UNIVERSIDAD DE COLIMA

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

CARRERA: QUMICO FARMACUTICO BILOGO GRUPO: 5 Q.F.B

ENZIMAS

M en C Nlida Araceli Medina Pineda Materia: Bioqumica II Ao 2012

CONTENIDO
1.- Introduccin 2.- Aspectos generales de las enzimas 3.- Propiedades de las enzimas 4.- Nomenclatura de las enzimas 5.- Clasificacin de las enzimas

6.- Activadores e inhibidores

7.- Regulacin de la actividad enzimtica 8.- Cintica enzimtica

1).- INTRODUCCIN

La enzima como unidad fundamental de vida

Las enzimas son protenas altamente especializadas que tienen como funcin la catlisis o regulacin de la velocidad de las reacciones qumicas que se llevan a cabo en los seres vivos.

 Cada clula y cada tejido tienen su actividad propia, lo que conlleva a continuos cambios en su estado bioqumico y en la base de la cual estn las enzimas, que tienen el poder de: Catalizar

Facilitar

Agilizar determinados analticos.

procesos

sintticos

 Los propios genes son reguladores de la produccin de las enzimas por tanto, genes y enzimas pueden considerados como las unidades fundamentales de la vida.

 El rasgo particular es que pueden catalizar procesos qumicos a: BAJA TEMPERATURA compatible con la propia vida, sin el empleo de sustancias lesivas para los tejidos.

 La vida es, en sntesis, una cadena de procesos enzimticos, desde aquellos que tienen por sustratos los materiales mas simples, como el agua (H2O) y el anhdrido carbnico (CO2), presentes en los vegetales para la formacin de hidratos de carbono, hasta los mas complicados que utilizan sustratos muy complejos

 Ello hace posible que en:

CONDICIONES FISIOLGICAS

tengan lugar reacciones que sin catalizador requeriran condiciones extremas de presin, temperatura o pH

2).- ASPECTOS GENERALES DE LAS ENZIMAS

 Prcticamente todas las reacciones qumicas que tienen lugar en los seres vivos estn catalizadas por enzimas

Las enzimas son catalizadores especficos

Cada enzima cataliza un solo tipo de reaccin y casi siempre acta sobre un nico sustrato o sobre un grupo muy reducido de ellos

REACCIN CATALIZADA POR UNA ENZIMA

1.- LA ENZIMA Y SU SUSTRATO

La molcula sobre la que acta la enzima se llama: SUSTRATO

2.- UNIN AL CENTRO ACTIVO

El SUSTRATO se une a una regin de la enzima, llamada CENTRO ACTIVO el cual est formado por un sitio de: UNIN formado por los aminocidos que estn en contacto directo con el sustrato CATALTICO formado por los aminocidos directamente implicados en el mecanismo de la reaccin

3.-FORMACIN DEL PRODUCTO

Una vez formados los productos de la enzima puede comenzar un nuevo ciclo de reaccin

MECANISMO DE ACCIN ENZIMTICA:

1) Se forma un complejo: enzimasubstrato o substratos.

2) Se une la coenzima a este complejo. 3) Los restos de los aminocidos que configuran el centro activo catalizan el proceso. Para ello debilitan los enlaces necesarios para que la reaccin qumica se lleve a cabo a baja temperatura y no se necesite una elevada energa de activacin. 4) Los productos de la reaccin se separan del centro activo y la enzima se recupera intacta para nuevas catlisis. Coenzima 5) Las coenzimas colaboran en el proceso; bien aportando energa (ATP), electrones (NADH/NADPH) o en otras funciones relacionadas con la catlisis enzimtica productos sustrato

Enzima Enzima inactiva Centro activo

COMPARACIN DE UNA REACCIN CON Y SIN ENZIMA

Cuando se forma esta interaccin BAJA LA ENERGA DE ACTIVACIN necesaria para poder llevar a cabo la reaccin

Modelo comparativo de la disminucin de la energa de activacin por la accin de la enzima. 1) La reaccindisminuye 2) La enzima no se produce pues hace de o elimina la energa falta una energa de y activacin necesaria activacin para que la reaccin transcurre transcurra espontneamente. espontneamente.

Enzima

Substrato

Producto

 Las enzimas, a diferencia de los catalizadores inorgnicos catalizan reacciones especficas sin embargo hay distintos grados de ESPECIFICADAD 1.-MUY ESPECFICO Ejemplo la enzima sacarasa rompe el enlace B-glucosdico de la sacarosa o de compuestos muy similares.

Para la enzima sacarasa, la sacarosa es su sustrato natural, mientras que la maltosa y la isomaltosa son sustratos anlogos (maltasa e isomaltasa)

ESQUEMA DE LA ACCIN DE UNA ENZIMA

CENTRO ACTIVO DE UNA ENZIMA

Mecanismo muy especfico

sacarasa

Sacarosa
enlace B-glicosdico

Glucoquinasa

Mecanismo muy especfico

2.-POCO ESPECFICOS: La enzima acta con mxima eficacia sobre el sustrato natural y con menor eficacia sobre los sustratos anlogos. Ejemplos de enzimas poco especficas: Las proteasas digestivas como la quimotripsina, que rompe los enlaces amida de protenas y pptidos de muy diverso tipo.

QUIMOTRIPSINGENO (zimgeno inactivo)

QUIMOTRIPSINA (enzima activa)

QUIMOTRIPSINA

La qimotripsina bovina es una enzima con actividad proteoltica con 245 aminocidos, que cataliza la ruptura hidroltica de enlaces peptdicos adyacentes a residuos aminoacdicos aromticos: Esta formada por tres cadenas polipeptdicas conectadas mediante dos puentes disulfuro intercatenarios.

 Se sintetiza en forma de precursor inactivo, quimotripsingeno, que es activado por la ruptura especfica de su enlace peptdico Ser 14, Arg 15 y Thr 147, Asn 148

 Los aminocidos esenciales en el proceso de catlisis son la His 57 y Ser 195, estos aminocidos se encuentran localizados en el sitio de fijacin del sustrato, junto con el Asp 102. Estos tres aminocidos se encuentran unidos por enlaces por puentes de hidrgeno, y se conocen con el nombre de trada cataltica.

Vista en 3D de la conformacin de la trada cataltica His-Asp-Ser en la serina proteasa -quimotripsina. Las lneas discontinuas representan enlaces de hidrgeno.

 Los principales sustratos de la quimotripsina que los hidroliza en el grupo C- terminal lo constituyen los aminocidos:
Triptfano Tirosina Fenilalanina Metionina Al igual que muchas proteasas tambin hidroliza enlaces ster in vitro

CONCLUSIN DE ESPECIFICIDAD
Las molculas del sustrato se unen a un sitio particular en la superficie de la enzima, denominado sitio activo, donde tiene lugar la catlisis. La estructura tridimensional de este sitio activo, donde solo puede entrar un determinado sustrato (ni siquiera sus ismeros) es lo que determina la especificidad de las enzimas. El acoplamiento es tal que E. Fisher (1894) enunci: El sustrato se adapta al centro activo o cataltico de una enzima como una llave a una cerradura".

MODELO LLAVE CERRADURA

Los sustratos se unen perfectamente al sitio activo en la enzima: son especficos

Importancia del centro activo en la catlisis enzimtica

Centro activo

F
Centro F
e2

e1

c2

C
c1 e3

Centro C

El centro activo es la regin de la enzima en la que transcurre la catlisis unindose a el sustrato, los cofactores (bioelementos) de naturaleza inorgnica, o coenzimas (vitaminas) de naturaleza orgnica
Esta unin puede originar modificaciones estructurales tanto en la enzima como en el sustrato

 Los AMINOCIDOS en el CENTRO ACTIVO se clasifican en:

AMINOCIDOS CATALTICOS (c1 , c2 c3 , c4 ) directamente implicados en los cambios covalentes del sustrato durante la reaccin enzimtica (CENTRO C)
AMINOCIDOS DE ESPECIFICADAD O CONTACTO (e1 , e2 ) participan en la unin del sustrato a la enzima pero no intervienen en los cambios covalentes (CENTRO F) AMINOCIDOS DE CONFORMACIN: no estn relacionados con el proceso cataltico directamente pero son necesarios para el mantenimiento de la estructura tridimensional de la enzima

Cules son los modelos de interaccin del complejo Enzima Sustrato (ES)?

S E
E

1.- MODELO LLAVE-CERRADURA: supone que la estructura del sustrato y la del centro activo son complementarias, de la misma forma que una llave encaja en una cerradura. Es vlido en muchos casos, pero no es siempre correcto.

2.- MODELO DE AJUSTE INDUCIDO: el centro activo adopta la conformacin idnea slo en presencia del sustrato. La unin del sustrato al centro activo del enzima desencadena un cambio conformacional que da lugar a la formacin del producto

S E
E

3.-

MODELO DE COMPRESIN: el centro activo adopta la conformacin idnea slo en presencia del sustrato pero el sustrato tambin modifica su conformacin en la formacin del complejo ES

S S E

4.- MODELO DE DISTORSIN: supone que la estructura del sustrato y la del centro activo son complementarias pero en el momento de formar el complejo ES ambos se distorsionan para generar un cambio conformacional

S S E

3).- PROPIEDADES DE LAS ENZIMAS

 Las propiedades de los enzimas derivan del hecho de ser protenas y de actuar como catalizadores.
Como protenas, poseen una conformacin natural ms estable que las dems conformaciones posibles. Cambios en la conformacin suelen ir asociados en cambios en la actividad cataltica.

