Metabolismo del Eritrocito

Fundatal 2006

Eritroblasto
Prdida del ncleo

Reticulocito
Prdida de ARN y mitocondrias

Eritrocito

Eritrocito
Metabolismo reducido
Ausencia de ncleo y ribosomas Ausencia de sntesis de protenas No se produce renovacin del stock de enzimas Agotamiento progresivo de enzimas que limitan la sobrevida del GR Ausencia de mitocondrias Ausencia de Ciclo de Krebs Gliclisis anaerobia

VIA EMBDEN-MEYERHOF
Glucosa HK Va Pentosas Sntesis GSH
ATP M ADP g

ADP

Glucosa 6P GP I Fructosa ATP 6P Mg PFK AL D

Fructosa 1-6P TP DHAP I G3P Reduccin Meta Hb G3PD NADH H 1,3DP

NAD
Pi

VIA EMBDEN MEYERHOF

1,3DP ADP G M PGK
ATP g

DPGM

pH (-) Shunt Rapoport Luebering

Degradacin Nucletidos y Vas de rescate

DPGP 3PG PG M 2PG ENO PEP L PK LDH

2,3DP G
pH (+)

ADP
M ATP g

PIRUVAT O

LACTATO

NADH NAD

Funciones del ciclo de EMP

Produccin de intermediarios de la gliclisis anaerobia
1. Inicia y mantiene la gliclisis 2. Sntesis de GSH 3. Activacin de ribosa -5P (PRPP) 4. Mantenimiento de integridad y plasticidad de la membrana 5. Mantenimiento de bomba cationes ATPasa dep

ATP

2,3 DPG Modulacin de la curva de disociacin de oxiHb

1. Interviene en la reduccin de piruvato a lactato 2. Reduccin de MetaHb

NADH

CICLO DE LAS PENTOSAS

Glucosa
NAD NADP P H

Glucosa 6P

G6PDH

6P-gluconato

NAD P 6PGDH NADP H Ribulosa 5P

CO2 Xilulosa 5P Fructosa 6P Gliceraldehdo 3P () Ribosa 5P

F6P + G3P

SNTESIS y REGENERACIN DE GLUTATIN

cido glutmico
GCS

Cisten ATP a
AD P Stress oxidativ o O2

glutamilcistena ATP Glutati n AD G6PD Sintetas P G6P NADP a GSH H2O2

Glicina

SOD

6PG

NADPH

GSS H2 O Glutatin G Glutatin Reductas Peroxidas a a

CAPACIDAD REDUCTORA
Va principal NAD NADH NADP NADPH NADP NADPH NADP NADPH
MetaHb R NADHdep

Cit b5

Hb

Cit b5 red Meta Hb Vas accesorias AM oxid AM red Hb Meta Hb

67%

MetaHb R NADPHdep

5% Hb 16% MetaHb 12%

GSH R GSH R

GSH GS-SG GSH GS-SG

dehidroasc ascrbico

Hb MetaHb

Glucosa HK Cys

Glu GC

H 2 O + O2 Catalasa H2O2 Hb
Fe++

MetaHb - prevencin - reduccin

Cb5+++ Cb5++ AzMet ox NADH NAD+ NADPH NADP+

F1-6DP F6P 6PGD G6PD

G6P Gly NADP+ 2 GSH NADPH 6PG NADP+ NADPH

GS=SG-R (FAD)

GSH-P (Se)

GS=SG

R5P PRPP

AzMet red Hemicromos reversibles Hemicromos irreversibles Cuerpos de Heinz

2 H20

Hb

Fe+++

G3P

VA DE RESCATE DE PURINAS
ATPasa ADP Adenosina Quinasa
ADENOSIN A

ATP AK
AMP

ADP ATP P5 N Pi

APR T

ADA

H2O NH3

Inosin a

Uridin Citidin a Hipoxanti a na

Pi

PP i UM CM PP P PIMP i

PRPP
AM P ATP

Adenin a

RPPK
Shunt HMP

R-5-P

PNP

R-1P

R-1,5P2

PRM

ARN ribosomal ribonucleasa nucletidos purnicos AMP GMP pirimidnicos UMP CMP P5N Pi Uridina Citidina

Anemias Hemolticas
Pruebas de laboratorio

ANEMIA HEMOLTICA Pruebas de Laboratorio

Objetivos:
1. Destruccin acelerada de G. R. 2. Eritropoyesis acelerada 3. Diagnstico diferencial

