HEPATITIS B SURFACE ANTIGEN TEST STRIP

INTRODUCTION The complex antigen found on surface of HBV is called HBs Ag. The presence of HBs Ag in serum or plasma is indication of an active hepatitis B infection, either acute or chronic. In a typical hepatitis B infection, HBs Ag will be detected 2-4 week before the ALT level becomes abnormal and 3 to 5 weeks before symptoms or jaundice develop. HBs Ag has four principal subtype : adw, ayw, adr and ayr. Because of antigenic heterogeneneity of determinant, there are 10 mayor serotypes of hepatitis B virus.

PRINCIPLE OF THE METHOD One step hepatitis B surface antigen test device (serum/plasma) is a qualitative, lateral flow immunoassay for the detection of HBs Ag in serum or plasma. The membrane is pre-coated with anti HBs Ag antibodies on test line region of the strip. During testing, the serum or plasma specimen reacts with the particle coated with anti HBs Ag antibody. The mixture migrates upward on the membrane chromatographically by capillary action to react with anti HBs Ag antibodies on the membrane and generate a colored line. The presence of this colored line in the test region indicates a positive result, while its absence indicates a negative result. To serve as procedural control, a colored line will always appear in the control line region indicating that proper volume of specimen has been added and membrane wicking has occurred.

SPECIMEN TYPE, COLLECTION AND STORAGE The test may be performed using human serum or plasma. If specimen are not immediately tested they should be refrigerated at 2-8 degree C. For storage periods greater than three days, freezing is recomended. Specimen containing precipitate may yield inconsistent test result. Such specimens must be clarified prior to assaying.

EQUIPMENT NEEDED Specimen collection container, centrifuge, timer.

REAGENTS Material provided Delta HBs Ag test device

PROCEDURE Allow test strip, serum or plasma specimen, and/or controls to equilibrate to room temperature (15-30 C) prior to testing. 1. Bring the pouch to room temperature before opening it. Remove the test strip from sealed pouch and use it as soon as possible. Best results will be obtained if the assay is performed within one hour. 2. With arrows pointing toward the serum or plasma specimen, immerse the test strip vertically in the serum or plasma for least 10-15 second. 3. Place the test strip on non-absorbent flat surface, interpret test results at 20-30 minutes.

INTERPRETATION 1. A color band will appear in upper section of the result window to show that the test is working properly. This band is the control band. 2. The lower section of the result window indicates the results. If another color band appears in the lower section of the result window, this band is the test band.

POSITIVE RESULTS The presence of two colors band (? band and C band) within the result window no matter which band appears first indicates a positive result. Note : generally, the higher the analyte level in specimen, the stronger the ?

band color will be. When the specimen analyte level is close to but still within the sensitivity limit of the test, the color of the ? will be very faint.

NEGATIVE RESULTS The presence ooooof only one purple color band within the result window indicates a negative result.

INVALID RESULTS If after performing the test no band is visible within the result window, the result is considered invalid. The directions may not have been followed correctly or the test may have deterioated. It is recomended that the specimen be re-tested.

LIMITATIONS OF THE TEST A negative result does not preclude the possibility of infection with HBV. Other clinically available tests are required if questionable results are obtained. As with all diagnostic tests, a definitive clinical diagnosis should not be based on the results of a single test, but should only be made by the physician after all clinical and laboratory findings have been evaluated.

