UNIVERSIDAD NACIONAL PEDRO RUIZ GALLO FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS- MICROBIOLOGA Y PARASITOLOGA TEMA: FAMILIA AEROMONADACEA CURSO: BACTERIOLOGA

PROFESORA: M. Sc. OLGA FRANCIA ARANA

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Contenido
FAMILIA AEROMONADACEAE3 I.INTRODUCCION.3 II.CARACTERISTICAS GENERALES DE LA FAMILIA...4 III.CLASIFICACION.5 IV.GENERO AEROMONAS.6

Morfologa y estructura:6 Caractersticas de su cultivo...7 Condiciones de crecimiento..8 Metabolismo................9 Factores de Virulencia10 Lipopolisacrido..10 Cpsula.11 Lamina S......12 Adhesinas.13 Flagelos.14 Sistemas de captacin de Hierro............15 Secrecin de exotoxinas..16 Hemolisinas..17 Toxinas asociadas al sistema de secrecin tipo III (T3SS) ..................18

BIBLIOGRAFIA.19

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FAMILIA AEROMONADACEAE I. INTRODUCCIN La taxonoma del gnero Aeromonas es compleja y ha experimentado cambios continuos. En 1891, Sanarelli realiz lo que se considera la primera descripcin de un aislamiento de Aeromonas con el nombre de Bacillus hydrophilus fuscus, a partir de una rana infectada.

Posteriormente, varios autores describieron cepas similares aisladas de diferentes animales y su nomenclatura fue cambiando progresivamente.

En 1936, Kluyver y van Neil propusieron su asignacin a un nuevo gnero, Aeromonas, nombre que deriva de las palabras griegas aer, que significa aire o gas, y monas, que significa unidad, es decir, unidades productoras de gas.

Aunque durante muchos aos fue clasificado dentro de la familia Vibrionaceae, junto con los gneros Vibrio, Photobacterium y Plesiomonas, investigaciones filogenticas posteriores indicaron que debera formar parte de una familia propia: Aeromonadaceae.

En la primera edicin del Manual de Bergey de Bacteriologa Sistemtica, el gnero se dividi en dos grupos principales: uno constituido por las especies psicrfilas e inmviles: A. salmonicida; y otro por las especies mesfilas y mviles: A. hydrophila, A. caviae y A. sobria.

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II. CARACTERISTICAS GENERALES DE LA FAMILIA

El orden Aeromonadales contiene una sola familia, Aeromonadaceae, con Aeromonas como genero tipo. Son bacilos Gram-negativos, rectas, rgidos, no generadoras de esporas. Se las encuentra aisladas, ocasionalmente en pares, o formando cadenas cortas. Anaerobias facultativas, y quimiorganotrficas. Oxidasa positivo con raras excepciones (Tolumonas) y catalasa positiva. laterales; algunas especies son consideradas no mviles (A. salmonicida y A. media).

Motilidad por medio de flagelos polares con una cierta evidencia de flagelos

La mayora de las especies son mesofilicas, pero si existen especies psicrofilicas. Oceanimonas requiere NaCl. Metabolismo Fermentativo u Oxidativo con oxgeno como aceptador universal del electrn. Reduce los nitratos, pero no los desnitrifica. Se utiliza sales del amonio por la mayora de los aislantes como fuente nica del nitrgeno. Principalmente habitan en ambientes de agua dulce, marinas, y especialmente de estuarios, asociados a menudo a los animales acuticos. Algunas ciertas especies son patgenos oportunistas en seres humanos, as como una variedad de otros animales e invertebrados de sangre caliente y sangre fra.Los patgenos ms destacados son Aeromonas hydrophila, Aeromonas caviae y Aeromonas veronii biovariante sobria.

Las dos principales enfermedades asociadas a Aeromonas son la gastroenteritis y la infeccin de heridas (con o sin bacteriemia). Aeromonas es resistente a las penicilinas, la mayora de cefalosporinas y a eritromicina. El mol% G - C del DNA es: 5763%.

