UNIVERSIDADE FEDERAL FLUMINENSE INSTITUTO DE BIOLOGIA DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR

O LABORATRIO A palavra laboratrio provm da unio de duas palavras latinas: labor = trabalho + oratorium = lugar de reflexo. Assim, o laboratrio um local de muito trabalho e muita concentrao. Este ambiente um recinto construdo especialmente para a execuo de experincias e a maior parte das atividades no dia-a-dia de um bioqumico se desenvolve no laboratrio, local adequado para o trabalho de identificao, separao e determinao da quantidade de substncias bem como, da preparao e obteno de novos produtos. Resultados tais que podem ser utilizados para uma srie de estudos, entre estes, para a pesquisa do funcionamento de organismos, de doenas e de novos medicamentos. Pelo grau de sua importncia, faz-se necessrio que haja um mnimo conhecimento de como um laboratrio, como se trabalha nele, os cuidados que se deve ter e a aparelhagem bsica nele existente. EQUIPAMENTOS BSICOS DE LABORATRIO As atividades de laboratrio exigem por parte dos alunos e professores no s o conhecimento das peas e aparelhos utilizados mas tambm o emprego correto de cada um deles. Portanto, antes de qualquer coisa, necessrio que se observe bem cada uma das peas, memorize sua forma e conhea sua utilidade. Apresentamos a seguir a funo dos equipamentos mais utilizados em um laboratrio e no curso de Bioqumica. Almofariz com pistilo Utilizados para a triturao de diferentes materiais e homogeinizao de misturas slidas. Argola Usada como suporte para funil de vidro ou tela metlica. Prende-se ao suporte atravs de uma mufa.

Balo de destilao Usado em processos de destilao onde o brao lateral ligado ao condensador. Balo volumtrico

Recipiente que possui um gargalo longo com um aferidor que permite medies rigorosas de volumes. Sendo utilizado assim, no preparo de solues que tenham concentraes definidas, volumes precisos e prefixados. Seu volume pode variar de 5mL a 2000mL.

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Balo de fundo chato Empregado para o preparo, dissolues, aquecimento e armazenamento de lquidos e solues. Utilizado em procedimentos que haja desprendimento gasoso. Pode ser com gargalo curto ou longo.

Banho-Maria Serve dentre outras coisas para fazer reaes enzimticas a fim de manter temperatura exata e constante. Pode ser feito simplesmente em um recipiente com gua e uma resistncia (popularmente conhecido com raboquente) ou em equipamentos especializados.

Basto de vidro Basto de vidro macio que utilizado para agitar os lquidos auxiliando nas homegeinizaes e dissolues de solues, sendo til tambm nas transferncias e filtraes de lquidos.

Bquer ou becker Recipiente usado para fazer dissolues e reaes. Por ser resistente ao fogo usado para aquecimento de lquidos. Apesar disso seu aquecimento deve ser feito de forma protegida, por exemplo, por trip e tela de amianto ou em banho-maria. resistente tambm s substncias muito reativas. Porm no resistente ao basto de vidro que deve ser usado com cautela para que no haja choque entre o basto e as paredes e/ou fundo do bquer podendo levar sua quebra. No deve ser usado para volumes precisos.

Bico de Bunsen Fonte de calor destinada ao aquecimento de materiais no-inflamveis. Dependendo da quantidade de Oxignio que estiver alimentando a chama ela fica mais quente e oxidante (azul) ou mais fria e mais redutora (amarela).

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Bureta Tubo cilndrico e graduado que possui uma torneira em uma extremidade. Tal torneira permite controlar a vazo de sada com absoluto rigor e preciso. Utilizada para adicionar volumes conhecidos de um lquido e na medio de pequenos volumes, como exemplo em titulaes.

Centrfuga

um aparelho que acelera o processo de decantao atravs do movimento de rotao que gera uma fora centrfuga. Tal fora atua nos tubos colocados em um crculo horizontal, fazendo com que as partculas de diferentes densidades fiquem separadas em camadas onde as partculas de maior densidade so arremessadas para o fundo do tubo. OBS.: Deve-se SEMPRE colocar nmeros pares de tubos na centrfuga, com a mesma massa e um de frente para o outro de modo que equilibremse.

Copo graduado ou Clice Tem forma cnica e seu fundo arredondado com vidro espesso sendo apropriado para o preparo de solues (a frio) com o auxlio do basto de vidro. usado para medidas no rigorosas de volumes e normalmente quando esses so maiores que 60mL.

