UNIVERSITATEA DE VEST FACULTATEA DE CHIMIE-BIOLOGIE-GEOGRAFIE SPECIALIZAREA:BIOCHIMIE

SI

ORGANISME TRANSGENICE ORGANISME MODIFICATE GENETIC

STUDENTA: STOICA LAURA CUPRINS:

1.Introducere 2.oareci transgenici-metodologie 3.Modificri genetice cu sistemul de recombinare Cre-lox P 4.oareci transgenici-aplicaii 5.Modele trangenice pentru metoda Alzheimer 6.Clonarea animalelor prin transfer nuclear 7.Vite,oi,capre i porci transgenici 8.Psri transgenice 9.Peti transgenici 10.Despre organisme modicate genetic(OMG) 11.OMG duse la extrem 12.Produsele OMG:beneficii i riscuri 13.OMG,buctria din laborator 14.Mncare modificat genetic 15.Organisme modificate genetic in Romania 16.Bibliografie

INTRODUCERE
Sunt necesare multe generaii de mperecherii selecionate pentru a mbuntii animalele domestice din punct de vedere genetic,lund n considerare caracteristici ca volumul de lapte,anumite caliti ale lnii,rata de cretere n greutate i frecvena de producere a oulor.La fiecare generaie succesiv,animalele cu perfomane superioare sunt folosite pentru nmulire.Aceast combinaie de mperechere i selecie,desi costisitoare i de lung durat,a fost de un succes excepional. Astzi,aproape toate aspectele bazelor biologice ale produciei de animale domestice pot fi atribuite acestor proceduri.Cu toate acestea odat ce o linie genetic eficient a fost stabilit devine dificil introducerea a noi caracteristici genetice prin metode de nmulire selecionat. Nu cu foarte mult timp n urm,nmulirea selecionat era singura metod de a nbuntii caracteristicile genetice ale animalelor domestice.Totui,combinaia unui transfer reuit de gene n celulele mamiferelor i posibilitatea crerii unor animale identice din punct de vedere genetic prin transplantarea nucleilor din celule somatice n ovule enucleate a ndreptat cercettorii spre a pune gene singulare i funcionale sau grupuri de gene n ADN-ul cromozomal al organismelor superioare. Din punct de vedere conceptual strategia folosit este destul de simpl. 1.O gen clonat este injectat n nucleul ovulului fertilizat. 2.Ovulul inoculat i fertilizat este implantat ntr-un primitor de sex feminin pentru c dezvoltarea embrional reuit la mamifere nu este posibil n afara uterului. 3.Unii dintre produii de concepie derivai din ovulul implantat vor avea gena clonat n toate celulele. 4.Animalele cu gena clonat integrat n ADN-ul lor sunt folosite pentru a frealiza o nou linie genetic. n timpul anilor 1980,cu efort considerabil ideea animalelor manipulate genetic prin introducerea genelor n ovule fertilizate a devenit realitate.Odat cu apariia numeroaselor nouti tiinifice,a fost creat un set de termeni pentru a mbuntii comunicarea.De exemplu un animal al crei compoziie genetic a fost modificat prin intoducerea de ADN strin este numit transgenic.ADN-ul introdus este numit transgen i ntregul proces este numit tehnologie genetic sau transgenez.

oarecii Transgenici:metodologie
Tehnologia transgenic a fost dezvoltat i perfecionat la oarecii de laborator.De la nceputul anilor 1980 sute de gene diferite au fost introduce n ADN-ul diferiilor oareci.Aceste studii au contribuit la nelegerea reglrii genelor,a dezvoltrii tumorii,a specificitii imunologice,genetica molecular a dezvoltrii i multe alte procese bilogice fundamentale.

oarecii transgenici au jucat de asemenea un rol n examinarea fezabilitii produciei industriale a medicamentelor pentru uz uman.Pentru transgenez ADN-ul poate fi:1.introdus la oarece prin vectori retrovirali ce infecteaz celula embrionilor n stadiu incipient naintea implantrii n primitorul femel; 2.microinjecie pronucleului masculin n ovulul fertilizat; 3.introducerea de celule stem modificate genetic ntr-un embrion n stadiu incipient nainte de implantare ntr-un primitor femel.

Modificri Genetice cu Sistemul de Recombinare Cre-loxP

oarecii transgenici au de obicei o transgen sau o modificare genetic n toate celulele.Totui este benefic un proces ce regleaz selectiv expresia unei gene ntr-un esut somatic specific sau ntr-un anumit tip celular.Sistemul de recombinare Cre-loxP,care deriv din elemente genetice ale bacteriofagelor P1 a fost adoptat acestui scop.Morfologic,bacteriofagele P1 seamn cu bacteriofagele .Ambele tipuri au cap,coad i fibre caudale. Sistemul de recombinare Cre-loxP presupune mbinarea a dou situri loxP,ce fiecare are molecule Cre recombinate.Rezultatele recombinrii depind de orientarea repetrilor la siturile loxP.Dac repetrile sunt n direcii opuse atunci se face schimbul care inverseaz ADN-ul ntre dou situri loxP.Dac repetrile au aceeai orientare atunci secvena ce intervine este tears.Elementele repetitive ale bacteriofagului P1 sunt n mod normal n direcii opuse.Sistemul de recombinare Cre-loxP poate funciona cnd siturile loxP sunt foarte distanate. Specificitatea sistemului Cre-loxP este absolut,deoarece recombinaza Cre acioneaz specific pe siturile loxP.Pe baza acestor caracteristici sistemul Cre-loxP a fost dezvoltat pentru a produce modificri de gene specifice n celulele de oareci.Ca prim pas n strategia general,gena Cre este izolat i plasat sub controlul unui promotor specific de esut.oarecii transgenici cu gena Cre sunt stabilii i specificitatea de esut pentru activitatea Cre este confirmat. Sistemul de recombinare Cre-loxP poate fi de asemenea folosit pentru a activa o gen ntr-un anumit esut.Tehnologia Cre-loxP a fost folosit pentru a studia consecinele biologice ale inactivrii unei gene specifice cu scopul de a stabili modele pentru patologia uman. Aberaii cromozomiale mari ca deleiile pot fi de asemenea create cu sistemul Cre-loxP.La oameni o deleie mare n cromozomul 22 este asociat sindromului DiGeorge(DGS) a crui caracteristic major este disfuncia cardiovascular. Pentru a determina cauza DGS o deleie mare a cromozomului la oarece este comparabil cu cromozomul uman 22 i a fost produs prin strategia exciziional Cre-loxP.oarecii cu aceast deleie au avut simptoame ce semnau cu DGS.

