A aqicultura a servio da conservao

A produo de larvas de

caranguejo-u
em sistema de cultivo em mesocosmos

Por: Ubirat Assis Silva 1,2,* , Fabrcio Menezes1, Robson Ventura de Souza1,3, Antonio Coelho Neto1, Walter Antonio Boeger1,2, Antonio Ostrensky1,2
1- Instituto GIA; 2- Universidade Federal do Paran, 3- CEDAP/EPAGRI. *ubiratan@gia.org.br

esde 2000 o Grupo Integrado de Aqicultura e Estudos Ambientais (GIA) desenvolve estudos voltados ao domnio das tcnicas e mtodos de produo de larvas de caranguejo-u para repovoamento e recuperao populacional em manguezais alterados. Aps alguns anos, com as tcnicas de larvicultura em laboratrio j bastante dominadas, ficou clara a necessidade de reduzir os custos de produo das larvas, para que essa tecnologia pudesse ser aplicada conservao dos estoques, gerando benefcios econmicos e sociais para as populaes que vivem da cata do caranguejo. E foi com esse objetivo que, em 2007, o GIA firmou uma parceria com a Bahia Pesca. Nos dois ltimos anos, atravs do Projeto Pu - financiado com recursos do Governo da Bahia e do CNPq - a produo massiva de larvas de caranguejo-u foi integralmente realizada a partir de tcnicas fundamentadas no conceito de mesocosmos, que envolve tanques externos e a produo parcial de organismos-alimento nos prprios tanques de larvicultura. Mas a tecnologia desenvolvida pelo GIA no se limitou apenas ao protocolo de produo e s estratgias de liberao de larvas. Tambm foram desenvolvidos mtodos genticos de monitoramento e de avaliao do repovoamento, alm de protocolos que garantem que todas as aes sejam corretamente orientadas por conhecimento cientfico robusto e confivel. 24
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O caranguejo-u, Ucides cordatus Dentre os recursos naturais extrados de manguezais brasileiros, a captura de caranguejo-u, Ucides cordatus, considerada a atividade econmica mais importante conduzida em escala comercial (Kjerfve & Lacerda, 1990 apud Schories et al., 2003; Vieira et al., 2004), e sua demanda suprida em sua totalidade por catadores, que geralmente vivem prximos ou mesmo dentro das regies de manguezal. Longe de ser romntica ou buclica, a atividade de cata do caranguejo altamente insalubre, e reflete as tpicas

contradies sociais do nosso pas. Apesar de ser uma captura realizada de forma eminentemente artesanal, que se traduz nas pssimas condies de trabalho e de vida do caranguejeiro, o seu comrcio se desenrola em uma escala suficientemente grande para colocar em risco as populaes de caranguejo-u na maior parte das regies onde praticada. Atualmente, o cultivo do caranguejo-ua ainda no tido como economicamente vivel, principalmente devido ao longo tempo - mais de seis anos - necessrio para que o caranguejo atinja o tamanho comercial. Assim, encontrar meios para assegurar a sustentabilidade da atividade da cata do caranguejo num longo prazo, uma preocupao que deveria unir catadores, pesquisadores e a prpria sociedade. As nicas opes aplicadas na tentativa de manuteno dos estoques de caranguejo frente cata desenfreada so aquelas baseadas nas clssicas ferramentas de manejo pesqueiro, ou seja, estabelecem restries quanto ao tamanho mnimo de captura e proteo atividade reprodutiva. Porm, o que se observa que, apesar dessas medidas, h uma tendncia de contnuo declnio das populaes de caranguejo, ou, pelo menos do tamanho mdio dos animais capturados, em praticamente todo pas. Essa realidade decorrncia de fatores como sobrepesca, destruio de habitats ou mesmo a ocorrncia de uma doena (vide Boeger at al., 2005) que h mais de dez anos vem afetando os caranguejos nos manguezais do Nordeste e, mais recentemente, no Sudeste. Desta forma, medidas alternativas e complementares de proteo e recuperao das populaes de caranguejo so cada vez mais importantes. A produo controlada de larvas de caranguejo-u e sua posterior utilizao em projetos de repovoamento uma dessas possveis medidas. Mesocosmos Inicialmente baseada na larvicultura de camares marinhos, a tecnologia de cultivo larval do caranguejo-u vem gradativamente adquirindo uma identidade prpria, atravs dos trabalhos desenvolvidos pelo GIA. Os avanos mais significativos dizem respeito ao uso de um sistema de produo conhecido como mesocosmos. O princpio de utilizao do mesocosmos no novo na aqicultura, e se baseia no uso de tanques de grande volume em que uma parte da alimentao do organismo alvo, principalmente durante as primeiras e mais crticas fases de alimentao larval, produzida naturalmente, em resposta a estmulos controlados de determinados elos da cadeia trfica presentes no plncton marinho (Lavens & Sorgeloos, 1996). Ao se estimular um bloom de microalgas, atravs da fertilizao da gua com adubos agrcolas, possvel estabelecer as bases para que ocorra uma sucesso ecolgica no interior dos prprios tanques de cultivo. Essa tecnologia de mais baixo custo considerada uma soluo para o cultivo de espcies de moderado ou baixo valor comercial (Lee & Ostrowski, 2001). Quando adequadamente fertilizado e na presena de iluminao intensa (acima de 13.000 lux), o pico mximo na densidade da maioria das espcies de microalgas ocorre aps cerca de quatro a seis dias. Dois a trs dias mais tarde a vez do