FACTORES QUE INFLUYEN DIRECTAMENTE EN LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

pH

TEMPERATURA

COFACTORES

EFECTO DEL pH SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Las enzimas poseen grupos qumicos ionizables (-COOH; NH2; -SH; imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus aminocidos. Segn el pH del medio, estos grupos pueden tener carga elctrica positiva, negativa o neutra y como la conformacin de las protenas depende, en parte, de sus cargas elctricas, habr un pH en el cual la conformacin ser la ms adecuada para la actividad cataltica que es llamado pH PTIMO.

Efecto del pH sobre la conformacin de la protena

NH3 -H +H COOH

NH2
-H +H COOH

NH2 -H +H COO-

NH2

COO-

 La mayora de las enzimas son muy sensibles a los cambios de pH.

Desviaciones de pocas dcimas por encima o por debajo del pH ptimo pueden afectar drsticamente su actividad.

 EJEMPLO:

PEPSINA GSTRICA tiene un pH ptimo de 2 UREASA lo tiene a pH 7 ARGINASA lo tiene a pH 10 Ligeros cambios del pH pueden provocar la desnaturalizacin de la protena, los seres vivos han desarrollado sistemas complejos para mantener estable el pH intracelular:
LOS AMORTIGUADORES FISIOLGICOS

LISOSOMAS (Ejemplo mantenimiento de pH)

Organelos especializados que contienen diferentes tipos de enzimas hidrolasas cidas (40 tipos)
Lipasas, Fosfolipasas (lpidos) Proteasas (protenas) Sulfatasas (steres de sulfato) Fosfatasas (fosfatos de molculas orgnicas) Fosfatasa cida Nucleasas Todas estas enzimas necesitan de un ambiente cido para su funcionamiento ptimo, las membranas de los lisosomas disponen de bombas de protones que transportan de manera activa H+ hacia el lisosoma, manteniendo as un pH de 5.

 Los lisosomas mantienen las enzimas que necesitan para poder funcionar de un pH de 5 fuera del contacto del citosol, cuyo pH es de 7.2.

De esta forma se asegura su actividad, pero al mismo tiempo se protege al propio citosol en caso de que se produjera algn escape de enzimas hacia fuera.
Cuando se produce una alteracin de la membrana del lisosoma, por ejemplo si se rompe, se liberan las hidrolasas y se digieren los componentes celulares, pudiendo provocar incluso la muerte de la clula.

EJEMPLO DE ENFERMEDADES LISOSOMALES

2.-Clulas Nieman Pick
3

1 1.- ENFERMEDAD DE GAUCHER: enfermedad metablica rara causada por deficiencia de la enzima betaglucosidasa cida, que origina un depsito de un glucocerebrsido, la glucosilceramida, en el sistema retculoendotelial 2.- ENFERMEDAD DE NIEMAN-PICK: enfermedad gentica que impide el metabolismo de la esfingomielina celular por falta o deterioro de la enzima responsable, la esfingomielinasa cida 3.- SNDROME DE HUNTER: causada por un error en la enzima iduronato-2-sulfatasa. Produce tambin alteraciones en el desarrollo fsico y mental del nio.

EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

En general los aumentos de temperatura aceleran las reacciones qumicas: por cada 10C de incremento, la velocidad de reaccin se duplica. Las reacciones catalizadas por enzimas siguen esta ley general. Sin embargo, al ser protenas, a partir de cierta temperatura, se empiezan a desnaturalizar por el calor.

 La temperatura a la cual la actividad cataltica es mxima se llama TEMPERATURA PTIMA

Por encima de esta temperatura, el aumento de velocidad de la reaccin debido a la temperatura es contrarrestado por la prdida de actividad cataltica debida a la desnaturalizacin trmica, y la actividad enzimtica decrece rpidamente hasta anularse.

EFECTO DE LOS COFACTORES SOBRE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Las enzimas algunas veces requieren para su funcin la presencia de sustancias no proteicas que colaboran en la catlisis: COFACTORES O COENZIMAS. Los cofactores son de carcter inorgnico y pueden ser iones: Fe++, Mg++, Mn++, Zn++ etc. Casi un tercio de las enzimas conocidas requieren cofactores.

Cuando la molcula es orgnica se le llama coenzima. Muchos de estas se sintetizan a partir de vitaminas.

 Cuando los cofactores y las coenzimas se encuentran unidos covalentemente a la enzima se les llama:
GRUPOS PROSTTICOS La forma catalticamente activa de la enzima (cuando la enzima se une a su grupo prosttico) se le denomina: HOLOENZIMA (enzima completa) La parte proteica de una holoenzima (inactiva) se llama: APOENZIMA

Apoenzima + Grupo Prosttico = Holoenzima

VITAMINA (Orgnica) Hidrosoluble

COENZIMA

GRUPO PROSTTICO

METAL Inorgnico

METALOENZIMA METALOACTIVADA

COENZIMAS =Vitaminas (molculas orgnicas)

VITA= VIDA AMIN = QUE CONTIENE NITRGENO

1912: Casimir Funk. Molculas orgnicas complejas, indispensables para el funcionamiento adecuado de los seres vivos. OTRA DEFINICIN: Compuestos orgnicos esenciales que actan como catalizadores o coenzimas en reacciones qumicas para mantener las funciones metablicas normales, el crecimiento y la reparacin de los tejidos Son necesarias en cantidades mnimas (R.D.R.) = Respuesta Relativa a una Dosis

NO cumplen funciones estructurales ni energticas. NO son sintetizadas por los animales y, por tanto, deben proporcionarse en la dieta.

En base a que parmetro se clasifican las vitaminas? R = SOLUBILIDAD

HIDROSOLUBLES ABSORCIN: con agua en el tracto gastrointestinal EXCRECIN: va renal NO BIOACUMULABLES VITAMINA C (cido ascrbico COMPLEJO B (excepto la vitamina B12 que requiere un factor intrnseco) BIOTINA Y CIDO PANTOTNICO. LIPOSOLUBLES ABSORCIN: Se unen a grasas ALMACN: Hgado y tejidos grasos BIOACUMULABLES (Toxicidad)

A = RETINOIDES D = CALCIFEROLES E = TOCOFEROLES K = QUINONAS

VITAMINAS HIDROSOLUBLES
COMPLEJO B: B1 = Tiamina. B2 = Riboflavina. B3 = Niacina. B5 = cido Pantotnico. B6 = Piridoxal. B8 = Biotina. B9 = cido flico. B12 = Metilcobalamina
VITAMINA C = cido ascrbico.

Vitamina B1 (Tiamina)
ANTINEURTICA, ANTIBERIBERI
ESTRUCTURA QUMICA: Pirimidina + Anillo tiazico R.D.R: Nios: 0.5 mg/da, Adultos: 1 - 1,5 mg. Segn ingesta carbohidratos FUENTES: Tejidos animales (Carne cerdo y vsceras, cereales y leguminosas).

COENZIMA: TPP (PIROFOSFATO DE TIAMINA) REACCIONES: DECARBOXILACIN, TRANCETOLACIN

DEFICIENCIA: Beriberi (Neuropata perifrica, anorexia, fatiga), Encefalopata Wernicke Korsakow (Alcoholismo).

Coenzima PPT: forma activa

Enzimas que requieren de PPT: Complejo piruvato deshidrogenasa, complejo alfa-cetoglutarato deshidrogenasa Decarboxilacin oxidativa y no oxidativa de a cetocidos en el metabolismo intermediario

Complejo piruvato deshidrogenasa

Gliclisis aerobia Gliceraldehdo-3-P

Glucosa

Almidones

Vitamina B2 Riboflavina
ESTRUCTURA QUMICA: Ribitol + isoaloxacina (FLAVINA = amarillo). R.D.R: 0,5 mg en nios y 2 mg en adultos. Segn ingesta protenas FUENTES: Leche, granos, leguminosas, huevo y carne magra. COENZIMAS:: FMN: (MONONUCLETIDO DE FLAVINA) FAD: (DINUCLETIDO DE FLAVINA) REACCIONES: OXIDO-REDUCCIN DEFICIENCIA Arriboflavinosis (Anemia, queilosis, lengua color magenta, dermatitis seborreica y fotofobia).

RIBITOL

ISOALOXACINA

FOSFATO ADP

FAD

FMN

COENZIMAS

ENZIMA= Succinato deshidrogenasa Succinato + FAD Fumarato + FADH2

REACCIN DEL CICLO DE KREBS

Vitamina B3 Niacina
CIDO NICOTINICO, ANTIPELAGRA ESTRUCTURA QUMICA: Piridina. R.D.R: Nios: 5 - 8 mg. Adultos: 18 - 29 mg. Cada 60 mg de triptfano generan 1 mg de niacina. FUENTES: Maz, vegetales y animales. COENZIMAS: NAD (DINUCLETIDO DE ADENIN NIACINA) NADP DINUCLETIDO DE ADENIN NIACINA FOSFATO) REACCIONES: OXIDO-REDUCCIN

DEFICIENCIA: Pelagra (Diarrea, Demencia, Dermatitis) Ingesta isoniacida, enfermedad de Hartnup y sndrome carcinoide maligno. TOXICIDAD: Dao heptico ?.