oarecii Transgenici:aplicaii
oarecii transgenici pot fi folosii ca sistem model pentru a determina baza biologic pentru bolile umane i divizarea tratamentelor pentru diferite condiii.n plus transgeneza oarecilor este un sistem exemplar pentru a determina fizabilitatea unui anumit agent terapeutic.n acest context,oarecii de laborator au fost numii eprubetele mblnite. Modele ce folosesc ntregul animal mimeaz att cauza ct i evoluia bolilor umane.Totui oarecii nu sunt oameni cu toate c oarecii sunt mamifere dar, informaia obinut de la anumite modele transgenice s-ar putea s nu fie relevant din punct de vedere medical.n alte instane pot fi obinute informaii vitale cu privire la etiologia unor boli complexe.

Modele Transgenice pentru Metoda Alzheimer

Boala Alzheimer este un proces degenerativ al creierului,ce este caracterizat att prin pierderea progresiv a abilitii de a gndi abstract ct i a memoriei i este acompaniat de schimbri de personalitate,tulburri de limbaj i ncetinirea capacitilor psihice.Prognosticul bolii Alzheimer este sumbru,dei 1% din populaia ntre 60-65ani i 30% din populaia peste 80 ani o pot avea.

Principala protein a corpurilor amiloide din boala Alzheimer este o protein de 4 kilodaltoni numit A. Proteina A are o lungime ntre 39 pn la 42 de resturi de aminoacizi,iar formele A40 i A42 sunt principalele variante.Toate proteinele A sunt derivate dintr-o clivare proteolitic intern a precursorului -amiloid (APP).O clivare defecioas a APP duce la producerea de A40 i A42 i o ndepartare ineficient a acestor variante duce la acumularea lor.Un numr mic de familii cu inciden crescut a bolii Alzheimer prezint mutaii la nivelul genei APP,acest descoperire implic aceast gen n producerea bolii.Din nefericire,la marea majoritate,studiul patogeniei bolii Alzheimer la oamenii este imposibil.Deci,un model animal ce mimeaz boala Alzheimer este o unealt de cercetare indispensabil. Au fost creai un numr de oareci transgenici cu versiuni complete sau pariale de gen APP normal conduse de promotori neurospecifici.n majoritatea cazurilor plcile de amiloid,amestecurile de neurofibrin,moartea neuronilor sau comportamentul celular anormal nu a fost observat.Totui neurodereglarea i alte caracteristici similare bolii Alzheimer s-au petrecut n anumite situaii.De exemplu o transgen,ce este produs din zona ce codific ultimii 100 de aminoacizii ai APP i care conine secvena A proteinei produce caracteristicile histologice reprezentative pentru boala Alzheimer. Modele animale mai convingatoare pentru boala Alzheimer au fost create cu transgene ce conin mutaii ale genei APP ce se petrec n anumite familii cu o inciden crescut a bolii Alzheimer cu debut precoce.(50 ani).ntr-un sit din aceste familii,situl 717 al APP(APP-717) conine fenilalanin n loc de valin.n alt grup de familii cu boala Alzheimer,siturile 670 i 671 ale APP conin asparagin i

levalin,n loc de lisin i metionin.

Alte 3 gene (Apo-E4,gena presenilina 1 i gena presenilina 2 [PS1 i PS2] ) au

fost implicate n boala Alzheimer la oameni.Prezena alelelor Apo E4 a locusului Apo E4 ,ce joac un rol n transportul lipidelor crete posibilitatea ca indivizii ce au cel puin 60 de ani s dezvolte boala Alzheimer.Mutaii ale genelor presenilinelor au fost gsite la familii cu debut foarte precoce a bolii Alzheimer.Diferite studii indic faptul c genele presenilinelor mutante cresc acumularea de A42. . Cu toate c mai exist multe informaii de cunoscut cu privire la boala Alzheimer disponibilitatea modelelor animale va ajuta la gsirea rspunsurilor unor ntrebri cruciale referitoare la cauza molecular a bolii ce afecteaz aproximativ 4 milioane de oameni in USA i care cost anual aproximativ 100 milioane de dolari anual.

Clonarea Animalelor prin Transfer Nuclear

ntr-un caz intens mediatizat o oaie pe nume Dolly a fost clonat prin transfer de nucleu de la o celul a ugerului unui animal adult.Aceasta a fost prima demonstrare a pluripotenei (totipotenei) nucleului diferitelor celule adulte.De la clonarea lui Dolly,nucleii celulelor somatice au fost folosite pentru a clona vite,capre i porci.

n aceste cazuri procedeul de transfer a nucleului este similar.Pe scurt celulele donor fie ele embrionare,fetale sau adulte sunt izolate,cultivate i modificate genetic.Cu toate c celulele adulte nu sunt ntotdeauna fesabile culturile lungi sunt preferate pentru c astfel cei ce efectueaz experimentul au timp n plus pentru a realiza alterri genetice succesive cum ar fi inactivarea ambelor alele ale unui locus sau crearea de schimbri genetice multiple. Dup stabilirea unei linii celulare cu o modificare genetic specific celulele donor individuale sunt fuzionate cu un oocit enucleat cu impulsuri electrice de durat scurt.Impulsurile induc simultan fuziunea celular i activarea oocitelor.Celulele fuzionate sunt cultivate fiecare pn la stadiul de blastocit nainte de a fi transferat n uterul unei femele fals nsrcinate.La natere prin analiza genotipului se identific transgena. n general animalele produse prin transfer de nucleu sunt sntoase.Totui exist o pierdere substanial de indivizi nainte i dup natere.Cauza acestei rate sczute de supravieuire nu este cunoscut.n ciuda eficinei sczute transferul nuclear are o serie de avantaje fa de microinjecia de ADN n pronucleu.Prin transfer nuclear schimbrile genetice specifice sitului sunt posibile;toi produii de concepie sunt transferai i mici turme de acelai sex pot fi produse ntr-un timp scurt. n contrast,prin microinjecie cu ADN integrarea transgenei se face n situri randomizate,expresia fiind limitat de localizarea cromozomial,se formeaz tandemuri instabile,iar stabilirea liniilor transgenice presupune un oarecare numr de generaii.Din aceste motive se depun eforturi pentru perfecionarea clonrii animalelor cu nuclei din celule somatice.

