ANLISIS DE ORINA Qu es un anlisis de orina y qu muestra?

Un anlisis de orina comprende una serie de exmenes bioqumicos y microscpicos que ayudan a descubrir infecciones del tracto urinario, enfermedades renales y de otros rganos que motivan la aparicin de elementos anormales en la orina o en la sangre. El anlisis de orina puede detectar enfermedades, que en ocasiones no presentan signos significativos u otros sntomas evidentes y no han sido detectadas por el propio paciente. Adems, un anlisis de orina es, habitualmente, parte rutinaria de un examen mdico general. Son muchas las enfermedades que se pueden encontrar al realizar un anlisis de orina: diabetes, distintas enfermedades del rin, infecciones crnicas del tracto urinario... Un tipo de anlisis de orina es el que se realiza gracias a una tirita qumica o "tira reactiva". Es una tira de celulosa impregnada de sustancias qumicas que sirve para detectar la presencia de protenas, glucosa, bacterias u otras sustancias en la orina. Este sistema permite obtener los resultados en menos de un minuto. Segn las sustancias que existan en la orina, la tira cambia de color (como en las tpicas pruebas de embarazo). Los colores que van apareciendo le sirven al mdico para conocer si el paciente tiene o no infecciones o enfermedades y cules son. Estas tiritas pueden ser utilizadas, por ejemplo, para determinar el pH de la orina, la densidad, si existen protenas, glucosa, sangre o glbulos blancos en la orina. El mtodo es muy simple; se ponen gotas de orina del paciente sobre la tira y se espera a que stas reaccionen con los productos qumicos impregnados en la misma. Es una prueba muy rpida y muy fcil de hacer. Adems, es la manera ms barata y eficaz para analizar la orina. Qu es un anlisis de orina bajo el microscopio? Para realizar un anlisis ms exhaustivo de orina que el obtenido con la tira reactiva se puede utilizar un microscopio. Para realizar esta prueba, el especialista prepara una muestra de orina del paciente y la coloca en una fina lmina de cristal para observarla a travs del microscopio. En primer lugar, se examina la muestra con el microscopio a baja potencia para identificar la existencia de sustancias extraas de mayor tamao. Posteriormente, se aumenta la potencia del microscopio para identificar clulas extraas, bacterias, microbios, etc. Qu debe hacer el paciente? Es fundamental tomar una muestra limpia de la orina. Para tomar una muestra limpia se deben seguir dos reglas sencillas:

Asearse (lavarse los genitales con agua y jabn) antes de recoger la orina en el bote estril para anlisis, y Recoger lquido de la mitad del chorro. Es decir, hay que tirar la primera parte del chorro antes de recoger la muestra.

Se recomienda recoger aproximadamente unos 30 mililitros de orina. No obstante, el especialista puede pedir ms cantidad si desea realizar un mayor nmero de pruebas. Normalmente, el frasco est envuelto en una bolsa de plstico que garantiza que est estril. Si no es as, hay que asegurarse de que el frasco est completamente limpio antes de llenarlo de orina. Si puede ser, se debe recoger la primera orina despus de levantarse por la maana. La primera orina del da es la ms concentrada y la que tiene mayor probabilidad de mostrar anomalas. Si me hago un anlisis, cules son los valores normales? Una vez realizado un anlisis de orina hay que esperar a los resultados para saber en qu estado se encuentra el paciente. Lo lgico y ms aconsejable es que su mdico le explique cules han sido los resultados de las pruebas, tanto si stos han sido negativos como positivos. No obstante, no est de ms que expliquemos, de forma general, qu se puede esperar de unos anlisis de orina.

El color de la orina puede variar de ms claro a ms oscuro La densidad de la orina debe fluctuar entre 1.006 y 1.030 El pH de la orina suele fluctuar entre 4,6 y 8,0 con un promedio de 6,0

Normalmente, no hay glbulos rojos o blancos en la orina ni se detecta la presencia de bilirrubina ni de hemoglobina en la orina.

Resultados de los anlisis El color normal de la orina debe ser claro. Si la orina presenta un color poco usual se recomienda consultar al mdico. Un color muy oscuro (amarillo oscuro o rojizo) puede llamar la atencin sobre enfermedades del sistema urinario.

Si la densidad de la orina es superior o inferior al margen normal o si no vara en funcin del momento del da en el que se haga la prueba quiere decir que hay algn problema en el los riones y el mdico har las pruebas oportunas en cada caso. Del mismo modo, el pH de la orina debe estar entre los valores citados. Si el nivel de glucosa y cuerpos cetnicos en sangre es normal no se detecta ninguna anomala en un anlisis de orina, pero si los niveles en sangre son muy altos, se pueden detectar en la orina. La presencia de glucosa en la orina puede significar que el paciente es diabtico. Por tanto, en estos casos el mdico debe realizar otra serie de pruebas que lo confirmen. Encontrar protenas en la orina puede ser sntoma de la existencia de alguna enfermedad renal. Cuando se encuentra sangre en la orina puede ser indicio de una enfermedad del tracto urinario. Qu significa que se detecten glbulos rojos y blancos en la orina? Los glbulos rojos pueden aparecer en la sangre a travs de la vagina en pocas de menstruacin en la mujer, por problemas en la vejiga, por daos en los riones, por tumores en el sistema urinario, por piedras en el rin o por infecciones del sistema urinario, entre otros motivos. Por tanto, si se detectan glbulos rojos en un anlisis de orina se deben realizar otras pruebas para detectar la causa que lo ha provocado. Asimismo, la presencia de glbulos blancos en la orina (generalmente relacionada con la presencia de pus) puede significar que hay alguna infeccin de orina, algn problema en los riones, la vejiga, la uretra, los urteres o cualquier otra afeccin del sistema urinario.

