Estudio Histolgico de Mdula sea Toma de muestra, Procesamiento y Parmetros de Evaluacin.

Mdula sea normal, Fibrosis, Necrosis, Granulomas , Relacin MieloideEritrode

BIOPSIA DE HUESO
Util en el diagnstico y control evolutivo de numerosas enfermedades hematolgicas. Aporta informacin de gran valor para determinar o completar el diagnstico de otras enfermedades no hematolgicas. Esencial para el diagnstico, cuando el AMO es seco (como consecuencia de fibrosis medular o de una densa infiltracin celular)

BIOPSIA DE HUESO
Estudio de la arquitectura medular, presencia de granulomas o de lesiones vasculares, y el patrn de distribucin de cualquier infiltrado anormal. Valora cuantitativamente la celularidad en pacientes con citopenias, para investigar la infiltracin en linfomas, y en el estudio de los neoplasias mieloides.

OBTENCIN DE LA MUESTRA DE AMO Y BIOPSIA DE HUESO

PROCESAMIENTO HISTOLOGICO
Es recomendable una biopsia de al menos 1 cm de largo, se coloca en formol tamponado a una concentracin de 4%. El tiempo de fijacin puede ser de 2 a 4 horas. Descalcificacin usando cido ntrico con EDTA por 2 a 3 horas. Proceso histotecnlogico, hasta obtener la biopsia incluida en un taco de parafina, lista para los cortes histolgicos. Los cortes histolgicos, son a un grosor de 3 a 4 um. Se adhieren a una lmina portaobjetos, luego se desparafinan. Se lleva a colorear en una batera de Hematoxilina de Harriseosina. Montaje con blsamo de Cnada, y etiquetado.

PARAMETROS DE EVALUACION
Determinar la presencia de megacariocitos o evaluar depsitos de hierro. Determinar la presencia de artefactos que puedan dificultar una correcta interpretacin (hemorragia, tejido hematopoytico desplazado y distorsionado por las trabculas seas). Una biopsia de 0,5 cm de largo puede ser insuficiente para excluir una infiltracin linfomatosa o metastsica.

Observacin a 40x
Evaluacin de la arquitectura medular, Las trabculas seas, la relacin celularidad/grasa (expresada como porcentaje entre tejido hematopoytico y grasa). Segn la edad vara desde un 90% en nios hasta un 40 - 50% en mayores de 60 aos. La presencia de estructuras anormales, como: ndulos linfoides, reas infiltradas o fibrosadas, granulomas, entre otras.

Arquitectura Medular

BIOPSIA NORMAL

BIOPSIAS DE HUESO

BIOPSIA DE HUESO

NODULOS LINFOIDES EN MO

AREAS CON INFILTRACION O FIBROSIS

Observacin a 100x
Valorar la presencia, cantidad y maduracin de las tres series hematopoyticas. Presencia y situacin de los megacariocitos, la presencia de acmulos de linfocitos (teniendo en cuenta que aproximadamente un 10% de las biopsias de adultos mayores de 40 aos tienen agregados linfoides de carcter benigno), e identificacin de las clulas plasmticas, de los histiocitos principalmente.

Observacin superior a 400x

El tipo de alteracin observada en los cortes de mdula es fundamental para el diagnstico de algunas enfermedades hematolgicas, especialmente aplasia medular y Enfermedades Mieloproliferativas. Empleado en la extensin de la Enfermedad de Hodgkin, y pronstico de otras, como la Leucemia Linftica Crnica. En granulomas, metstasis, leucemias, linfomas, mielomas, etc, determinan la extensin y caractersticas de la infiltracin (difusa, nodular, intersticial). En la pancitopenia o sndrome febril de etiologa desconocida puede permitir el diagnstico de linfoma o carcinomatosis con invasin medular.

Adicionalmente, pueden realizarse tcnicas histoqumicas e inmunohistoqumicas. Las cuales sern detalladas en la presente unidad.

ASPIRADO DE MEDULA OSEA

Evaluacin de finos detalles morfolgicos.
El aspirado es til en el estudio de pacientes con sospecha de anemia de enfermedad crnica, anemia megaloblstica, control de leucemias agudas, bsqueda de hemoparsitos, agranulocitosis, etc. El estudio morfolgico de la sangre perifrica es ms representativo que el de la mdula sea, de manera particular en algunos sndromes linfoproliferativos y mieloproliferativos.

ESPICULAS

VALORACION MACROSCOPICA
La abundancia, escasez o ausencia de espculas, nos orienta sobre la representatividad del material analizado. Presencia de espculas, el aspecto citolgico que se estudia suele ser representativo de la mdula sea. En el caso de un aspirado seco o sin espculas, se establece la sospecha de una mielofibrosis o de mdula sea hipercelular "empaquetada", siendo en estos casos recomendable efectuar una biopsia medular.

HIPOCELULAR

HIPERCELULAR

VALORACION MICROSCOPICA A MENOR AUMENTO

Permite valoracin semicuantitativa de la celularidad (muy escasa, disminuida, normal o aumentada) Confirmar la presencia de clulas de estroma medular, en condiciones normales la celularidad es representativa, as como observar la presencia de megacariocitos. Permite identificar otros elementos celulares: clulas metastsicas, histiocitos, acmulos de clulas plasmticas, osteoblastos, osteoclastos, mastocitos, necrosis celular, clulas de Reed-Sternberg, entre otras.

VALORACION MICROSCOPICA CON OBJETIVO DE INMERSION

Se efecta un recuento diferencial de al menos 300 - 500 clulas para determinar los siguientes parmetros: La relacin mielo/eritroide Recuento celular diferencial (Mielograma) El examen morfolgico evala los rasgos de maduracin de las series hematopoyticas: detencin madurativa mieloide o eritroide (agranulocitosis, eritroblastopenia), o alteraciones madurativas (anemia megaloblstica, anemia hemoltica, sndrome mielodisplsico, infecciones graves, etc.). La observacin citolgica cuidadosa permite identificar clulas atpicas de leucemias, linfomas, histiocitosis, mieloma, metstasis, etc., as como la presencia de hemoparsitos ante un cuadro clnico sospechoso.

RESULTADOS DEL MIELOGRAMA