Vite,Oi,Capre i Porci Transgenici

Dac glanda mamar este folosit ca bioreactor,vacile pentru lapte ce produc anual aproximativ 10.000 litri de lapte coninnd aproximativ 35g de proteine/litru sunt candidate profitabile pentru transgenez. Un protocol pentru microinjecia de ADN pentru transgeneza oarecilor a fost elaborat pentru vite.Pe scurt,paii eseniali presupun: 1.prelevarea oocitelor de la vaci sacrificate la abator; 2.maturarea n vitro a oocitelor; 3.fertilizarea n vitro cu sperm de taur; 4.centrifugarea oulor fertilizate pentru o concentraie ,care mpiedic vizualizarea pronucleilor masculini la microscop; 5.microinjectarea de ADN n pronucleii masculini; 6.dezvoltarea n vitro a embrionilor; 7.implantarea nechirurgical a unui embrion ntr-o mam vitreg prin ci naturale; 8.screening AND a progeniturii pentru determinarea prezenei genei. Unul dintre scopurile transgenezei vacilor de lapte este de a schimba compoziia laptelui.Cantitatea de brnz produs din lapte este direct proporional cu coninutul de k-casein.Creterea produciei de k-casein cu supraexpresia unei transgene pentru k-casein este un scenariu realizabil.Pentru un scop final diferit expresia transgenei pentru lactoz n glanda mamar ar putea scade coninutul n lactoz a laptelui cu toate c este nevoie de o anumit cantitate de lactoz pentru secreia de lapte. Cu toate c transgeneza vitelor pare promitoare,progresia spre a produce numere mari de animale modificate genetic va fi destul de nceat,deoarece dureaz 2 ani producerea unui viel dintru-un ovul fertilizat. n prezent,bolile infecioase ale animalelor domestice sunt controlate prin vaccinare,medicamente,izolare fizic i monitorizare atent.n cazul animalelor se pot face ncercri de a crea animale ce motenesc rezistena la boli virale,bacteriene sau parazitare.De exemplu,rezistena genetic la boli bacteriene cum ar fi:mastita la vacile de lapte ,dizenteria neonatal la porci i holera ar fi putea fi utile.Dac cauza rezistenei n fiecare caz este datorat unei singure gene este posibil creearea unor animale transgenice cu protecie specific mpotriva unor boli bacterine dup izolarea i caracterizarea acestor gene. O alt abordare,ce poate fi folosit pentru dezvoltarea liniilor de animale rezistente la ageni infecioi presupune creearea proteciei imunologice motenit prin transgenez.Un numr de gene candidate ce contribuie la sistemul imun sunt studiate pentru acest scop.Totui cele mai favorabile rezultate preliminarii pn n prezent au venit din partea cercettorilor n care genele ce codific lanurile H i L a anticorpilor monoclonali au fost transferate la oareci,iepuri,capre i porci.Motivaia acestei strategii este de a conferii un mecanism de protecie biologic motenit a animalului transgenic ce elimin nevoia imunizrii prin vaccin. Conceptul de a introduce ntr-un organism a transgenelor un anticorp ce se leag de un anumit antigen a fost numit imunizare in vitro.Pentru a testa acest idee genele pentru lanurile imunoglobulinelor a unui anticorp monoclonal de oarece

mpotriva unui anticorp ce se leag de 4-hidroxi-3-nitrofenilacetat au fost clonate n tandem i microinjectate n ovule fertilizate de oareci,iepuri i porci.n fiecare caz activitatea anticorpului monoclonal ce conine att lanuri H i L clonate a fost sczut.Diferite constructe transgenice vor trebui examinate pentru a determina dac aceast problem poate fi rezolvat. Cercetarea transgenezei la oi i capre a fost n cea mai mare parte ndreptat spre dezvoltarea glandelor mamare a acestor organisme drept bioreactoare pentru producerea de proteine farmaceutice.Cu toate c cantitatea de lapte produs fie de oi,fie de capre este mai mic fa de cea produs de vaci,lactaia la oi i capre produce cantiti de sute de litri de lapte/an. Printr-o metod foarte asemnatoare cu cea folosit pentru producerea de oareci transgenici cu aceste construcii transgenice ce presupun conducerea secvenelor de gene umane de ctre promotorii specificii glandei mamare cercettorii au creat oi,capre,porci i iepuri transgenici pentru mai mult de 100 de proteine umane ce sunt secretate n lapte.Proteinele derivate din transgenez au fost glicolizate i au avut alte modificri postranslaionale.n multe astfel de cazuri proteinele recombinate au activitate biologic identic cu acelea ce provin din surse umane. Transgeneza este folosit i pentru abordarea anumitor probleme ce in de mediu.De exemplu o problem de mediu major adus de creterea numrului de porcine este abundena de fosfor (P) din materiile lor fecale.Fosforul din fecale de porcine i galinacee ce este depozitat n aer liber sau este folosit ca ngrmnt se poate infiltra n sistemele de irigare i poate determina creterea excesiv de populaii bacteriene (cianobacterii) ,care scad rezerva de oxigen i prin urmare omoar petii i alte organisme acvatice.Cantiti mari de P sunt implicate n producerea de gaze,ce cresc efectul de ser,care contribuie la nclzirea global. Porcinele i galinaceele excret cantiti mari de P pentru c,spre deosebire de rumegtoare nu sunt capabile s digere i s utilizeze acidul fitic,care este forma n care se gsete P n nutrieni.Ca surs principal de hran pentru porci este soia,ce are aproximativ 50% din fosfatul su sub form de acid fitic.Incapacitatea de a cataboliza acidul fitic este cauzat de absena unei enzime fitaze,care se gsete n plante i microorganisme.Majoritatea fitozelor nlocuiesc succesiv P din acidul fitic pentru a produce inozitol 2-monofostat sau inozitol.A fost adugat fitoz n nutrieni pentru a facilita aportul de fosfor alimentar i pentru a scdea concentraia de fosfor din excremente.Totui acest supliment este costisitor i ineficient pentru c majoritatea activitii enzimei este pierdut prin prepararea i depozitarea hranei. Ca strategie alternativ este justificat faptul c porcii transgenici,ce exprim gena fitazei n glandele lor salivare s poat depii consecinele de ordin nutriional i din punctul de vedere al polurii cu privire la prezena acidului fitic n diet.Pentru a ndeplinii acest scop,microinjectarea embrionilor cu pronuclei a fost folosit pentru a introduce la porci un construct transgenic ce const din gena appA pentru fitoz provenind de la E.coli aflat sub controlul promotorului proteinei glandei parotide,care dirijeaz producia unei proteine specifice salivare la oareci.Stabilirea unor linii transgenice productoare de fitoz a fost realizat i apoi testat cu privire la nivelul de P dup mese de soia ce conineau 53% din fosfat sub form de acid fitic. n aceste condiii acidul fitic din soia a fost digerat aproape n totalitate i