III.. CLASIFICACIN:

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Segn el Manual Determinativo de Bergey :

Grupo 5: Bacilos Anaerobios Facultativos Gram negativos Subgrupo 2: Familia Vibrionaceae

Gnero: Aeromonas Segn el Manual Sistemtico Bacteriolgico de Bergey :

Dominio : Bacteria Phylum B XII : Proteobacteria Clase III : Gammaproteobacteria Orden XII : Aeromonadales Familia I : Aeromonadaceae Gnero I : Aeromonas Especie : Aeromonas hydrophila A. allosaccharophila A. bestiarum A. caviae A. culicicola A. encheleia A. enteropelogenes A. eucrenophila A. ichthiosmia A. jandaei A. media A. popoffii A. punctata A. salmonicida A. schubertii A. sobria A. simiae A. trota A. veronii

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Gnero II : Oceanimonas

Especie : O. doudoroffii O. baumannii Gnero III : Oceanisphaera Especie : Oceanisphaera litoralis Gnero IV : Tolumonas Especie : Tolumonas auensis

IV. GENERO AEROMONAS Caractersticas generales: Morfologa y estructura:

Son clulas rectas cocobacilares a bacilares, con extremos redondeados.

Gram-negativos.

No generadoras de esporas. Su tamao va desde 0.3 1.0 x 1.03.5 m. Se las puede encontrar aisladas, en pares o formando cadenas cortas. En su mayora, mviles por flagelacin polar, a excepcin de A.salmonicida y A. media.

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Caractersticas de su cultivo:

El gnero Aeromonas tradicionalmente se ha dividido en dos grandes grupos de especies, es decir, mviles versus especies no mviles y mesfilas versus especies psicrofilicas.

Colonias mesfilas mviles son de 1-3mm en dimetro, lisa, circulares, convexo, translcido, y blanco griscea con una consistencia mantecosa despus 2448 h de incubacin 35 C.
Apariencia fsica: Agar sangre con ampicilina

Las colonias ms antiguas pueden desarrollar un matiz verdoso, similar a lo visto con ciertas especies de Vibrio y un olor bastante fuerte. Las cepas de A. media cepas pueden producir un pigmento marrn difusa sobre agar tripticasa soja (TSA). Colonias psicrofilicas no mviles, subespecies de A. salmonicida son del tamao de una punta de alfiler despus de 1824 h a 2022 C, pero despus de 4 das de incubacin son circulares, convexo, bordes enteros, de 1 2 mm de dimetro.

B-hemlisis de A.hydrophila

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Varias de las subespecies A. salmonicida producen un pigmento marrn, difuso despus 5 das, especialmente en medios de cultivo que contienen tirosina. La presencia de encapsulacin notoria entre varias de las especies da como resultado la apariencia perlada a las colonias mucoides Existe variabilidad en la produccin hemolisinas tanto dentro como entre las especies. As como diferencias en la presencia o tipo de hemlisis segn el tipo de clulas rojas utilizadas. En un estudio de eritrocitos, de nueve especies de animales probados, el medio de agar sangre ms sensible lo tuvo los eritrocitos del ratn, y los eritrocitos de la oveja estaban entre los menos sensible para la deteccin de -hemlisis. A.hydrophila y A. veronii son dos de las especies ms comnmente aisladas son fuertemente -hemolticas en agar sangre de oveja. Esta -hemlisis pueden ser una zona amplia, una doble zona de hemlisis parcial, o una zona estrecha de -hemlisis justo por debajo del borde de Colonia. Muchos aislamientos de A. caviae son parcialmente hemolticas, mostrando hemlisis, pero tambin puede mostrar estrechas zonas de -hemlisis. Sobre Agar MacConkey, la mayora de las especies mesfilas crecen como no fermentadoras de lactosa, pero un buen nmero de aislamientos de A. caviae puede fermentar lactosa. Esto puede llevar a confusin cuando se hace pruebas para coliformes de fuentes de agua, que son tambin a la lactosa fermentadores. Condiciones De Crecimiento Las aeromonas crecen en una gama amplia de temperatura 045C. Las cepas mesfilas crecen entre 10 y 42 C, la temperatura ptima es 2237C dependiendo de la cepa. Aunque estudios anteriores informaron que 28C es la temperatura ptima para a aeromonas mviles. Las cepas psicroflicas en la subespecie de A. salmonicida crece a temperaturas generalmente desde 2 hasta 30C. Aislamientos clnicos son generalmente incubados a 37C, y aislamientos ambientales son incubados a menudo a 2230C, as que las comparaciones entre laboratorios de las reacciones bioqumicas son difciles de hacer. Algunas cepas mesfilas parecen ser bioqumicamente ms activas a 22C que a 37C. Hay incluso casos de algunas pruebas bioqumicas en que los resultados son muy diferentes a las dos diferentes temperaturas para la misma cepa. En medio de infusin de cerebro corazn a 28C, el rango de crecimiento para A. hydrophila es de entre 4,5 y 9.0 pH y 04 % NaCl. Incapaces para crecer en caldo con cloruro de sodio al 6,5 %.