COENZIMAS

Fermentacin Alcohlica NADH NAD+

Reacciones oxidativas de la va de las pentosas fosfato NADP+ NADP

Vitamina B5 cido pantotnico

ESTRUCTURA QUMICA: cido pantoico - b - alanina R.D.R: Nios 2 - 7 mg. Adultos 4 - 7 mg. FUENTES: Alimentos origen animal, cereales enteros y legumbres. COENZIMA: COENZIMA A (CoA) REACCIONES: B ACETILACIN (ACP) OXIDACIN, LIPOGNESIS Y

DEFICIENCIA: Rara. Animales: Hemorragia suprarrenal, alopecia, dermatitis, anorexia, lceras duodenales y retardo crecimiento.

Activacin de un cido graso y traslocacin de acil-CoA resultante por la carnitina

Rojo: acil-CoA verde: carnitina Rojo+verde: acilcarnitina CoASH: Coenzima A CPTI: carnitina palmitoiltransferasa CPTII: carnitina palmitoiltransferasa II 1: acil-CoA sintetasa 2: translocasa A: membrana mitocondrial externa B: espacio intermembrana C: membrana mitocondrial interna D: matriz mitocondrial I

Vitamina B6 Piridoxal
ESTRUCTURA QUMICA: Pirimidina. Piridoxal, piridoxina. y piridoxamina R.D.R: Nios: 0.3 1 mg. Adultos: 2 mg. Segn ingesta protenas. FUENTES: Hgado, carnes, pescado, aguacates, bananos, vegetales y huevos. COENZIMA: PLP (FOSFATO DE PIRIDOXAL) REACCIONES: METABOLISMO DE AMINOCIDOS, GLUCOGNESIS, GRUPO HEM, NUCLETIDOS Y FOSFOLPIDOS DEFICIENCIA: Neuropata perifrica, dermatitis, glositis y anemia sideroblstica.

PIRIDOXAL

PIRIDOXINA

PIRIDOXAMINA

COENZIMA

FOSFATO DE PIRIDOXAL

A pH fisiolgico el fosfato de piridoxal se presenta en forma de ion dipolar

Formacin de una aldimina entre la coenzima y un grupo amino de un residuo lisina en el lugar activo de la enzima.

COENZIMA

ENZIMA

REACCIN DE TRANSAMINACIN.- (Transaminasas o aminotransferasas) 1.- La reaccin comienza con la formacin de una nueva base de Schiff (aldimina) entre el grupo amino del aminocido y el fosfato de piridoxal.

2. Eliminacin de un grupo cargado positivamente por rotura

de un enlace debilitado en el carbono alfa del aminocido

3.- Deslocalizacin electrnica seguida de una protonacin 4.- Hidrlisis y liberacin de los productos de la reaccin

Las TRANSAMINASAS catalizan la transferencia del grupo amino de un aminocido a un cetocido

TGP

EJEMPLO: ALANINA TRANSAMINASA (TRANSAMINASA GLUTMICO PIRVICA) = TGP

Vitamina B8 Biotina (Vitamina H)

ESTRUCTURA QUMICA: anillo imidazol R.D.R: Nios: 10 30 mg. Adultos: 100 mg. FUENTES: Bacterias intestinales COENZIMA: BIOCITINA REACCIN: TRANSFERENCIA DE GRUPOS CARBOXILO (CARBOXILACIN) DEFICIENCIA: Avidina (Huevo). 128 aa Depresin, dermatitis, mialgias, alucinaciones, Inmunosupresin (Nios)

VITAMINA

FRACCIN APO (E)

 La enzima HOLOCARBOXILASA SINTETASA (HCS) cataliza la activacin, mediante biotinilacin, de cuatro carboxilasas en clulas humanas CITOSLICA

1.- ACETIL CoA CARBOXILASA: cataliza la conversin de acetil CoA a malonil CoA
MITOCONDRIALES 2.- PIRUVATO CARBOXILASA: Participa en la gluconeognesis, en el mantenimiento de los niveles de intermediarios del ciclo del cido ctrico 3.- PROPIONIL CoA CARBOXILASA: Participa en la carboxilacin del propionil CoA, convirtindolo en metil malonil CoA luego pasa a succinil CoA y forma parte del ciclo de los cidos tricarboxlicos 4.- METIL CROTONIL CoA CARBOXILASA: que interviene en el paso de metilcrotonil CoA a metil glutaconil CoA en el catabolismo de la leucina

 La deficiencia de HCS produce el SNDROME DE DEFICIENCIA MLTIPLE DE CARBOXILASAS (DMC). SINTOMATOLOGA:

NEUROLGICOS: (convulsiones, hipotona, retraso del desarrollo, sordera, letargia, dificultad respiratoria, hepatoesplenomegalia, coma) MUCOCUTNEOS: (dermatitis atpica y seborreica, alopecia completa o parcial, conjuntivitis). Esta enfermedad es potencialmente mortal y se caracteriza por la DEFICIENCIA DE LA ACTIVIDAD DE TODAS LAS CARBOXILASAS.
La deficiencia de biotina no solo disminuye la actividad de estas enzimas sino que parece modificar la expresin gentica.

Ejemplo: PIRUVATO CARBOXILASA MITOCONDRIAL

Vitamina B9 cido flico

ESTRUCTURA QUMICA: Pterina PABA glutamato R.D.R: Nios 25 mg. Adultos 150 mg. FUENTES: Hojas verdes, hgado, levadura. COENZIMA: TETRAHIDROFOLATO (TH4) producido en clulas intestinales por folato reductasa, ligada a NADPH+H. La forma activa son POLIGLUTAMATOS DE TH4. REACCIN: ADICIN DE MONOCARBONADOS DEFICIENCIA: Anemia megaloblstica, defectos del tubo neural (espina bfida).

Por qu es importante la ingesta de CIDO FLICO en las mujeres en edad de procrear hijos?
RECOMENDACIN: Ingesta antes de la concepcin y durante el primer mes de embarazo reducen el riesgo de tener un beb con ciertos defectos de nacimiento en el:
Cerebro Mdula espinal Defectos del Tubo Neural (NTD)

El tubo neural es la estructura embrinica que al desarrollarse se convierte en el cerebro y la mdula espinal (antes del da 29). Los NTD ms comunes son la: ESPINA BFIDA: es una de las causas ms importantes de parlisis infantil en la parte inferior del cuerpo y problemas de control de esfnteres ANENCEFALIA:. es una condicin fatal por la cual el beb nace con el crneo y el cerebro seriamente subdesarrollados. .

FORMA METILADA Y REDUCIDA DEL CIDO FLICO COMO PENTAGLUTAMATO

 REACCIONES ESPECFICAS: 1).- Formilacin de ribonucletidos en la sntesis de las purinas 2).- Metilacin del cido desoxiuridlico a cido timidlico en la biosntesis de nucletidos de pirimidina 3).- Generacin y utilizacin del formato 4).- Conversin de aminocidos. Serina (Ser) a glicina (Gly) (requiere de piridoxina) Histidina (His) a glutmico (Glu). Homocistena a metionina (Met) (requiere metilcobalamina)

Conversin de aminocidos: SERINA

GLICINA

Vitamina B12 Cobalamina

ESTRUCTURA QUMICA: Anillo corrina.

R.D.R: Nios 0.3 -1.5 mg. Adultos 2 mg.

FUENTES: Bacterias intestinales. Alimentos origen animal. VITAMINA: HAPTOCORRINA. TRANSCOBALAMINA COENZIMA: METILCOBALAMINA REACCIONES: TRANSMETILACIN, COBAMIDA, ISOMERIZACIN DEFICIENCIA: Anemia perniciosa (Megaloblastosis y sntomas neurolgicos, Glositis = inflamacin aguda o crnica de la lengua)

 FUNCIONES: Reduccin de ribonucletidos (algunas bacterias). Biosntesis de la metionina (mamferos) Isomerizacin del metilmalonato a succinato (mamferos) Isomerizacin del B - metil aspartato a glutamato (Clostridium tetanomor - phum) Conversin de aldehdos en dioles (algunas bacterias). De estas reacciones, slo 2 ocurren en los seres humanos. 1.- Sntesis de metionina a partir de la homocistena, reaccin de especial inters, pues no slo requiere metilcobalamina, sino tambin folatos como coenzima (metil tetrahidrofolato) 2.- Un paso en el catabolismo del propionato, la conversin del metilmalonil CoA a succinil Coa.

Cmo se absorbe, metaboliza y elimina la vitamina B12?

ABSORCIN: se produce en la mitad inferior del leon. La presencia del "factor intrnseco", una protena de la mucosa gstrica, es esencial para la absorcin de vitamina B12 que procede de los alimentos. En el estmago se forma un: Complejo vitamina B 12-factor intrnseco que pasa al intestino, all se une a los receptores de la mucosa del leon para que la vitamina B 12 se pueda absorber y pasar a la circulacin.

METABOLISMO: HGADO, actuando ste rgano como un depsito corporal

ELIMINACIN: VA BILIAR. Las cantidades superiores a las necesidades diarias se excretan en la orina.

METABOLISMO DE LA VITAMINA B12

Vitamina C cido ascrbico

ESTRUCTURA QUMICA: Derivado de L glucosa (lactona) R.D.R: Nios 15 30 mg. Adultos 60 75 mg. FUENTES: Ctricos, papa, tomate, guayaba. FUNCIONES: -HIDROXILACIN, REDOX, ANTIOXIDANTE -INMUNOCOMPETENCIA Nota: Se desconoce su accin como coenzima DEFICIENCIA: Escorbuto (Hemorragias, anemia, cicatrizacin heridas alterada, artralgias, letargia).