coninutul de P din fecale a fost redus cu 75% n comparaie cu lipsa de control transgenic.Nu au fost semnalate efecte adverse la aceti porci.Mai sunt necesare studii pentru a demonstra c fitoza nu este sintetizat i n alte locaii n afar de glandele salivare i c nu este alterat cantitatea crnii,dar i c fitoza nu este alergen.Cel mai probabil aceast abordare va scdea costul produciei de porcine ct i de galinacee i va diminua efectele negative asupra mediului.Deci,aceti porci au fost numii porci envitro.

Psri Transgenice
Anumite caracteristici,care sunt proprii reproducerii aviare,dar i

dezvoltrii aviare fac producerea liniilor trangenice prin microinjectare de ADN n ovule specializate extrem de ineficient.De exemplu,n timpul fertilizrii la psri ovulul este penetrat de mai muli spermatozoizi.Prin urmare este imposibil identificarea pronucleului masculin ce va fuziona cu pronucleul feminin.De asemenea ADN-ul injectat n citoplasma ovulului fertilizat nu se integreaz n ADN-ul genomic.n final,chiar dac microinjectarea nucleului cu ADN ar fi practicabil tehnica ar fi dificil de implementat deoarece ovulul aviar dup fertilizare devine acoperit de o membran dur,nconjurat de cantiti mari de albumin i nchis ntr-o membran intern i extern extrem de rezistent.Lund n calcul aceste dezavantaje este posibil injectarea unei transgene n regiunea glbenuului(disc germinativ), care este format din pronucleii feminin i masculin.Discul germinativ este prezent naintea formrii cojii oului.Dup administrarea ADN-ului discului germinativ fiecare ou este cultivat n vitro i cnd se formeaz embrionul acesta este plasat ntr-un ou surogat pentru a produce un pui de gin.n ciuda dificultilor tehnice anumite linii transgenice ale puilor au fost stabilite prin aceast metod. Pn cnd membrana extern a oulor se ntrete embrionul n curs de dezvoltare are 2 straturi,ce conin ntre 30.000 i 60.000 de celule.n cadrul stadiilor experimentale inocularea n stadiul de blastoderm cu vectori retrovirali defectivi de replicare cu gene bacteriene markeri au rezultat n caiva pui ce aveau aceste secvene ADN n genomul lor.Dei unele organisme transgenice nu au produs virui folosirea vectorilor retrovirali pentru a inocula gene ntr-un produs destinat consumului ca hran a acestuia va ridica ntrebri cu privire la sigurana acestora cu toate c riscurile sunt reale sau imaginare. Vehicolul ideal pentru transgenez ar fi celulele pluripotente ce pot fi obinute continuu n cultur i pot fi modificate prin metode standard.Pn n prezent doar celule din stadiul de blastoderm i celule primordiale germinative ce au o cretere limitat n vitro i celule stem embrionare de pui n stadiul X ,ce supravieuiesc 21 de zile n cultur,sunt disponibile acestui scop.Deci,aceste celule sunt extrase de la puiul donator transfectate cu constructul transgenic i implantate n spaiul subgerminal al embrionilor primitori din ou proaspt clocite.La eclozare o parte din progenituri prezint o mixtur de celule. Un organism cu celule diferite provenite de la 2 sau mai muli indivizi este numit himer.La anumite himere de pui de gin celulele provenite din celule transfectate devin parte a liniei esutului germinativ i formeaz celule germinative.Liniile transgenice pot fi astfel stabilite pornind de la aceste himere prin mperechere.n general celulele primitoare sunt mult mai multe dect celulele donatoare ce conin transgena.Totui proporia celulelor donatorului poate fi crescut cu scopul de a mrii posibilitatea obinerii liniilor himerice.n ciuda ineficienei sale aceast procedur a fost adesea folosit pentru a produce pui de gin transgenici. Pui de gin transgenici pot fi folosii pentru a mbuntii genotipurile existente prin dobandirea rezistenei la virui i bacterii,a unei luri n greutate mai eficiente,a unui nivel de grsimi i colesterol mai sczut n ou i a unei caliti mai bune a crnii. n prezent experimental pui de gin ce sintetizeaz anticorpi monoclonali,hormoni de cretere,insulin,albumin seric uman i -interferon au

fost creai.