Pruebas Alternativas en Examen General de Orina

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Indice 1. Introduccin 2. Anatoma del rin 3. Fisiologa Renal 4. Formacin de la Orina 5. Introduccin y utilidad clnica del anlisis de orina 6. Resumen y explicacin de las tiras reactivas. 1. Introduccin El examen general de orina (EGO) es una prueba de gran importancia para el clnico y para el paciente mismo, sin embargo esta rea, al igual que la del coprologico, son vistas con cierto recelo, esto se debe al tipo de muestra que en ellas se analizan. Para algunos qumicos, no pasa de ser una simple rutina engorrosa, donde lo nico que se puede realizar es la lectura de tiras y la vista al microscopio, pero el uroanlisis es algo ms que la simple impregnacin de la tira y la observacin del sedimento, es la

aplicacin de todos nuestros conocimientos y el empleo de todos nuestros recursos dentro del laboratorio para proporcionar al mdico y al paciente resultados de y con calidad. Este trabajo no pretende abarcar todas las pruebas alternativas, solamente aquellas que debido a su importancia es preciso confirmar o descartar por un mtodo ms especifico, as mismo, se piensa que los reactivos aqu empleados se tienen en todos los laboratorios. Claro que en cada laboratorio se pueden implementar otras tcnicas de acuerdo a sus recursos y necesidades. 2. Anatoma del rin Anatoma macroscpica Los riones son rganos pares situados en la pared posterior del abdomen a ambos lados de la columna vertebral. Debajo de la cpsula de tejido fibroso que incluye los riones se ubica la corteza, que contiene los glomrulos. La porcin interna del rin, la mdula, contiene los tubos colectores. La pelvis renal disminuye rpidamente su calibre y se une dentro del urter. Cada urter desciende al abdomen al costado de la columna vertebral para unirse en la vejiga. La vejiga provee un almacenamiento temporal de orina,que es eventualmente vertida a travs de la uretra al exterior. Anatoma microscpica Cada rin esta constituido por aproximadamente 1 milln de unidades funcionales, o nefronas. La nefrona comienza con el glomrulo, que es un penacho de capilares que se forman desde la arteriola aferente (entrada) y son drenados por la arteriola eferente de menor tamao (salida). El glomrulo esta rodeado por la cpsula de Bowman, la cual esta formada por la porcin final dilatada ciega del tbulo renal. El tbulo contorneado proximal recorre un curso tortuoso a travs de la corteza, entrando en la mdula y formando primero la rama descendente del asa de Henle y luego la rama ascendente del asa de Henle. La seccin gruesa de la rama ascendente del asa de Henle vuelve a entrar en la corteza, formando el tbulo contorneado distal. La salida de dos o ms tbulos dstales marca el comienzo de un tbulo colector. Como los tbulos colectores descienden a travs de la corteza y mdula, reciben el efluente de una docena o ms tbulos dstales. Los tbulos colectores se unen y aumentan su tamao as como pasan hacia abajo en la mdula. Los tbulos de cada pirmide se unen para formar un tbulo central, el cual vaca a travs de la papila en unos clices menores, eventualmente evacuando en la pelvis renal. 3. Fisiologa Renal El rin es el principal regulador de todos los fluidos corporales y es primariamente responsable de mantener la homeostasis, o equilibrio entre fluido y electrolitos en el organismo. El rin tiene seis funciones principales: 1. Formacin de la orina 2. Regulacin del equilibrio hidroelectroltico 3. Regulacin del equilibrio cido-base 4. Excrecin de los productos de desecho del metabolismo proteico

5. Funcin hormonal 6. Conservacin proteica El rin es capaz de efectuar estas funciones complejas porque aproximadamente el 25% del volumen de sangre bombeado por el corazn en la circulacin sistmica circula a travs de los riones; por lo tanto los riones, que constituyen cerca del 0.5% del peso total del cuerpo, reciben un cuarto de la salida cardaca. 4. Formacin de la Orina La funcin principal de los riones es la remocin de productos potencialmente txicos y es realizada mediante la formacin de la orina. Los procesos bsicos involucrados en la formacin de la orina son filtracin, reabsorcin y secrecin. Los riones filtran grandes volmenes de plasma, reabsorben la mayora de lo que es filtrado, y queda para la eliminacin una solucin concentrada de desechos metablicos llamada orina. En individuos sanos, altamente sensibles a fluctuaciones de la dieta e ingesta de fluido y electrolito, los riones compensan cualquier cambio variando el volumen y la consistencia de la orina. Filtracin glomerular. Por los riones pasan entre 1000 y 1500 mL de sangre por minuto. El glomrulo tiene una membrana basal semipermeable que permite el libre pasaje de agua y electrolitos pero es relativamente impermeable a molculas grandes. En los capilares glomerulares la presin hidrosttica es aproximadamente tres veces mayor que la presin en otros capilares. Como resultado de esta gran presin, las sustancias son filtradas a travs de la membrana semipermeable en la cpsula de Bowman a una velocidad aproximada de 130 mL/min; esto es conocido como la velocidad de filtracin glomerular (IFG). Las clulas y protenas plasmticas de gran peso molecular son incapaces de pasar a travs de la membrana semipermeable. Por lo tanto el filtrado glomerular es esencialmente plasma sin las protenas. La IFG es un parmetro extremadamente importante en el estudio de la fisiologa renal y en la evaluacin clnica de la funcin renal. En una persona promedio sana, se forman por da ms de 187,000 mL de filtrado. La excrecin normal de orina es alrededor de 1500 mL por da, lo cual es solamente cerca del 1% de la cantidad de filtrado formado; por lo tanto el otro 99% debe ser reabsorbido. Tbulo proximal. Las clulas del tbulo proximal desempean una variedad de roles fisiolgicos. Aproximadamente un 80% de la sal y el agua son reabsorbidos desde el filtrado glomerular en el tbulo proximal. Toda la glucosa filtrada y la mayora de los aminocidos filtrados son normalmente reabsorbidos aqu. Las protenas de bajo peso molecular, urea, cido rico, bicarbonato, fosfato, cloruro, potasio, magnesio, y calcio son reabsorbidos en grado variable. Una variedad de cidos orgnicos y bases, as como tambin iones hidrgeno y amonaco, se secretan en el fludo tubular por las clulas tubulares. En condiciones normales, la glucosa no es excretada en la orina; todo lo que filtra se reabsorbe. Cuando la concentracin plasmtica de glucosa esta aumentada por encima de un nivel crtico, llamado el umbral plasmtico renal, el mximo tubular para la glucosa es excedido y la glucosa aparece en la orina. Cuanto