Vitamina C = cido L - ascrbico

Ascorbato

Radical ascorbil

Dehidroascorbato

2,3 - Dicetogulonato

El cido dehidroascrbico posee tambin actividad biolgica, debido a que en el cuerpo se reduce para formar cido ascrbico

 El contenido de vitamina C en las frutas y verduras vara dependiendo del grado de madurez:
Es menor el contenido cuando el fruto est verde Aumenta su cantidad cuando el fruto est maduro y luego vuelve a disminuir Lo ms recomendable es comer las frutas y verduras frescas puesto que la:

Accin del calor la destruye En contacto con el aire se oxida y pierde su actividad
Otra forma de destruccin de la vitamina C, es al tener contacto con alcohol etlico, por ejemplo con la cerveza o el tequila.

VITAMINA
TIAMINA (B1)
RIBOFLAVINA (B2) ACIDO NICOTNICO, NIACINA (B3) ACIDO PANTOTNICO (B5)

COENZIMA
Pirofosfato de tiamina (TPP)
FMN y FAD

REACCIN o PROCESO
Descarboxilacin, transferencia de grupos aldehido
Oxido- reducciones

NAD y NADP

Oxido-reducciones

Coenzima A (CoA)

Transferencia de grupos acilos

VITAMINA
PIRIDOXAL B6 BIOTINA (B8) ACIDO FLICO (B9) B12 C

COENZIMA
Fosfato de piridoxal (PLP) Biocitina Tetrahidrofolato (TH4) Metilcobalamina Cobamida

REACCIN o PROCESO
Transferencia de grupos amino Carboxilaciones Transferencia de grupos de un solo carbono Transferencia de grupos de un solo carbono Hidroxilaciones

Vas metablicas principales que involucran a las coenzimas formadas a partir de vitaminas hidrosolubles

VITAMINAS LIPOSOLUBLES

Vitamina A = RETINOIDES Vitamina D = CALCIFEROLES

Vitamina E = TOCOFEROLES Vitamina K = QUINONAS

Vitamina A

Retinol

ESTRUCTURA QUMICA: Poliisoprenoide (Retinol, retinal, cido retinoico) R.D.R: Nios 400 mg. Adultos 1000 mg. 1mg de retinol = 6 mg de betacaroteno FUENTES: Vegetales (Beta caroteno), Hgado FUNCIONES BIOLGICAS: Crecimiento y diferenciacin celular Visin Antioxidante (Beta - caroteno - Captura ROS) Actividad anticancergena Retenil fosfato (Donador grupos glucosilos en sntesis glucoprotenas).

 DEFICIENCIA:
NICTALOPA: (disminucin de la visin diurna con percepcin clara de los objetos por la noche, o sea con iluminacin dbil) = ceguera nocturna XEROFTALMIA: (sequedad persistente de la conjuntiva y opacidad de la crnea). CEGUERA CATARATAS SENILES HIPERQUERATOSIS FOLICULAR (lesiones que se perciben erizadas al tacto, consistentes de mltiples ppulas secas y duras Se observan en particular sobre la parte posterior de los brazos) ANEMIA: (defecto sntesis de transferrina).

 TOXICIDAD: DOLOR SEO DERMATITIS ESCAMOSA HEPATOESPLENOMEGALIA NUSEA Y DIARREA TERATOGNICA: (sustancias y preparados que a consecuencia de una exposicin inhalatoria (respiracin), oral (ingestin), o cutnea (piel) pueden producir o aumentar las posibilidades de producir alteraciones en el feto) en embarazadas

BETA - CAROTENO (fuente natural)

El Beta - caroteno es un polieno conjugado muy importante en la naturaleza Es un precursor de la vitamina A. Da el color naranja a las zanahorias

Cmo se lleva a cabo el proceso de la visin?

El proceso de la transduccin de la seal luminosa se basa en la activacin de una protena por la luz El pigmento visual de los bastones es una protena compuesta: RODOPSINA = OPSINA + RETINAL OPSINA: Protena de siete dominios transmembrana Localizada en la membrana de los discos RETINAL: Derivado de la vitamina A Sintetizado a partir de b-caroteno La forma unida a opsina es D11-cis-retinal: base de Schiff Es el responsable de la absorcin de luz (496 nm)

OPSINA

OPSINA Y 11-CIS RETINAL

RODOPSINA

ACTIVACION DE RODOPSINA INDUCIDA POR LA LUZ

LUZ

Metarodopsina II

Vitamina D
ESTRUCTURA QUMICA: Esteroide D2 = ERGOCALCIFEROL D3 = COLECALCIFEROL R.D.R: 10 mg.10g de colecalciferol= 400 U.I. Vitamina D FUENTES: 7 - DEHIDROCOLESTEROL (mediante luz U-V) Pescados (Bacalao), yema de huevo e hgado. FUNCIONES BIOLGICAS: 1,25 (OH)2 D3 (Calcitriol). Su produccin regulada por PTH y Ca++ srico Regulan metabolismo Ca++ y P- en intestino y rin. Diferenciacin celular e inmunitaria

 DEFICIENCIA:
RAQUITISMO (falta de mineralizacin en huesos) = nios OSTEOMALACIA (acumulacin de matriz sea submineralizada) = adultos ABSORCIN INADECUADA DE CALCIO DEBILIDAD MUSCULAR HIPOFOSFATEMIA

TOXICIDAD: Calcificacin de tejidos

HIPERCALCEMIA

Cristales de calcio en tejido mamario

Calcificacin de tejidos blandos

CLCULOS RENALES

Precursor de la vitamina D2

El ERGOSTEROL que esta presente en vegetales y levaduras, mediante una fotolisis o exposicin a luz ultravioleta abre el anillo B del perhidrociclopentanofenantreno dndole de esta manera propiedades antirraquticas.

Precursor de la vitamina D3

Es el 7-DESHIDROCOLESTEROL este se produce en animales Este compuesto es un precursor del colesterol Si no lo producimos al exponernos al sol podemos consumirlo en la dieta.

Calcitriol Forma activa

Vitamina E

ESTRUCTURA QUMICA: alfa-tocoferol

R.D.R:: Nios 3 mg. Adultos 10 mg. 1 mg de a-tocoferol = 1 U.I. Vitamina E.

FUENTES: Germen de trigo, semillas, aceite de girasol, aceite de maz y de soya

FUNCIONES BIOLGICAS: Antioxidante (Primera lnea de defensa frente a la peroxidacin de cidos grasos poliinsaturados contenidos en fosfolpidos de membrana).

 Acta sinrgicamente con Se, (Componente de glutatin peroxidasa). Impide la oxidacin de la LDL DEFICIENCIA: Anemia (Disminucin sntesis y vida media d hemoglobina) Predisposicin a enfermedades cardiovasculares. TOXICIDAD??? La vitamina E es considerada segura an si las dosis son grandes. Dosis mayores a 800 UI pueden traer consecuencias como:

Diarrea Dolor abdominal Fatiga Disminucin de la resistencia frente a infecciones bacterianas Sangrado (debido que la vitamina E tiene efecto anticoagulante) Hipertensin arterial Disminucin de la vitamina C en la sangre

Accin antioxidante

ROO. + Toc- OH ROOH + Toc- O

ROO. + Toc- O ROOH + radical no libre
Su forma biolgicamente activa es el D alfa tocoferol, cuyo hidroxilo fenlico en el anillo de cromano es responsable de la reduccin antioxidante

Vitamina K
ESTRUCTURA QUMICA: Nafto-quinonas K1= Filoquinona. K2 = Menaquinona. K3 = Menadiona.

RD.R: Nios 5 mg. Adultos 45 - 80 mg FUENTES: Bacterias intestinales y tejidos animales FUNCIONES BIOLGICAS: Utilizada por g glutamil carboxilasa en modificacin postraduccional glutamato en factores (II, VII, IX y X). y en osteocalcina DEFICIENCIA: Hemorragias (Neonatos), osteoporosis, ingesta de 4-hidroxicumarina (dicumarol) y warfarina

 CLASIFICACIN: * Vitamina K1 o filoquinona (2-metil-3-fitil-1,4naftoquinona), de origen vegetal, y la ms presente en la dieta. * Vitamina K2 o menaquinona, de origen bacteriano (difieren en el nmero de unidades isoprenoides que se encuentran en la cadena lateral) * Vitamina K3 o menadiona, liposoluble, de origen sinttico. Sus derivados bisulfticos son solubles en agua.

Participa en la sntesis de factores de la coagulacin sangunea, que concluyen en la formacin de un cogulo cuando se produce una herida

VITAMINA
VITAMINA A

FORMA ACTIVA
Retinal cido retinoico

REACCIN o PROCESO
Visin, crecimiento y reproduccin

VITAMINA D VITAMINA E
VITAMINA K

1,25(OH)2 D3 Alfa - tocoferol

Menaquinona

Metabolismo de Ca++ y PAntioxidante de los lpidos

Coagulacin sangunea y calcificacin sea

COFACTORES (INORGNICO)
Las funciones generales ms importantes asociadas con los metales son las siguientes:
Funciones estructurales Activacin y transporte de oxgeno Transporte de citocromos Funciones catalticas en procesos REDOX Funciones catablicas en reacciones cido - base

1. 2. 3. 4. 5.

