QUMICA ANALTICA Aspectos bsicos del proceso analtico

Prof. Nora Alvino UNFV-Qumica 2012-2

CONTENIDO
1. Generalidades:
Anlisis Cualitativo y Anlisis Cuantitativo

2. Conceptos bsicos en Anlisis Qumico 3. Clasificacin de los mtodos de Anlisis 4. El proceso analtico

1. GENERALIDADES
CIENCIA DE LA MEDICIN: separa, identifica y cuantifica los componentes de una muestra. Para ello desarrolla y mejora mtodos e instrumentos

QUMICA ANALTICA

ANLISIS QUMICO
Parte prctica de la Qumica Analtica que aplica los mtodos de anlisis para resolver problemas

OTRAS DEFINICIONES
La Qumica Analtica es la ciencia que estudia el conjunto de principios, leyes y tcnicas cuya finalidad es la determinacin de la composicin qumica de una muestra. El conjunto de tcnicas operativas puesto al servicio de dicha finalidad constituye el Anlisis Qumico. La Qumica Analtica es la ciencia creadora de dichas tcnicas.

Rama de la qumica que estudia los mtodos de: Separacin Identificacin Determinacin de los componentes o la cantidad relativa de componentes que constituyen una muestra de materia.

QUMICA ANALTICA:
La Qumica analtica es una ciencia metrolgica que desarrolla, optimiza y aplica herramientas de amplia naturaleza, que se concretan en procesos de medida encaminados a obtener informacin Qumica y Bioqumica de calidad, tanto parcial como global sobre materias o sistemas de amplia naturaleza (qumica, bioqumica y biolgica) en el espacio y en el tiempo, para resolver problemas cientficos, tcnicos, econmicos y sociales .

Working Party on Analytical Chemistry (WPAC) Edimburgo, 1993

TIPOS DE ANLISIS EN QUMICA ANALTICA

ANLISIS QUMICO Anlisis Cualitativo Anlisis Cuantitativo

Identificacin de las especies que componen la muestra (elementos, iones o compuestos).

Sangre
Glucosa, colesterol total, triglicridos, hierro, ferritina, albmina, cido rico.

Determinacin de la cantidad relativa de los componentes de la muestra en trminos numricos

Glucosa 100 mg/dL Colesterol total 200 mg/dL Triglicridos 160 mg/dL cido rico 5 mg/dL Fe 150 g/dL Ferritina 200 g/dL Albmina 5 g/dL

IMPORTANCIA DE LA QUMICA ANALTICA

Geologa
Ciencias Ambientales

Biologa

Qumica

Agricultura

QUMICA ANALTICA

Ingeniera

Ciencias Sociales

Medicina Ciencias de los materiales Fsica

2. CONCEPTOS BSICOS EN ANLISIS QUMICO

MUESTRA: parte representativa de la materia objeto de anlisis. ALCUOTA: fraccin o porcin de muestra. ANALITO: especie qumica objeto del anlisis. MATRIZ DE LA MUESTRA: especies qumicas que acompaan al analito en la muestra. TCNICA ANALTICA: medio empleado para obtener informacin sobre el analito. MTODO ANALTICO: secuencia de operaciones y tcnicas aplicadas para el anlisis de una muestra. Ejemplo: Anlisis de glucosa en sangre.
Muestra: Sangre Analito: Glucosa Matriz: Protenas, sales minerales, colesterol Tcnica analtica: Espectrofotometra de absorcin molecular visible Mtodo analtico: Implica desde la toma de muestra hasta la obtencin del resultado final.

NATURALEZA DE LA MUESTRA Y ANALITO

MUESTRA
Inorgnica Inorgnica Inorgnica Orgnica Orgnica Orgnica Bioqumico

ANALITO
Inorgnico Orgnico Bioqumico Inorgnico Orgnico Bioqumico Inorgnico

EJEMPLO
Oro en minerales Pesticida en suelo Molculas en meteoritos Metales en frmacos Compuestos orgnicos nitrogenados en petrleos Actividad enzimtica en disolventes orgnicos Calcio en fluidos biolgicos

Bioqumico
Bioqumico

Orgnico
Bioqumico

Drogas y sus metabolitos en orina

Contenido protenico de la leche

Ejemplo: Determinacin de Calcio en leche

Composicin de la leche (incompleta)

Matrz
leche
Agua (87%) Extracto seco total (13%)

Grasa (3,9%)

Extracto seco no graso

Minerales (0.7%) Na Ca fe

Hidratos de carbono (lactosa) (4,6%) Casenas (2.6%)

Protenas (3.2%)

Protenas del suero (0.6%)

Analito

OTROS CONCEPTOS IMPORTANTES

INTERFERENTE: especie qumica distinta del analito que aumenta o disminuye la respuesta del analito bajo el mtodo aplicado. Ejemplo: Analito: Ca2+ Al3+ es un interferente si la determinacin se lleva a cabo por valoracin con EDTA. Interferencia positiva
ENMASCARAMIENTO: transformacin del interferente en otra especie qumica que no es detectada con la tcnica analtica empleada. Ejemplo: Al3+ + 3OH- Al(OH)3

DISOLUCIN ESTNDAR: disolucin conteniendo el analito en concentracin perfectamente conocida. Ejemplo: Disolucin acuosa conteniendo glucosa en una concentracin exacta de 75 mg/dL
CURVA DE CALIBRADO: grfica que representa la seal analtica monitorizada frente a la concentracin del analito.