ANEMIA HEMOLTICA Pruebas de Laboratorio

Destruccin acelerada de Glbulos Rojos
Vida eritrocitaria con 51Cr
% Actividad de 51Cr 100

50

10

27

Das

Bilirrubina indirecta LDH Signos de hemlisis intravascular

 Haptoglobina y hemopexina Hemoglobina libre en plasma Metahemalbuminemia Hemoglobinuria Hemosideruria Estercobilingeno y urobilingeno

Signos de hemlisis intravascular

ANEMIA HEMOLTICA Pruebas de Laboratorio

Hb + Hapto

Hb libre Dimeros

Hb-hapto

MetaHb Hem Globina + Hemopexina + Albmina Hemopexina-Hem MetahemaAlb + Hemopexina

ANEMIA HEMOLTICA Pruebas de Laboratorio

Eritropoyesis acelerada
SANGRE:
Reticulocitosis Policromatofilia Macrocitosis Punteado basfilo Eritroblastos circulantes

M.O.:
Hiperplasia eritroide

FERROCINTICA:
Turn over de Fe

ANEMIA HEMOLTICA Pruebas de Laboratorio

Diagnstico diferencial
Hemograma completo Examen del frotis de sangre perifrica Recuento de reticulocitos Prueba de Coombs Electroforesis de Hb Resistencia osmtica globular Autohemlisis Test de Ham Test de isopropanol

Dficit de Piruvato Kinasa

Dficit de Piruvato Kinasa

Test de Screening
Autohemlisis:
Fundamento: Hemlisis por anomala intrnseca del GR al someterlo a incubacin a 37C / 48 hs. con y sin agregado de glucosa y ATP Resultado: V.N: < 2.0% en ausencia de glucosa < 0.9% en presencia de glucosa Desventaja: Tiempo (laboratorista) No diagnstico diferencial

Dficit de Piruvato Kinasa

Test de Screening
Tcnica de Fluorescencia:
PK PEP + ADP LDH PIRUVATO + NADH + H+ LACTATO + NAD+ PIRUVATO + ATP

Fluoresce

NO Fluoresce

Dficit de Piruvato Kinasa

Test Diagnsticos:
Dosaje cuantitativo de la actividad enzimtica de PK
PK PEP + ADP LDH PIRUVATO + NADH + H+ LACTATO + NAD+ PIRUVATO + ATP

Desventajas:
Existencia de variantes cinticas con afinidad por el sustrato (System Low) Reticulocitosis

Biologa Molecular

Dficit de
Glucosa-6-Fosfato-dehidrogenasa

Dficit de G6PDH
Tests de Screening
Test Brewer:
Pasos: 1. Hb (roja) + NO2Na Hbi (marrn)
2. Hbi + Azul Metileno + NADPH Hb + NADP + leucobase

Desventaja:
No sirve para deteccin de heterocigotas

Glucosa HK Cys

Glu GC

H 2 O + O2 Catalasa H2O2 Hb
Fe++

MetaHb - prevencin - reduccin

Cb5+++ Cb5++ AzMet ox NADH NAD+ NADPH NADP+

F1-6DP F6P 6PGD G6PD

G6P Gly NADP+ 2 GSH NADPH 6PG NADP+ NADPH

GS=SG-R (FAD)

GSH-P (Se)

GS=SG

R5P PRPP

AzMet red Hemicromos reversibles Hemicromos irreversibles Cuerpos de Heinz

2 H20

Hb

Fe+++

G3P

Dficit de G6PDH
Tests de Screening
Test Citoqumico
NO2Na
Hb Hbi

HCN
CNHbi (sol. con H2O2)

MTT

G6PD H

Formazan insol.

Dficit de G6PDH
Tests de Screening
Electroforesis de isoenzimas de G6PDH
B: A: normal normal africana

A-: poblacin afroamericana Mediterrnea: poblacin blanca

Dficit de G6PDH
Tests diagnsticos:
Dosaje cuantitativo de la actividad enzimtica de G6PDH
G-6-PDH G6P + NADP+ 6-PGDH 6PG + NADP+ Ribulosa-5-P + NADPH + H+ + CO2 6PG + NADPH + H+

Biologa Molecular

Hora de despertarse

Muchas Gracias!