1.- FUNCIONES ESTRUCTURALES

La participacin de fosfatos de calcio en la formacin de estructuras seas de los organismos superiores En otros organismos los tejidos duros estn asociados a la presencia de SiO2 o carbonato de calcio

2.- ACTIVACIN Y TRANSPORTE DE O2

Se realiza normalmente por protenas que contienen

HIERRO ( Hb = hemoglobina, Cu (hemocianinas)

Mb = mioglobina,

HEMERITINA

Como consecuencia de su interaccin con el centro metlico la molcula de oxgeno, sufre cambios importantes en su estructura electrnica y reactividad, proceso que se conoce con el nombre de activacin que es fundamental para posibilitar la utilizacin de oxgeno en los sistemas biolgicos

Reacciones de carga y descarga

Reaccin de carga
Los eritrocitos con desoxihemoglobina a su paso por los pulmones captan el O2

Desoxihemoglobina (sin O2)

Oxihemoglobina (con O2) Reaccin de descarga

Los eritrocitos con oxihemoglobina descargan el O2 a los tejidos

Pulmones

DesoxiHb +O2
Tejidos

OxiHb

3.- TRANSPORTE DE ELECTRONES Ciertos sistemas biolgicos requieren iones metlicos (Fe II / Fe III), (Cu I / Cu II), (Mo VI / Mo VII) para el transporte de electrones Son sistemas que aceptan electrones de un agente reductor y los transfieren a uno oxidante, estabilizados por cierto tipo de bioligandos. 4.- FUNCIONES CATALTICAS EN PROCESOS REDOX En estos sistemas el metal constituye el sitio activo sobre el cual tiene lugar una reaccin REDOX

Ejemplo de metales involucrados en este tipo de funciones son el Fe, Cu y Mo

5.- FUNCIONES CIDO-BASE

CATALTICAS

EN

REACCIONES

Pertenecen a este grupo las: HIDROLASAS Y FOSFATASAS. Los metales ms comunmente presentes en este tipo de sistemas son el Zn y Mg y en menor cantidad el Mo y otros cationes divalentes. Tambin las SINTETASAS e ISOMERASAS forman parte de este grupo

Aparte de los sistemas biolgicos involucrados en los cinco grupos mencionados y que cumplen funciones biolgicas y bioqumica fundamentales se han ido conociendo otros sistemas que tambin tienen metales pero no pueden clasificarse dentro de estos grupos generales, entre ellos se encuentran los siguientes:

Sistemas que participan en: La captacin, transporte y acumulacin de metales (Fe, Cu)

Procesos fotoqumicos, como las clorofilas que contienen Mg

Procesos o mecanismos de detoxificacin metalotionenas o los corpsculos de inclusin como las

Sistemas catinicos que ejercen funciones de control, regulacin y transmisin. En estos participan los cationes alcalinos y alcalino trreos, que aparecen involucrados en procesos como: control de la presin osmtica, contraccin muscular, transmisin del impulso nervioso

METALBIOMOLCULAS

PROTEICAS

NO PROTEICAS

ENZIMAS

PROTENAS DE TRNASPORTE Y ACUMULACIN

FUNCIONES ESTRUCTURALES

OXIDORREDUCTASAS TRANSPORTE Y ACTIVACIN DE O2

CAPTACIN DE METALES
TRANSPORTE DE e-

TRANSFERASAS

HIDROLASAS

SISTEMAS DE CONTROL Y REGULACIN

LIASAS ISOMERASAS LIGASAS

TRANSPORTE Y ACUMULACIN DE METALES SISTEMAS BIOQUMICOS

DETOXIFICACIN

Caractersticas de las enzimas maetaloactivadas y metaloenzimas

ENZIMA METALOACTIVADA

METALOENZIMA

METAL UNIDO REVERSIBLEMENTE

METAL UNIDO FIRMEMENTE

RELACIN METAL / PROTENA VARIABLE

RELACIN METAL / PROTENA CONSTANTE

RELACIN METAL / ACTIVIDAD ENZIMTICA VARIABLE METAL NO NECESARIAMENTE NICO

RELACIN METAL / ACTIVIDAD ENZIMTICA CONSTANTE METAL NICO

ACTIVIDAD ENZIMTICA POSIBLE SIN METAL

NO HAY ACTIVIDAD ENZIMTICA SIN METAL

METALOENZIMAS

1 METALOPROTENAS El metal y la protena estn asociadas

2 METALOPORFIRINAS In metlico asociado al anillo porfirnico

3 METALOFLAVIN ENZIMAS Metal unido a una unidad flavnica

1.- METALOPROTENAS
M = METAL = Cu (n=1) ; Mn (n=2) ; Fe (n=2) ; Ni (n=2).

SOD (Superxido dismutasa) = PROTENA

REACCIN: M(n+1)+ SOD Mn+ SOD + + O2 O2 Mn+ SOD + O2 + H 2 O2

+ 2H+ M(n+1)+ SOD

En esta reaccin el estado de oxidacin del catin metlico oscila entre n y n+1

 La enzima superxido dismutasa (SOD) cataliza la dismutacin de superxido en oxgeno y perxido de hidrgeno. Debido a esto es una importante defensa antioxidante en la mayora de las clulas expuestas al oxgeno En humanos existen tres formas de superxido dismutasa. SOD1 (Cu y Zn) se encuentra en el citoplasma Dimrica = contiene 2 subunidades SOD2 (Mn) se encuentra en las mitocondrias Tetramrica = contiene cuatro subunidades SOD3 (Cu y Zn) se encuentra en el lquido extracelular Tetramrica = contiene cuatro subunidades

Estructura de la unidad monomrica de superxido dismutasa 2 humana.

Estructura del sitio activo de la superxido dismutasa 2 humana.

1.- METALOPROTENAS

COBRE.- La superxido dismutasa es una metaloenzima que posee el in Cu y Zn. Esta enzima funciona en el proceso cataltico de la siguiente manera: O2 + O2 + 2H+ H2 O2 + O2
El Cu funciona en el proceso cataltico de la siguiente forma: E Cu+2 + O2 E Cu+1 + O2 E Cu+1 + O2 E Cu+2 + H2 O2

SOD1 (Cu y Zn)

 ZINC.- La carboxipeptidasa A es una enzima pancretica que tiene preferencia por aminocidos aromticos, aunque puede cortar con casi todos, excepto si el ltimo aminocido es la prolina.

 El sitio activo de esta enzima posee un tomo de zinc, adems de los residuos del GLU270 y la ARG127, que tambin participan. Aunque se han propuesto varios mecanismos, el ms aceptado es el que se muestra abajo y est basado en una combinacin de datos cinticos qumicos y cristalogrficos. Estos ltimos revelan que en el sito activo, una molcula de agua se encuentra coordinada al zinc

 Una metaloenzima que posee cofactores inorgnicos (Zn) y orgnicos (coenzima NAD+) es la ALCOHOL DESHIDROGENASA que es un dmero que cataliza la reaccin

Alcohol + NAD+

Aldehdo o Cetona + NADH

Tiene dos iones Zn para cada NAD+ uno de ellos est ligado a una molcula de H2 O conduciendo as mismo a la formacin de E Zn OH. Esta especie se une luego al alcohol (RCH2OH). Un in hdrico es transferido al NAD+ dando el aldehdo ligado al Zn

Zn

Sitio activo del Zn (sin H2O) Zn+2 en verde

NADH

http://www.bioygeo.info/AnimacionesBio2.htm

2.- METALPORFIRINAS

FERROPORFIRINA (HEME): La citocromo oxidasa es un ejemplo importante de este tipo de metaloenzima.

Adems del anillo ferroporfirnico esta enzima contiene Cu

Ambos iones metlicos oscilan entre sus estados oxidado y reducido

Su funcin es transferir electrones al oxgeno molecular en la cadena mitocondrial de transporte de e El H2O es el producto final.

CITOCROMO OXIDASA

Fe Cu

3.- METALOFLAVINPROTENAS
El ejemplo representativo es la XANTINA OXIDASA que es una enzima que depende de la presencia de:

2 tomos de Mo 8 tomos de Fe 2 molculas de FAD

En esta enzima el Fe est unido directamente a la protena, no est involucrada una estructura porfirnica. Los tomos de molibdeno se encuentran como cofactores de molibdopterina y son los sitios activos de la enzima

Las siguientes reacciones qumicas son catalizadas por la xantina oxidasa:

Hipoxantina + H2O + O2 xantina + H2O2 Xantina + H2O + O2 cido rico + H2O2

HIPOXANTINA (un tomo de oxgeno

XANTINA (dos tomos de oxgeno

CIDO URICO

(tres tomos de oxgeno

Mo
Mo DEGRADACIN DE PURINAS

METALOACTIVADAS
Mg.- Muchas FOSFOTRANSFERASAS requieren iones metlicos complejos con dos de los grupos fosforilo del ATP
Mg

4).- NOMENCLATURA DE LAS ENZIMAS

 Hay varias formas mediante las cuales se asigna el nombre a una enzima: NOMBRES PARTICULARES NOMBRE SISTEMTICO CDIGO DE LA COMISIN ENZIMTICA (ENZYME COMISSION)

NOMBRES PARTICULARES
Antiguamente, las enzimas reciban nombres particulares:

Asignados por su descubridor y /o por el sufijo ASA de acuerdo al sustrato sobre el que ejercan su accin.
Al ir aumentando el nmero de enzimas conocidos, se hizo necesaria una nomenclatura sistemtica que informara sobre: La accin especfica de cada enzima y los sustratos sobre los que actuaba.