zooplncton presente na gua iniciar a sua fase de crescimento exponencial. Em funo da prpria predao, a curva de crescimento da microalga comea a declinar na medida em que a curva de crescimento do zooplcton se aproxima de seu pice. Estas sucesses de curvas de densidade entre predador e presa so consideradas clssicas nos estudos de dinmica populacional. Em um sistema de cultivo, no entanto, o processo deve ser adequadamente planejado e manejado de tal forma que o organismo alvo do cultivo se estabelea como o nico predador no topo da cadeia. Tambm importante que as flutuaes nas densidades de microalgas e de zooplncton sejam minimizadas atravs da adio de indivduos produzidos em cultivos massivos realizados paralelamente. O sistema de cultivo em mesocosmos est passando por uma releitura no mundo inteiro, havendo um reconhecido potencial para cultivo larval de diversas espcies de peixes marinhos (Crosetti & Cataudella, 1995; Zouiten et al., 2008). No entanto, no que se refere produo de larvas de invertebrados marinhos, as perspectivas so mais limitadas, o que aumenta a prpria relevncia do trabalho que vem sendo realizado na larvicultura do caranguejo-u. O desenvolvimento da tecnologia As primeiras tentativas de cultivo de larvas de caranguejo-u no sistema de mesocosmos foram realizadas no ano de 2005, em pr-berrios de uma fazenda de cultivo de camares marinhos (Fazenda Borges) localizada no litoral paranaense. Os tanques recebiam a gua filtrada atravs de malha de nylon de 50 m e eram posteriormente fertilizados. As comunidades de fitoplncton respondiam de maneira diversa, dependendo da variao de fatores como salinidade, temperatura e luminosidade, da relao entre carbono e nitrognio e das caractersticas intrnsecas do inculo. Como no havia controle sobre quais integrantes do plncton eram efetivamente inoculados atravs da gua e nem sobre quais responderiam bem s fertilizaes, o risco da introduo de espcies indesejadas era muito grande. A alternncia de bons e maus resultados demonstrava, contudo, que a tecnologia era tecnicamente promissora, mas que precisava ser refinada. Nos anos seguintes, mtodos adicionais de controle ambiental foram sendo aos poucos introduzidos, at que finalmente foi possvel desenvolver um conjunto de prticas que logrou obter as taxas de sobrevivncia que anteriormente s eram obtidas em laboratrio. O primeiro passo nesta direo foi o controle da qualidade da gua utilizada no cultivo. Atravs de filtragem, esterilizao por sistema de raios ultravioleta e de ajustes da salinidade, reduziu-se a influncia das variveis ambientais mais significativas. A inoculao de microalgas e de rotferos cultivados em paralelo foi outra alterao importante no mtodo e permitiu direcionar a sucesso ecolgica dentro dos tanques de cultivo para espcies de reconhecida eficincia como organismo-alimento. Entre setembro de 2007 e junho 2009 quando foi encerrada a fase de larviculturas originalmente prevista no

