Espectrometra Raman - Espectrometria .

com

http://www.espectrometria.com/espectrometra_raman

StarLine Spectrometers Multiple Detector & Grating Choices Solving a Variety of Applications

ESPECTROMETRIA .COM
BWB Fotmetro de llama
Sodio, potasio, litio, calcio y bar Anlisis, calibracin y generacin www.bwbtech.com/

Avantes.com

Espectrometra Raman
La espectrometra Raman es una tcnica espectroscpica utilizada en fsica de la materia condensada y tambin en qumica para el estudio de los modos vibracionales, rotacionales y otros de baja frecuencia en un sistema. Se basa en la dispersin inelstica, o dispersin Raman, de la luz monocromtica, que por lo general procede de un lser en el rango visible, infrarrojo cercano, o ultravioleta cercano. La luz lser interacta con fonones u otras excitaciones en el sistema, por lo que la energa de los fotones lser se desplaza hacia arriba o hacia abajo. Normalmente, la muestra se ilumina con un rayo lser. La luz del punto iluminado se recoge con una lente y se enva a travs de un monocromador. Las longitudes de onda cercanas a la lnea lser, debidas a la dispersin elstica de Rayleigh, son filtradas, mientras que el resto de la luz recogida se dispersa en un detector. La dispersin Raman espontnea es generalmente muy dbil, y como resultado la principal dificultad de la espectrometra Raman es separar la luz dbil dispersada inelsticamente de la luz intensa lser por dispersin de Rayleigh. Histricamente, los espectrmetros Raman utilizaban rejillas de difraccin hologrfica y mltiples etapas de dispersin para lograr un alto grado de rechazo lser. En el pasado, los detectores de eleccin para las configuraciones de dispersin Raman eran los fotomultiplicadores, lo que daba lugar a largos tiempos de adquisicin. Sin embargo, la instrumentacin moderna en casi todo el mundo emplea filtros de muesca o borde para rechazar el lser, as como espectrgrafos y detectores CCD. Hay diferentes tipos avanzados de espectrometra Raman, como la de superficie potenciada, la polarizada, la estimulada, la de transmisin, la compensada espacialmente y la hperRaman.

Contenidos

ESPECTROMETRIA .COM Mtodos espectromtricos Tipos de espectrometra Espectrmetros Espectro electromagntico Espectrometra de absorcin Espectrometra de fluorescencia Espectrometra de rayos X Espectrometra de absorcin atmica Espectrometra de emisin Espectrometra ultravioletavisible Espectrometra infrarroja Espectrometra Raman Espectrometra de resonancia magntica nuclear Espectrometra Mossbauer

TEORA BSICA
El efecto Raman se produce cuando la luz incide sobre una molcula e interacta con la nube de electrones de los tomos de esa molcula. El fotn incidente excita uno de los electrones a un estado virtual. La molcula se excita desde el estado basal a un estado de energa virtual, y se relaja a un estado vibracional excitado, lo que genera la dispersin de Raman Stokes. Si la molcula ya se encontraba en un estado elevado de energa vibracional, la dispersin Raman se llama entonces dispersin Raman anti-Stokes. Para que la molcula exhiba el efecto Raman es necesario un desplazamiento en la polarizabilidad molecular, o cantidad de deformacin de la nube de electrones con respecto a la coordenada vibracional. La cantidad del desplazamiento de polarizabilidad determinar la intensidad de la dispersin Raman, siempre que el desplazamiento Raman sea igual al nivel vibracional que est involucrado.

