O DNA e a cromatina

O dogma central
Mas como o DNA est compactado no ncleo? Como acontecem os processos de transcrio e traduo? Como a estrutura fsica dos processos funciona, minuciosamente?

Descoberta do DNA
Surdo, no conseguia clinicar bem, passou a estudar qumica fisiolgica Interessado em estudar a qumica do ncleo, conseguiu isolar ncleo do citoplasma Encontrou compostos ricos em fsforo e nitrognio, mas sem enxofre
Chamou-o de nuclena (DNA)

Johannes Miescher 1844-1895 (Sec. XIX) Mdico e bilogo Suio

Descoberta da CROMATINA
Descobriu uma estrutura celular que era altamente afim a corantes bsicos
Chamou-a de cromatina

Essas estruturas poderiam ser vistas no ncleo em pedaos

Cromossomos (corpos corados)

Walther Flemming 18431905 Mdico e Bilogo alemo, fundador da citogentica

Estudou a diviso celular em salamandras (mitose)

Descoberta e publicao da mitose (1888)

Teoria cromossmica
Sutton (1902-3) mostrou, atravs de estudos em clulas germinativas de gafanhotos, que os cromossomos eram responsveis pela base fsica da herana mendeliana Boveri descobri que os ourios do mar precisavam ter todos os cromossomos em ordem para que seu desenvolvimento embrionrio ocorresse de forma perfeita Descobriu tambm que no cncer havia alterao cromossmica e que isso leva reproduo descontrolada

Walter Sutton 1877 - 1916

1915 O mecanismo da herana mendeliana (Teoria cromossmica da herana), Morgan et al. Ligou os cromossomos diretamente a Mendel

Thomas Morgan 1866 1945

Eucromatina e Heterocromatina
Emil Heitz, 1928
A heterocromatina do musgo

Eucromatina: menos corada, cromossomos menos condensados, representa os genes ativos Heterocromatina: mais corada, cromossomos mais condensados, representa os genes inativos Fez estudos citolgicos em 115 espcies de plantas, alm de drosfilas e outros dpteros

Emil Heitz 1892 - 1965

Cromossomos
Anatomia cromossomal

Telmeros Brao curto

Centrmero

Brao longo

Cromtides

Cromatina
Cooper, 1959 Heterocromatina e cromatina so diferentes biofisicamente, mas teem um mesmo arranjo bsico estrutural como DNA
Linfcito humano Linfcito de rato

Cromatina
Regies mais coradas heterocromatina Regies menos coradas - eucromatina

Inativao do cromossomo X
~1960: Uma das duas cpias do cromossomo X de fmeas de mamferos inativada O cromossomo X extra fica em estado de heterocromatina
Compensao de dose Escolha aleatria mas continua por toda a vida (em marsupiais sempre o X paterno inativado)

Alguns genes podem fugir inativao

Empacotamento do DNA
eucariotos

HU proteins Histonas

Mecanismo molecular para formar a eucromatina X heterocromatina

Histonas
Descobertas por Kossel ainda no sculo XIX (1884)

Protenas mais conservadas entre os organismos Carregadas positivamente (Lys + Arg) DNA d 1,7 voltas no octmero

Descoberta do Nucleossomo
Kornberg, R.D. (1974) Chromatin structure: a repeating unit of histones and DNA. Science 184, 868-871.
Descoberta dos nucleossomos

Produziu estruturas cristalogrficas relacionadas ao mecanismos de transcrio (produo do RNA) Prmio Nobel em 2006

Roger David Kornberg Bioqumico americano (1947-)

Octmero de Histonas, o nucleossomo

Formado por 146 bp Ligado a outro nucleossomo por uma regio ligadora (linker), contendo entre 10 e 80 bp

Estrutura da cromatina eucaritica

Empacotamento de nucleossomos como um octmero de histonas: 2X H2A H2B H1 H3 H4

Modificaes ps-traducionais
Uma vez que as protenas so traduzidas nos ribossomos, muitas delas podem ser modificadas para ajustar suas funes em tempo real Fosforilao de protenas
Protenas quinases e fosfatases

Diversas outras modificaes podem acontecer em protenas... As histonas so alvos de vrias delas

Estrutura e funo da cromatina

Papel estrutural: empacotamento do DNA Papel regulatrio: controle do acesso da maquinaria de transcrio Histonas desacetiladas
Exemplo: histonas acetilases histonas desacetilases

cromatina fechada expresso gnica inativa

Ligao de fatores de transcrio e acetilao de histonas

desempacotamento da cromatina ativao da expresso gnica

Modificaes que diminuem a carga positiva das protenas abrem a cromatina

Menor interao DNA-histona Ativao do gene

Modificaes ps-traducionais nas histonas influenciam a expresso gnica

Compactao do DNA
compreendida hoje a relao das histonas com o DNA Entretanto h uma srie de protenas que formam as fibras da cromatina cuja ao no bem compreendida

Remodelamento da cromatina
Vrios estudos modernos so feitos com relao ao remodelamento dinmico da cromatina em clulas interfsicas

Estudos recentes (2007) parecem mostrar no haver estrutura de nucleossomos em regies de promotores e origens de replicao
Nucleossomos so removidos em condies de estresse, permitindo transcrio

O cdigo das histonas

Estudos que almejam identificar a relao entre
Cdigo de modificaes ps-traducionais em histonas Expresso gnica (Transcrio)

Concluses
O DNA das clulas est empacotado no ncleo Este empacotamento se d atravs da associao do DNA (-) com protenas chamadas histonas (+) As histonas permitem a regulao da expresso gnica ao abrirem ou fecharem a cromatina, permitindo o acesso ao DNA por outras protenas (fatores de transcrio)