Peti Transgenici

Cum pescriile naturale devin insuficiente producerea acestei hrane rspandite pe ntreg mapamondul va depinde din ce n ce mai mult de aquacultur.n acest context,raii de cretere mari,tolerana la stresul ambiental i rezistena la boal sunt unele caracteristici ce pot fi create prin transgenez.Pn n prezent,transgenele au fost introduse prin microinjecie n ovulele fertilizate a unui numr de specii de pete incluzandu-le pe cele de:crap,somon,pstrv,pisic de mare,etc.Pronuclei de pete nu pot fi vizualizai la microscop dup fertilizare prin urmare ADN-ul transgenic este injectat n citoplasma ovulelor fertilizate sau a embrionilor ce au ajuns la un stadiu de dezvoltare de 4 celule.Spre deosebire de embriogeneza mamiferelor,dezvoltarea oulor de pete este extern prin urmare nu este nevoie de procedur de implantare.Dezvoltarea de peti transgenici se realizeaz n acvarii cu temperatur reglabil.Prezena transgenei este evident prin PCR sau printr-o scal AND pentru eritrocitele nucleate.Vor mai fi efectuate mperecheri pentru a obine linii transgenice pure.

O multitudine dintre studiile iniiale pe peti transgenici au fost realizate pe examinarea efectelor transgenei pentru hormonul de cretere.ntr-un studiu o transgen ce era format din promotorul genei pentru proteina antinghe a petelui renumit ocean pout,AND-ul pentru hormonal de cretere de la somon i semnalele poliadenilrii a captului 3 a genei proteinei antinghe din petele ocean pout au fost injectate n oule somonului Atlantic.n general somonii transgenici au fost mai mari i au crescut mai repede dect petii netransgenici.Acest sistem de exprimare a fost ales pentru a mbuntii transcripia hormonului de cretere n apele reci.Un construct exclusiv din pete a fost asamblat pentru a evita posibilele incompatibiliti biologice ce ar fi putut aprea la folosirea de hormon de cretere din surse nepiscicole. Pentru o specificitate i mai mare un construct pentru hormonul de cretere format doar din somon a fost formulat i microinjectat n ou de somon.Dup aprox.1 an somonii transgenici au fost de aprox.11 ori mai grei decat somonii normali.Totui la adult nu exist diferene de mrime. Teoretic,creterea mai rapid a somonilor tineri ar scdea costul pentru hran i ar diminua poluarea apelor de coast din vecintatea locului unde sunt inui petii.Vor exista i alte posibiliti printre care petii transgenici n aquacultur pot fi dezvoltai n locaii ngrdite.ns pn atunci eliberarea accidental a populaiilor de

peti transgenici printre populaii naturale trebuie luate n considerare dac petii sunt crescui n arcuri transgenice. n plus pentru a mbuntii trsturi ce folosesc la producerea petilor pentru hran transgeneza poate fi folosit pentru a genera un sistem model pentru monitoizarea riscurilor de sntate i de screening a chimicalelor pentru a determina dac acestea provoac mutaii.Un numr de sisteme biologice au fost proiectate pentru detectarea mutaiilor induse la microbi i roztoare. Dintre cerinele majore pentru determinarea mutaiilor n vivo,acestea nu trebuie s afecteze viabilitatea dect dac sunt urmrite efectele genelor letale,de asemenea mutaiile induse trebuie s produc un fenotip identificabil,gena intit s poat fi extras i o nou mutaie s fie uor de determinat prin secvenializarea ADN-ului. Un alt tip de mutaie a petilor transgenici la care se folosete o transgen plasmidic cu o gen sensibil la antibiotice ca int pentru mutaie a fost dezvoltat.n acest caz Escherichia coli este transformat cu ADN plasmidic recuperat de la petii transgenici tratai, creterea incidenei coloniilor rezistente la antibiotice provenite din monstre tratate n comparaie cu monstre netratate denot mutagenez.n general petii transgenici vor oferii o metod eficient din punct de vedere al costurilor pentru determinarea mutagenilor chimici n apa de la surse poluante.

Organismele Modificate Genetic

Ce sunt organismele modificate genetic? Organismele modificate genetic (OMG) sunt organisme cu o structur genetic alterat prin ncorporarea unei gene strine care va determina o trstur dorit.Un exemplu n acest sens sunt un anumit tip de tomate Flavr Savr Tomato.S-a recurs la acest procedeu n cazul acestora pentru a contracara procesul de coacere a roiilor,care n mod firesc atrage nmuirea lor.n timpul coacerii anumite celule din pereii tomatelor se destram fapt ce determin caracterul moale o dat cu trecerea timpului pn la intrarea n putrefacie a acestora.n cazul lor s-a inserat n ADN-ul acestora o anumit gen,care previne ruperea lanurilor celulare din pereii acestora rezultnd astfel roii care i pstreaz duritatea pe perioade ndelungate putnd fi astfel transportate de la productor la centrele comerciale fr bataie de cap c pe drum s-ar putea nmuia i ca i consecin s nu mai fie cumprate de consumatori.

Care este impactul organismelor modificate genetic? Cu toate c impactul nu a fost n amnunt cercetat anumite aspecte deja au fost analizate ajungndu-se la anumite concluzii.n primul rnd se arat c prin intermediul organismelor modificate genetic se vor reduce costurile de producie a alimentelor;producia n cazul lor nu necesit foarte multe substane chimice i dispozitive mecanice sofisticate.Pe consumator n afar de pre l intereseaz i aplicaiile nutritive ale acestor produse.n acest sens studiile arat c aceast biotehnologie a altoirii genelor permite crearea de specii cu valoarea nutritiv net superioar fa de cele comune.Un exemplu n acest sens este noua specie de orez numit gold rice,care conine beta carotena,o surs de vitamina A i fier ce va ajuta foarte mult n combaterea orbirii la copii i anemiei materne.Trebuie tiut c n multe ri n curs de dezvoltare orezul este sursa central de hran a populaiei acestora.S-a constatat c populaia acestor ri prezint datorit lipsurilor n alimentaie unele maladii specifice cum ar fi:orbirea infantil i anemia matern.Cu ajutorul acestui tip modificat de orez dup introducerea lui la scar larg n aceste ri bolile vor disprea ncet.