HISTORIA
Aunque la dispersin inelstica de la luz la predijo Smekal en 1923, no fue hasta 1928 cuando se observ en la prctica. El efecto Raman fue nombrado despus de que uno de sus descubridores, el cientfico indio Sir CV Raman, observara el efecto por medio de la luz del sol (en 1928, junto con KS Krishnan e independientemente de Grigory Landsberg y Leonid Mandelstam). Raman gan el Premio Nobel de Fsica en 1930 por este descubrimiento, realizado utilizando la luz del sol, un filtro fotogrfico de banda estrecha para crear luz monocromtica y un filtro "cruzado" para bloquear esta luz monocromtica. Posteriormente, el arco de mercurio se convirti en la principal fuente de luz, primero con deteccin fotogrfica y, a continuacin, con deteccin espectrofotomtrica. En la actualidad, se utilizan lseres como fuentes de luz.

APLICACIONES
La espectrometra Raman se utiliza comnmente en qumica, ya que la informacin

1 de 4

2/15/2012 2:47 PM

Espectrometra Raman - Espectrometria .com

http://www.espectrometria.com/espectrometra_raman

vibracional es muy especfica para los enlaces qumicos de las molculas. Por lo tanto, proporciona una huella dactilar de la molcula que puede ser identificada. La regin de huella digital de las molculas orgnicas est en el rango de 500-2000 cm -1. Otra forma de uso de la tcnica es el estudio de cambios en las uniones qumicas, por ejemplo cuando un sustrato se aade a una enzima. Los analizadores de gases Raman tienen muchas aplicaciones prcticas. Por ejemplo, se usan en medicina para el seguimiento en tiempo real de las mezclas de gases respiratorios y la anestesia durante la ciruga. En fsica del estado slido, la espectrometra Raman espontnea se utiliza para, entre otras cosas, caracterizar los materiales, medir la temperatura, y encontrar la orientacin cristalogrfica de una muestra. Al igual que ocurre con molculas individuales, un material slido tiene modos de fonn caractersticos que pueden ayudar a identificarlo. Adems, la espectrometra Raman se puede utilizar para observar otras excitaciones de baja frecuencia en los slidos, como plasmones, magnones, y excitaciones de brecha en superconductores. La seal Raman espontnea proporciona informacin sobre la poblacin de un modo fonn determinado en el rango entre la intensidad Stokes (desplazada hacia abajo) y anti-Stokes (desplazada hacia arriba). La dispersin Raman mediante un cristal anisotrpico da informacin sobre la orientacin del cristal. La polarizacin de la luz de dispersin Raman en relacin con el cristal, y la polarizacin de la luz lser, pueden utilizarse para conocer la orientacin del cristal, siempre que la estructura cristalina sea conocida. Las fibras activas Raman, como la aramida y el carbono, tienen modos vibracionales que muestran un cambio en la frecuencia Raman con estrs aplicado. Las fibras de polipropileno tambin exhiben cambios similares. El modo de respiracin radial es una tcnica de uso habitual para evaluar el dimetro de los nanotubos de carbono. La espectrometra Raman compensada espacialmente (SORS), que es menos sensible a las capas superficiales que la espectrometra Raman convencional, se puede utilizar para descubrir la falsificacin de medicamentos sin necesidad de abrir su embalaje interior, y para monitorizacin no invasiva de tejido biolgico. La espectrometra Raman se puede utilizar tambin para investigar la composicin qumica de documentos histricos, como el Libro de Kells, y contribuir al conocimiento de las condiciones sociales y econmicas en el momento en que los documentos fueron producidos. Esto es especialmente til porque la espectrometra Raman es una forma no invasiva que permite preservar este tipo de materiales.