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projeto Pu - essa metodologia foi significativamente aperfeioada em cultivos larvais de caranguejo-u realizados em larga escala na Fazenda Oruabo, pertencente Bahia Pesca e localizada prximo aos manguezais de Acupe, distrito de Santo Amaro, no estado da Bahia (Figura 1). As atividades do projeto Pu, por sua vez, se estendero at setembro prximo e, que tambm envolvem uma srie de aes complementares de carter social, econmico, educacional e cultural que devem, quase que de forma obrigatria, estar associadas a qualquer programa de recuperao ou manejo ambiental.

Figura 1. Vista geral da estrutura montada na Fazenda Oruabo, distrito de Acupe, BA, para realizao das larvicultura do caranguejo-u.

O sistema de cultivo massivo em tanques externos desenvolvido na Bahia Em um terreno de 25 x 25 m2, anexo ao complexo de laboratrios j existentes na fazenda Oruabo, foram instalados 9 tanques, feitos em PVC desmontveis, com 20 mil litros de capacidade nominal, contando com sistemas para distribuio de gua marinha e aerao, assim como drenos centrais conectados a uma caixa de despesca. A gua marinha usada no laboratrio proveniente de um sistema de captao instalado na praia, ao fundo da Baa de Todos os Santos e a aerao mantida por um soprador eltrico de 5,5 hp. Cinco desses tanques foram utilizados no cultivo das larvas e os outros quatro para a produo massiva de microalgas (Figura 2).
Figura 2. Representao esquemtica da infraestrutura envolvida na produo de larvas de caranguejo em sistema de mesocosmos.

C B B A E D

B A A

B A

a) Tanques de produo massiva de microalgas d) Produo de inculo de rotferos b) Tanques de larvicultura e) Piscina de despesca c) Estufa para produo de inculo de microalgas

O planejamento, quando se utiliza o mtodo de mesocosmos, uma atividade continua e vital para o sucesso da larvicultura, j que no momento do povoamento os tanques de cultivo devem contar com densidades adequadas de alimentos vivos. Para isso, inculos de cultura monoxnica de microalgas, utilizando as espcies Nannochloropsis oculata e Chaetoceros muelleri eram produzidos de maneira assptica com bastante antecedncia, at atingirem concentraes finais entre 100.000 e 300.000 clulas/ml e volumes de cerca de 1.000 litros. Estes inculos deveriam estar prontos para serem introduzidos nos tanques de cultivo, juntamente com a fertilizao inicial, cerca de seis a oito dias antes das ecloses, dependendo da temperatura ambiente e da luminosidade. Da mesma maneira, inculos do rotfero Brachionus plicatilis eram igualmente produzidos em cultivos paralelos, pelo sistema batch (no qual uma determinada quantidade de gua, enriquecida com microalgas, adicionada ou trocada diariamente), e introduzidos nos tanques de larvicultura dois a quatro dias antes das ecloses das larvas de caranguejo. As larvas eram obtidas a partir de fmeas ovgeras, capturadas diretamente dos manguezais por catadores profissionais, e transferidas para um tanque de desinfeco, onde ficavam imersas em gua marinha, em descanso, por at uma hora. Aps este perodo, a gua era completamente renovada a cada hora, at que no houvesse sinal de sedimento no fundo do tanque ou na gua. Ao final da lavagem, as fmeas eram tratadas com 100 ppm de formalina a 37% por 10 minutos. Aps este perodo, os animais eram transferidos para tanques de ecloso, preenchidos com gua marinha. Estes tanques contavam com substratos plsticos que permitiam que as fmeas se mantivessem fora da gua pelo perodo que desejassem. Como as ecloses geralmente ocorrem aps as 18 horas (podendo tambm ocorrer um pouco antes do amanhecer), a alimentao das fmeas ( base de peixes picados), a troca de gua e qualquer outro manejo necessrio era concludo at no mximo s 16 horas de cada dia. O evento de ecloso de larvas de caranguejou ocorre de maneira sincronizada com as mars de sizgia, uma adaptao natural ao melhor momento para assegurar a disperso larval no ambiente. Por este motivo, as ecloses tendem a ocorrer dentro de um perodo de quatro a seis dias antes da lua cheia ou da lua nova. No Sul do Brasil, as ecloses normalmente ocorrem a partir de dezembro, com a mesma intensidade tanto na lua cheia quanto na lua nova. No estado da Bahia, nos dois anos do projeto Pu, observouse que as primeiras ecloses ocorreram somente a partir de fevereiro, com intensidades diferentes entre a lua cheia e lua nova. No primeiro ano, as ecloses se concentraram na lua nova e em 2009 foram mais

