Procesos de Bio-separacin

Universidad Politcnica de Huatusco

Ingeniera en Biotecnologa
Presenta :
I.Q. Csar Adrin Hernndez Aguilar
Huatusco de chicuellar, Ver. Mayo de 2011
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Propiedades del material biolgico
Antes de discutir como se lleva a cabo una bioseparacin, puede ser
til el discutir algunas propiedades fundamentales de las sustancias
biolgicas, que son relevantes para el proceso de bioseparacin:
1. Tamao
2. Peso molecular
3. Difusividad
4. Coeficiente de sedimentacin
5. Presin osmtica
6. Carga electrosttica
7. Solubilidad
8. Coeficiente de particin
9. Absorcin luminosa
10. Fluorescencia
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Tamao:
MATERIAL TAMAO (MICRONES)
Ion cloruro 9.9x10-5
Urea 1.6x10-4
Glucosa 8.6x10-4
Insulina 4x10-3
Dextrano 1x10-3 a 15x10-3
Inmunoglobulina G 11.1x10-3
Partculas de virus 0.004 a 0.1
Bacterias 0.2 a 2.0
Clulas de levadura 2 a 30
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Alfa-amilasa.
Un ejemplo de una
molcula elipsoide
Para partculas elipsoides o
aquellas en las que se puede
identificar un eje mayor y un eje
menor, el tamao frecuentemente
se muestra en trminos de largo
y ancho.
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Algunas molculas como los
anticuerpos tienen formas aun
mas complejas. Una manera
universal de expresar la
dimensin de especies no-esfricas
es el dimetro de Stokes-Einstein;
que es el dimetro de una
partcula o molcula que tiene la
misma difusividad.
Estructura de una molcula de
anticuerpo
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Estructura de una molcula de ADN
Los cidos nucleicos como el AND y el ARN son molculas lineales y sus
tamaos no se pueden expresar en trminos del dimetro de Stokes-Einstein,
sino en trminos de longitud solamente.
Page 7
9
2 ( )
T
e
s l
r
g
u

=

Para partculas densas, la velocidad de sedimentacin por gravedad en un

fluido de menor densidad se puede utilizar para medir el dimetro de
partcula, esta tcnica solo es factible para partculas con un tamao mayor
a 5 micrones.
El radio equivalente se estima de la velocidad terminal con la formula:
6
SE
RT
r
D N t
=
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Peso molecular:
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Difusividad:
1 2
2 1
SE
SE
r D
r D
=
Correlacin de difusividad -
radio de Stokes-Einstein
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Coeficiente de sedimentacin:
2
v
s
r e
=
Coeficiente de sedimentacin
(proceso de centrifugacin)
(1 )
M
M v
s
f

=
Coeficiente de sedimentacin
correlacionado con las propiedades del
material
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Presin osmotica:
RTc H=
Presin osmtica para soluciones diluidas
2 3
1 2 3
( ....) RT AC A C AC H= + + +
Presin osmtica para soluciones concentradas
Diferencia de presin osmtica a travs de la membrana
1 2
AH = H H
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Carga electrosttica:
La carga electrosttica en las molculas es la base de tcnicas de separacin
como la electroforesis, adsorcin de intercambio inico, cromatografa,
electrodilisis y precipitacin.
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Solubilidad:
Por regla general, un compuesto polar ser mas soluble en agua que un
compuesto no polar. Adems un compuesto no polar puede ser mas soluble
en un solvente orgnico que en agua.
La solubilidad de una sustancia puede ser influenciada por la temperatura,
el pH de la solucin y la presencia de aditivos.
Es la base de tcnicas de separacin como extraccin, precipitacin,
cristalizacin y separacin por membrana.
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Coeficiente de reparto:
Es una medida de cmo un compuesto se distribuye entre dos fases liquidas
y es la base de la separacin en procesos como extraccin lquido-lquido y
cromatografa de particin.
Esta distribucin del compuesto es termodinmicamente impulsada, el
potencial qumico del compuesto en las dos fases es igual en el equilibrio.
La razn de concentracin del compuesto en las dos fases en equilibrio se
refiere como el coeficiente de reparto.
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Absorcin de luz:
Soluciones de diferentes sustancias absorben luz a diferentes longitudes de
onda, la absorcin de luz es debido a la presencia de grupos especficos, o
enlaces dentro de las molculas, llamadas cromforos.
La absorcin de luz no es la base para una separacin pero es un parmetro
importante por el cual se monitorean los compuestos durante la separacin.
La cantidad de luz absorbida por un solucin depende de la concentracin de
soluto y del largo del trayecto de la luz dentro la muestra. La cantidad de
luz absorbida por una muestra es cuantificada en trminos de absorbancia
(A).
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10
log
i
t
I
A
I
| |
=
|
\ .
A aCl =
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Fluorescencia:
Ciertos compuestos fluorescentes, es decir, emiten luz despus de absorber
luz de una frecuencia mas alta; la fluorescencia no es un fundamento para
separacin pero es un parmetro por el cual se monitorean diferentes
sustancias durante un proceso de separacin.
la luz emitida en fluorometra se mide en ngulo recto a la de la luz
incidente para evitar la interferencia de la luz trasmitida.
La intensidad de la luz emitida se puede correlacionar a la concentracin.
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