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Respostaimunolgicaadquiridahumoral
Respostaimunolgicaadquiridahumoral
respostasTD: desencadeadasporantigniosproteicos
dependentesdocontactoentrelinfcitosBe linfcitosTauxiliares(linf.TCD4+)
Respostaimunolgicaadquiridahumoral
proliferaoediferenciaodelinfcitosBocorreem microambientesespecializadosdosrgolinfides,ondea
Respostaimunolgicaadquiridahumoral
Principaismecanismosresponsveispeladiversidadedas imunoglobulinas(edaespecificidadedarespostaimunolgica)
Respostaimunolgicaadquiridahumoral
diversidadedasimunoglobulinas
Respostaimunolgicaadquiridahumoral
diversidaderecombinatria namedulassea genescodificantes (segmentos)daregio variavl:V,DeJ segmentoC:regio constante
Respostaimunolgicaadquiridahumoral
hipermutao somtica nosrgoslinfides secundrios emlinfcitosBactivadospelosantignios introduzmutaespontuaisnasregiesV,nosgenes dascadeiaslevesepesadasdasIgs,jrearranjados (taxademutao1milhodevezessuperiortaxanormal)
Respostaimunolgicaadquiridahumoral
Teoriadaseleo clonal
MaturaoactivaoediferenciaodoslinfcitosB
DesenvolvimentodasclulasB
Faseindependentedoantignio Maturao
ActivaodoslinfcitosB
Poliespecfica
independentedoslinfcitosT
Especfica
dependentedoslinfcitosT
Dependedanaturezadoantignio
IndependentedoTimo(TI)
Mitognios (activadores ( activadores policlonais) Ex:compon. p.bacterianas (LPS) Ausnciadeparticipao directadelinfcitosTh
DependentedoTimo(TD)
Protenas solveis
ContactodirectocomlinfcitosTh
PapeldasclulasThnasrespostasimuneshumorais
Sinal1:
Formaodoconjugado:
InteracoCD40CD40L
Sinal2
Produodecitocinas pelasclulasTh
Caractersticasdarespostaimunehumoralprimriaesecundria
Respostaimuneapresenta2fases:
Tecidoscomdrenagemlinftica Correntesangunea
Gnglioslinfticos
Gnglioslinfticos
Bao
Vasosaferentes:entradadoatg(livre,imunocomplexooucluladendrtica) Paracortex(reg.ricaemclulasT,macrfagoscldend.interdigitantes) :
ActivaoinicialdasclulasBeclulasTh 1 ActivaodasclulasThesuaproliferao 2 MigraodeclulasBnaivedocortexparaparacortex 3 Reconheci/o,processamentoeapresentaodoatgsclulasTh 4 FormaodoconjugadoclB:clT;activao,proliferaoediferenciao dasclulasBemplasmcitossecretoresdeIgMeIgG Maioriadosatcproduzidosnarespprimriaprovenientesdoparacortex
Papeldascitocinasnaproliferaoediferenciaodas clulasBactivadas
Anticorpos
ProduzidosporlinfcitosBactivados plasmcitos
SubstnciaA Substncia A
Reagemespecificamentecomsubstncia queinduziuasuaproduo(invitro) i d i d (i it )
Produodeanticorpos
SubstnciaAumimunognio
Classesesubclassesdasimunoglobulinas(Igs)Humanas
Estruturageralesquemticadasimunoglobulinas
RegiesHipervariveis(46aacada) (CDRs complementarydeterminingregions) Cadeiapesada ,,, ou
Regio dobradia
Cadeialeve ou
Fab
Regio varivel
Fc
Regio i constante
IgG,IgAeIgD cadeiaspesadas(H)com1domniovarivel(VH)e3constantes(CH) IgG IgA e IgD cadeias pesadas (H) com 1 domnio varivel (VH) e 3 constantes (CH) IgMeIgE cadeiaspesadas(H)com1domniovarivel(VH)e4constantes(CH)
DigestoenzimticadeImunoglobulinas
ContribuionoconhecimentodaestruradasIgs C ib i h i d d I
Fab Capacidadedeligaraumantignio
RepresentaoesquemticadeumaIg
Domniosvariveis,regieshipervariveisestiodeligaoaoantignio
Domniovariveldacadeiapesada(VH)
Domniovariveldacadeialeve(VL)
Imunoglobulinas podemaparecersobaforma:
IgG
IgD
IgE
Monomricas
IgA
IgM
Dimricas
Pentamricas
Formaspolimricas SubunidadesunidasporligaesdissulfuretoecadeiaJ
SubclassesdaIgGhumanas
InteracesAntignio Anticorpo
Complexoatg atc
Estabilizadopor interacesnocovalentes Estabilizado por interaces no covalentes
ligaesdehidrognio ligaesinicas i t interaceshidrofbicas hid fbi interacesdeVanderwaals
Afinidade
deumanticorpo
Especificidadedasinteraces
Identificaodeantignioscominteressebiolgicoemdico
Mudanasconformacionaisinduzidaspelaligaodoantignio
InteracesAntignio Anticorpo
eptope Afinidade
Foratotaldasmltiplasinteracesentreumatcmultivalenteeumantignio Fora total das mltiplas interaces entre um atc multivalente e um antignio
Aumentacom:
onmerodeepitopesrepetitivos presentesnumantignio
avalnciadoanticorpo (IgMdecavalente;IgGbivalente) (I M d l I G bi l )
Alta Avidez
Baixa Avidez
Exemplodepossveisresultadosserolgicosparaa p p g p toxoplasmosenocasoespecficodegravidez
Reactividadecruzada
Doisantigniosdiferentesapresentamumeptopeidnticooumuitosemelhante eptopessoreconhecidospelomesmoanticorpo h id l i
AntignioA AntignioB
Ex:gruposanguneoABO. Comoqueumindivduodo gruposanguneoOapresenta O t anticorposantiAeantiBsem nuncatertidocontactocomas nunca ter tido contacto com as glicoprotenasAeB?