De asemenea susintorii OMG-urilor arat c necesitatea proliferrii lor nu se rezum numai la att, ci ele sunt necesare pentru a alimenta o populaie n continu cretere.

Care sunt aspectele care ngrijoreaz n legtur cu consumarea acestor organisme modificate genetic? Cea mai evident ngrijorare este legat de posibilitatea reaciilor alergice la acest gen de mncare din partea consumatorilor.Peste 90% din alergiile la alimente sunt datorate anumitor proteine care se gsesc n lapte,ou,pete,alune,soia, anumite fructe de mare.Teama se refer la situaia cnd o gen provenit din alimentele care conin aceste proteine ce creeaz aceste alergii ar fi ncorporat ntrun produs care n mod normal nu prezint asemenea risc.Se aprecieaz c pentru a fi admis un anumit produs modificat genetic va trebui probat faptul c el nu ncorporeaz asemenea alergeni de risc.

Organisme Modificate Genetic duse la extrem

Modificarea genetic a plantelor i animalelor a fost i este nc,motivul multor dispute.Cu toate acestea,oamenii de tiin au continuat s produc organisme extraordinare. Petele Fluorescent Este primul oraganism transgenic,care a fost acceptat ca animal de companie.A fost obinut prin ncruciarea unor gene strine cu cromozomi cunoscutului pete Zebra, nainte de eclozarea icrei.Genele aparin unor vieti marine care eman lumin.S-au obinut astfel zebre roii i verzi care n timpul zilei absorb lumina,iar noaptea devin fosforescente.Au fost create iniial pentru a fi folosite drept sistem de avertizare n cazul polurii,dar cu timpul au ptruns pe piaa petilor de acvariu.

Grapple-ul ncruciarea dintre textura unei boabe de strugure (grape) i dimensiunea unui mr (apple) a avut ca rezultat un nou fruct.Gustul acestuia mprumuta din savoarea ambelor fructe.A fost creat pentru rile lumii a treia,iar fondurile pentru cercetri au fost asigurate de UNICEF.

Stafida uria

O gsim n pia sub numele de graisin i este o stafid modificat genetic,care atinge dimensiuni gigantice.A fost produs de Institutul Naional de Genetic din Japonia.Gustul ei este asemntor cu cel al fructului printe.

Arborele de plut i cauciuc Arborii de plut au fost folosiii vreme ndelungat pentru fabricarea dopurilor pentru sticlele de vin.n ultima perioad,dopurile de plut au fost nlocuite cu cele de plastic.Pentru a satisface tradiionalitii,dar i pentru a reduce costurile,cercettorii au creat un copac rezultat din ncruciarea arborelui de plut cu cel de cauciuc.Materialul rezultat arat ca pluta i are aceleai caliti poroase,dar a imprumutat i din durabilitatea cauciucului.

oprla Umbuku

Acest organism este singurul din list care nu a fost proiectat cu scop practic,ci pentru a demostra c este posibil.oprlei Umbuku i-au crescut aripi n urma modificrii ADN-ului de ctre geneticienii din Zimbabwe.Se pare c Umbuku este urmaa speciei Prerodactile,care i-a pierdut capacitatea de a zbura cu cteva milioane de ani n urm.Pn acum nu au fost produse dect ase astfel de oprle zburtoare.

Arborele de hrtie A fost creat pentru a reduce costurile de producie,dar i pentru a proteja pdurile.Popularitatea reciclrii hrtiei din ultima perioad a stimulat civa cercettori suedezi s creeze un copac cu frunze ptrate,care,o dat uscate,pot fi folosite pentru scris.

Dolion-ul Acesta este probabil cel mai elocvent exemplu al evoluiei

tiinei.Dolion-ul este rezultatul combinrii genelor unui cine cu cele ale unui leu.Este similar tigrului (ncruciarea dintre leu i tigru), excepie fcnd faptul c cel din urm se poate produce i n mediul natural,fr a intervenii asupra ADN-ului.

Pinul pitic Aceast plant este un conifer care atinge doar 2 cm nlime la maturitate.A fost creat pentru a fi folosit n industria parfumurilor,dar a cptat i alte ntrebuinri.n Papua Noua Guinee este cunoscut ca fiind comestibil i se servete ca desert.

Pianjenul ferig Este singurul organism din lista,care a rezultat n urma combinrii dintre plant i animal.A fost creat pentru a se studia ce anse de supraviuire are un pianjen ce se poate camufla fa de unul obinuit.Rezultatele studiului nu au fost fcute publice nc.

Lemurat-ul Este un animal de companie pentru oamenii foarte bogai din China.Aa cum i sugerez i numele este rezultatul ncrucirii genelor dintre un lemur i o pisic.Este mai agresiv dect o felin domestic obinuit,dar nu mai mult dect un cine Chihuahua.Numele tiinific al acestei vieti este Prolos Fira.

Produsele OMG:beneficii i riscuri

Sunt greu de pus n balan beneficiile i riscurile,pentru sntatea uman,a produselor alimentare obinute din OMG.Fr ndoial, ntr-o lume suprapopulat ca cea n care trim,cu o clim n continu schimbare,cu duntori care devin din ce n ce mai rezisteni,nu putem s nu recunoatem progresele pe care interveniile genetice le-au adus n privina scurtrii timpului de maturare a recoltelor,a creterii rezistenei acestora la boli i duntori,cantitatea mai mare de ou,lapte i carne la animale,obinerea de bioerbicide i bioinsecticide prietenoase,care protejeaz mediul,bioprocesarea produselor forestiere etc. Pe de alt parte,dac privim lumea n care trim ca pe un uria organism care s-a autodezvoltat n miliarde de ani,reuind s rmn n echilibru,experiena de pn acum a omenirii nu ne poate arta altceva dect c intervenia omului n mecanismele extrem de fragile ale mediului ajunge s fie devastatoare. Omul a reuit s dea peste cap clima planetei,punnd n pericol sau ducnd la dispariie flora i fauna globului.Nenorocirea este c progresul ingineriei genetice a mers cu muli pai naintea cercetrii tiinifice n ceea ce privete riscul OMG asupra sntii umane,animale i ambientale.Cum,la ora actual,exist n desfurare sute de cercetri pe aceste teme,rezultatele lor ncep s nfricoeze omenirea.Bucuria progresului tehnologiilor genetice este ncet-ncet stins de montrii care se profileaz din ce n ce mai clar la orizontul sntii omului i a planetei.Riscul este amplificat nu doar de dovedirea efectului devastator asupra sntii umane,ci mai ales de faptul c nc nu sunt cunoscute efectele majore ale OMG.