Cada enzima acta sobre un sustrato

Enzima Sacarasa Lipasa Proteasa Carbohidrasa Sustrato Sacarosa Lpidos Protenas Carbohidrato

NOMBRE SISTEMTICO
El nombre sistemtico actualmente de 3 partes: de un enzima consta

EL SUSTRATO PREFERENTE

EL TIPO DE REACCIN CATALIZADA

TERMINACIN ASA EJEMPLO: GLUCOSA FOSFATO ISOMERASA que catalizar la isomerizacin de la glucosa-6-fosfato a fructosa-6-fosfato.

 Muchas enzimas catalizan reacciones reversibles No hay una manera nica para fijar cual de los dos sentidos se utiliza para nombrar al enzima As la glucosa -6-fosfato isomerasa (1) tambin podra llamarse fructosa -6-fosfato isomerasa (2)

1 2

 Cuando la accin tpica del enzima es la hidrlisis del sustrato, el segundo componente del nombre se omite por ejemplo:
La lactosa hidrolasa (1) se llama simplemente lactasa.

 Adems de los nombre sistemticos, an persisten otros de uso cotidiano. As, la glucosa ATP fosfotransferasa (1) se llama habitualmente glucoquinasa.

(1)

NOMENCLATURA DE LA COMISIN ENZIMTICA

El nombre de identificado por:

cada

enzima

puede

ser

Las letras E.C. (Enzyme Comission) Cdigo numrico seguido de cuatro nmeros separados por puntos.

 El primer nmero indica: La CLASE a la que pertenece la enzima. Son 6 clases El segundo se refiere a: Las distintas SUBCLASES GRUPO

dentro

de

CADA

El tercero y el cuarto indican Los GRUPOS QUMICOS ESPECFICOS que intervienen en la reaccin.

 EJEMPLO: ATP:glucosa fosfotransferasa (glucoquinasa)

EC 2.7.1.2 El nmero 2 indica que es una TRANSFERASA El 7 que es una FOSFOTRANSFERASA El 1 indica que el ACEPTOR ES UN GRUPO OH Y el ltimo 2 indica que es un OH DE LA D-GLUCOSA EL QUE ACEPTA EL GRUPO FOSFATO

1 7
glucoquinasa

2 2

2 = Transferasa = CLASE 7 = Fosfotransferasa = (el dador de Pi es el ATP) = SUBLCASE 1 = aceptor es un grupo OH = SUB-SUBCLASE

2 = OH de la D-glucosa = sustrato = (acepta el grupo fosfato) =ENZIMA

5.- CLASIFICACIN DE LAS ENZIMAS

 En funcin de su accin cataltica especfica las enzimas se clasifican en 6 grupos o clases: Clase 1: OXIDORREDUCTASAS Clase 2: TRANSFERASAS Clase 3: HIDROLASAS

Clase 4: LIASAS
Clase 5: ISOMERASAS

Clase 6: LIGASAS

Clase 1: OXIDORREDUCTASAS Catalizan reacciones de oxidorreduccin, es decir, transferencia de hidrgeno (H) o electrones (e-) de un sustrato a otro, segn la reaccin general:

AH2 + B

A + BH2

Ared + Box

Aox + Bred
Ejemplos: Succinato deshidrogenasa Citocromo c oxidasa.

COENZIMA OXIDADA

COENZIMA REDUCIDA

SUSTRATO REDUCIDO

ENZIMA
E.C.1. 3. 99. 1

PRODUCTO OXIDADO
CICLO DE KREBS

Clase 2: TRANSFERASAS Catalizan la transferencia de un grupo qumico (distinto del hidrgeno) de un sustrato a otro

A-B + C

A + C-B

Glucoquinasa

Un ejemplo es la glucoquinasa, que cataliza la reaccin representada en la (figura de la derecha:

glucosa + ATP

ADP + glucosa-6-fosfato

E.C. 2. 7. 1. 2
GLICLISIS

Clase 3: HIDROLASAS Catalizan las reacciones de hidrlisis:

A-B + H2O

AH + B-OH

Un ejemplo es la SACARASA que cataliza la reaccin:

Sacarosa + Agua

Glucosa + Fructuosa

E.C.3. 2. 1.10

HIDRLISIS DE DISACRIDOS

Enfermedad: Intolerancia a la sacarosa es poco conocida, debida a la falta de sacarasa. Sntomas: en el intestino delgado provoca que la sacarosa (azcar comn) pase sin digerir al intestino grueso, donde es fermentada por las bacterias, produciendo gases, malestar, diarreas, e incluso sangrado. Es muy difcil diagnosticarla ya que los sntomas son similares a otras: enfermedad celaca (GLUTEN) - (SIN TACC), intolerancia a la lactosa, sndrome de intestino irritable. Diagnstico: Biopsia intestinal, y analizar la cantidad de enzima sacarasa presente.

Clase 4: LIASAS: Catalizan reacciones de ruptura o soldadura de sustratos

A-B

A + B

Ejemplo: acetoacetato descarboxilasa que cataliza la reaccin

cido acetoactico

CO2 + Acetona

Otra es la glutamato descarboxilasa que cataliza la reaccin

cido glutmico

CO2 + GABA

Acetato descarboxilasa
E.C. 4.1.1.4

+ CO2
CETOGNESIS

GAD = Glutamato descarboxilasa EC 4.1.1.15 BIOSNTESIS DE NEUROTRANSMISORES

Clase 5: ISOMERASAS Catalizan la interconversin de ismeros

Ejemplos:
Fosfotriosa isomerasa = Triosa fosfato isomerasa

Fosfoglucosa isomerasa = Glucosa fosfato isomerasa

Fosfotriosa isomerasa E.C.5.3.1.1

GLICLISIS

E. C. 5.3.1.9

Clase 6 LIGASAS: Catalizan la unin de dos sustratos con hidrlisis simultnea de un nucletido trifosfato (ATP, GTP, etc)

A + B + XTP

A-B + XDP + Pi

Un ejemplo es la piruvato carboxilasa que cataliza la reaccin

Piruvato + CO2 + ATP

Oxalacetato + ADP + Pi

Piruvato carboxilasa E.C.6. 4. 1. 1

GLUCONEOGNESIS

6.- ACTIVADORES E INHIBIDORES

A).- En las reacciones espontneas, los productos finales tienen menos energa libre de Gibbs (DG) que los reactantes Por tanto, en las reacciones espontneas se libera energa de Gibbs (DG<0)

Perfil energtico de una reaccin espontnea

B).- El comienzo de la reaccin requiere un aporte inicial de energa. Esta energa inicial que hay que suministrar a los reactantes para que la reaccin transcurra se llama energa de activacin (Ea). Cuanto menor es la Ea ms fcilmente transcurre la reaccin.

Perfil energtico de una reaccin catalizada

 La accin de un catalizador consiste en disminuir la Ea

Las enzimas son catalizadores eficaces, ya que disminuyen la Ea an ms que los catalizadores inorgnicos. EJEMPLO: la descomposicin del agua oxigenada (H2O2) para dar H2O y O2:
a).- Sin catalizador b).- Con un catalizador inorgnico (platino) c).- Con una enzima especfico (catalasa). Las respectivas Ea para cada proceso son: a).- 18 Kcal/mol b).- 12 Kcal/mol c).- 6 Kcal/mol. As, se puede calcular que el platino acelera la reaccin 20.000 veces, mientras que la catalasa la acelera 370.000 veces.

 Para que una reaccin qumica tenga lugar:

Las molculas de los reactantes deben chocar con una energa y una orientacin adecuadas
La accin de la enzima permite que: Los reactantes (sustratos) se unan a su centro activo con una orientacin ptima para que la reaccin se produzca

Modifique las propiedades qumicas del sustrato unido a su centro activo, debilitando los enlaces existentes y facilitando la formacin de otros nuevos

MECANISMO DE ACCIN DE LAS ENZIMAS

ACTIVADORES E INHIBIDORES

ACTIVADORES: Cambian la conformacin de la enzima para formar el complejo enzima sustrato Pueden ser:

IONES METLICOS: COFACTORES DE ORIGEN ORGNICO: COENZIMAS

ACTIVADORES
productos sustrato

Enzima inactiva Enzima activa

activador

Los activadores se unen al centro regulador, cambian la configuracin del centro activo, que hasta ese momento estaba inactivo y desencadenan la catlisis enzimtica.

INHIBIDORES

REVERSIBLES

IRREVERSIBLES

COMPETITIVOS

NO COMPETITIVOS

MIXTOS

INHIBIDORES
INHIBIDORES REVERSIBLES: Se unen a las enzimas COVALENTES tales como: mediante interacciones NO

PUENTES DE HIDRGENO INTERACCIONES HIDROFBICAS ENLACES INICOS Los enlaces dbiles mltiples entre el inhibidor y el sitio activo se combinan para producir una unin fuerte y especfica

Impiden la actividad de una enzima y puede ser de tres formas

INHIBIDOR COMPETITIVO
El sustrato y el inhibidor no se pueden unir a la misma enzima al mismo tiempo

El INHIBIDOR TIENE AFINIDAD POR EL SITIO ACTIVO de una enzima en el que tambin se une el sustrato; el SUSTRATO y el INHIBIDOR COMPITEN para el acceso al sitio activo de la enzima Este tipo de inhibicin se puede superar con concentraciones suficientemente altas del sustrato, es decir, dejando fuera de competicin al inhibidor
Los inhibidores competitivos son a menudo similares en estructura qumica al sustrato verdadero BLOQUEA EL SITIO ACTIVO

INHIBICIN COMPETITIVA

INHIBICIN COMPETITVA
sustrato inhibidor

Enzima

Enzima

Sin inhibidor

con inhibidor

Los inhibidores competitivos son sustancias, muchas veces similares qumicamente a los sustratos, que se unen al centro activo impidiendo con ello que se una el sustrato. El proceso es reversible y depende de la cantidad de sustrato y de inhibidor, pues ambos compiten por la enzima.