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Figura 3. As diferentes fases do desenvolvimento ontogentico do caranguejo-u, Ucides cordatus

abundantes durante a lua cheia. As larvas geralmente eclodem cerca de duas horas aps o anoitecer. Com o uso de uma lmpada, as zoeas, como so chamadas, eram coletadas dos tanques de ecloso e transferidas provisoriamente para baldes graduados para serem contadas atravs de amostragem; desinfetadas, com soluo de iodo a 2 ppm; e imediatamente transferidas para os tanques de larvicultura. Com o objetivo de evitar choques por diferenas ambientais, utilizava-se a gua proveniente dos prprios tanques de cultivo para preencher os tanques de ecloso. Caso, ainda assim, existissem diferenas significativas, as larvas eram devidamente aclimatadas antes de serem transferidas. A densidade inicial de povoamento variava de 36 a 50 larvas/l. A larvicultura As larvas do caranguejo-u passam por cinco a seis estgios durante seu desenvolvimento larval (Figura 3). A durao de cada estgio dependente de fatores ambientais externos - principalmente da temperatura da gua - e das condies nutricionais das prprias larvas. Os cultivos desenvolvidos no Sul do Brasil, em laboratrio e sob condies totalmente controladas, duram em torno de 25 dias. J nos cultivos realizados na Bahia, nas condies de mesocosmos e alta temperatura, as primeiras megalopas (que marcam o fim das larviculturas) apareciam em apenas 17 dias. Diariamente eram coletadas amostras das larvas para contagem e monitoramento das taxas parciais de soInculo Inculo Microalgas Rotferos

brevivncia. Alm disso, 10 larvas eram analisadas ao microscpio para avaliao do seu estado de sade. Todos os dias as variveis ambientais e de qualidade de gua (temperatura, oxignio dissolvido, pH, amnia, nitrito e salinidade) eram medidas e os dados registrados em planilhas de controle. Tambm diariamente eram transferidos, em mdia, 4.000 litros de microalgas provenientes dos tanques de cultivo massivo para os tanques de larvicultura e o mesmo volume de gua era retirado por sifonamento para limpeza dos tanques. Como a taxa inicial de predao pelas larvas de caranguejo baixa, os rotferos se reproduziam exponencialmente nos tanques nos primeiros dias do cultivo, consumindo as microalgas. No momento em que as larvas de caranguejo atingiam o estgio de zoea II, em resposta predao larval, a densidade de rotferos declinava repentinamente. A partir da era feita a suplementao de rotferos provenientes do cultivo massivo, mantendo-se uma densidade mnima de 5 rotferos/ml at que as larvas atingissem o estgio de zoea IV (Figura 4). A partir de zoea IV as larvas passam a predar presas maiores. Por esse motivo, nessa fase deve-se interromper a suplementao de microalgas nos tanques de cultivo e a alimentao ser baseada em naplios recm eclodidos de artmia. At o fim do cultivo, deve-se manter uma densidade mnima de 1 naplio/ml, aumentando-se a quantidade administrada diariamente para compensar o aumento natural na capacidade de predao pelas larvas. Porm, como as larvas de caranguejo no realizam a muda de forma sincronizada, deve-se estabelecer um perodo de transio, que se inicia em zoea III, com a administrao de pequenas quantidades naplios de artmia, ao mesmo tempo em que se reduz o fornecimento de microalgas e rotferos. Ao contrrio das zoeas, que se mantm na coluna dgua atravs do batimento de seus maxilpedes (apndices que auxiliam na alimentao), as megalopas apresentam primariamente hbitos bentnicos, permanecendo cada vez por menos tempo na coluna dgua. Quando cerca de 70% das larvas j se encontravam no estgio de megalopa, sobrando poucas larvas na coluna de gua, eram iniciadas as despescas.
Introduo de Nuplios de artmia