- Peso o volumen de muestra Mediciones en Anlisis Cuantitativo - Cantidad proporcional a la cantidad de analito en la muestra.

3. CLASIFICACIN DE LOS MTODOS DE ANLISIS

Mtodos clsicos:
Se basan en propiedades qumicas de los analitos. Volumetras y gravimetras.

Mtodos instrumentales:
Se basan en propiedades qumico-fsicas de los analitos. Se clasifican segn la propiedad que se mide (espectroscpicos, electroqumicos, miscelneos).

Mtodos de separacin:
La finalidad inicial de estos mtodos era separar interferentes antes de proceder a aplicar la tcnica analtica seleccionada. En la actualidad, existen mtodos de separacin que son mtodos de anlisis en s mismos, como por ejemplo la cromatografa.

4. EL PROCESO ANALTICO
El Anlisis Qumico alcanza sus objetivos mediante el PROCESO ANALTICO, que es la aplicacin del mtodo cientfico, implicando el proceso de la figura: Problema

Eleccin del mtodo analtico

Toma de muestra

MTODO ANALTICO
Tratamiento de la muestra
Proceso de medida Tratamiento de los datos Valoracin de los resultados Informe y conclusiones

ETAPAS DEL PROCESO ANALTICO

4.1. Definicin del problema:
En esta 1ra etapa se plantea el tipo de anlisis requerido y la escala de trabajo.
producto farmacutico con el valor suministrado por el fabricante

Ejemplo: se pretende contrastar el contenido real de acido acetilsaliclico (AAS) en un

4.2. Seleccin del mtodo de anlisis:

Consideraciones importantes:
Exactitud requerida en los resultados Disponibilidad de tiempo y de dinero Nmero de muestras a analizar Concentracin esperada del analito en la muestra Complejidad de la muestra bajo anlisis

Etapa crucial para el xito de los resultados finales

Volumetra cido-base

NaOH

Buscar en la bibliografa procedimientos apropiados y de ser necesario, poner a prueba nuevos procedimientos analticos antes de llevar a cabo el anlisis.

AAS

4.3. Toma de muestra o muestreo

Plan de muestreo: estrategia a seguir para garantizar que los resultados
obtenidos reflejen la realidad del material analizado.

Caractersticas que ha de cumplir la muestra:

ser representativa del material a analizar. ser homognea, lo que significa que debe ser igual en todas sus partes.

Se reduce el error en los resultados

4.4. Tratamiento de la muestra

Son escasos los problemas que se resuelven sin necesidad de tratamiento de la muestra. Lo habitual, es que la muestra necesite algn tipo de tratamiento, con el fin de: 1. Preparar la forma y tamao de la muestra, as como la concentracin del analito, ms adecuada para la tcnica analtica seleccionada. 2. Eliminar interferencias matriciales.

CONSIDERACIONES IMPORTANTES DURANTE LA ETAPA DE PREPARACIN DE MUESTRA

1) La preparacin de la muestra no puede implicar prdidas de analito, ni tampoco contaminaciones.

2) Se debe transformar el analito en la mejor forma qumica para el mtodo analtico seleccionado.
3) Si es necesario, se eliminarn las interferencias de la matriz, mejorando as la selectividad del mtodo. 4) No se deben introducir nuevas interferencias. 5) Debe considerarse la dilucin o preconcentracin del analito, de manera que se halle en el intervalo de linealidad del mtodo seleccionado.

Para la mayora de las tcnicas analticas: MUESTRA EN ESTADO LQUIDO Si la muestra es slida
Molienda: Disminucin tamao de partcula
Piln

Si el anlisis no va a ser inmediato

Almacenamiento: luz, T, tipo de recipientes

Mortero

Liofilizacin previa Si la muestra es lquida

Evaporacin del disolvente Si el analito es un gas disuelto en un lquido
Doble recipiente sellado para su almacenamiento

MUESTRA EN ESTADO LQUIDO Obtencin de la muestra Preparacin de la muestra

Eleccin del mtodo

Extraccin del analito a una fase lquida

No

Se encuentra el analito disuelto? S Es mensurable la propiedad analtica?