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Metabolismo Aeromonas son anaerobias facultativas. Capaces de fermentar tanto la glucosa como numerosos carbohidratos con produccin de cidos y, frecuentemente, gas. Reductores de nitratos a nitritos (aunque no tienen actividad desnitrificante) Son oxidasa y catalasa positivo. Son enzimaticamente muy activas. Ellos han reportado la produccin de amilasa, DNasa, quitinasa, elastasa, esterasas, peptidasas, arilamidasas y otras enzimas hidroliticas. Son resistentes al agente vibriosttico O/129 (2,4-diamino-6,7-diisopropilpteridina). Numerosos estudios bioqumicos a gran escala fenotpicas sobre Aeromonas han sido publicados. Ambos aeromonas mviles y no moviles Utilizan otros carbohidratos adems de glucosa.

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FACTORES DE VIRULENCIA

La virulencia, en este gnero, es dependiente de la cepa bacteriana, de la ruta de infeccin y del animal utilizado como modelo. Los principales factores de virulencia descritos en Aeromonas spp, son el : lipopolisacrido, la cpsula, la lmina S, las fimbrias y otras adhesinas no filamentosas, la flagelacin polar y lateral, los sistemas de captacin de hierro, el sistema de secrecin de tipo III y la secrecin de otras exotoxinas y enzimas extracelulares.

LIPOPOLISACARIDO

El lipopolisacrido (LPS), tambin conocido como endotoxina, es una molcula glucolipdica que representa la estructura mayoritaria de la cara externa de la membrana externa de la mayora de las bacterias Gram negativas.

Las molculas de LPS extradas a partir de un mismo cultivo celular muestran heterogeneidad en sus tamaos. LPS que presentan el antgeno O unido al ncleo, con diversas longitudes de cadena, conocidas como LPS de tipo S (Smooth). Sin embargo, tambin se pueden encontrar algunas molculas que slo contienen el lpido A y el ncleo, completo o truncado, denominadas LPS de tipo R (Rough). El LPS es un importante factor de virulencia en bacterias Gram negativas patgenas.
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Por un lado, el lpido A, la nica regin del LPS reconocida por el sistema inmune innato, es el responsable de la actividad endotxica del LPS (Rietschel et al., 1996) y puede llegar a provocar una importante inflamacin sistmica conocida como shock sptico o endotoxemia. Por otro lado, la presencia de las cadenas polisacardicas del antgeno O facilita el proceso inicial de adhesin y colonizacin de las mucosas. Adems, acta de barrera fsica impidiendo la correcta activacin del complemento. El antgeno O es la parte ms externa, inmunognica y variable del LPS. Se trata de un importante factor de virulencia que proporciona a la bacteria una capa superficial hidrfila que puede enmascarar importantes eptopos antignicos conservados de la membrana externa y que es capaz de conferir resistencia a la actividad bactericida del complemento.