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Transparncia da gua (cm)

Dias de cultivo Figura 4. Representao grfica da seqncia de eventos envolvidos em um cultivo de larvas do caranguejou em sistema de mesocosmos. A produo mxima de organismos-alimento, em resposta fertilizao inicial, coincide com o estgio de zoea II, declinando rapidamente em funo do aumento da capacidade de predao das larvas. Inoculaes subseqentes so necessrias para a manuteno da cadeia trfica artificial at o estgio de zoea IV, quando se inicia o fornecimento de nuplios de artmia

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Rotferos por ml

Durante as despescas, o nvel dos tanques deve ser reduzido em cerca de 80% e o restante da gua ser transferido para caixas dgua de 1.000 litros, adaptadas com drenos filtrantes. As megalopas concentradas nestas caixas esto enfim prontas para serem embaladas em sacos plsticos com gua supersaturada com oxignio e transportadas at os locais de soltura. Problemas enfrentados e solues encontradas Durante os cultivos realizados na Bahia, foram registradas temperaturas da gua e salinidades muito elevadas (acima de 31 C e 40, respectivamente) por vrios dias seguidos. Estas variveis puderam ser parcialmente controladas atravs da renovao de gua nos tanques de cultivo. Par isso, a gua dos cultivos era trocada, em mdia, 20% diariamente. O ideal que a temperatura seja mantida em torno de 25 a 28 oC e a salinidade em torno de 25 a, no mximo, 35. Observou-se que a microalga N. oculata demasiadamente pequena para ser consumida pelas larvas de caranguejo j a partir do estgio de zoea II. Por este motivo, sua densidade nos tanques de larvicultura aumentava a partir deste ponto do cultivo. Posteriormente, esta espcie foi inteiramente substituda pela C. muelleri, que podia ser consumida tanto pelos rotferos quanto pelas larvas de caranguejou at o estgio de zoea IV. Isto, porm, contribuiu com um aumento substancial na quantidade de matria orgnica sedimentada e, conseqentemente, para a formao de detrito, que se acumula no fundo do tanque, e provoca um aumento significativo das concentraes de amnia dissolvidas na gua.

O acmulo de matria orgnica no fundo dos tanques se revelou um problema bastante grave durante as larviculturas em sistema de mesocosmos. As megalopas desenvolvem hbitos bentnicos na fase final do cultivo e o contato cada vez mais freqente destas com o fundo contaminado do tanque exerce efeito comprovadamente negativo sobre a sobrevivncia das larvas. Como forma de contornar este problema, no ltimo cultivo realizado, to logo as primeiras megalopas comearam a aparecer nos tanques de larvicultura, foi testada a transferncia de todas as larvas para um tanque limpo, contendo gua marinha renovada e nuplios recm eclodidos de artmia. Os resultados iniciais foram bastante positivos, mas somente com a repetio dos cultivos ser possvel avaliar se esta estratgia poder ser de fato validada. J a amnia geralmente est presente desde o incio do cultivo e possivelmente esteja relacionada presena dos rotferos, que so introduzidos nos tanques de cultivo dias antes do povoamento. Com desenrolar da larvicultura, entretanto, as concentraes tendem a crescer paulatinamente superando, por vezes, o nvel de 3 mg/l. Como forma de reduzir a concentrao de amnia na gua, no ltimo cultivo realizado pelo projeto Pu, foi testado o uso probiticos (Epicin G-2, na concentrao de 2-3 ppm diariamente). Neste cultivo, ao

