Documenti di Didattica
Documenti di Professioni
Documenti di Cultura
CROMOSSOMOS
COMPACTAO DA CROMATINA
NUCLEOSSOMA - octmero de histonas H2A, H2B, H3 e H4. H1. Reduo no tamanho DNA entre 6 a 7 vezes. 2: SOLENIDE- 6 nucleossomos. 3 :ALAS - solenide- alas unidas - protenas no-histnicas (crommeros). 4 CROMOSSOMOS- enrolamento final.
1 NVEL: NUCLEOSSOMO
SOLENIDE
SOLENIDE
COMPRIMENTO DO CROMOSSOMO 1
DNA NUCLEOSSOMA SOLENIDE
15cm 1,5cm (1:10)~ 200pb 0,3cm (1:50)~1200pb 10a 100kb 50m (1:3000) 15m (1:10000) 10 a 20 milhes pb
cromossomos replicado pelo incio simultneo da replicao em regies mltiplas dentro do cromossomo Rplicons. processo replicao controlado cada cromossomo ser replicado totalmente apenas uma vez na fase S
CENTRMEROS
Constrio
Primria seqncias DNA repetitivas + protenas ( CENP-B). Cpias seqncias mltiplas com 171 pb = DNA alfa. Classificao da forma cromossomo. Stio de ligao das cromtides irms.
CENTRMERO
CENTRMERO
Formao
Cinetcoro-
CENTRMERO
CLASSIFICAO CROMOSSMICA
TELMEROS
Telmeros extremidades cromossmicas; DNA + protenas, seqncias repetidas (TTAGGG)n Funo : Integridade cromossmica; estabilidade; evitam a degradao dos cromossomos (nucleases); replicao correta dos telmeros (telomerase). Telomerase presente clulas embrionrias e germinativas; clulas somticas parecem ter telomerase inativa morte celular por encurtamento telmero antes de ocorrer alterao cromossmica. Reduo : associao ponta a ponta; quebras ; translocaes. Telomerase ativa clula somtica poder indicar condio neoplsica.
SATLITES
Cromossomos
22. Ligado ao brao curto: Constrio secundria. Stio formao ribossomo (genes RNAr) Regies organizadoras nucleolares (RON/NOR)
TIPOS DE CROMATINA
Eucromatina
: ativa, menos condensada, replica cedo na fase S. Heterocromatina : seqncias repetidas, mais condensada, replica tarde na fase S. H. Constitutiva : sempre inativa (pericentromrica e brao longo do cromossomo Y ). H. Facultativa : inativa e ativa (cromossomo X)
CULTURA
CELULAR
MEIO DE CULTURA: RPMI 1640, TC 199, HAM F10, depender do tipo celular a ser cultivado. SORO FETAL: Bovino ou humano. Presena de fatores de crescimento celular. AGENTE MITOGNICO: Fito-hemaglutinina, etc ... se for necessrio.. AGENTE BLOQUEADOR DA DIVISO CELULAR: Inibidores do fuso: Colchicina; vinblastina. SOLUO HIPOTNICA: Tumefao das Soluo salina ( KCl; Citrato de sdio; etc...) clulas;
Caritipo - Tcnica
Sangue perfrico (linfcitos); Meio de cultura ( RPMI/199 ,soro, fito-hemaglutinina) Incubar 37 C por 72 horas; Adicionar colchicina; e a soluo hipotnica; Fixar o material; Distribuir em lminas; bandas; colorao(GIEMSA); Observar em MO; Selecionar, fotografar e montar o caritipo; Resultado.
METFASE HUMANA
BANDAS G
cromossomos
submetidos ao de uma enzima tripsina que desnatura as protenas cromossmicas; colorao posterior com corante de Giemsa; as bandas G escuras so regies ricas em AT. cada cromossomo com padro tpica de regies claras e escuras.
NOMENCLATURA
BANDAS G
CARITIPO FEMININO
BANDAS Q
cromossomos corados com corantes fluorescentes (quinacrina-mostarda; DAPI...); regies cromossmicas ricas em AT; cromossomos com padro de bandas brilhantes e opacas; anlise feita em microscpio de fluorescncia (UV); diferenciao longitudinal dos cromossomos.
BANDAS Q
BANDAS R
cromossomos
so desnaturados com o uso de soluo salina e calor; colorao posterior com corante de Giemsa; cada cromossomo com padro tpica de regies claras e escuras; as bandas R escuras so regies ricas em GC; padro inverso das bandas Q e G; diferenciao longitudinal dos cromossomos.
BANDAS R
Contm DNA rico em AT (55-60%); Replicao tardia na fase S Contm poucos genes;
BANDAS R
DNA rico em GC (50-60%) Replicao precoce na fase S Contm a maioria dos genes
no estgio de prmetfase, menos condensados; tcnica de bandas G, Q ou R colorao posterior com corante de Giemsa; maior nmero de bandas; deteco de alteraes cromossmicas estruturais menores.
STIOS FRGEIS
zonas
de instabilidade cromossmicas; cultura especial com meio pobre em timidina e cido flico ou um inibidor da timidina sintetase (metatrexate ou fluordesoxiuridina); colorao com uso de Giemsa; stios frgeis visualizados como falhas ou quebras cromossmicas; regies susceptveis a quebras cromossmicas;
STIO FRGIL
BANDAS C
cromossomos
submetidos a ao de uma soluo de hidrxido de brio; colorao posterior com corante de Giemsa; desnaturao da eucromatina e heterocromatina facultativa; marcao da heterocromatina constitutiva; regies centromricas dos cromossomos e outras regies que contenham heterocromatina constitutiva (brao longo do Y).
BANDA C
Nomenclatura de Bandas
FISH