Candida e biofilm Il catetere da dialisi peritoneale

Finalit della presentazione

Paziente in dialisi peritoneale quale possibile bersaglio delle infezioni fungine da Candida Peculiarit biologiche del biofilm micotico

Il paziente in dialisi peritoneale

Concentrazione dei fattori di rischio infettivo per Candida
Sesso femminile Presenza del catetere da dialisi (perdita integrit cutanea) Frequenti ospedalizzazioni Antibioticoterapia Precedenti episodi peritonitici Deficit immunologico legato alluremia Deficit immunologici associati (LES HIV corticoterapia)

As many as two-thirds of patients receiving chronic ambulatory peritoneal dialysis will develop peritonitis in the first year of dialysis. The mortality rate from sepsis in dialysis patients is increased 100 to 300 times compared to persons not receiving dialysis.
Foley RN: Infections in patients with chronic kidney disease. Infect Dis Clin North Am 21:659,2007

Peritonite fungina in corso di CAPD in paziente nefroTX

Paziente di sesso femminile nata il 12/04/1946, affetta da ipertensione e da paraplegia familiare di Strumpell-Lorrain

1990 aprile 1991

Diagnosi di IRC Biopsia renale: danno renale cronico di possibile origine vascolare

16.07.1994 18.07.1994
31.08.1994

Inizio trattamento dialitico sostitutivo ( CVC temporaneo) Posizionamento di catetere peritoneale per dialisi
Inizio CAPD ( dialisi peritoneale ambulatoriale continua)

Trattamento dialitico peritoneale per 3 anni, poi

Peritonite fungina in corso di CAPD in paziente nefroTX

08.03.1997 Episodio di peritonite, LP torbido con frustoli di fibrina, addome poco trattabile, dolente diffusamente alla palpazione, Blumberg +, peristalsi presente. Dopo i prelevi ematici sul LP applicato "protocollo peritoniti" ( Glazidim + Nebicina IP) Laboratorio: Sedimento LP: alcuni linfociti + GR Esame colturale: nessuna crescita (peritonite a coltura negativa ?)

Peritonite fungina in corso di CAPD in paziente nefroTX

14.03.1997
15.03.1997 16.03.1997 25.03.1997

Posizionato CVC per HD

Inizio dialisi extracorporea TX renale da donatore cadavere Espianto TX renale ( trombosi arteria renale) e ripresa CAPD II episodio di peritonite Esame colturale su LP: Candida albicans Emocolture: E. Coli Terapia con Vancomicina + Fluconazolo

01.04.1997

02.04.1997
08.04.1997

Incisione e drenaggio ematoma infetto in sede di pregresso TX

Rimozione del CP

Peritonite fungina in corso di CAPD in paziente nefroTX

24.04.1997
25.04.1997 29.04.1997

Ecografia addome: abbondante liquido libero

Ricovero per EPA e stato settico Puntura esplorativa del versamento addominale: liquido torbido, Rivalta ++, Sedimento: alcuni neutrofili e linfociti, numerosi GB, Esame colturale: nessuna crescita

01.05.1997

Intervento chirurgico: laparotomia esplorativa con toelette peritoneale. Esame colturale positivo per Candida spp Stop Vancomicina e Fluconazolo, inizio terapia con Amfotericina B e.v. 30 mg in 500 ml Sol gluc x 21 gg e Amfotericina B IP. Al termine del ciclo con Amfotericina B terapia orale con Itraconazolo per altri 30 gg.
Ricovero in chirurgia per addome acuto da occlusione intestinale da briglie aderenziali TX renale da donatore cadavere

15.07.1997 14.09.2004

Quadro clinico particolare Peritonite sclerosante incapsulante

La peritonite sclerosante incapsulante (EPS) una malattia rara ma severa (mortalit tra il 24 e il 54%), il cui principale fattore di rischio la dialisi peritoneale
(incidenza cumulativa tra 0.5 e 7.3%).