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contrrio de todos os precedentes, as concentraes de amnia e nitrito se mantiveram sempre abaixo de 1 mg/l durante todo o tempo. Porm, no ainda possvel afirmar com segurana que a reduo substancial na concentrao de amnia foi devida utilizao do probitico, pois este ltimo cultivo tambm se caracterizou pelo uso mais moderado de microalgas na alimentao larval. Como o acmulo de matria orgnica no fundo dos tanques tambm foi sensivelmente menor, isto certamente contribuiu para que uma menor quantidade de amnia fosse gerada. Outros cultivos usando a mesma tcnica sero igualmente necessrios para confirmar estas observaes. Complementando o pacote tecnolgico: Ferramentas genticas de monitoramento e avaliao No possvel sintetizar em poucas pginas tudo o que tem sido desenvolvido e trabalhado em relao tecnologia de repovoamento de caranguejo. Neste artigo o foco o processo produtivo de larvas, mas h tambm uma srie de estudos e protocolos desenvolvidos e que envolvem a soltura das mesmas, incluindo a escolha dos locais, mtodos e efeitos do transporte na viabilidade das larvas, o momento certo da liberao, estruturas a serem utilizadas para a liberao, predadores e competidores, dentre vrios outros. Contudo, um aspecto muito importante para ser aqui mencionado so os estudos realizados atravs do uso de ferramentas genticas de ltima gerao. Tais ferramentas tm sido desenvolvidas e aplicadas pelo GIA com pelo menos trs grandes objetivos: 1- Avaliar o sucesso das aes de repovoamento Uma das crticas mais freqentes aos projetos de repovoamento que no basta liberar animais no ambiente. preciso tambm avaliar adequadamente o sucesso das aes de repovoamento. Mas, como fazer isso? Na realidade, existem vrias maneiras de faz-lo. Uma delas marcando os animais produzidos em laboratrios para permitir sua identificao na natureza. Essa forma de avaliao bastante eficiente, pois permite detectar animais de laboratrio no ambiente mesmo anos aps sua liberao. Com base nos dados

gerados sobre a quantidade de animais produzidos em laboratrio encontrados na natureza, mtodos estatsticos permitem avaliar o sucesso do repovoamento em uma determinada rea. possvel, por exemplo, estimar quanto da populao local dessa espcie animal representada por organismos produzidos em laboratrio. Marcar larvas de caranguejo-u, todavia, no uma tarefa simples. Como todo crustceo, o caranguejo, ao crescer, muda a sua carapaa. Portanto, nenhum mtodo de marcao fsica permanece sobre o animal aps a troca do exoesqueleto. Assim, o GIA est desenvolvendo e avaliando um procedimento gentico de marcao, usando marcadores moleculares conhecidos como microsatlites. O fundamento terico do procedimento relativamente simples. Se conhecermos o pai e a me, podemos identificar com alguma certeza as larvas produzidas em laboratrio e liberadas no meio ambiente porque os filhos so o produto da mistura dos dois. Metade do material gentico da larva vem do seu pai e a outra metade de sua me. Com esse marcador, podemos caracterizar a me geneticamente, reconstruir o pai e criar um banco de dados que ser usado posteriormente na identificao de animais coletados no meio ambiente aps a liberao das larvas. Os resultados do estudo de paternidade que realizamos atravs do projeto Pu indicam que a maioria das fmeas do caranguejo-u fertilizada por apenas um macho, o que facilita bastante o procedimento. 2- Conhecer a estrutura gentica das populaes de caranguejo. Escolher adequadamente a origem das fmeas que sero utilizadas na produo das larvas utilizadas to importante quanto avaliar o sucesso do repovoamento. preciso, dentre outras coisas, respeitar as caractersticas genticas dos estoques sendo recuperados, aqueles que iro receber as larvas produzidas em laboratrio. Qualquer populao de plantas e animais se adapta ao ambiente e s condies nas quais vivem. Por isso, fundamental que fmeas utilizadas no processo sejam da mesma populao dos manguezais nos quais as larvas sero soltas. Se isso no for respeitado, podemos estar prejudicando a populao natural, liberando larvas que no sobrevivem ou que no esto adaptadas s condies do local.