Por otro lado, tambin se ha descrito, el papel que juega como adhesina y, consecuentemente, su importancia en la colonizacin de las mucosas del organismo hospedador. En A. hydrophila AH-3 (serotipo O:34), se han observado cambios en el LPS, como consecuencia de una adaptacin trmica, que implican la presencia o ausencia de antgeno O. Las molculas de LPS de las bacterias crecidas a 20C, o a 37C y elevada osmolaridad, son de tipo S, mientras que las crecidas a 37C en condiciones de baja osmolaridad son de tipo R. Dentro de las Aeromonas mesfilas, se definieron 44 serotipos O , que fueron ampliados posteriormente a 97, entre los cuales, O:11, O:16 y O:34 destacan por su incidencia en infecciones en humanos y, junto con el serotipo O:18, estn relacionados con ms del 60% de los casos de septicemia. El LPS de tipo S proporciona a las bacterias una mayor actividad hemoltica, un aumento de la virulencia en peces y ratones, un incremento de la adhesin a clulas epiteliales humanas y resistencia a la actividad bactericida del suero no inmune. El ncleo del LPS es un oligosacrido heterogneo unido al lpido A en la posicin 6. En bacterias que producen LPS de tipo S, se encuentra dividido en dos regiones: el ncleo interno, prximo al lpido A, y el ncleo externo, donde normalmente se une el antgeno O. CPSULA

La cpsula es una estructura polisacardica que recubre la membrana externa de la bacteria. Est altamente hidratada (aproximadamente, un 95% es agua) Se compone de repeticiones de monosacridos unidos entre s mediante enlaces glicosdicos, dando lugar a polisacridos capsulares (CPS) que pueden ser homopolmeros o heteropolmeros. Frecuentemente, esta estructura constituye la capa ms externa de la clula y, como tal, participa en la interaccin de la bacteria con el ambiente.

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Se ha descrito como un factor de virulencia importante en diversos patgenos, ya que contribuye a la resistencia a la actividad bactericida del complemento y a la fagocitosis.

Favorece la adherencia a otras bacterias o tejidos del hospedador, y acta como barrera frente a molculas hidrofbicas txicas. La cpsula puede impedir el acceso de los componentes del complemento a la superficie celular y, por otro lado, algunos CPS contienen componentes que inactivan al factor C3b, de manera que se impide la formacin del complejo de ataque a la membrana. La cpsula, adems, se ha utilizado para la clasificacin dentro de un mismo gnero debido a sus propiedades antignicas (antgenos K). En A. salmonicida, se haba documentado la capacidad de formar cpsula tanto in vitro (en un medio rico en glucosa) como in vivo, y el papel de esta estructura como factor de virulencia, ya que su presencia reduca la opsonizacin, impidiendo la fagocitosis, y favoreca la invasin en lneas celulares de peces.

LMINA S

La lmina S es una matriz proteica de naturaleza paracristalina, producida por una gran variedad de bacterias, que forma una envoltura externa a la pared celular. Debido a su posicin, cumple distintas funciones biolgicas: est implicada en adhesin y proteccin frente a la fagocitosis. La lmina S de Aeromonas est constituida por subunidades de una nica protena que se autoensamblan de forma tetragonal y envuelven a la clula por completo, y constituye el antgeno superficial predominante de las clulas que la poseen. En A. salmonicida, la lmina S facilita la unin a macrfagos, une porfirinas e inmunoglobulinas, protege de la accin de las proteasas, evita la activacin del complemento y contribuye a la resistencia a la actividad bactericida del suero. Es capaz de unirse a una gran variedad de protenas de la matriz extracelular, como el colgeno IV y la laminina. La presencia de lmina S en las Aeromonas spp. mesfilas pertenecientes al incrementa la capacidad de adhesin de estas clulas, contribuyendo a la colonizacin de la mucosa intestinal. Adems, parece que la lmina S proporciona una mayor resistencia a la opsonofagocitosis, hecho que podra facilitar la diseminacin sistmica. Tanto en A. salmonicida como en Aeromonas mesfilas, la prdida de la lmina se ha asociado con la disminucin de la virulencia. Hasta el momento, todas las cepas de Aeromonas que poseen lmina S tienen en comn la presencia de un lipopolisacrido (LPS) que contiene polisacridos O de longitud de cadena homognea en su superficie celular, y este hecho ha llevado a especular sobre la posible implicacin del LPS en la unin de la lmina a la superficie celular bacteriana.