Fungal peritonitis is a serious complication and should be strongly suspected after recent antibiotic treatment for bacterial peritonitis. Catheter removal is indicated immediately after fungi are identified by microscopy or culture (Evidence). Fungal peritonitis is serious, leading to death of the patient in approximately 25% or more of episodes. Some evidence suggests that prompt catheter removal poses a lesser risk of death. Initial therapy may be a combination of amphotericin B and flucytosine, until the culture results are available with susceptibilities. An echinocandin (e.g., caspofungin or anidulafungin), fluconazole, posaconazole, or voriconazole may replace amphotericin B based on species identification and MIC values. Intraperitoneal use of amphotericin causes chemical peritonitis and pain.

Candida albicans

Candida albicans

Candida albicans lievito - ifa

Steinberg G Eukaryotic Cell 2007;6:351-360

Tip growth and the Spitzenkrper in Neurospora crassa strain 74A.

Steinberg G Eukaryotic Cell 2007;6:351-360

Dalla adesione alla penetrazione tissutale

Attivazione genica switch fenotipico

Il biofilm
Un biofilm una aggregazione complessa di microrganismi contraddistinta dalla secrezione di una matrice adesiva e protettiva, e spesso anche da: adesione ad una superficie, sia di tipo biologico che inerte, eterogeneit strutturale, interazioni biologiche complesse, una matrice extracellulare di sostanze polimeriche, spesso di carattere polisaccaridico.
Da Wikipedia

Formazione del biofilm

Biofilm batterico

Biofilm micotico

Forme miste

Inside biofilm
Quorum sensing Aumentata sintesi fattori virulenza Diversificazione fenotipica Passaggio materiale genetico Resistenza ad antibiotici antimicotici Cellule vitali ma non coltivabili (VNC) Fenotipo Persister

Quorum sensing
Gossip molecolare deputato alla quantificazione della densit cellulare (quorum) allinterno della colonia, allo switch fenotipico tipico del biofilm ed alla sintesi dei fattori di virulenza

Quorum sensing

Quorum sensing ~ Circuito di autoinduzione

Popat R et al. Br Med Bull 2008;87:63-75

Quorum sensing ~ Batteri Gram + e Gram -

Quorum sensing ~ Funghi - (Candida)

Farnesol

Tyrosol Dodecanol

Importance of interspecies signalling in disease

From the data above and in the literature, it is clear that the in vivo interaction between P. aeruginosa and C. albicans is likely to be complex and that it is possible to predict some consequences of these interactions. During the acute phase of infection when a strain of P. aeruginosa is secreting high levels of HSLs, any Candida cells in that niche will remain in the yeast form. In contrast, during a chronic infection when HSL concentrations are likely to drop, C. albicans may be able to trigger a switch to filamentous growth, possibly leading to formation of a fungal biofilm with the potential for invasive growth.

International Journal of Microbiology Volume 2012 (2012), Article ID 845352, 10.1155/2012/845352 Review Article Candida Biofilms and the Host: Models and New Concepts for Eradication

Instabilit di Kelvin - Helmholtz

Instabilit di Kelvin - Helmholtz

During biofilm development, the ergosterol level was reduced by 41% at intermediate phase and by 50% at the mature phase, compared to that for early-phase (6-h) biofilms. While efflux pumps play a critical role in azole resistance in earlyphase biofilms, alteration in sterol composition is an important mechanism of antifungal resistance at the intermediate and mature phases of biofilm formation.

By producing matrix b-glucan capable of sequestering antifungals, a drug sponge prevents the agent from reaching its target, allowing biofilm cells to survive astonishingly high drug exposures.

The matrix glucan acts by sequestering drug, preventing it from reaching its intended target.

Fenotipo Persister

Il presente

Antimicotici attivi sul biofilm di Candida

Amfotericina B liposomiale

PREVENTION OF MICROBIAL BIOFILM BUILD-UP ON POLYMERIC SURFACES

Passive antifouling coatings to inhibit surface-associated microbial life Prevention of biofilm development by antimicrobial compounds released from modified surfaces

Quaternary ammonium compound coatings

Silver coatings

Il futuro

PREVENTION OF BIOFILM FORMATION ON POLYMERIC SURFACES FUNCTIONALIZED WITH ANTIMICROBIAL GROUPS

Covalent binding of antimicrobial moieties on a preformed polymer Copolymerization

Grazie per lattenzione