Agitacin Disolvente (H2O, EtOH, MeOH) Muestra slida

Centrifugacin Lquido sobrenadante Residuo slido

Decantacin

Recogemos el lquido el sobrenadante

Suspensin del slido en el disolvente

Residuo slido

Determinacin del AAS en productos farmacuticos mediante volumetra cidobase

Trituracin del frmaco y disolucin en etanol

En ocasiones, se requieren condiciones ms enrgicas para la extraccin del analito a la fase lquida: Disoluciones acuosas de:
- cidos fuertes - bases fuertes - agentes oxidantes - agentes reductores - combinaciones de reactivos

Aplicacin de energa externa:

- microondas - ultrasonidos

Eleccin del mtodo

Obtencin de la muestra

Preparacin de la muestra

Extraccin del analito a la fase lquida

No

Se encuentra el analito disuelto? S Es mensurable la propiedad analtica? S Eliminar interferencias si las hubiere

Especie fluorescente

Cambio de la forma qumica del analito

No

Ej. Sulfonamida

MTODOS DE SEPARACIN
Adicionamos reactivos (para la determinacin mediante fluorimetra)

DEFINICIN DE RPLICAS DE UNA MUESTRA

El proceso de medida debe llevarse a cabo con varias alcuotas de muestra, todas ellas idnticas entre s.

1 mL

110 mg/dL

Finalidad
1. Establecer el rango de variabilidad del anlisis. 2. Evitar un error grave

1 mL

109,6 mg/dL

1 mL

187,5 mg/dL
LA INCERTIDUMBRE ES TAN IMPORTANTE COMO LA MEDIDA MISMA

1mL

110,3 mg/dL

X SD

4.5. Proceso de medida

La mayora de los mtodos necesitan de disoluciones estndar o patrn VOLUMETRAS: se mide la cantidad de equivalentes qumicos de valorante en el punto final de la valoracin. Seal analtica = K x CA Disolucin patrn CA = 80 mg/dL S = 0,199
K= constante de proporcionalidad CA= concentracin de analito

Disolucin problema CA = ? S = 0,261

0,199 = K 80 K = 0,0025 dL/mg

0,261 = 0,0025 CA CA = 104,4 mg/dL

4.6. Tratamiento de los datos a travs de ecuaciones de calibracin

Curva de calibracin con patrones externos
0.6

Concentracin, mg/dl

Seal analtica
0.5

Seal analtica

0 40 80 120

0,001 0,101 0,199 0,303

0.4 0.3 0.2 0.1

160
200

0,401
0,498
0.0 0 50 100 150 200 250

Concentracin, ppm mg/dl

Seal analtica = ordenada origen + K x CA Seal analtica = 0,00129 + 0,0024 x CA

CLCULO DE CA EN LA MUESTRA A TRAVS DE LA CURVA DE CALIBRADO

Seal analtica = 0,0013 + 0,0024 x CA

0.6 0.5

Seal analtica

0,261 = 0,0013 + 0,0024 x CA

0.4 0.3 0.2 0.1 0.0 0 50 100 150 200 250

CA = 108,2 mg/dL

Aplicacin de factores de dilucin preconcentracin, si procede

Concentracin, ppm mg/dl

El mtodo de calibracin frente a patrones externos es vlido si una determinada CA tanto en la muestra como en la disolucin estndar proporciona la misma respuesta analtica.

Si las respuestas analticas para un mismo valor de CA en la disolucin estndar y en la muestra son diferentes:

Mtodo del estndar interno

El patrn interno es una especie de referencia (R), con propiedades qumicas y fsicas parecidas a las del analito (A)

Mtodo de adiciones estndar

Se agregan cantidades conocidas de analito a la muestra

SA/SR

SA

CA
Concentracin de analito en la muestra

CA aadida a la muestra

4.7. Evaluacin de los resultados, informe y conclusiones

Los resultados han de ser evaluados por estimacin de su fiabilidad.
El informe dirigido al solicitante del anlisis ha de: 1. Indicar claramente los resultados 2. Las condiciones experimentales empleadas 3. Limitaciones concretas de la tcnica analtica empleada

1. Concentracin de glucosa obtenida: X SD 2. Tcnica espectrofotomtrica 3. Intervalo de linealidad, LD, LQ

As en orina
1. ND (no detectado) 2. Espectrometra de absorcin atmica con atomizacin electrotrmica (ETAAS) 3. LD (Lmite de deteccin): 50 ppt

Conclusiones
El analista puede o no implicarse en lo que se vaya a hacer con su informacin. Como mnimo debera asegurarse que las conclusiones que se extraigan de sus datos sean coherentes con los mismos.
1. Concentracin de glucosa: 520 1 mg/dL 1. Tcnica espectrofotomtrica 2. Intervalo de linealidad, LD, LQ

Ingreso hospitalario del individuo

1. Concentracin de As en orina: 403 2 ng/L 2. Tcnica HG-AAS 3. Intervalo de linealidad, LD, LQ

Envenenamiento crnico del individuo

Eleccin del mtodo

Obtencin de la muestra

Preparacin de la muestra

Extraccin del analito a la fase lquida

No

Se encuentra el analito disuelto? S Es mensurable la propiedad analtica? S Eliminar interferencias si las hubiere

Cambio de la forma qumica del analito

No

Estimar la fiabilidad de los resultados

Calcular los resultados Conclusiones

Medir la propiedad analtica

Informe