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ADHESINAS

La capacidad de adhesin y colonizacin bacteriana de las mucosas es crtica para el desarrollo de la infeccin. Las Aeromonas spp. producen adhesinas que les permiten adherirse a receptores especficos que se encuentran en la superficie de clulas eucariotas. Muchos de estos receptores son carbohidratos que se expresan en eritrocitos. De manera que la hemoaglutinacin se ha utilizado para la deteccin de adhesinas. Aunque no todas las adhesinas presentan la capacidad de hemoaglutinar. Se han descrito dos clases de adhesinas en Aeromonas, unas se han asociado con apndices filamentosos (fimbrias o pili) y otras con protenas de la membrana externa y otras estructuras.

Fimbrias o pili (adhesinas filamentosas)

Las fimbrias son proyecciones filamentosas, formadas a partir de subunidades proteicas denominadas pilinas, que se encuentran en lasuperficie bacteriana. En cepas aisladas, tanto clnicas como ambientales, de Aeromonas mesfilas, se han descrito dos tipos de fimbrias: fimbrias cortas y rgidas (S/R, Short/Rigid), presentndose en un alto nmero por clula bacteriana; y fimbrias largas y flexibles (L/W, Long/Wavy), que se encuentran en bajo nmero por clula. Las fimbrias S/R presentan una longitud de 0,6 a 2 m, estn altamente distribuidas entre las cepas ambientales. Es el tipo de fimbrias predominante entre las Aeromonas spp. que presentan una elevada cantidad de pili, como algunas cepas ambientales de A. veronii bv. Sobria. Pueden causar autoagregacin de las bacterias, pero no hemoaglutinacin, y no se unen a clulas intestinales En algunas cepas clnicas, este tipo de fimbrias se puede inducir bajo determinadas condiciones ambientales (22C, en medio lquido). Las fimbrias L/W se consideran hemoaglutininas. Son largas, finas (4-7 m) y flexibles y son el tipo predominante en cepas aisladas a partir de heces, como las de A. veronii bv. sobria que presentan un bajo nmero de pili (< 10 por clula). El anlisis de su secuencia aminoacdica indica que se corresponden con pili de tipo IV, reconocidos como estructuras importantes en la adhesin a clulas epiteliales y en la formacin de biofilms, y relacionadas con el movimiento celular independiente de flagelo sobre superficies slidas, conocido como twitching motility, actividades importantes en la colonizacin de las mucosas.

Adhesinas no filamentosas
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Las Aeromonas spp. presentan en su superficie otras estructuras no filamentosas que han sido consideradas adhesinas, como los monmeros constituyentes de la lmina S, el lipopolisacrido y diferentes protenas de membrana externa. Entre estas ltimas, se ha descrito que las porinas podran actuar como adhesinas tipo lectina para la unin de la bacteria a superficies ricas en carbohidratos, como los eritrocitos y, probablemente, las clulas del intestino humano. En A. hydrophila, ha sido descrita una protena de membrana externa (OMP) de 43 kDa con funcin adhesina, denominada Aha1p, y se ha planteado la posibilidad de utilizarla como vacuna en peces.