mayor es la concentracin de glucosa plasmtica, mayor es la cantidad excretada por la orina. Tambin existen umbrales renales plasmticos para los iones fosfato y bicarbonato. La mayora de la energa metablica consumida por el rin es usada para promover la reabsorcin activa. La reabsorcin activa puede producir el movimiento neto de una sustancia contra un gradiente de concentracin o elctrico y por lo tanto requiere gasto de energa para el transporte de clulas. La reabsorcin activa de glucosa, aminocidos, protenas de bajo peso molecular, cido rico, sodio, potasio, magnesio, calcio, cloruro, y bicarbonato est regulada por el rin de acuerdo a los niveles de estas sustancias en la sangre y la necesidad del organismo. La reabsorcin pasiva ocurre cuando una sustancia se mueve por difusin simple como el resultado del gradiente de concentracin qumico o elctrico, y no se involucra energa celular en el proceso. El agua, urea, y cloruro son reabsorbido de esta forma. La secrecin tubular, que transporta sustancias al lumen tubular (que es, en la direccin opuesta a la reabsorcin tubular), tambin puede ser un proceso activo o pasivo. Las sustancias que son transportadas desde la sangre a los tbulos y excretadas en la orina incluyen potasio, iones hidrgeno, amonaco, cido rico, y ciertas drogas, como la penicilina. Asa de Henle. La rama descendente del asa de Henle es altamente permeable al agua. En la mdula, el asa de Henle desciende en un medio progresivamente hipertnico a medida que se aproxima a la papila. Hay una reabsorcin pasiva de agua en respuesta a este gradiente osmtico, dejando la presunta orina altamente concentrada en el fondo del asa. La rama ascendente es relativamente impermeable al pasaje de agua pero reabsorbe activamente sodio y cloruro. Este segmento de la nefrona es a menudo llamado el segmento dilutorio porque la remocin de la sal con pequeo pasaje de agua desde el contenido tubular disminuye la sal y la concentracin osmtica, diluyendo en efecto el fludo tubular. La rama gruesa ascendente del asa de Henle transfiere cloruro de sodio activamente desde su luz hacia el fludo intersticial. El fludo tubular en su luz se vuelve hipotnico, y el fludo intersticial hipertnico. Este fenmeno es conocido como el mecanismo de contracorriente. Una serie de mecanismos sucesivos producen el atrapamiento de cloruro de sodio en el lquido intersticial medular. A medida que el fludo isotnico en la rama descendente alcanza el rea en la cual la rama ascendente est bombeando sodio, se vuelve ligeramente hipertnico debido al movimiento de agua al intersticio hipertnico. El primer paso se repite, y nuevamente, a medida que se agrega ms cloruro de sodio al intersticio por la rama ascendente, se produce una mayor salida de agua de la rama descendente. Tbulo contorneado distal. Una pequea fraccin de sodio, cloruro, y agua filtrado es reabsorbida en el tbulo distal. El tbulo distal responde a la hormona antidiurtica (HAD), y por lo tanto su permeabilidad al agua es alta en presencia de la hormona y baja en su ausencia. El potasio puede ser reabsorbido o segregado en el tbulo distal. La Aldosterona estimula la reabsorcin de sodio y la secrecin de potasio en el tbulo distal. Tambin

ocurre la secrecin de hidrgeno, amonaco, y cido rico y la reabsorcin de bicarbonato, pero hay un pequeo transporte de sustancias orgnicas. Este segmento de la nefrona tiene una baja permeabilidad a la urea. Tbulo colector. La HAD controla la permeabilidad del agua del tbulo colector a lo largo de su longitud. En la presencia de la hormona, el fludo tubular hipotnico entra al tbulo perdiendo agua. El sodio y cloruro son reabsorbidos por el tbulo colector, con el transporte de sodio estimulado por la aldosterona. El potasio, hidrgeno, y amonio son tambin reabsorbidos por el tbulo colector. Cuando la HAD est presente, la velocidad de reabsorcin de agua excede la velocidad de reabsorcin de soluto, y la concentracin de sodio y cloruro aumenta en la presunta orina. El tbulo colector es relativamente impermeable a la urea. 5. Introduccin y utilidad clnica del anlisis de orina El anlisis de orina realizado en el laboratorio clnico, puede proporcionar una informacin amplia, variada y til del rin de un individuo y de las enfermedades sistmicas que pueden afectar este rgano excretor. Por medio de este anlisis, es posible elucidar tanto desrdenes estructurales (anatmicos) como desrdenes funcionales (fisiolgicos) del rin y del tracto urinario inferior, sus causas, y su pronstico. La realizacin cuidadosa del examen de orina, por parte del laboratorio, ayuda al diagnstico diferencial de numerosas enfermedades del sistema urinario. Usualmente, los datos de laboratorio obtenidos por medio de este anlisis, se logran sin dolor, dao o tensin para el paciente. Esta es la razn por la cual, la realizacin e interpretacin correcta del anlisis de orina, por parte del laboratorio permanecer siempre como una herramienta esencial ms no definitiva de la prctica clnica. Tabla 1. Principales constituyentes de la orina.
Constituyente Albmina Calcio Creatinina Glucosa Cetonas Osmolaridad Fsforo Potasio pH Sodio Gravedad especfica Valor < 15-30 mg/l 100-240 mg/24h 1.2-1.8 mg/24h <300 mg/l <50 mg/l >600 mOsm/l 0.9-1.3 g/24h 30-100 mEq/24h 4.7-7.8 85-250 mEq/24h 1.005-1.030

