SISTEMA DE IDENTIFICACION BBL Crystal

EQUIPO PARA LA IDENTIFICACION DE Neisseria/Haemophilus

SISTEMA DE IDENTIFICACION BBL Crystal

METODO DE IDENTIFICACION EN MINIATURA QUE UTILIZA SUBSTRATOS CONVENCIONALES Y CROMOGENICOS MODIFICADOS

VENTAJAS

Menor espacio, necesario para almacenamiento. Extensin de la fecha de caducidad. Control de calidad uniforme Facilidad de uso.

Varios procedimientos de anlisis usados en los sistemas BBL Crystal son modificaciones de mtodos clsicos.

Fermentacin Oxidacin Degradacin Hidrlisis

Adems hay substratos ligados a cromgenos y fluorogenos para la deteccin de enzimas

EQUIPO BBL Crystal

Tapas del panel

Bases Tubos de fluido del inoculo

ALMACENAMIENTO DEL EQUIPO

TAPAS
Estn envueltas individualmente, conservar cerradas en un refrigerador entre 2 8 C. No deben congelarse. No deben usarse si la envoltura parece estar daada.

BASES
Envasadas en dos grupos de 10 en las bandejas de incubacin. Apiladas boca abajo para reducir contaminacin. Almacenar en lugar libre de polvo de 2 30C.

ALMACENAMIENTO DEL EQUIPO

TUBO DE FLUIDO DEL INOCULO

Envasados en dos grupos de 10 tubos cada uno. No deben usarse:

Fugas en lo tubos o sus tapas. Indicios evidentes de contaminacin.

Almacenar entre 2 25 C.

PRINCIPIO DE LA PRUEBA

Los paneles del sistema BBL Cristal contienen:

29 substratos bioqumicos y enzimticos deshidratados. 1 control fluorescente. Utilizar una suspensin bacteriana preparada con el fluido de inoculo.

Para rehidratar los substratos:

Las pruebas usadas en el sistema se basan en la utilizacin y degradacin microbiana de substratos especficos detectados por varios sistemas indicadores.

PRINCIPIO DE LA PRUEBA

La hidrlisis enzimtica de los substratos fluorognicos que contienen derivados cumarinicos resulta en un aumento de la fluorescencia, detectable a simple vista con una lmpara de luz UV. Los substratos cromognicos despus de sufrir hidrlisis producen cambios de color que pueden detectarse a simple vista.

SUBSTRATOS

BACTERIAS IDENTIFICABLES

MATERIAL

MECHERO HISOPOS DE ALGODN VORTEX INCUBADORA LAMPARA CON LUZ UV GUANTES, CUBREBOCAS, GOGLES. SOLUCION SALINA 0.85% ESTERIL.

OBTENCION DE LAS MUESTRAS

No debe utilizarse el sistema directamente con muestras clnicas. Utilizar aislados de un medio como:

Agar

chocolate Agar Thayer-Martn

El aislado para la prueba debe ser un cultivo puro (1824 horas) hasta 48 horas**

PROCEDIMIENTO

Realizar una tincin de gram a las colonias presuntivas. Permitir que los reactivos alcancen la temperatura ambiente (25C). Bajo condiciones estriles y con ayuda de un hisopo de algodn, tome varias colonias de un cultivo puro. Suspenda las colonias en un tubo de fluido del inoculo. Agite en vortex de 10 a 15 segundos.

Ajuste la turbidez al patrn No.3 del nefelmetro de McFarland. Si no hay colonias disponibles:

Diluir con solucin salina al 0.85% sin exceder 1 ml. Al final quite el volumen agregado.

PROCEDIMIENTO..

Realice la prueba de cultivo puro:

Extraiga una pequea gota del tubo de fluido del inoculo con asa estril Inocule una placa con medio apropiado (agar chocolate o agar Thayer-Martn) Incube 24 a 48 horas, de 35 a 37C con 5% CO2

PROCEDIMIENTO..

Tome una base y vierta en ella todo el contenido del tubo de fluido del inoculo en el rea demarcada de la base. Balancee la base suavemente con ambas manos hasta que se llenen con el inoculo todos los pocillos, al final deje el exceso en la zona demarcada. Asegrese del relleno completo de los pocillos.

PROCEDIMIENTO.

Alinie la tapa y presione hacia abajo simultneamente hasta sentir una leve resistencia.

PROCEDIMIENTO.

Coloque los paneles inoculados en las bandejas de incubacin. Deben incubarse boca abajo (sin CO2), con 4060% humedad, 35-37C, por 4 horas.

PROCEDIMIENTO.

La incubadora no debe abrirse continuamente (< 3 veces)

Los paneles deben leerse 30 minutos despus de sacarlos de la incubadora.

LECTURA
Lea

las columnas F a J usando luz blanca.

las columnas A hasta E usando luz UV

Lea

Un pocillo con substrato fluorescente se considera positivo nicamente si la intensidad de la fluorescencia observada en el pocillo es mayor que la del pocillo de control negativo

REGISTRO DE RESULTADOS

Calculando el nmero de perfil

Ejemplo

4 2 1
Perfil

A *
+

B +
+ -

C + +

D + -

E +
+

F +
+ -

G +
-

H + +

I +
+ +

J -

CONTROL DE CALIDAD

Antes de la incubacin, deje el panel a temperatura ambiente durante 1 minuto (no mas de 2 minutos). Observe la bandeja y note si hay reacciones de color. Si nota algn pocillo positivo no use los paneles.

LIMITACIONES

El sistema ha sido diseado nicamente para los grupos taxonmicos que aparecen en la tabla anterior. Se necesita una prueba de confirmacin adicional. La base de datos se creo con medios de la marca BBL, la reactividad de algunos substratos depende de los medios suministrados. No utilice medios que contengan esculina.

GRACIAS