 Los inhibidores competitivos se pueden unir a E, pero no a ES. La inhibicin competitiva aumenta el valor de Km (es decir, el inhibidor interfiere con la unin del sustrato), pero no afecta a la Vmax (el inhibidor no obstaculiza la catlisis en ES porque no se puede unir a ES).

Succinato deshidrogenasa

Inhibidores competitivos (anlogos estructurales del Sustrato)

COO-

COO- FAD CH2 CH2 COO

-

FADH2 COO CH SDH CH

CH2 COOMalonato

COOC O CH2 COOOxalacetato

COOFumarato

Succinato

 NO COMPETITIVA: Altera la forma del sitio activo UNIENDOSE A LA ENZIMA EN OTRO LUGAR cambiando su conformacin.
Los inhibidores no competitivos tienen afinidades idnticas por E y ES (Ki = Ki'). La inhibicin no competitiva no cambia la Km (es decir, no afecta a la unin del sustrato) pero disminuye la Vmax (es decir, la unin del inhibidor obstaculiza la catlisis).

INHIBICIN NO COMPETITVA
sustrato

No se produce la catlisis

Enzima

Enzima

Sin inhibidor

Con inhibidor

inhibidor

Los inhibidores no competitivos se unen a la enzima en lugares diferentes al centro activo alterando la conformacin de la molcula de tal manera que, aunque se forme un complejo enzima-sustrato, no se produce la catlisis. Este tipo de inhibicin depende solamente de la concentracin de inhibidor.

 MIXTA El inhibidor se puede UNIR A LA ENZIMA AL MISMO TIEMPO QUE EL SUSTRATO Sin embargo, la unin del inhibidor afecta la unin del sustrato y viceversa. Este tipo de inhibicin se puede reducir, pero no superar al aumentar las concentraciones del sustrato. Aunque es posible que los inhibidores de tipo mixto se unan en el sitio activo, este tipo de inhibicin resulta generalmente de un EFECTO ALOSTRICO donde el inhibidor se une a otro sitio que no es el sitio activo de la enzima. La unin del inhibidor con el SITIO ALOSTRICO cambia la conformacin (es decir, la ESTRUCTURA TERCIARIA o la forma tridimensional) de la enzima de modo que la afinidad del sustrato por el sitio activo se reduce.

USO TERAPUTICO DE LA INHIBICIN COMPETITIVA

Cul es la terapia en pacientes que han ingerido metanol?

Alcohol deshidrogenasa

Ceguera CH3-CH2-OH + NAD+ CH3-C=O + NADH +H+ H Acetaldehdo

Etanol

Administrar etanol para saturar la alcohol deshidrogenasa y prevenir la formacin de metabolitos txicos del metanol

INHIBIDORES IRREVERSIBLES
Los inhibidores irreversibles normalmente MODIFICAN UNA ENZIMA COVALENTEMENTE por lo que la inhibicin no puede ser invertida Suelen contener grupos funcionales reactivos como: Mostazas nitrogenadas Aldehdos Haloalcanos Alquenos.

 Estos grupos electroflicos reaccionan con las cadenas de aminocidos para formar uniones covalentes Los residuos modificados son aquellos que contienen en sus cadenas laterales nuclefilos como por ejemplo un grupo hidroxilo o un grupo sulfhidrilo. Esto incluye a los aminocidos serina (como en el DFP), cistena, treonina o tirosina.

ENVENENADORES

sustrato envenenador

Enzima

Los envenenadores son sustancias que se unen al centro activo mediante enlaces fuertes en un proceso irreversible, con lo que impiden de manera definitiva la catlisis.

La inhibicin irreversible es diferente de la inactivacin enzimtica reversible.

Los inhibidores irreversibles son generalmente especficos para un tipo de enzima y no inactivan a todas las protenas.
No funcionan destruyendo la estructura protenica, sino alterando especficamente la estructura tridimensional del sitio activo inhabilitndolo. Por ejemplo, el pH las temperaturas extremas causan la desnaturalizacin de casi todas las protenas, pero este no es un efecto especfico.
Reaccin del inhibidor irreversible diisopropilfluorofosfato (DFP) con una sern-proteasa.

MECANISMO DE ACCIN DE LA ACETILCOLINESTERASA

Tejido nervioso Glbulos rojos

El residuo de serina acetilada debe ser

Enlace de la acetilcolina en el centro activo de la acetilcolinesterasa

hidrolizada antes de que la reaccin se complete, siendo la enzima capaz de catalizar una nueva reaccin

INHIBIDORES IRREVERSIBLES DE LA ACETILCOLINESTERASA

Su aguda TOXICIDAD se debe al efecto que producen sobre el sistema nervioso de los animales (INHIBEN LA SNTESIS DE NEUROTRANSMISORES)

PARO DE LA RESPIRACIN CELULAR

CO

Nombre

Frmulaa

Origen

Modo de accin
Reacciona con iones metlicos de enzimas enzimas de la cadena respiratoria

Cianuro

Almendras amargas (p.ej.,Fe,Zn,Cu);sus dianas primarias son las

Diisopropil Fluorofosfato (DFP) Sarn

Sinttico

Inhibe enzimas con serina en el lugar activo, como la acetilcolinesterasa

Sinttico (gas nervioso)

Como el DFP

Fisostigmina

Semillas de Physostigma venosum

Como el DFP

Paratin

Sinttico (insecticida)

Como el DFP, pero especialmente inhibidor de la acetilcolinesterasa de insectos

N-Tosil-L-fenilAlaninacloroMetil cetona (TPCK)

Sinttico

Reacciona con la His 57 de la quimotripsina

Penicilina

Del hongo Penicillium

Inhibe las enzimas de la sntesis de la pared de la clula bacteriana

a R = grupo variable; difiere en las distintas penicilinas

Bioqumica Mathews, van Holde y Ahern. Addison Wesley 2002

EN CONCLUSIN LOS INHIBIDORES PUEDEN SER:

ISOSTRICOS: Ejercen su accin sobre el centro activo ALOSTRICOS: Ejercen su accin sobre otra parte de la molcula causando un cambio conformacional con repercusin negativa en la actividad enzimtica

7).- REGULACIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

 Una enzima no tiene por qu actuar siempre a la misma velocidad. Su actividad puede estar modulada por: a).- Cambios en el pH b).- Cambios en la temperatura c).- Presencia de cofactores d).- Las concentraciones del sustrato y de los productos finales e).- Presencia de inhibidores f).- Modulacin alostrica g).- Modificacin covalente h).- Activacin por proteolisis i).- Isoenzimas

a).- Cambios en el pH
pH ptimo. AMORTIGUADORES FISIOLGICOS Sistema BICARBONATO-CIDO CARBNICO Sistema FOSFATOS Sistema de PROTENAS PLASMTICAS con alto contenido: Aminocidos acdicos = GLUTMICO Y ASPRTICO, Basdicos = ARGININA, HISTIDINA, LISINA) HEMOGLOBINA (alto contenido del aminocido Histidina)

b).- Cambios en la temperatura

A partir de cierta temperatura se desnaturalizan por el calor

La temperatura a la cual la actividad cataltica es mxima se llama temperatura ptima

Por encima de esta temperatura:

El aumento de velocidad de la reaccin debido a la temperatura es contrarrestado por la prdida de actividad cataltica debida a la desnaturalizacin trmica

c).- Presencia de cofactores/coenzimas

A veces, una enzima requiere para su funcin la presencia de sustancias no proteicas que colaboran en la catlisis:

Los cofactores pueden ser iones inorgnicos como el Fe++, Mg++, Mn++, Zn++ etc. Casi un tercio de los enzimas conocidos requieren cofactores.

Cuando el cofactor es una molcula orgnica se llama coenzima. Muchos de estos coenzimas se sintetizan a partir de vitaminas

d).- Las concentraciones del sustrato y de los productos finales

La velocidad de una reaccin enzimtica depende de la concentracin de sustrato. Ejemplo: velocidad de una reaccin enzimtica a 6 concentraciones distintas de sustrato.