Antigniosmicrobianosdafloraintestinalinduzemrespostaimunolgicacomproduode anticorposqueapresentamreactividadecruzadacomasglicoprotenasAeB.
Reactividadecruzada
Componentesdarespostahumoral(atc)contraalgunsvrusebactrias reagemcomcomponentesdohospedeiro(reactividadecruzada)
AtgMdaparedecelulardoStreptococcuspyogenes Atg M da parede celular do Streptococcus pyogenes Produodeatcquereagemcomprotenasdomsculoesquelticoemiocrdio q g p q doHomem Lesesnocoraoerins Leses no corao e rins
Anticorpos(atc)policlonaisversus monoclonais
Respostaimunitriacomproduodeatcpoliclonais:
Promovefagocitoseeeliminaodoatgmediadapelocomplementoinvivo imunoproteco Heterogeneidadedeatcreduzaeficciaemdiversasutilizaesinvitro g
Atcmonoclonais
(provenientesdeumnicoclonedeclulas;especficoparaumdadoeptope)
Grandeaplicabilidadeeminvestigao,diagnsticoeterapia
Produodeanticorpos(atc)policlonais
Utilizaodemamferosdegrandeoumdioporte (cavalo,coelho,porco)
ImunizaodoanimalcomsubstnciaA (23vezesemintervalosde15dias)
(2a3semanas)
Imunizaopodeserrealizada
Sangramentodoanimal S t d i l
SorocontmttulodeanticorposantiAelevado
(misturadeanticorposdirigidosparadiferentes eptopespresentesnoantignioA) eptopes presentes no antignio A)
Produodeanticorposmonoclonais(mAb)
(KhlereMilstein,1975)
Formaoeselecodeclulashbridas(hibridomas)
Purificaodeanticorposmonoclonaisapartirdeascites
Ascite Remoodoslpidos(isopropanol+teretlico) Filtrao(filtrode5m) Purificaoporcromatografiadeafinidade(protenaG) P ifi t fi d fi id d ( t G) Dilise(tampofosfatopH7,4) Dilise (tampo fosfato pH 7 4) Quantificao(mtododeLowry) y Filtrao(filtrode5m;estril) Armazenamentoa70Cemalquotas
Produodeanticorposmonoclonaishumanos
Dificuldadestcnicas I Obtenodeclulasdemielomahumano crescimentoimortal crescimentoemmeioHAT i i produodeatc sobrevivnciainvitro napresenadosatcsecretados
II ObtenodeclulasBhumanasactivadasespecficamente I I Obteno de clulas B humanas activadas especficamente Infecoinvitro dasclulasBcomEpsteinBarr(EBV)napresenadoatg Capacidadeimortal,produodeatcmuitobaixa TransplantedeclulasdoSIhumanasemratinhosSCID T l t d l l d SI h ti h SCID RatinhosSCIDHumanizados
RatinhosSCIDHumanizados RatinhoSCID Nodesenvolve d l clulasBeclulasTmaturas Imunologica/comprometido Norejeitatecidohumanotransplantado j p Linfcitosimaturosmigramparaotecido implantadoondematuramemclsTeB implantado onde maturam em cls T e B Exposiodeatgderatinhodurante a a u ao dos amaturaodoslinfcitoshumanos c os u a os Linfcitosreconhecematgderatinho comopp como pp
Contmlinfcitos humanosimaturos
Modeloanimalptimop/aestudarlinfcitoshumanoseaSIDA
UtilidadedosatcmonoclonaisnaClnica
Laboratorial
mAbssimplesouacopladosaenzimas,biotina, mAbs simples ou acoplados a enzimas, biotina, fluorocromos,estreptavidina,elem/osradioactivos
Diagnstico Detecodeagentespatognicos Deteco de agentes patognicos Gravidez Teordedrogasehormonasnosangue Detecodeantigniostumorais
Imagem g
mAbsacopladosaelementosradioactivos b l l
Detecodeatgtumorais detecodotumores 131I localizaodemetastasesdetumoresmamrios l li d d i
Terapia