Erlenmeyer Pode ser em vidro ou polipropileno, de boca larga ou estreita, graduado ou no graduado e tem seu volume variado. Possui uma gama de funes sendo empregado para preparar, aquecer e guardar solues com utilidade tambm em dissolues de substncias, reaes qumicas, titulaes e filtraes.

Esptula usada comumente para transferir slidos de pequenas quantidades.

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Espectrofotmetro Aparelho utilizado para avaliar concentraes de solues atravs das caractersticas do soluto de absorver a luz ou deix-la atravessar.

Estante ou suporte Utilizado para colocao dos tubos de ensaio. Existem diferentes tipos de estante tendo formatos diferentes e podendo ser feitas de plstico, madeira ou ferro.

Frascos para reativos Permitem guardar as solues para armazenamento. Nos frascos de cor mbar so colocadas as substncias que se decompem em presena da luz. Nos frascos brancos so colocadas as solues que no se decompem em presena da luz. Funil Utilizado para transferncia de lquidos de um frasco para o outro ou para filtraes simples onde se utiliza junto o filtro de papel. H tambm o funil de Bromo ou funil de separao que utilizado para separar lquidos no miscveis.

Garra

Presa ao suporte atravs da mufa, serve para segurar vrias outras peas.
Kitasato

Kitassato Possui uma sada lateral e utilizado no processo de filtrao a vcuo onde acopla-se uma torneira em tal sada diminuindo a presso interna do kitassato e assim acelerando a filtrao.

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Micropipeta ou pipeta automtica Utilizada para medir volumes reduzidos, na ordem do microlitro, de forma precisa e reprodutvel. So de volumes fixos ou variveis. Utilizam-se pontas (ou ponteiras) descartveis em plstico, de modo que o lquido aspirado no entre no corpo principal da pipeta. So sempre de dois estgios onde o primeiro usado para sugar o lquido e o segundo para descart-lo.
Ponteira

Mufa

Adaptador para prender peas ao suporte.

Papel de filtro Papel poroso, que retm as partculas slidas, deixando passar apenas a fase lquida.

Pina de madeira Utilizada para segurar tubos de ensaio, principalmente durante o aquecimento.

Pipeta Consiste em um basto de vidro estreito e oco que permite a medio ou transferncia de volumes precisos. Existem dois tipos de pipetas, as graduadas e as volumtricas. As graduadas possuem escala e permitem a captao de volumes variados. J as volumtricas possuem um bulbo central e um aferidor acima do bulbo que permite a captao de um volume nico predeterminado sendo mais precisas que as graduadas. As pipetas graduadas possuem uma ou duas listras em suas extremidades superiores que permitem sua diviso em parciais ou totais respectivamente. Nas pipetas parciais no se deve descartar a ltima gota que fica na pipeta. J nas pipetas totais a gota final deve ser descartada atravs de um sopro ou de mecanismos do pipetador. As graduaes nas pipetas so variadas sendo apresentadas tambm na extremidade superior. O primeiro nmero mostra o volume total da pipeta e os dois nmeros seguintes referem-se escala. Por exemplo: 5 in 1/10 significa que o volume total da pipeta de 5mL e sua escala de 0,1mL. Limites de erro em pipetas ( mL ) Capacidade (at) Limite de erro 2 0,006 5 0,01
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10 30 50 100 200

0,02 0,03 0,05 0,08 0,10

Pipetador Utenslio que acoplado na extremidade da pipeta para sugar o lquido necessrio. Os pipetadores podem ser do tipo roldana ou as pras. Os do primeiro tipo possuem uma roda que ao ser deslizada para cima suga o lquido e este vai sendo descartado atravs de um boto. Quando se estiver trabalhando com pipetas totais deve-se apertar a extremidade deste pipetador para descartar a ltima gota. Tais pipetadores so utilizados de acordo com suas cores sendo o amarelo para volumes de at 0,2ml; o azul para volumes de at 2ml; o verde para volumes at 10ml e o vermelho para volumes at 25ml. As pras so de borracha e possuem trs bolinhas que tm as letras A, S e E. A primeira serve para retirar todo o ar da pra antes desta ser acoplada pipeta; a segunda serve para fazer o lquido subir e a ltima para expulsar o lquido. Alm disso, para expulsar a ltima gota, quando se est trabalhando com pipetas totais, s apertar o orifcio na extremidade lateral da pra (ao lado da bolinha E).