MICROESPECTROMETRA RAMAN
La espectrometra Raman ofrece varias ventajas para el anlisis microscpico. Dado que se trata de una tcnica de dispersin, las muestras no necesitan ser fijadas o seccionadas. Los espectros Raman pueden ser obtenidos a partir de un volumen muy bajo (<1 m de dimetro); estos espectros permiten la identificacin de especies presentes en ese volumen. El agua no interfiere de manera apreciable. Por lo tanto, la espectroscopia Raman es adecuada para el examen microscpico de minerales, materiales como cermica y polmeros, y clulas y protenas. Un microscopio Raman consiste de un microscopio ptico estndar con un lser de excitacin, un monocromador y un detector sensible (como un dispositivo de carga acoplada (CCD), o un tubo fotomultiplicador (PMT)). En visualizacin directa, todo el campo de visin se examina por dispersin sobre una pequea gama de nmeros de onda (turnos Raman). Por ejemplo, un nmero de onda caracterstico para el colesterol podra ser utilizado para registrar la distribucin de colesterol en un cultivo celular. El otro enfoque es la visualizacin hiperespectral o las imgenes qumicas, en las que miles de espectros Raman son adquiridos por todo el campo de visin. Los datos pueden ser utilizados para generar imgenes que muestran la ubicacin y la cantidad de distintos componentes. Tomando el ejemplo del cultivo celular, una imagen hiperespectral podra mostrar la distribucin de colesterol, as como de protenas, cidos nucleicos y cidos grasos. Las tcnicas sofisticadas de procesamiento de imgenes y seales pueden utilizarse para ignorar la presencia de agua, los medios de cultivo y otros interferentes. La microscopa Raman y, en particular, la microscopa confocal, disponen de una resolucin

2 de 4

2/15/2012 2:47 PM

Espectrometra Raman - Espectrometria .com

http://www.espectrometria.com/espectrometra_raman

espacial muy alta. Por ejemplo, las resoluciones laterales y de profundidad son de 250 nm y 1,7 m, respectivamente, utilizando un microespectrmetro confocal Raman con la lnea de 632,8 nm de un lser de He-Ne con una abertura de 100 m de dimetro. Dado que las lentes objetivo de los microscopios enfocan el rayo lser a varios micrmetros de dimetro, el resultado del flujo de fotones es mucho mayor que los que se logran en las configuraciones Raman convencionales. Esto tiene el beneficio aadido de una mayor desactivacin de la fluorescencia. Sin embargo, el alto flujo de fotones tambin puede causar la degradacin de la muestra, y por esta razn algunas configuraciones requieren un sustrato que conduzca trmicamente (lo que acta como un disipador de calor) a fin de mitigar este proceso. Mediante el uso de la microespectrometra Raman, se pueden medir los espectros Raman, resueltos en vivo en el tiempo y el espacio, de regiones microscpicas de la muestra. Como resultado de esto, puede eliminarse la fluorescencia del agua, el medio y los intermediarios. En consecuencia, este tipo de espectrometra es apropiada para examinar protenas, clulas y rganos. Para muestras biolgicas y mdicas, la microscopa Raman generalmente utiliza lseres de infrarrojo cercano (diodos de 785 nm y 1064 nm). Esto reduce el riesgo de daar la muestra mediante la aplicacin de alta potencia. Sin embargo, la intensidad del Raman en infrarrojo cercano es baja (debido a la dependencia -4 de la intensidad de dispersin Raman), y la mayora de detectores requieren mucho tiempo de registro. En la actualidad se dispone de detectores ms sensibles, por lo que esta tcnica es apropiada para uso general. La microscopa Raman de muestras inorgnicas, tales como rocas, cermicas y polmeros, puede utilizar una gama ms amplia de longitudes de onda de excitacin.

ANLISIS RAMAN POLARIZADO

La polarizacin de la luz dispersada Raman tambin contiene informacin til. Esta propiedad puede medirse utilizando un lser de excitacin polarizado y un analizador de polarizacin. Los espectros adquiridos con el analizador, tanto en perpendicular como en paralelo al plano de excitacin, pueden ser utilizados para calcular el coeficiente de despolarizacin. El estudio de la tcnica es pedaggicamente til en la enseanza de las conexiones entre la teora de grupos, la simetra, la actividad Raman y los picos en el espectro Raman correspondiente. La informacin espectral que se deriva de este anlisis da una idea sobre la orientacin molecular y la simetra vibracional. En esencia, permite al usuario obtener valiosa informacin relativa a la forma molecular, por ejemplo, en qumica sinttica o anlisis polimrfico. A menudo se utiliza para entender la orientacin macromolecular en entratamados cristalinos, cristales lquidos o muestras de polmeros.