Bilirrubina total Proteinas totales Nitrgeno ureico Acido rico Urobilingeno

No detectada <150 mg/24h 7-16 g/24h 300-800 mg/24h <1 mg/l

En la actualidad, se practican tres tipos de exmenes de orina: anlisis de orina por tira hmeda, empleado generalmente por los mdicos en sus consultorios y por los pacientes en sus casas; tamizaje de anlisis hmedo de la orina, comnmente llamado anlisis bsico o rutinario de orina; y citodiagnstico de la orina, que es una evaluacin citolgica especializada del sedimento urinario que correlaciona con los anlisis realizados por medio de la tira reactiva. El anlisis de orina realizado con la tira hmeda es un ensayo de primera etapa para la deteccin y monitoreo de pacientes con anormalidades qumicas. Los pacientes diabticos a menudo monitorean permanentemente su propia enfermedad, buscando signos de glucosuria, proteinuria, e infecciones del tracto urinario, mediante pruebas realizadas en casa. El anlisis de orina hmedo o rutinario, proporciona, a costos razonables, un tamizaje adecuado para la deteccin de anormalidades qumicas y morfolgicas presentes en la orina. Este procedimiento se compone de dos partes:

1. Un anlisis macroscpico, en el cual se determinan las caractersticas fisicoqumicas (apariencia, gravedad especfica y la medicin de los constituyentes qumicos por medio de la tira), y 2. Un examen microscpico del sedimento, en campo claro o contraste de fases, para verificar hematuria, piuria, cilindruria, cristaluria, y otros signos. Por medio de este simple examen de orina, un uromicroscopista experimentado puede detectar y monitorear muchas entidades que afectan al rin y al tracto urinario inferior.
Recientemente, el citodiagnstico de la orina ha ganado aceptacin mdica como un anlisis nuevo, ms sensible en el diagnstico de ciertas patologas renales y del tracto urinario inferior. s Como este anlisis requiere mayor inversin de tiempo debido a la preparacin de coloraciones, debe reservarse para pacientes sintomticos con enfermedades renales, del tracto urinario inferior, o neoplasias. Este anlisis especializado ha reemplazado al recuento de Addis, proporcionando informacin secuencial del progreso o regresin de muchas de las patologas renales o del tracto urinario inferior. El propsito de este trabajo, dirigido a los laboratorios mdicos o de qumica clnica, es describir en forma breve las metodologas mas comnmente empleadas en la mayora de los laboratorios de anlisis rutinarios, haciendo nfasis en las responsabilidades del laboratorio de uroanlisis en los siguientes aspectos: 1. 2. Procedimientos y equipos ms comunes;

3. Calidad de los reactivos; 4. Sensibilidad, especificidad, y limitaciones de cada procedimiento; 5. Pruebas confirmatorias; 6. Identificacin precisa de los elementos principales del sedimento urinario empleando microscopa de campo claro; y 7. Control de calidad. 6. Resumen y explicacin de las tiras reactivas. Las tiras reactivas para uroanlisis son bases plsticas en las que hay adheridas diversas reas reactivas para determinar Glucosa, Bilirrubina, Acetona, Densidad, Sangre, pH, Protenas, Urobilingeno, Nitritos y Leucocitos. Los resultados obtenidos por las tiras reactivas proporcionan informacin referente al metabolismo de carbohidratos, funcin heptica y renal, balance cido-base e infecciones del tracto urinario. Las tiras reactivas estn listas para utilizarse y son desechables. Estas pueden ser ledas visualmente aunque existen presentaciones que pueden ser ledas instrumentalmente empleando autoanalizadores . Las instrucciones deben seguirse correctamente, considerando los tiempos de espera para cada parmetro as como los procedimientos de almacenaje y utilizacin. Los valores mnimos detectables para la mayora de las tiras se resume en la tabla correspondiente. Tabla 2. Valores mnimos detectables de las tiras reactivas.
Area Reactiva Glucosa Bilirrubina Cetona Sangre Protena Nitritos Leucocitos pH Densidad Tiempo de Lectura 30" 30" 40" 60" 60" 60" 2 60" 45" Sensibilidad 75-125 mg/dL 0.4-0.8 mg/dL 5-10 mg/dL (Acido acetoactico) 0.015-0.062 mg/dL (Hemoglobina) 15-30 mg/dL (Albumina) 0.06-0.1 mg/dL (Ion nitrito) 5-15 clulas /m L 5.0-8.5 1.000-1.030

Es posible no encontrar una concordancia exacta entre el resultado determinado de manera visual sobre las tiras y el resultado obtenido por algn mtodo instrumental, esto puede deberse a las diferencias inherentes entre la percepcin del ojo humano y el sistema ptico del instrumento.

Determinacin de glucosa en orina. Principio. La Glucosa es una sustancia reductora, la cual reduce al sulfato cprico (color azul), de la solucin de Benedict , a xido cprico (color rojo) que es insoluble. Mtodo.

1. Con una pipeta depositar 5 mL de solucin de Benedict en un tubo de ensayo. 2. Agregar 8 gotas de orina y mezclar completamente. 3. Hervir durante 2 minutos. 4. Dejar enfriar la muestra a temperatura ambiente. 5. Examinar la muestra y ver si existe algn cambio de color o precipitado.
Resultados.
Color Azul Verde Verde con precipitado amarillo Desde amarillo hasta verde oscuro Castao Desde anaranjado hasta rojo ladrillo Resultado Negativo Huellas + ++ +++ ++++ Concentracin mmol/L* 0 14 28 56 83 111 ms

*Dividir el resultado por 0.055 para convertirlo a mg/dL Reactivo de Benedict. 1. Disolver los cristales de sulfato cprico por calentamiento en 100 mL de agua destilada (solucin A) 2. Disolver el citrato trisdico y el carbonato sdico aproximadamente en 800 mL de agua (Solucin B). 3. Aadir la solucin A lentamente a la solucin B, removienco constantemente. 4. Completar a 1000 mL. Determinacin de pigmentos biliares en orina. Principio. Cuando se aade yodo (solucin de Lugol) a la orina que contenga pigmentos biliares se forma un complejo verde. Mtodo 1. 2. Colocar 4 mL de orina Agregar 4 gotas de lugol

3.

Agitar el Tubo y Observar.