Ceeea ce se tie pn n prezent este c unele substane din OMG duc la dezvoltarea anormal a embrionilor n timpul gestaiei,c toxinele bacteriene folosite n OMG devin toxice pentru consumator,c nu exist testare anticanceroas a produselor OMG.

OMG,buctria din laborator

De-a lungul timpului alimentaia omului a suferit o evoluie paralel cu rata dezvoltrii tehnologice.Dac la nceput hrana venea exclusiv din natur,n ultima vreme o bun parte din alimente provin mai degrab din laboratoare de inginerie genetic dect din mediu natural.Omul s-a preocupat dintotdeauna de ameliorarea i selecionarea acelor specii,vegetale sau animale,pe care le-a socotit a rspunde cel mai bine nevoilor sale de subzisten.Dar numai n ultimele dou decenii,odat cu formidabilul avnt al geneticii,s-a putut obine ,prin manipulri specifice,mai nti n laborator,apoi i pe terenurile de cultur organisme cu alte caractersitici dect cele naturale.Acestea sunt denumite OMG,adic organisme modificate genetic.

Dincolo de avantajele oferite de acestea prin prisma unei productiviti mai mari i implicit preuri mai mici,o parte a oamenilor de tiin dezaprob elanul cercetrii n acest domeniu i includerea n dieta zilnic a alimentelor care au la baz organisme modificate genetic.Cele mai recente studii demonstreaz c produsele modificate genetic afectez sntatea mamiferelor i implicit a oamenilor. Efecte alergice i toxice asupra oamenilor:majoritatea culturilor modificate genetic sunt concepute s reziste la aplicri fr limit de ierbicide.Dou dintre cele mai folosite chimicale,bromoxylin i glyphosat sunt asociate cu tulburri de cretere ale fetuilor,cu tumori,carcinoame,limfoame non-Hodgkin.Se consider c soiul de porumb modificat genetic numit StarLink declaneaz reacii alergice precum voma,diareea i ocul anafilactic.Unii consultani tiinifici din SUA consider c toate proteinele din porumbul modifcat genetic ar putea aciona ca ageni antigenetici i alergenici.

Un tip de porumb modificat genetic,aprobat pentru consum uman pe piaa Uniunii Europene,a cauzat serioase modificri la nivelul ficatului i rinichilor cobailor care l-au consumat n timpul unui studiu tiinific.Studiul a fost realizat de cercettorul francez Gilles Eric Serralini i publicat n martie 2007.

O alt varietate de porumb modificat genetic,denumit NK603,deja aprobat pentru consum n Uniunea European a fost analizat de Institutul tiinific francez CRIIGEN.Rezultatele studiului au artat c grupul de cobai hrnit cu acest porumb a suferit modificri la rinichi,ficat,creier,inim i a prezentat diferene semnificative n greutate.

Mncare Modificat Genetic

Dintre toate lucrurile pe care le poate face ingineria genetic,mncarea modificat genetic,este,probabil,cel mai discutat.Aceasta ar putea anihila foametea de pe pmnt,dar mulii oameni ii fac griji n privina securitii ei. Frankenmncarea Mncarea modificat genetic a fost numit Frankenmncarea,dup omul de tiin din romanul de Mary Shelley Frankestein.n aceast

carte,Frankestein creeaz un monstru care se ntoarce mpotriva lui i-i atac familia. Pe masa dumneavoastr Milioane dintre noi am mncat deja mncare modificat genetic.Unele roii modificate genetic au genele schimbate pentru a nu le permite s se nmoaie n timp de cresc.De civa ani,ele au fost folosite n pasta de tomate.

Mncarea modificat genetic pe care o consumm a fost testat n privina siguranei consumului,dar muli oameni inc se mai tem c acestea ar putea fi duntoare ntr-un mod pe care nu-l nelegem. Mai multe temeri Sunt mai multe motive de ngrijorare n privina mncrii modificate genetic.Una este c o combinaie a genelor ar putea avea efecte neateptate.Un morcov modificat pentru a crete mai mare ar putea fi otrvitor.Creterea culturilor modificate ar putea fi duntoare pentru mediul nconjurtor.De exemplu,semnturile modificate pentru a fi otrvitoare pentru parazii ar putea duce la dispariia unor specii de insecte. Rspndirea prin vnt Cnd cerealele sau semnturile cresc,polenul lor se poate rspndi i ajunge pe alte cmpuri.Astfel,polenul de pe semnturile/cerealele modificate genetic,coninnd gene modificate,se pot combina cu cele nemodificate genetic i s le schimbe i pe acestea.Cresctorii ncerc s le in separat de cele nemodificate genetic,dar nu funcioneaz intodeauna.Dac se dovedete c mncarea modificat genetic este periculoas,aceasta va constitui o problem.

Lupta cu foametea

Sunt milioane de oameni care nu au destul mncare.Aceasta se ntmpl de multe ori din cauz faptului c recoltele le sunt mncate de parazii,din cauza solului sterp sau a lipsei de ploaie.Culturile modificate genetic sunt fcute s reziste duntorilor i s supraviuiasc pe sol srac i uscat.Ele ar putea ajuta la rezolvarea acestor probleme i la prevenirea foametei.