FLAGELO

El flagelo bacteriano es un apndice largo (15-20 um de longitud) y delgado (aproximadamente, 20 nm de dimetro), de naturaleza proteica, con capacidad de rotacin y que permite la propulsin de la clula. Las Aeromonas mesfilas expresan un nico flagelo polar de manera constitutiva y, en un 50-60% de las cepas asociadas a procesos diarreicos, el crecimiento en superficies induce la expresin de flagelos laterales. As, las cepas de A. hydrophila y de A. caviae producen un nico flagelo polar sin vaina cuando crecen en medio lquido, y mltiples flagelos laterales, adems del flagelo polar, tambin sin vaina, cuando crecen en medio slido. El flagelo polar permite la movilidad por natacin (swimming) en ambientes lquidos Los flagelos laterales son responsables de la movilidad colonial observada en crecimientos en medios slidos o semislidos, conocida como swarming (enjambrado). La natacin y la quimiotaxis son importantes en el contacto inicial con las superficies, mientras que el swarming permite a las bacterias avanzar sobre las superficies y facilitar el proceso de colonizacin. En consecuencia, la presencia del flagelo y tambin su movilidad participan en las fases iniciales del proceso de infeccin, entre las que cabe destacar la adhesin a clulas eucariotas, la colonizacin del hospedador y la formacin de biofilms. A. salmonicida ha sido definida como una especie no flagelada e inmvil, aunque en crecimientos en medios lquidos con elevada viscosidad y a temperaturas supraptimas (30 a 37C), se ha observado que un 1% de la poblacin presenta movilidad mediante flagelacin polar.

SISTEMAS DE CAPTACIN DE HIERRO

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Numerosos ambientes contienen una concentracin de hierro libre inferior a 1 M, que es la considerada indispensable para el crecimiento ptimo de los microorganismos. La baja disponibilidad de hierro libre dificulta, pero no impide, el crecimiento y la patogenicidad bacteriana. Los microorganismos han desarrollado una serie de mecanismos que les permiten extraer el hierro del hospedador y de los polmeros insolubles del ambiente: las modificaciones reductivas del hierro, los sistemas de transporte de iones ferrosos o los siderforos. Debido a la presencia de las protenas de unin a hierro del hospedador, como por ejemplo la hemoglobina (con sus grupos hemo), la transferrina, la lactoferrina o la ferritina, el hierro se encuentra poco accesible in vivo. En suero, las concentraciones de hierro libre estn muy lejos de los mnimos requeridos para el crecimiento durante la infeccin de muchas bacterias. Por lo tanto, los mecanismos para la captacin de hierro que presentan las bacterias se consideran esenciales para su crecimiento y para la virulencia durante una infeccin. Se conocen dos sistemas de captacin de hierro en cepas de Aeromonas, uno dependiente y otro independiente de siderforo. Los siderforos son molculas de bajo peso molecular que presentan grupos funcionales con elevada afinidad y especificidad por el in frrico. Algunas Aeromonas spp. tambin podran adquirir el hierro in vivo mediante la unin de receptores de la membrana bacteriana con protenas secuestradoras de hierro del hospedador. La mayora de Aeromonas mesfilas producen siderforos: enterobactina o amonabactina. Ambos siderforos son de tipo catecolato, ya que estn formados por cido 2,3dihidrxidobenzoico (2,3-DHB) conjugado con aminocidos. De este modo, en Aeromonas spp. la biosntesis de 2,3-DHB est codificada por dos agrupaciones gnicas diferentes: la agrupacin amo,presente en las cepas productoras de amonabactina, y la agrupacin aeb (Aeromonad Enterobactin Biosynthesis), propia de las productoras de enterobactina. Se ha demostrado la capacidad de la amonabactina en la adquisicin de hierro a partir de la transferrina y de la lactoferrina y, por lo tanto, su importante papel en la patognesis. Los sistemas de captacin de hierro mediante siderforos se componen, tambin, de un aparato asociado a la clula responsable de procesar el siderforo unido a hierro con la finalidad de entregarlo al metabolismo bacteriano.Este sistema incluye un receptor, especfico para el siderforo, unido a la membrana. En A. hydrophila, se ha descrito un nico receptor y transportador de hierro en la membrana externa de la bacteria, que es dependiente de amonabactina. El transporte implica un proceso de intercambio de ligando, o mecanismo lanzadera, que tiene lugar en la superficie celular cuando el ferri-siderforo transfiere el tomo de hierro a un apo-siderforo, libre de hierro, previamente unido al receptor. Adems, el receptor de amonabactina de A. hydrophila presenta baja especificidad, con capacidad de transportar un amplio rango de siderforos.