Resultados. Verde Plido: + Verde Intenso: ++ Amarillo Castao: Negativo Determinacin de urobilingeno en orina. Fundamento: El p-dimetilaminobenzaldehdo reacciona con el urobilingeno para dar un complejo rojo. Mtodo. 1. Colocar 5 mL de orina recin emitida (la orina vieja contiene uurobilina, no detectable). 2. Aadir 0.5 mL del reactivo de Ehrlich 3. Reposar 5 minutos y observar. Resultados Color Rojo Intenso: Urobilingeno aumentado. Color de Rosa a Castao tnue: Normal. Reactivo de Ehrlich. p-Dimetilaminobenzaldehdo 2g HCl concentrado 20 mL Agua destilada 80 mL 1. 2. Mezclar el p-dimetilaminobenzaldehdo con el agua y A continuacin ir adicionando el HCl lentemente y con cuidado.

Determinacin de sangre en orina. Tcnica del Sulfato de Amonio Fundamento. Aprovechando la diferencia de solubilidad de la hemoglobina y la mioglobina es posible diferenciar una de otra, cuando en un anlisis en tira se tiene sangre positiva y el sedimento muestra escasos o ausencia de stos. Mtodo 1. Saturar la orina al 80% con sulfato de amonio (2.8 g + 5 mL de orina). 2. Mezclar hasta disolucin total. 3. Filtrar o centrifugar para separar la hemoglobina que precipita, de la mioglobina que queda en solucin.

Existen diversos cidos que pueden usarse para precipitar protenas, stos son: cido sulfosaliclico, tricloroactico, ntrico y actico. Sin embargo el de eleccin es el cido sulfosaliclico debido a que no requiere de calentamiento para su precipitacin. El

mtodo que se emplear usa el reactivo de Exton, que lo hace ms sensible y especifico para todas las protenas. Mtodo. 1. 2. 3. Centrifugar una alcuota de orina y utilizar el sobrenadante. Mezclar volmenes iguales de orina centrifugada y reactivo de Exton. Observar resultados.

Reactivo de Exton

1. Disolver 88g de sulfato de sodio en 600 mL de agua destilada con ayuda de calor. 2. Agregar 50g de cido sulfosaliclico y llevar a 1000 mL
Resultados.
No existe turbidez Se percibe turbidez slo sobre fondo negro Se observa turbidez pero no granular Se observa turbidez y es granular Turbidez considerable y existe aglutinacin Nube densa con masas aglutinadas de gran tamao que pueden solidificarse Negativa Trazas + ++ +++ ++++

7. Bibliografa Argeri-Lopardo. Anlisis de orina. Fundamentos y Prctica. Editorial Mdica Panamericana. Argentina 1993. Bernard, J.H. Diagnstico y Tratamientos Clnicos por el laboratorio. 8 Ed. Editorial Salvat, espaa 1988. Graff, S.L. anlisis de Orina, Atlas Color. Editorial Mdica Panamericana. Argentina 1987. Serie Paltex. Manual de Tcnicas Bsicas para un laboratorio de Salud. O.P.S. 1983. Strasinger, S.K. Lquidos Corporales y Anlisis de Orina. Manual Moderno, Mxico 1991.

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Indice 1. Introduccin 2. Anatoma del rin 3. Fisiologa Renal 4. Formacin de la Orina 5. Introduccin y utilidad clnica del anlisis de orina 6. Resumen y explicacin de las tiras reactivas. 1. Introduccin El examen general de orina (EGO) es una prueba de gran importancia para el clnico y para el paciente mismo, sin embargo esta rea, al igual que la del coprologico, son vistas con cierto recelo, esto se debe al tipo de muestra que en ellas se analizan. Para algunos qumicos, no pasa de ser una simple rutina engorrosa, donde lo nico que se puede realizar es la lectura de tiras y la vista al microscopio, pero el uroanlisis es algo ms que la simple impregnacin de la tira y la observacin del sedimento, es la aplicacin de todos nuestros conocimientos y el empleo de todos nuestros recursos dentro del laboratorio para proporcionar al mdico y al paciente resultados de y con calidad. Este trabajo no pretende abarcar todas las pruebas alternativas, solamente aquellas que debido a su importancia es preciso confirmar o descartar por un mtodo ms especifico, as mismo, se piensa que los reactivos aqu empleados se tienen en todos los laboratorios. Claro que en cada laboratorio se pueden implementar otras tcnicas de acuerdo a sus recursos y necesidades. 2. Anatoma del rin Anatoma macroscpica Los riones son rganos pares situados en la pared posterior del abdomen a ambos lados de la columna vertebral. Debajo de la cpsula de tejido fibroso que incluye los riones se ubica la corteza, que contiene los glomrulos. La porcin interna del rin, la mdula, contiene los tubos colectores. La pelvis renal disminuye rpidamente su calibre y se une dentro del urter. Cada urter desciende al abdomen al costado de la columna vertebral para unirse en la vejiga. La vejiga provee un almacenamiento temporal de orina,que es eventualmente vertida a travs de la uretra al exterior. Anatoma microscpica Cada rin esta constituido por aproximadamente 1 milln de unidades funcionales, o nefronas. La nefrona comienza con el glomrulo, que es un penacho de capilares que se forman desde la arteriola aferente (entrada) y son drenados por la arteriola eferente de menor tamao (salida). El glomrulo esta rodeado por la cpsula de Bowman, la cual esta formada por la porcin final dilatada ciega del tbulo renal. El tbulo contorneado proximal recorre un curso tortuoso a travs de la corteza, entrando en la mdula y formando primero la rama descendente del asa de Henle y