Organisme modificate genetic in Romania

In Romania , cultivarea soiei modificate genetic este interzisa din anul 2007, adica de pe vremea parintelui Ilie Sarbu. Desi s-au facut presiuni din toate partile, nu s-a revenit asupra deciziei. Dupa cativa ani, s-a permis n schimb porumbul OMG, mai precis MON810 de la Monsanto, ca doar americanii sunt tari pe piata, iar Romania se situeaza pe axa lor de interese. Adica ceea ce altii au refuzat, inclusiv Franta, a acceptat Romania. Ceea ce este de neinteles este, insa, faptul ca furajele OMG, in special soia, sunt permise in hrana animalelor, iar in final acestea ajung la consumatorul final, adica omul. Atunci de ce se mai interzice cultivarea OMG?

Undeva lantul se rupe, ceva nu este in regula. Adica noi europenii nu avem voie sa punem soia OMG, dar o aducem,din America si Brazilia sa o dam la animale. In port la Constanta sunt mii de tone de soia OMG la preturi modice de circa 330 dolari pe tona si atunci de ce sa ne mai miram ca marii crescatori apeleaza la aceasta varianta pentru a scapa mai ieftin in ce priveste furajarea animalelor. Daca tot ce mancam contine urme de OMG ar trebui macar sa stim! Oare cate produse au specificate pe eticheta faptul ca au OMG si cine le verifica?

Agricultura cu mutanti genetici Cultivarea plantelor modificate genetic e, de ani buni, un subiect de controversa. Inca nu se cunosc efectele pe termen mediu si lung, dar suprafetele cultivate cu OMG-uri cresc de la un an la altul. Ca sa putem vorbi de efecte reale, organismele modificate genetic (OMG) ar fi trebuit sa fie cercetate pe o perioada mult mai lunga decat istoria lor relativ recenta. Unii cercetatori au comparat plantele modificate genetic cu E-urile alimentare. O serie de E-uri catalogate la inceput drept inofensive, cativa ani mai tarziu au fost interzise din cauza potentialului cancerigen. OMG-urile nu au o toxicitate acuta, insa, in timp, ar putea provoca boli grave, din cauza continutului genetic modificat si a pesticidelor incluse. Romania, pe locul 3 in topul tarilor Europene In afara de sase state din Europa care au interzis cultivarea plantelor modificate genetic, alegerea apartine fermierilor. Statele europene orientate spre culturi bio sunt: Franta, Austria, Polonia, Ungaria, Grecia si Italia. De cealalta parte, Statele Unite ale Americii, Argentina, Canada si China sunt cele mai active tari in domeniul cultivarii de plante modificate genetic. Cand vorbim de OMGuri, nu te gandi la rosiile si fructele fara gust pe care le stim cu totii. Aici e vorba de o selectie la nivelul speciei, care duce la scaderea calitatilor nutritive ale plantelor. Insa, nu pot fi incadrate la capitolul plante modificate genetic. La nivel mondial, principalele specii de OMGuri sunt: soia (36,5%), porumbul (12,4%), bumbacul (6,8%) si rapita (3%). Alte specii de plante transgenice s-au cultivat pe suprafete mai mici: dovlecel si papaya in SUA, orez in Iran, garoafe in Olanda. In prezent, Romania ocupa locul al treilea in Uniunea Europeana din punctul de vedere al suprafetelor cultivate cu OMG-uri, conform datelor Serviciului International de Achizitionare a Aplicatiilor Agricole Biotehnologice (ISAAA). Dintre plantele cultivate, porumbul e pe primul loc la noi.

Departe de a urma exemplul altor tari europene care au inceput rand pe rand sa scoata in afara legii plantele transgenetice, tara noastra continua sa le cultive fara nicio rezerva. Ba mai mult, aloca suprafete din ce in ce mai mari. Astfel, potrivit Serviciului International de Achizitionare a Aplicatiilor Agricole Biotehnologice (ISAAA), suprafata semanata cu porumb modificat genetic MON810 a depasit anul trecut 7.000 de hectare, comparativ cu anul 2007, cand erau cultivate doar 350 de hectare. Situatia este si mai grava in ceea ce priveste suprafetele de soia, cea de-a doua cultura modificata genetic oficial cultivata la noi. Conform unor asociatii de fermieri si chiar spuselor fostului country manager al companiei Monsanto (cel mai mare cultivator de OMG in lume) in Romania, in realitate, soia MG acopera 90% din totalul suprafetelor cultivate cu soia si nimeni nu detine controlul asupra situatiei. In plus, reprezentantii Greenpeace in Romania sustin ca in urma unor investigatii pe cont propriu au identificat o serie de experimente cu pruni si cartofi MG, care se desfasurau in statiuni de cercetare ale Ministerului Agriculturii. Ei au dovedit cu ajutorul echipamentelor speciale pentru testarea in camp si al analizelor facute ulterior intr-un laborator certificat din Austria, ca aceste culturi ilegale si situatiile de contaminare sunt reale pe tot cuprinsul Romaniei.

BIBLIOGRAFIE:
1.Bernard R.Glick,Jack J.Pasternak Molecular Biotechnology Principles and Applications of Recombinant DNA,Department of Biology,University of Waterloo Waterloo,Ontario,Canada. 2.Jose Cibelli,Robert P.Lanza,Heith H.S.Campbell,Michael D.West Principiile Clonrii,Editura Tehnic Bucureti,2007. 3.Anna Claybourne, Ilustrat de: Stephen Monrieff, Consultani tiinifici: prof.referent Michael J.Reiss Noiuni despre Gene i ADN,Editura Aquila. 4.http://www.recolta.eu/ce-sunt-organismele-modificate-genetic-si-alimentele-obtinute-dinorganisme-modificate-genetic/ 5.http://www.ecomagazin.ro/organisme-modificate-genetic-duse-la-extrem/

6.http://www.sanatateatv.ro/articole/alimentatie/omg/ 7.http://www.yuppy.ro/articol/Health/2136/OMG-bucataria-din-laborator.html 8.http://vivanatura.ro/bio/?p=2126