QU SON LOS ANTICUERPOS ANTI MITOCONDRIALES? IMPORTANCIA CLNICA.

MTODOS DE ESTUDIO
Vidal Lucero Geraldine Paola

Los Anticuerpos antimicondriales (AMA) son anticuerpos (inmunoglobulinas) que se unen a antgenos proteicos que se encuentran en los complejos multienzimticos (paquetes de enzimas) presentes en la membrana interna y externa de las mitocondrias AMA especficamente reaccionar en contra de un componente de este complejo multienzimtico llamado E2.

 Se

ha postulado que entre las causas de la produccin de AMA est la modificacin a nivel del sistema xenobitico y la cadena respiratoria a nivel mitocondrial, lo que conducira a la produccin de la prdida de tolerancia y la produccin de los autoanticuerpos .

IMPORTANCIA CLINICA

La presencia de AMA en la sangre o en el suero de una persona orienta a graves desrdenes autoinmunes, como la cirrosis biliar primaria (CBP), patologa que afecta principalmente los conductos biliares, afectando el drenaje biliar del hgado. Est presente en un 95% de los casos, siendo una prueba de diagnstico muy til en conjunto al cuadro clnico.

En las fallas hepticas agudas, los AMA especficamente reaccionar en contra de un componente de este complejo multienzimtico llamado E2. En PBC, AMA preferentemente reaccionar con el componente E2 de uno de los multienzymes que se llama el complejo de la piruvato deshidrogenasa (PDC).

Se han identificado 9 subtipos de AMA nombrados de M1 a M9 con diferente significancia clnica. El subtipo mas frecuentemente encontrado es el M2, un anticuerpo que se encuentra dirigido especficamente contra la subunidad E2 del complejo enzimtico piruvato deshidrogenasa.

ANTIMITOCONDRIAL M1

: dirigidos contras la cardiolipina (componente principal de la membrana interna de las mitocondrias) y compuesto por dos grupos de fosfodiesteres. Se encuentran en sfilis secundaria

ANTIMITOCONDRIAL M7

Detectados exclusivamente en pacientes con miocarditis aguda o cardiomiopatias de origen desconocido con la tcnica de Western Blot se reconocen dos determinantes antignicos de 90 y 40 kd.

Antimitocondrial M5: dirigidos contra fosfolipidos. Se observan en algunas colagenopatias no bien caracterizadas y en algunos pacientes con lupuseritematoso.

Antimitocondrial M3: se observa en pacientes con pseudo lupus inducido por fenopirazona. Antimitocondrial M6: se observa en hepatitis producida por iproniazida (antidepresivo).

 Antimitocondrial

M2:

Cuyo objetivo es el epitope inmunodominante E2 del complejo de la pruvato dehidrogenasa o la 2oxodehidrogenasa cida de las mitocondrias. Diagnstico: es el mtodo de mayor valor diagnstico de cirrosis biliar primaria. Aparecen en el 95% de los pacientes con esta patologa. Tienen una especificidad del 97 % y una sensibilidad del 98%(cuando se presenta la imagen correspondiente a M2 con ttulos mayor de 1:80).

Antimitocondriales M8: dirigidos contra la membrana externas de las mitocondrias asociado con M4 y M2 son indicativos de formas progresivas de la cirrosis biliar primaria.

Antimitocondrial M9: particularmente si es IgM ocurre en las formas precoces y benignas de la cirrosis biliar primaria.

METODOS DE ESTUDIOS:

Mtodo: inmunofluorescencia indirecta (IFI), ELISA; Western Blot Imagen en IFI: sustrato: rin /estomago. Teido citoplasmtico de clulas parietales y tbulos renales.

INMUNOFLORESCENCIA INDIRECTA
Los anticuerpos anti-mitocondriales (AMA) del suero se unen a sus correspondientes antgenos presentes en las secciones de rin de rata. Una vez unidos, los anticuerpos se ponen de manifiesto mediante la incubacin con un anticuerpo contra las inmunoglobulinas humanas conjugado con fluorescena y se visualizan por microscopa de fluorescencia.

Utiliza el FITC/Evans (R): Anticuerpos de cabra anti-inmunoglobulinas humanas conjugados con isotiocianato de fluorescena (FITC) y adsorbidos con suero de rata, Azul de Evans 0,01g/L, azida de sodio 0,95 g/L. Mounting Medium. Medio de Montaje: Glicerol 78%, fosfato de sodio 6 mmol/L, fosfato de potasio 1,6 mmol/L, cloruro de sodio 60 mmol/L, azida de sodio 0,95 g/L

El sustrato de eleccin es rinde rata. Se Puede observar la fluorescencia en el citoplasma de las clulas de los tbulos renales que es un tejido rico en mitocondrias. En clulas Hep-2 podemos observar un pattern defluorescencia positivo sugerentede anticuerpos anti-mitocondriales.

LECTURA Examinar el portaobjetos con un microscopio de fluorescencia (250-400x).

Los sueros que presentan una fluorescencia granular de las mitocondrias en el citoplasma de las clulas tubulares renales a las diluciones recomendadas deben considerarse positivos. Cuando no se observa ninguno de los marcajes especficos, el resultado es negativo para los autoanticuerpos indicados.