luego la rama ascendente del asa de Henle. La seccin gruesa de la rama ascendente del asa de Henle vuelve a entrar en la corteza, formando el tbulo contorneado distal. La salida de dos o ms tbulos dstales marca el comienzo de un tbulo colector. Como los tbulos colectores descienden a travs de la corteza y mdula, reciben el efluente de una docena o ms tbulos dstales. Los tbulos colectores se unen y aumentan su tamao as como pasan hacia abajo en la mdula. Los tbulos de cada pirmide se unen para formar un tbulo central, el cual vaca a travs de la papila en unos clices menores, eventualmente evacuando en la pelvis renal. 3. Fisiologa Renal El rin es el principal regulador de todos los fluidos corporales y es primariamente responsable de mantener la homeostasis, o equilibrio entre fluido y electrolitos en el organismo. El rin tiene seis funciones principales: 1. Formacin de la orina 2. Regulacin del equilibrio hidroelectroltico 3. Regulacin del equilibrio cido-base 4. Excrecin de los productos de desecho del metabolismo proteico 5. Funcin hormonal 6. Conservacin proteica El rin es capaz de efectuar estas funciones complejas porque aproximadamente el 25% del volumen de sangre bombeado por el corazn en la circulacin sistmica circula a travs de los riones; por lo tanto los riones, que constituyen cerca del 0.5% del peso total del cuerpo, reciben un cuarto de la salida cardaca. 4. Formacin de la Orina La funcin principal de los riones es la remocin de productos potencialmente txicos y es realizada mediante la formacin de la orina. Los procesos bsicos involucrados en la formacin de la orina son filtracin, reabsorcin y secrecin. Los riones filtran grandes volmenes de plasma, reabsorben la mayora de lo que es filtrado, y queda para la eliminacin una solucin concentrada de desechos metablicos llamada orina. En individuos sanos, altamente sensibles a fluctuaciones de la dieta e ingesta de fluido y electrolito, los riones compensan cualquier cambio variando el volumen y la consistencia de la orina. Filtracin glomerular. Por los riones pasan entre 1000 y 1500 mL de sangre por minuto. El glomrulo tiene una membrana basal semipermeable que permite el libre pasaje de agua y electrolitos pero es relativamente impermeable a molculas grandes. En los capilares glomerulares la presin hidrosttica es aproximadamente tres veces mayor que la presin en otros capilares. Como resultado de esta gran presin, las sustancias son filtradas a travs de la membrana semipermeable en la cpsula de Bowman a una velocidad aproximada de 130 mL/min; esto es conocido como la velocidad de filtracin glomerular (IFG). Las clulas y protenas plasmticas de gran peso molecular son incapaces de pasar a travs de la membrana semipermeable. Por lo

tanto el filtrado glomerular es esencialmente plasma sin las protenas. La IFG es un parmetro extremadamente importante en el estudio de la fisiologa renal y en la evaluacin clnica de la funcin renal. En una persona promedio sana, se forman por da ms de 187,000 mL de filtrado. La excrecin normal de orina es alrededor de 1500 mL por da, lo cual es solamente cerca del 1% de la cantidad de filtrado formado; por lo tanto el otro 99% debe ser reabsorbido. Tbulo proximal. Las clulas del tbulo proximal desempean una variedad de roles fisiolgicos. Aproximadamente un 80% de la sal y el agua son reabsorbidos desde el filtrado glomerular en el tbulo proximal. Toda la glucosa filtrada y la mayora de los aminocidos filtrados son normalmente reabsorbidos aqu. Las protenas de bajo peso molecular, urea, cido rico, bicarbonato, fosfato, cloruro, potasio, magnesio, y calcio son reabsorbidos en grado variable. Una variedad de cidos orgnicos y bases, as como tambin iones hidrgeno y amonaco, se secretan en el fludo tubular por las clulas tubulares. En condiciones normales, la glucosa no es excretada en la orina; todo lo que filtra se reabsorbe. Cuando la concentracin plasmtica de glucosa esta aumentada por encima de un nivel crtico, llamado el umbral plasmtico renal, el mximo tubular para la glucosa es excedido y la glucosa aparece en la orina. Cuanto mayor es la concentracin de glucosa plasmtica, mayor es la cantidad excretada por la orina. Tambin existen umbrales renales plasmticos para los iones fosfato y bicarbonato. La mayora de la energa metablica consumida por el rin es usada para promover la reabsorcin activa. La reabsorcin activa puede producir el movimiento neto de una sustancia contra un gradiente de concentracin o elctrico y por lo tanto requiere gasto de energa para el transporte de clulas. La reabsorcin activa de glucosa, aminocidos, protenas de bajo peso molecular, cido rico, sodio, potasio, magnesio, calcio, cloruro, y bicarbonato est regulada por el rin de acuerdo a los niveles de estas sustancias en la sangre y la necesidad del organismo. La reabsorcin pasiva ocurre cuando una sustancia se mueve por difusin simple como el resultado del gradiente de concentracin qumico o elctrico, y no se involucra energa celular en el proceso. El agua, urea, y cloruro son reabsorbido de esta forma. La secrecin tubular, que transporta sustancias al lumen tubular (que es, en la direccin opuesta a la reabsorcin tubular), tambin puede ser un proceso activo o pasivo. Las sustancias que son transportadas desde la sangre a los tbulos y excretadas en la orina incluyen potasio, iones hidrgeno, amonaco, cido rico, y ciertas drogas, como la penicilina. Asa de Henle. La rama descendente del asa de Henle es altamente permeable al agua. En la mdula, el asa de Henle desciende en un medio progresivamente hipertnico a medida que se aproxima a la papila. Hay una reabsorcin pasiva de agua en respuesta a este gradiente osmtico, dejando la presunta orina altamente concentrada en el fondo del asa. La rama ascendente es relativamente impermeable al pasaje de agua pero reabsorbe activamente sodio y cloruro. Este segmento de la nefrona es a menudo