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Recientemente, ha sido descrita la agrupacin gnica implicada en la biosntesis del siderforo tipo catecolato de A. salmonicida, cuya produccin es imprescindible para el crecimiento en condiciones limitantes de hierro, y que es capaz de obtenerlo de la transferrina.

SECRECIN DE EXOTOXINAS Y OTRAS ENZIMAS EXTRACELULARES Exotoxinas

Se ha descrito que el gnero Aeromonas produce una gran variedad de exotoxinas. No obstante, no todas las cepas del gnero producen la totalidad de toxinas descritas y, aunque ciertas cepas posean los genes que codifican una toxina en concreto, stos slo se expresan en determinadas condiciones de crecimiento.

Enterotoxinas En Aeromonas spp., se han descrito dos tipos de enterotoxinas: Citotxicas, que provocan importantes daos en el epitelio del intestino delgado, y citotnicas, que no producen degeneracin del epitelio. Enterotoxinas citotxicas

Las enterotoxinas citotxicas, tambin conocidas como enterotoxinas citolticas, Bhemolisinas o aerolisinas, pueden llegar a producir hemlisis, citotoxicidad y enterotoxicidad. Las cepas productoras se aslan, frecuentemente, de enfermos diarreicos. Se sintetizan como preproprotenas que contienen una secuencia seal que se separa al atravesar la membrana. La proprotena inactiva pierde parte de su extremo C-terminal y, producindose su activacin por protelisis, es capaz de oligomerizar y formar poros en la membrana de la clula eucariota que pueden provocar un desequilibrio osmtico. A partir de A. hydrophila, se purific una hemolisina con actividad hemoltica, citotxica y enterotxica y capaz de provocar letalidad en ratones. Ms tarde, dos grupos diferentes publicaron el clonaje de un gen aerolisina, aerA, a partir de A. trota y A. bestiarum. Posteriormente, a partir de la cepa SSU de A. hydrophila, aislada de una muestra diarreica, fue purificada una nueva enterotoxina citotxica, Act, que presentaba actividades similares a las asociadas a las enterotoxinas descritas anteriormente. Estudios detallados de las funciones y estructuras de la aerolisina y la Act indicaron que estaban ntimamente relacionadas, aunque presentan heterogeneidad aminoacdica en algunas regiones. Se ha demostrado la importancia de estas enterotoxinas en la patognesis de enfermedades mediadas por Aeromonas. La aerolisina contiene dos lugares de unin a receptor, uno se une a protenas ancladas al glicosil-fosfatidil-inositol y el otro, a carbohidratos de superficies celulares.

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En este sentido, la aerolisina de A. bestiarum puede unirse a la glicoforina de la membrana de los eritrocitos, mientras que la Act no. Se han realizado estudios de las cascadas de sealizacin intracelular, inducidas por Act, que llevan a la produccin de mediadores de la inflamacin en macrfagos y en clulas epiteliales humanas. Adems, se ha investigado el potencial papel de esta enterotoxina como inductora de la apoptosis. Enterotoxinas citotnicas:

Las enterotoxinas citotnicas presentan un sistema de actuacin similar al de la toxina colrica, aumentando los niveles de AMPc y prostaglandinas en las clulas del epitelio intestinal. En el gnero Aeromonas, se han descrito diversas enterotoxinas que presentan diferentes pesos moleculares y una reactividad variable con la antitoxina colrica. Estas enterotoxinas se dividieron en dos tipos: termolbiles (56C durante 10 minutos) sin reactividad cruzada con la toxina colrica, y termoestables (100C durante 30 minutos) que reaccionan con la antitoxina colrica. La protena Alt es una enterotoxina citotnica termolbil, que fue purificada a partir de A. hydrophila y causa un incremento de los niveles de AMPc y de prostaglandinas en la mucosa intestinal de rata. En la misma cepa, fue identificada la enterotoxina citotxica termoestable (56C durante 20 minutos) conocida como Ast y se ha demostrado, utilizando una rata como modelo animal, que provoca la secrecin de fluido en el intestino delgado y un aumento de los niveles de AMPc en las clulas de la mucosa.