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forma, evita-se a disseminao da enfermidade atravs de larvas potencialmente portadoras do fungo patognico.

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Resultados alcanados e perspectivas futuras Durante o projeto Pu, o GIA, em parceria com a Bahia Pesca e com o CNPq, produziu cerca de 3,8 milhes de larvas de Ucides cordatus em fase de recrutamento (megalopa) utilizando o sistema de mesocosmos. Todo o trabalho de produo de larvas ocorreu em paralelo com os estudos de avaliao ambiental, de anlise da estrutura gentica das populaes de caranguejo e da aplicao de metodologias de avaliao do sucesso de cada uma das aes desenvolvidas. A relativa simplicidade do mtodo de larvicultura em sistema de mesocosmos poder possibilitar, em um futuro prximo, que pequenos laboratrios simplificados possam ser instalados prximos aos manguezais mais afetados, operando com a participao das prprias comunidades, e assim gerar a quantidade de larvas necessrias para acelerar o processo de recuperao dos estoques em reas onde os outros mtodos no se mostrem suficientes.
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Figura 6. No laboratrio, uma amostra da massa de ovos e do tecido de uma fmea retirada antes do nascimento das larvas do u. Essas amostras so utilizadas na caracterizao gentica materna e para a reconstruo do gentipo paterno. No exemplo, a fmea foi identificada como tendo os marcadores C e D enquanto o macho, o pai, os marcadores A e B. Essas informaes so guardadas em um banco de dados no computador. As larvas eclodem no laboratrio, onde so criadas, alimentadas e posteriormente liberadas no meio ambiente. Amostras de caranguejos podem, ento, ser coletadas em locais onde a liberao de larvas ocorreu. A caracterizao gentica de indivduos coletados nesses locais poder ser utilizada para avaliar se esses animais so oriundos de desovas realizadas em laboratrio. No exemplo da figura, apenas o caranguejo coletado no meio ambiente e marcado com a bandeira vermelha apresenta marcadores do pai e da me simultaneamente. Esse o nico indivduo, dentre aqueles apresentados na figura, que foi produzido em laboratrio.

O GIA desenvolveu marcadores de gentica molecular que permitem estabelecer os limites das populaes do caranguejo-u. Essas tcnicas detectam a existncia de troca de informao gentica entre animais que habitam lugares geograficamente distintos, se esses animais fazem parte de uma nica populao, com caractersticas genticas iguais. Assim, aceitvel usar, por exemplo, adultos de um lugar para produzir larvas que sero liberadas em outro local. 3- Identificar a presena do fungo causador da DCL em caranguejos assintomticos e no prprio ambiente Os laboratrios associados ao GIA foram os primeiro a identificar o agente etiolgico da enfermidade chamada por ns de Doena do Caranguejo Letrgico (DCL) (Boeger et al., 2005) e a realizar estudos buscando maior compreenso sobre o dinmica da enfermidade, sua patologia e disperso (Boeger et. al., 2006; Ribeiro, 2008; Ferreira et al., 2009). A equipe do GIA desenvolveu um marcador molecular que permite realizar a diagnose rpida da presena do fungo causador da DCL em caranguejos e em amostras (biolgicas ou no) coletadas na natureza. O protocolo baseado no processo conhecido como reao em cadeia da polimerase do DNA (PCR). Uma seqncia exclusiva da levedura negra da DCL usada como iniciadora dessa reao garante que o DNA dessa espcie de fungo ser detectado se presente nas amostras analisadas. Assim, as fmeas utilizadas na produo de larvas so obtidas apenas daqueles estoques nos quais uma avaliao prvia realizada com esses marcadores demonstra estar livre da DCL. Dessa

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