HEPATITIS B antigen permukaan TEST STRIP PENDAHULUAN Antigen kompleks yang ditemukan pada permukaan HBV disebut HBs Ag. Kehadiran HBs Ag dalam serum atau plasma adalah indikasi infeksi hepatitis B aktif, baik akut atau kronis. Dalam infeksi hepatitis B khas, HBs Ag akan terdeteksi 2-4 minggu sebelum tingkat ALT menjadi normal dan 3 sampai 5 minggu sebelum gejala atau ikterus berkembang. HBs Ag memiliki empat subtipe utama: adw, ayw, adr dan Ayr. Karena heterogeneneity antigenik determinan, ada 10 walikota serotipe virus hepatitis B. PRINSIP YANG METODE Salah satu langkah hepatitis B antigen permukaan uji perangkat (serum / plasma) adalah, aliran kualitatif immunoassay lateral untuk mendeteksi HBs Ag dalam serum atau plasma. membran yang digunakan adalah pra-dilapisi dengan antibodi anti HBs Ag pada daerah uji baris strip. Selama pengujian, spesimen serum atau plasma bereaksi dengan partikel dilapisi dengan antibodi anti HBs Ag. Campuran bermigrasi ke atas pada membran kapiler chromatographically oleh tindakan untuk bereaksi dengan antibodi anti HBs Ag pada membran dan menghasilkan garis berwarna. Kehadiran garis berwarna di wilayah pengujian menunjukkan hasil positif, sedangkan ketiadaan menunjukkan hasil negatif. Untuk melayani sebagai kontrol prosedural, garis berwarna akan selalu muncul di wilayah garis kontrol menunjukkan bahwa volume spesimen yang tepat telah ditambahkan dan wicking membran telah terjadi. CONTOH TIPE, PENGUMPULAN DAN PENYIMPANAN Pengujian dapat dilakukan dengan menggunakan serum atau plasma manusia. Jika spesimen tidak segera diperiksa dan mereka harus didinginkan pada 2-8 derajat C. Untuk periode penyimpanan yang lebih besar dari tiga hari, pembekuan dianjurkan. Spesimen yang mengandung endapan dapat menghasilkan hasil tes tidak konsisten. spesimen tersebut harus diklarifikasi sebelum pengujian. PERALATAN DIPERLUKAN Koleksi spesimen kontainer, centrifuge, timer. Reagen Bahan yang disediakan Delta HBs Ag uji perangkat PROSEDUR Izinkan spesimen uji strip, serum atau plasma, dan / atau kontrol untuk menyeimbangkan ke suhu ruang (15-30 C) sebelum pengujian. 1. Bawa kantong ke suhu kamar sebelum membukanya. Lepaskan strip uji dari kantong disegel dan menggunakannya sesegera mungkin. Hasil terbaik akan didapat jika metode analisis dilakukan dalam satu jam. 2. Dengan panah menunjuk ke arah spesimen serum atau plasma, strip merendam uji vertikal dalam serum atau plasma untuk setidaknya 10-15 detik. 3. Tempatkan strip uji pada permukaan datar non-penyerap, menginterpretasikan hasil tes pada

20-30 menit. INTERPRETASI 1. Sebuah band warna akan muncul di bagian atas jendela hasil menunjukkan bahwa tes tersebut bekerja dengan benar. Band ini merupakan band kontrol. 2. Bagian bawah jendela hasil menunjukkan hasilnya. Jika band lain warna muncul di bagian bawah jendela hasil, band ini adalah band tes. HASIL POSITIF Kehadiran dua band warna (band "?" Dan "C" band) dalam jendela pun hasil yang muncul band pertama menunjukkan hasil yang positif. Catatan: umumnya, semakin tinggi tingkat analit dalam spesimen, semakin kuat warna band akan "?". Ketika tingkat analit spesimen dekat tapi masih dalam batas sensitivitas tes, warna dari "?" Akan sangat samar. HASIL NEGATIF Para ooooof Kehadiran band hanya satu warna ungu dalam jendela hasil menunjukkan hasil negatif. INVALID HASIL Jika setelah melakukan tes band tidak ada terlihat dalam jendela hasil, hasilnya dianggap tidak valid. Arah mungkin belum diikuti dengan benar atau tes mungkin telah deterioated. Disarankan bahwa spesimen akan kembali diuji. PEMBATASAN ATAS UJI Hasil negatif tidak menghalangi kemungkinan infeksi VHB. tes klinis lain yang tersedia diperlukan jika hasil yang diperoleh dipertanyakan. Seperti dengan semua tes diagnostik, diagnosis klinis yang pasti tidak harus didasarkan pada hasil tes tunggal, tetapi hanya boleh dilakukan oleh dokter setelah semua temuan klinis dan laboratorium telah dievaluasi.