Pisseta

So frascos lavadores que contm gua destilada ou outros solventes e atravs de jatos, auxiliam no preparo de solues, lavagens, remoo de precipitado e outros fins. Podem ser de polietileno na cor mbar ou transparente, com ou sem graduao e de bicos retos ou curvos.

Placa de agitao Serve para aquecimento e tambm para dissolver solutos e preparar solues aquosas.

Proveta So cilindros graduados empregados nas medies aproximadas de volumes de lquidos, sendo pouco rigorosas. Sua capacidade varia de 5mL a 2.000mL e podem ser de vidro ou polipropileno. Nunca deve ser aquecida. Para volumes menores e mais

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precisos deve-se usar a pipeta.

Trip Utilizado como suporte, principalmente de telas de amianto. (SEM FIGURA) Tubo de ensaio Empregado para fazer reaes em pequena escala, notadamente em teste de reaes. Pode ser aquecido, com cuidado, diretamente sobre a chama do bico de Bunsen. Tubo Falcon No possui uma funo especfica tendo vrias utilidades, como fazer um meio de cultura de clulas, auxiliar no preparo das solues e guard-las, pode-se triturar material como basto e vidro entre outros. Existem dois modelos de tubo Falcon o de 15ml e o de 50ml.

OBS.1: O laboratrio deve apresentar instalaes de gua, gs e eletricidade e deve ser muito bem ventilado e iluminado. OBS.2: No coloque lquidos aquecidos dentro de frascos volumtricos, pois o processo de expanso / contrao, devido ao aquecimento seguido de resfriamento, altera a calibrao desses frascos. SEGURANA NO LABORATRIO Quando se desconhece tanto os materiais do laboratrio e suas utilidades quanto algumas normas bsicas de segurana, a atividade laboratorial pode tornar-se frustrante (por causa dos maus resultados) e tambm muito perigosa (atravs de acidentes). Assim, para obter-se melhores resultados nos experimentos e nas pesquisas no necessrio apenas conhecer os utenslios, suas aplicaes e seu uso correto. preciso tambm, prezar pelo bem-estar de todos no laboratrio. E para isso, deve-se seguir orientaes e alguns pontos bsicos de segurana, alertando tanto para a maneira correta de se portar num laboratrio quanto para um manuseio bem cuidadoso com os produtos qumicos - j que tal atividade pode ser muito perigosa quando se trata de certas substncias como inflamveis (ter, lcool), cancergenos (benzeno), txicos (amnia) e venenosos (cianeto de potssio, sulfato cprico). Abaixo segue uma listagem que auxiliar em uma mais segura, correta e melhor prtica em laboratrios.

Cuidados gerais a) usar sempre um avental (jaleco) longo e de mangas compridas, de preferncia feito de algodo j que fibras sintticas so altamente inflamveis. No usar saias, bermudas ou calados abertos;

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b) pessoas que tenham cabelos longos devem mant-los presos enquanto estiverem no laboratrio; c) quando for necessrio proteger os olhos, conveniente usar culos de proteo e para a proteo das mos (ao trabalhar com produtos corrosivos) devem-se usar luvas de borracha; d) no colocar livros, sacolas, ferramentas, etc. sobre as bancadas ou bancos; e) no comer, beber ou fumar no laboratrio; f) no correr e manter os acessos desimpedidos; g) fechar gavetas e armrios logo aps o uso; h) no deixar o bico de Bunsen aceso com a chama forte, quando no estiver usando-o; i) fechar com cuidado as torneiras de gs, evitando o seu escapamento; j) no pegar com as mos equipamentos ou vidrarias que foram submetidos a aquecimento e que ainda possam estar quentes, caso isto seja necessrio, faa-o com luvas de isolamento trmico; k) no usar aparelhos de vidro quebrados ou rachados; l) certificar-se que a pipeta que est limpa, antes de utiliz-la; m) caso ocorra quaisquer respingos, limp-los imediatamente; n) em caso de acidentes, procurar o responsvel pelo laboratrio e no se desesperar; o) manter o local sempre limpo e organizado, limpando sua bancada ao trmino dos experimentos; p) lavar as mos logo aps cada experincia e lav-las bem ao deixar o recinto; q) ao ser designado para o trabalho, imprescindvel o conhecimento prvio da localizao dos acessrios de segurana e o completo saber de sua utilizao; Cuidados com os produtos qumicos