llamado el segmento dilutorio porque la remocin de la sal con pequeo pasaje de agua desde el contenido tubular disminuye la sal y la concentracin osmtica, diluyendo en efecto el fludo tubular. La rama gruesa ascendente del asa de Henle transfiere cloruro de sodio activamente desde su luz hacia el fludo intersticial. El fludo tubular en su luz se vuelve hipotnico, y el fludo intersticial hipertnico. Este fenmeno es conocido como el mecanismo de contracorriente. Una serie de mecanismos sucesivos producen el atrapamiento de cloruro de sodio en el lquido intersticial medular. A medida que el fludo isotnico en la rama descendente alcanza el rea en la cual la rama ascendente est bombeando sodio, se vuelve ligeramente hipertnico debido al movimiento de agua al intersticio hipertnico. El primer paso se repite, y nuevamente, a medida que se agrega ms cloruro de sodio al intersticio por la rama ascendente, se produce una mayor salida de agua de la rama descendente. Tbulo contorneado distal. Una pequea fraccin de sodio, cloruro, y agua filtrado es reabsorbida en el tbulo distal. El tbulo distal responde a la hormona antidiurtica (HAD), y por lo tanto su permeabilidad al agua es alta en presencia de la hormona y baja en su ausencia. El potasio puede ser reabsorbido o segregado en el tbulo distal. La Aldosterona estimula la reabsorcin de sodio y la secrecin de potasio en el tbulo distal. Tambin ocurre la secrecin de hidrgeno, amonaco, y cido rico y la reabsorcin de bicarbonato, pero hay un pequeo transporte de sustancias orgnicas. Este segmento de la nefrona tiene una baja permeabilidad a la urea. Tbulo colector. La HAD controla la permeabilidad del agua del tbulo colector a lo largo de su longitud. En la presencia de la hormona, el fludo tubular hipotnico entra al tbulo perdiendo agua. El sodio y cloruro son reabsorbidos por el tbulo colector, con el transporte de sodio estimulado por la aldosterona. El potasio, hidrgeno, y amonio son tambin reabsorbidos por el tbulo colector. Cuando la HAD est presente, la velocidad de reabsorcin de agua excede la velocidad de reabsorcin de soluto, y la concentracin de sodio y cloruro aumenta en la presunta orina. El tbulo colector es relativamente impermeable a la urea. 5. Introduccin y utilidad clnica del anlisis de orina El anlisis de orina realizado en el laboratorio clnico, puede proporcionar una informacin amplia, variada y til del rin de un individuo y de las enfermedades sistmicas que pueden afectar este rgano excretor. Por medio de este anlisis, es posible elucidar tanto desrdenes estructurales (anatmicos) como desrdenes funcionales (fisiolgicos) del rin y del tracto urinario inferior, sus causas, y su pronstico. La realizacin cuidadosa del examen de orina, por parte del laboratorio, ayuda al diagnstico diferencial de numerosas enfermedades del sistema urinario. Usualmente, los datos de laboratorio obtenidos por medio de este anlisis, se logran sin dolor, dao o tensin para el paciente. Esta es la razn por la cual, la realizacin e interpretacin correcta del anlisis de orina, por parte del laboratorio permanecer siempre como una herramienta esencial ms no definitiva de la prctica clnica.

Tabla 1. Principales constituyentes de la orina.

Constituyente Albmina Calcio Creatinina Glucosa Cetonas Osmolaridad Fsforo Potasio pH Sodio Gravedad especfica Bilirrubina total Proteinas totales Nitrgeno ureico Acido rico Urobilingeno Valor < 15-30 mg/l 100-240 mg/24h 1.2-1.8 mg/24h <300 mg/l <50 mg/l >600 mOsm/l 0.9-1.3 g/24h 30-100 mEq/24h 4.7-7.8 85-250 mEq/24h 1.005-1.030 No detectada <150 mg/24h 7-16 g/24h 300-800 mg/24h <1 mg/l

En la actualidad, se practican tres tipos de exmenes de orina: anlisis de orina por tira hmeda, empleado generalmente por los mdicos en sus consultorios y por los pacientes en sus casas; tamizaje de anlisis hmedo de la orina, comnmente llamado anlisis bsico o rutinario de orina; y citodiagnstico de la orina, que es una evaluacin citolgica especializada del sedimento urinario que correlaciona con los anlisis realizados por medio de la tira reactiva. El anlisis de orina realizado con la tira hmeda es un ensayo de primera etapa para la deteccin y monitoreo de pacientes con anormalidades qumicas. Los pacientes diabticos a menudo monitorean permanentemente su propia enfermedad, buscando signos de glucosuria, proteinuria, e infecciones del tracto urinario, mediante pruebas realizadas en casa. El anlisis de orina hmedo o rutinario, proporciona, a costos razonables, un tamizaje adecuado para la deteccin de anormalidades qumicas y morfolgicas presentes en la orina. Este procedimiento se compone de dos partes:

1. Un anlisis macroscpico, en el cual se determinan las caractersticas fisicoqumicas (apariencia, gravedad especfica y la medicin de los constituyentes qumicos por medio de la tira), y 2. Un examen microscpico del sedimento, en campo claro o contraste de fases, para verificar hematuria, piuria, cilindruria, cristaluria, y otros signos.

Por medio de este simple examen de orina, un uromicroscopista experimentado puede detectar y monitorear muchas entidades que afectan al rin y al tracto urinario inferior. Recientemente, el citodiagnstico de la orina ha ganado aceptacin mdica como un anlisis nuevo, ms sensible en el diagnstico de ciertas patologas renales y del tracto urinario inferior. s Como este anlisis requiere mayor inversin de tiempo debido a la preparacin de coloraciones, debe reservarse para pacientes sintomticos con enfermedades renales, del tracto urinario inferior, o neoplasias. Este anlisis especializado ha reemplazado al recuento de Addis, proporcionando informacin secuencial del progreso o regresin de muchas de las patologas renales o del tracto urinario inferior. El propsito de este trabajo, dirigido a los laboratorios mdicos o de qumica clnica, es describir en forma breve las metodologas mas comnmente empleadas en la mayora de los laboratorios de anlisis rutinarios, haciendo nfasis en las responsabilidades del laboratorio de uroanlisis en los siguientes aspectos: 1. Procedimientos y equipos ms comunes; 2. 3. Calidad de los reactivos; 4. Sensibilidad, especificidad, y limitaciones de cada procedimiento; 5. Pruebas confirmatorias; 6. Identificacin precisa de los elementos principales del sedimento urinario empleando microscopa de campo claro; y 7. Control de calidad. 6. Resumen y explicacin de las tiras reactivas. Las tiras reactivas para uroanlisis son bases plsticas en las que hay adheridas diversas reas reactivas para determinar Glucosa, Bilirrubina, Acetona, Densidad, Sangre, pH, Protenas, Urobilingeno, Nitritos y Leucocitos. Los resultados obtenidos por las tiras reactivas proporcionan informacin referente al metabolismo de carbohidratos, funcin heptica y renal, balance cido-base e infecciones del tracto urinario. Las tiras reactivas estn listas para utilizarse y son desechables. Estas pueden ser ledas visualmente aunque existen presentaciones que pueden ser ledas instrumentalmente empleando autoanalizadores . Las instrucciones deben seguirse correctamente, considerando los tiempos de espera para cada parmetro as como los procedimientos de almacenaje y utilizacin. Los valores mnimos detectables para la mayora de las tiras se resume en la tabla correspondiente. Tabla 2. Valores mnimos detectables de las tiras reactivas.
Area Reactiva Tiempo de Lectura Sensibilidad

