1 seminario : BARRIERA EMATOENCEFALICA by nico

una struttura Glio-Vascolare costituita da cellule Endoteliali che poggiano sulla M.Basale e dagli Astrociti; queste cellule sono connesse da Tight Junction molto serrate per esplicare la loro funzione difensiva (in questa sede possono essere anche chiamate Giunzioni Serrate). Infatti le proteine trans membrana che si fondono tra loro formano un reticolato; queste sono proteine giunzionali dette Occludine associate ad unaltra proteina, la Zonula Occludens 1 (ZO1, una proteina marker delle TJ) che legata fortemente ai filamenti actinici. Per identificare i piedi della Glia e lendotelio, sono state utilizzare tecniche immunoistochimiche per rilevare la Glial Fibrillary Acid Protein o in italiano, Proteina Fibrillare Acida della Glia (GFAP). La barriera ematoencefalica selettiva perch sulla membrana della cellula endoteliale vi sono molti Carrier specifici inoltre i piedi dellastrocita avvolgono la cellula endoteliale costituendo una seconda barriera. Sui piedi presente un canale trans membrana regolato, lAcqua Porina 4 (AQP4) responsabile del controllo del flusso dellacqua. LAqp4 associata alla famiglia delle Distrofine e alla Dp71 in particolare (unisoforma corta della distrofina); inoltre legata alla membrana tramite un complesso di proteine. Aqp4 localizzata sulla membrana della Glia sul fronte peri vascolare e al microscopio elettronico si presenta sotto forma di aggregati ottogonali. Rilasciando il Lipopolisaccaride Batterico si viene a formare una condizione di edema e anche con lutilizzo di anticorpi specifici, lAqp4 non si riesce a trovare presso la Glia Perivascolare. Da questo si dedotta la funzione e limportanza dellaqp4 nel controllo del flusso dellacqua. Nel Glioblastoma, tumore cerebrale, lAqp4 non pi espressa a livello vascolare ma fortemente sulle cellule tumorali; quindi non vi pi controllo del flusso di acqua a livello cerebrale e si verificano edemi. Infatti nei tumori cerebrali pi le cellule tumorali sono aggressive e si dividono, maggiore sar ledema perch la proteina meno espressa nella sua localizzazione normale. Per dopo trattamento radio e\o chemio terapico, lAqp4 torna nel suo assetto normale al livello perivascolare e ci porta alla riduzione delledema cerebrale. La Distrofina non solo espressa a livello del tessuto muscolare striato, ma anche a livello dei piedi astrocitari legati ad Aqp4 nel tessuto Nervoso. Nella distrofia di Duchenne manca la distrofina a causa di una mutazione puntiforme e ci causa la necrosi del t. muscolare. La Nico ha utilizzato dei topi x studiare questa patologia perch la mutazione puntiforme che la provoca la stessa sia nelluomo che nel topo. Nella distrofia di Duchenne per, vi sono danni anche a livello nervoso ed accompagnata da gravi alterazioni della barriera ematoencefalica: si verifica una maggiore Angiogenesi e i vasi sono permeabili; le Tight Junction sono alterate per cui la cellula Gliale dilatata mentre le Aqp4 sono poco presenti a livello perivascolare e vi poca ZO1. Inoltre tutte le alterazioni si accompagnano a diminuzioni della Dp71.

Ma quali sono i meccanismi che inducono laumento della rete vascolare e della permeabilit vascolare? Il Fattore di Crescita Vascolare (VEGF) induce un forte aumento dellAngiogenesi ed over espresso in condizioni di richiesta di vasi sanguiferi; quando viene espresso si verifica una cascata di segnali. Il Vegf fortemente espresso nei neuroni degli animali con la distrofia di Duchenne ed inoltre e presente il suo recettore (VEGFR-2) sulle cellule endoteliali. Per quanto riguarda le proteine giunzionali, la ZO1 in animali sani ha un aspetto bandato mentre in quelli patologici diversa poich le giunzioni sono rotte e staccate e la Zo1 ne risulta spostata nel citoplasma. La Zo1 una fosfoproteina e negli animali di controllo sani il livello di fosforilazione normale mentre negli animali distrofici, il livello di fosforilazione molto alto. Ma cosa determina laumento del VEGF ? LHipoxian Inducible Factor (HIF-1) un fattore di trascrizione che in condizioni normale disattivato mentre in condizioni di ipossia, bassa[O2], attivato , si sposta nel nucleo e qui trasduce per Vegf. HIF-1 over espresso nella glia dellanimale distrofico e ovviamente aumentando, aumentano il Vegf e il Vegfr-2 e parte la cascata di segnali. Un altro fattore il Neural Grow Factor (NGF) che over espresso nellanimale distrofico dai neuroni, dalle cellule della glia e dalle cellule epiteliali mentre il suo recettore (NGFR) espresso a livello dei vasi sanguiferi.

CONCLUSIONI Nella distrofia cerebrale, la mancanza di Distrofina e della sua isoforma Dp71, induce nelle cellule gliali: Attivazione del Up-Regulatione del Up-Regulatione del Attivazione del Up-Phosphorilation del Down-Regulation di HIF-1 VEGF\VEGFR-2 NGF\NGFR MMP-2\MMP-9 ZO-1 AQP4\GFAP

Tutti insieme questi fattori possono essere responsabili della forte angiogenesi riscontrabile in questa patologia.