VARIACIONES DE LA ESPECTROMETRA RAMAN

Se han desarrollado diversas variaciones de la espectrometra Raman. El propsito habitual es aumentar la sensibilidad (por ejemplo, una mayor superficie Raman), para mejorar la resolucin espacial (microscopa Raman), o para adquirir informacin muy especfica (resonancia Raman). * Espectrometra Raman de superficie mejorada (SERS). Normalmente se hace en un coloide de plata o de oro, o en un sustrato que contiene plata u oro. Los plasmones de superficie de plata y oro son excitados por el lser, lo que resulta en un aumento en los campos elctricos que rodean el metal. Teniendo en cuenta que las intensidades Raman son proporcionales a la intensidad del campo elctrico, hay un gran aumento de la seal medida (de hasta 10 y 11). Este efecto fue observado por Fleishman, pero prevaleci la explicacin propuesta por Van Duyne en 1977. * Hiper-Raman. Un efecto no lineal en el que los modos vibracionales interactan con el segundo armnico del haz de excitacin. Para ello se requiere una potencia muy alta, pero permite la observacin de los modos vibracionales que son normalmente "silenciosos". A menudo se basa en una potenciacin de tipo SERS para incrementar la sensibilidad. * Espectrometra Raman de resonancia. La longitud de onda de excitacin es equivalente a una transicin electrnica de la molcula o cristal, a fin de que los modos vibracionales asociados con el estado electrnico excitado se vean muy potenciados. Esto es til para el estudio de molculas grandes, como los polipptidos, que pueden mostrar cientos de bandas en los espectros Raman "convencionales". Tambin es til para asociar los modos normales con sus cambios de frecuencia observados. * Espectrometra Raman espontnea. Utilizada para estudiar la dependencia a la temperatura de los espectros Raman de las molculas.

3 de 4

2/15/2012 2:47 PM

Espectrometra Raman - Espectrometria .com

http://www.espectrometria.com/espectrometra_raman

* Espectrometra Raman de pinzas pticas (OTRS). Se utiliza para estudiar partculas individuales, e incluso procesos bioqumicos en clulas individuales atrapadas por pinzas pticas. * Espectrometra Raman estimulada. Un pulso de dos colores transfiere la poblacin desde el estado basal a un estado excitado rovibracional, si la diferencia de energa se corresponde a una transicin Raman permitida. Dos fotones de ionizacin ultravioleta, aplicados despus de la transferencia de poblacin (pero antes de la relajacin), permite registrar el espectro Raman intra-molecular o inter-molecular de un gas o grupo molecular. Esta es una tcnica til para observar la dinmica molecular. * Espectrometra Raman compensada espacialmente (SORS). La dispersin Raman se obtiene de regiones compensadas lateralmente fuera del punto lser de excitacin, lo que disminuye significativamente las aportaciones de la capa superficial en comparacin con la espectrometra Raman tradicional. * Espectrometra Raman anti-Stokes coherente (CARS). Se utilizan dos rayos lser para generar un haz de frecuencia anti-Stokes coherente, que puede ser mejorada mediante resonancia. Fibras pticas de Mxico Equipos de medicin de Fibra ptica Ventas, servicio y soporte tcnico www.fibrasopticasdemexico.com/ Solues em Telecom Cabos UTP, Cabos FTP, Cabeamento Estruturado, Cat5e, Cat6, Cat6A www.lcdata.net Energea ENERGEA desarrolla proyectos en el sector energia, publicos y privados structura.com.mx

ESPECTROMETRIA .COM. Publicado bajo licencia GFDL. Credits: Designed by Free CSS Templates / Powered by 19pages / Poltica de privacidad

4 de 4

2/15/2012 2:47 PM