Adems, la presencia de los productos finales puede hacer que la reaccin sea ms lenta, o incluso invertir su sentido

e).- Presencia de inhibidores

Molculas que pueden inhibir la accin cataltica de una enzima. COMPETITVO NO COMPETITIVO

MIXTO

f).- Modulacin alostrica

Hay enzimas que pueden conformaciones interconvertibles: R (RELAJADA) T (TENSA) R es la forma ms activa porque se une al sustrato con ms afinidad. adoptar dos

Las formas R y T se encuentran en equilibrio R <==> T

Ciertas molculas tienden a estabilizar la forma R MODULADORES POSITIVOS El propio sustrato es a menudo un modulador positivo. Las molculas que favorecen la forma R pero que actan sobre una regin del enzima distinta del centro activo son los ACTIVADORES ALOSTRICOS

Activador alostricos : Favorece la unin del sustrato

Las molculas que favorecen la forma T y disminuyen la actividad enzimtica son los MODULADORES NEGATIVOS Si estos moduladores actan en lugares distintos del centro activo del enzima se llaman inhibidores alostricos

Inhibidor alostricos : Impide la unin del sustrato

COMPLEJO PIRUVATO DESHIDROGENASA

= Piruvato deshidrogenasa

MODULADORES NEGATIVOS

INACTIVACIN DEL COMPLEJO PDH

INHIBICIN POR EL SUSTRATO

El control de las deshidrogenasas que participan en el ciclo de Krebs (TCA) y producen NADH ( isocitrato DH, a-cetoglutarato DH y malato DH ) al igual que la PDH estas tres Deshidrogenasas son inhibidas por su producto NADH

ACTIVACIN DEL COMPLEJO PDH

ACTIVACIN DEL COMPLEJO PDH

g).- Modificacin covalente

Otras enzimas pasan de una forma menos activa a otra ms activa Unindose covalentemente a un grupo qumico de pequeo tamao como el PI o el AMP Tambin se da el caso inverso en el que: Una enzima muy activa se desactiva al liberar algn grupo qumico

 En las enzimas de las vas degradativas del metabolismo: La forma fosforilada es ms activa que la no fosforilada En las vas biosintticas ocurre lo contrario.

GLUCOGENOLISIS

GLUCOGENSIS

Elementos de la reaccin

La enzima NO FOSFORILADA es INACTIVA

La enzima FOSFORILADA es ACTIVA

h).- Activacin por protelisis

Algunas enzimas no se sintetizan como tales, sino como protenas precursoras sin actividad enzimtica Estas protenas se llaman: Proenzimas Preprotena, Preenzima o Zimgenos. Para activarse, necesita de un cambio bioqumico en su estructura que le lleve a conformar un centro activo donde poder realizar la catlisis. En ese momento, el zimgeno pasa a ser una enzima activo Para activarse, los zimgenos sufren un ataque hidroltico que origina la liberacin de uno o varios pptidos El resto de la molcula proteica adopta la conformacin y las propiedades del enzima activo.

ACTIVACIN
La activacin del zimgeno es un proceso catalizado por enzimas a travs de la cual, la enzima operadora promueve la hidrlisis de uno o ms enlaces peptdicos especficos en el zimgeno como sustrato liberando la forma activa al cambiar la conformacin de la molcula.
ENZIMA OPERADORA: Enzimas proteolticas (proteasas, proteinasas, peptidasas) Catalizadores biolgicos que hidrolizan los enlaces peptdicos

ACTIVACIN

+
Modificacin por una proteasa
Residuo

ZIMGENO (Protena precursora Inactiva)

Modificacin por una proteasa

Liberacin de la protena activa

ZIMGENOS

Diversos procesos biolgicos regulados por la ruptura proteoltica:

son

EJEMPLO:
La digestin La coagulacin sangunea

DIGESTIN: Las enzimas digestivas pancreticas se sintetizan como zimgenos que son activados por enzimas proteolticas

LUGAR DE SNTESIS Estmago (mucosa gstrica) Pncreas Pncreas

ZIMGENO (inactivo) Pepsingeno Tripsingeno Quimotripsingeno

ACTIVADOR HCl y autoactivacin Enteropeptidasa Tripsina Enteropeptidasa

Pncreas
Pncreas Pncreas Mucosa intestinal

Procarboxipeptidasa A
Procarboxipeptidasa B Proelastasa ------------------------

Tripsina
Tripsina Tripsina ------------------------

ENZIMA (activa) Pepsina Alfa- Tripsina

ENLACE Endopeptidasa Tirosina, Leucina Endopeptidasa Arginina, lisina Endopeptidasa Tirosina, fenilalanina, triptfano, metionina

Quimotripsina

Carboxipeptidasa A
Carboxipeptidasa B Elastasa

Todos excepto los bsicos

Exopeptidasa Arginina, lisina Endopeptidasa Aminocidos neutros

Aminopeptidasa

Endopeptidasa

TRIPSINGENO

TRIPSINA

+
Activado por Enteropeptidasa Residuo Pptido N-terminal

Ruptura enlace peptdico/residuo LYS 6 y ILE 7

Val Asp Asp Asp Asp - Lys

COAGULACIN SANGUNEA
Una cascada de activacin de zimgenos es la coagulacin sangunea FIBRINGENO (es soluble) Forma zimgena de la FIBRINA La fibrina acta en la coagulacin sangunea ya que es insoluble y aglutina

Protombina

2 A FIBRINOPPTIDOS 2 B FIBRINOPPTIDOS

(alfa, beta, gama)2

FIBRINGENO FORMADO POR TRES PARES DE CADENAS: (A alfa) 2 (B beta) 2 y (gama)2

LESIN

FORMACIN DE FIBRINA

FORMACIN DE COGULO

i).- Isoenzimas
Las enzimas que tienen distinta estructura molecular aunque su funcin biolgica es similar se llaman isozimas o isoenzimas Estas diferencias de estructura se traducen en ligeros cambios en sus propiedades, de forma que cada isozima se adapta perfectamente a la funcin que debe realizar

Se puede observar la existencia de isoenzimas en funcin de: a).- EL TIPO DE TEJIDO: Ejemplo: lactato deshidrogenasa presenta isozimas distintas en msculo y corazn.
4 SUBUNIDADES

Gliclisis anaerobia = Fermentacin lctica

GLUCOSA

Fotomicrografia de la enzima lactato deshidrogenasa

 La lactato deshidrogenasa tiene un PM =140 kDa

Est formada por 4 subunidades, cada una de unos 35 kDa Se conocen dos tipos de subunidades: H y M, que presentan pequeas diferencias en su secuencia de aminocidos Ambas pueden asociarse independientemente para formar tetrmeros, dando lugar a cinco isoenzimas (isoformas de la enzima), correspondientes a las cinco combinaciones posibles, cada una de las cuales se encuentra preferentemente en determinados tejidos

ISOZIMAS DE LA LACTATO DESHIDROGENASA

LDH-1 (H4): corazn, msculo y eritrocitos

LDH-2 (H3M): sistema retculoendotelial, leucocitos

LDH-3 (H2M2): pulmones

LDH-4 (HM3): riones, placenta, pncreas

LDH-5 (M4): hgado, msculo esqueltico

Niveles aumentados de LDH

CARDIOPATAS: Infarto de miocardio, miocarditis, insuficiencia cardaca aguda, arritmias cardacas.

ENFERMEDADES HEMATOLGICAS
HEPATOPATAS: hepatitis, hepatopata txica, obstruccin de vas biliares

METASTASIS TUMORALES
OTROS: Tromboembolismo pulmonar, neumona, insuficiencia renal aguda, infarto renal, hipotiroidismo, ejercicio muscular muy violento, fiebre tifoidea, tratamiento con medicamentos hepatotxicos, alcoholismo

b).- EL COMPARTIMENTO CELULAR

MALATO DESHIDROGENASA CITOPLASMTICA MALATO DESHIDROGENASA MITOCONDRIAL

ISOFORMAS DE LA MALATO DESHIDROGENASA MDH1 : Malato deshidrogenasa 1 ( citoslica ) Es una enzima cuyo gen se encuentra en el cromosoma 2 Nmero de EC = 1.1.1.37 MDH2 : Malato deshidrogenasa 2 ( mitocondrial ). Es una enzima cuyo gen se encuentra en el cromosoma 7 Nmero de EC = 1.1.1.37

c).- EL MOMENTO CONCRETO DEL DESARROLLO del individuo: Algunas enzimas de la gliclisis del feto son diferentes de las mismas enzimas en el adulto.

FETO
La glucosa, el lactato y los aminocidos son los principales sustratos para el metabolismo y el crecimiento fetal La glucosa de la circulacin materna se transfiere al feto por difusin facilitada a travs de la placenta La insulina est presente en el pncreas del feto humano desde la octava semana de gestacin. Como la insulina no atraviesa la placenta el incremento de los niveles de insulina en el ltimo trimestre de gestacin puede reflejar un incremento de la liberacin pancretica fetal El pncreas fetal parece ser menos sensible a los cambios de concentracin de glucosa que el pncreas adulto.

Enzimas de la gliclisis
HEXOQUINASA: La actividad en el hgado fetal es 500% ms elevada que en adultos FRUCTUOCINASA: Est ausente en el hgado fetal de rata, conejo, cobayo, desarrollndose solo despus del nacimiento aproximadamente entre los das 7 y 10. GALACTOCINASA: La actividad de esta enzima aumenta despus del nacimiento El hgado neonatal tiene mayor capacidad para utilizar y oxidar glucosa que el hgado fetal y el hgado del adulto Existen dos isozimas: la neonatal y la del adulto. GLUCOCINASA. No hay actividad en hgado fetal, su actividad aparece solo despus del nacimiento

 FOSFOFRUCTUOCINASA: La enzima fetal parece ser la misma del adulto. PIRUVATO CINASA: Existen dos isozimas: Tipo M Forma mayoritaria en el hgado fetal. Disminuye en la lactancia Tipo L. Forma mayoritaria en el adulto. Aumenta en la lactancia. OTRAS ENZIMAS como la FOSFOGLUCOISOMERASA, GLICERALDEHDO DESHIDROGENASA y TRIOSA FOSFATO ISOMERASA, aumentan en el momento del nacimiento, disminuyendo en la lactancia

GRACIAS POR SU ATENCIN

Un cientfico debe tomarse la libertad de plantear cualquier cuestin, de dudar de cualquier afirmacin, de corregir errores. Julius Robert Oppenheimer (1904-1967) Fsico estadounidense.