HEMOLISINAS

Las Aeromonas spp. producen al menos dos clases de hemolisinas: - hemolisinas y -hemolisinas. Adems de la enterotoxina citotxica con actividad -hemoltica, las Aeromonas producen otras -hemolisinas. Provocan la formacin de poros en las membranas celulares produciendo una lisis osmtica y una destruccin completa de los eritrocitos. Las -hemolisinas son termolbiles (56C durante 5 minutos) y, generalmente, se forman durante la fase de crecimiento exponencial. Las -hemolisinas producidas durante la fase estacionaria del crecimiento causan efectos citotxicos reversibles y lisis incompleta de los eritrocitos, pero no se han relacionado con propiedades enterotoxignicas.

OTRAS ENZIMAS EXTRACELULARES

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Las cepas de Aeromonas pueden producir una gran variedad de enzimas extracelulares como proteasas, lipasas, amilasas, quitinasas,nucleasas o gelatinasas, entre otras. Aunque en muchos casos su papel en la patogenicidad est todava por determinar, representan un gran potencial en la adaptacin a los cambios ambientales.

Proteasas

Las proteasas pueden contribuir a la patogenicidad causando lesiones directas del tejido, potenciando la invasividad o mediante la activacin proteoltica de toxinas. Adems, tambin pueden contribuir al establecimiento de la infeccin ayudando a superar las defensas del hospedador, mediante inactivacin del complemento, y proporcionando nutrientes para la proliferacin celular.

Lipasas/Fosfolipasas

Muchas bacterias patgenas producen lipasas. En cepas de Aeromonas del serotipo O:34, se han descrito las fosfolipasas A1 y C. La fosfolipasa C muestra actividad lecitinasa y capacidad citotxica, y se ha demostrado su papel como factor de virulencia. Las Aeromonas spp. tambin producen glicerofosfolpido colesterol aciltransferasas (GCAT), que funcionan como lipasas y pueden provocar lisis en eritrocitos mediante la digestin de sus membranas plasmticas.

TOXINAS ASOCIADAS AL SISTEMA DE SECRECIN DE TIPO III

El sistema de secrecin de tipo III (T3SS) es un sistema de transporte de protenas bacterianas, denominadas efectores, al citoplasma de las clulas hospedadoras. Las molculas efectoras llevan a cabo una amplia gama de actividades bioqumicas y modulan la funcin de molculas reguladoras cruciales para la clula hospedadora, de manera que son capaces de alterar el citoesqueleto o interferir en las cascadas de sealizacin intracelular. Se han identificado cuatro protenas efectoras de T3SS en A.salmonicida, AexT, AopP, AopO y AopH. La protena AexT es una que presenta actividad ADP-ribosiltransferasa y GAP (GTPase activating protein), AopP es miembro de la familia YopJ, un grupo de protenas efectoras de T3SS que interfiere con vas de sealizacin de protenas quinasa activadas por mitgeno (MAPK) y/o con el factor nuclear kappa B (NFZB). Se ha demostrado que el T3SS es esencial, en A. salmonicida, para establecer la infeccin sistmica en peces y que es importante en el proceso invasivo y de colonizacin. En A. hydrophila AH-1, AH-3 y SSU, tambin se ha observado que es un factor importante para su patogenicidad, vindose reducida su virulencia al inactivar algunos de los genes, tanto en modelos animales como en cultivos celulares.

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