Glucosa Bilirrubina Cetona Sangre Protena Nitritos Leucocitos pH Densidad

30" 30" 40" 60" 60" 60" 2 60" 45"

75-125 mg/dL 0.4-0.8 mg/dL 5-10 mg/dL (Acido acetoactico) 0.015-0.062 mg/dL (Hemoglobina) 15-30 mg/dL (Albumina) 0.06-0.1 mg/dL (Ion nitrito) 5-15 clulas /m L 5.0-8.5 1.000-1.030

Es posible no encontrar una concordancia exacta entre el resultado determinado de manera visual sobre las tiras y el resultado obtenido por algn mtodo instrumental, esto puede deberse a las diferencias inherentes entre la percepcin del ojo humano y el sistema ptico del instrumento. Determinacin de glucosa en orina. Principio. La Glucosa es una sustancia reductora, la cual reduce al sulfato cprico (color azul), de la solucin de Benedict , a xido cprico (color rojo) que es insoluble. Mtodo.

1. Con una pipeta depositar 5 mL de solucin de Benedict en un tubo de ensayo. 2. Agregar 8 gotas de orina y mezclar completamente. 3. Hervir durante 2 minutos. 4. Dejar enfriar la muestra a temperatura ambiente. 5. Examinar la muestra y ver si existe algn cambio de color o precipitado.
Resultados.
Color Azul Verde Verde con precipitado amarillo Desde amarillo hasta verde oscuro Castao Resultado Negativo Huellas + ++ +++ Concentracin mmol/L* 0 14 28 56 83

Desde anaranjado hasta rojo ladrillo

++++

111 ms

*Dividir el resultado por 0.055 para convertirlo a mg/dL Reactivo de Benedict. 1. Disolver los cristales de sulfato cprico por calentamiento en 100 mL de agua destilada (solucin A) 2. Disolver el citrato trisdico y el carbonato sdico aproximadamente en 800 mL de agua (Solucin B). 3. Aadir la solucin A lentamente a la solucin B, removienco constantemente. 4. Completar a 1000 mL. Determinacin de pigmentos biliares en orina. Principio. Cuando se aade yodo (solucin de Lugol) a la orina que contenga pigmentos biliares se forma un complejo verde. Mtodo 1. 2. 3. Colocar 4 mL de orina Agregar 4 gotas de lugol Agitar el Tubo y Observar.

Resultados. Verde Plido: + Verde Intenso: ++ Amarillo Castao: Negativo Determinacin de urobilingeno en orina. Fundamento: El p-dimetilaminobenzaldehdo reacciona con el urobilingeno para dar un complejo rojo. Mtodo. 1. Colocar 5 mL de orina recin emitida (la orina vieja contiene uurobilina, no detectable). 2. Aadir 0.5 mL del reactivo de Ehrlich 3. Reposar 5 minutos y observar. Resultados Color Rojo Intenso: Urobilingeno aumentado. Color de Rosa a Castao tnue: Normal. Reactivo de Ehrlich. p-Dimetilaminobenzaldehdo 2g HCl concentrado 20 mL Agua destilada 80 mL

1. 2.

Mezclar el p-dimetilaminobenzaldehdo con el agua y A continuacin ir adicionando el HCl lentemente y con cuidado.

Determinacin de sangre en orina. Tcnica del Sulfato de Amonio Fundamento. Aprovechando la diferencia de solubilidad de la hemoglobina y la mioglobina es posible diferenciar una de otra, cuando en un anlisis en tira se tiene sangre positiva y el sedimento muestra escasos o ausencia de stos. Mtodo 1. Saturar la orina al 80% con sulfato de amonio (2.8 g + 5 mL de orina). 2. Mezclar hasta disolucin total. 3. Filtrar o centrifugar para separar la hemoglobina que precipita, de la mioglobina que queda en solucin.

Existen diversos cidos que pueden usarse para precipitar protenas, stos son: cido sulfosaliclico, tricloroactico, ntrico y actico. Sin embargo el de eleccin es el cido sulfosaliclico debido a que no requiere de calentamiento para su precipitacin. El mtodo que se emplear usa el reactivo de Exton, que lo hace ms sensible y especifico para todas las protenas. Mtodo. 1. 2. 3. Centrifugar una alcuota de orina y utilizar el sobrenadante. Mezclar volmenes iguales de orina centrifugada y reactivo de Exton. Observar resultados.

Reactivo de Exton

1. Disolver 88g de sulfato de sodio en 600 mL de agua destilada con ayuda de calor. 2. Agregar 50g de cido sulfosaliclico y llevar a 1000 mL
Resultados.
No existe turbidez Se percibe turbidez slo sobre fondo negro Se observa turbidez pero no granular Se observa turbidez y es granular Turbidez considerable y existe aglutinacin Nube densa con masas aglutinadas de gran tamao que pueden solidificarse Negativa Trazas + ++ +++ ++++

7. Bibliografa Argeri-Lopardo. Anlisis de orina. Fundamentos y Prctica. Editorial Mdica

Panamericana. Argentina 1993. Bernard, J.H. Diagnstico y Tratamientos Clnicos por el laboratorio. 8 Ed. Editorial Salvat, espaa 1988. Graff, S.L. anlisis de Orina, Atlas Color. Editorial Mdica Panamericana. Argentina 1987. Serie Paltex. Manual de Tcnicas Bsicas para un laboratorio de Salud. O.P.S. 1983. Strasinger, S.K. Lquidos Corporales y Anlisis de Orina. Manual Moderno, Mxico 1991.