r) no pegar produtos qumicos com as mos; s) no provar o sabor de nenhum produto qumico, a no ser que haja orientao para isso de uma pessoa qualificada; t) utilizar uma esptula limpa para retirar produtos qumicos slidos dos frascos, lavar a esptula com gua em abundncia e depois guard-la imediatamente aps o uso; u) retirar dos frascos a quantidade mais prxima possvel de reagente que for utilizar, para que haja a mnima contaminao possvel; v) no trabalhar com substncias inflamveis prximo ao bico de gs aceso; w) nunca pipetar lquidos com a boca, utilizando sempre para suco dos lquidos os pipetadores; x) nunca pipetar diretamente dos frascos e sim transferir para um recipiente certa quantidade e desse recipiente retirar o lquido necessrio; y) no devolver o restante para o frasco, descartando ou mandando para purificao; z) fechar os frascos aps o uso e cuidar para que no haja troca das rolhas; ACESSRIOS DE SEGURANA Em caso de acidentes os acessrios de segurana auxiliaro em algumas solues. Ento os passos abaixo devem ser tomados como mais uma medida de precauo. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Localizar Localizar Localizar Localizar Localizar Localizar Localizar os extintores de incndio e, verificar a que tipo pertence e que tipo de fogo podem apagar; as sadas de emergncia, caso existam; a caixa de primeiros socorros e verificar os tipos de medicamentos existentes; a chave geral de eletricidade do laboratrio; o cobertor antifogo; o lava-olhos mais prximo e se est funcionado; o chuveiro e verificar o seu perfeito funcionamento. SINAIS DE OBRIGAO So pictogramas com fundo azul e representao em branco que demonstram atitudes que so obrigatrias para

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que haja uma maior segurana. Abaixo esto listados alguns exemplos. SINAIS DE PERIGO So pictogramas em fundo amarelo e representao em preto presentes em instalaes, aparelhos, acessos, entre outros e mostram algumas precaues e atenes que se deve ter. ACIDENTES Mesmo tomando todas as precaues conhecidas, os acidentes so quase que inevitveis. Ento, qualquer acidente dever ser comunicado imediatamente ao professor, que orientar o melhor procedimento para resolver o problema. Os acidentes mais comuns esto listados abaixo, acompanhados da melhor forma como encaminh-los. 1. Corte ou ferimento, mesmo leve, dever ser lavado e desinfetado; 2. Queimadura pequena, produzida por fogo ou material quente, dever ser tratada com pomada apropriada (picrato de butesin), com vaselina ou com cido pcrico; 3. Queimadura com lcali (bases) dever ser lavada com muita gua e em seguida com soluo diluda de cido actico (vinagre); 4. Queimadura com cidos dever ser lavada com muita gua e em seguida com soluo diluda de bicabornato de sdio; 5. Ingesto de cidos tomar leite de magnsia e procurar um mdico; 6. Intoxicao com gases ou vapores respirar profundamente ao ar livre e procurar um mdico; 7. Em qualquer situao, PROCURE MANTER A CALMA E CHAME O RESPONSVEL. OS RTULOS E SEUS SMBOLOS DE SEGURANA Como j citado anteriormente, os produtos qumicos possuem caractersticas que podem ser muito perigosas e por isso h informaes nos rtulos dos mesmos para que os acidentes sejam evitados ao mximo. Essas informaes aparecem em forma de smbolos, textos e cdigos. obrigatrio estarem presentes o nome, descrio completa do produto e frmula qumica, meio e temperatura de estocagem, informaes sobre os riscos sade e sua periculosidade e tambm pictogramas para identificao instantnea de tais riscos. Pictogramas

Os pictogramas so representados em forma quadrada e impressos em preto num fundo laranja. Tm como finalidade mostrar os riscos de manuseio do produto, representando os primeiros sintomas de um contato com a substncia.

Nmeros de risco (Frases R) So nmeros que fazem meno a frases que informam sobre os riscos especficos dos materiais. As frases R e combinaes esto na tabela abaixo. Indicaes de riscos:

Combinaes de riscos especficos

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So nmeros que fazem meno a frases que informam sobre precaues de segurana que se deve ter como os materiais. As frases S e combinaes esto na tabela abaixo. Indicaes de precaues de segurana

Nmeros de segurana (Frases S)

Combinaes de precaues de segurana

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