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Colgios Integrados Oswaldo Cruz Pais Leme

JULIANA HOCSIS BRAGA MDULO GESTO EM SADE - NOTURNO

PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRO DOSAGEM DA ALBUMINA

So Paulo 2011

PROCEDIMENTO OPERACIONAL PADRO

Procedimentos da dosagem de Albumina, como trabalho de concluso de curso da Escola Tcnica Oswaldo Cruz, rea de Tcnico em Anlises Clnicas

Professores: Jane Ramos Pereira Ktia Regina Cesar Lindimar Bezerra Mrcia Lagana

So Paulo 2011

IMPORTANTE: Esse documento contm informaes especficas para o exame realizado utilizando o kit do fornecedor DOLES, para qualquer outro kit, contatar o fornecedor responsvel. FINALIDADE: Sistema colorimtrico para quantificao da albumina no soro e outros lquidos biolgicos. Somente para diagnstico in vitro. PRINCPIO: Soluo de verdebromocresol tamponada em pH 4 reage especificamente com albumina, formando um complexo corado de cor verde. A intensidade da cor proporcional ao teor de albumina srica. ESPECIFICIDADE: O mtodo especifico para a albumina. AMOSTRAS: Preparo do Paciente Colher sangue pela manh aps jejum de 8 horas, salvo orientaes mdicas. Utilizar soro livre de hemlise. A albumina permanece estvel no soro por 30 dias, temperatura de 2-8C, e por 2 meses, temperatura de 10C negativos. Tambm se pode utilizar plasma colhido com EDTA e heparina. Demais lquidos biolgicos (lquido pleural, asctico, etc.) devem ser centrifugados previamente. Evitar estase prolongada na coleta de sangue, pois a hemoconcentrao aumenta os nveis de protenas plasmticas. Concentraes de bilirrubina at 30mg/dL, hemlise moderada at 400mg/dL de Hb no soro no interferem na reao. Lipemia moderada no interfere na metodologia, porm, algumas drogas podem interferir nos nveis de albumina, recomenda-se que o paciente seja questionado quanto ao uso de medicamentos.

A diluio da matriz no interfere na sensibilidade diagnstica da metodologia de verde bromocresol. Sensibilidade: a absorbncia encontrada de 0,001 corresponde a 0,1g/dL de concentrao de albumina quando realizados em espectrofotmetro a 630nm. A sensibilidade est relacionada com a do aparelho utilizado.

REAGENTES E PADRES DO FORNECEDOR DOLES: Reagentes de cor: soluo de Verde Bromocresol em soluo 0,08M de cido Lctico tamponado pH 4, contm tambm 0,3mL de Tween 80 por litro. Soluo padro 4g/dL: soluo de albumina bovina estabilizada com azida sdica 1:1000. CONDIES DE ARMAZENAMENTO DOS REAGENTES E PADRES: Reagente de cor: deve ser armazenado temperatura de 2-8C. Estvel at a data do vencimento indicada no rtulo do frasco. Soluo padro 4g/dL: deve ser armazenado temperatura de 2-8C. Estvel at a data do vencimento indicada no rtulo do frasco.

PRECAUES COM O USO DOS REAGENTES: Devem ser usados somente para diagnstico in vitro, a soluo verde de bromocresol irritante, necessita de cuidado com o manuseio, evitando contato com pele e mucosas. Em casos de contaminao acidental, lavar a rea afetada em gua corrente. O descarte deve ser feito seguindo as normas j propostas pelo laboratrio ou de acordo com as normas locais, estaduais ou federais.

EQUIPAMENTOS NECESSRIOS PARA REALIZAO DO EXAME: Espectrofotmetro capaz de medir a absorbncia em 630 nm; Tubos de ensaio; Pipetas graduadas; Pera de suco; Pipeta semi-automtica de 10L.

PROCEDIMENTOS: Identificas 3 tubos de ensaio com B (branco) T (teste) e P (padro). Proceder como segue a tabela: BRANCO (B) Reagente de cor 2mL (fornecido pelo kit) Amostra Soluo Padro TESTE (T) 2mL PADRO (P) 2mL

10L -

10L

Homogeneizar por inverso e, dentro de 1 a 2 minutos, ler absorbncias do teste e padro em espectrofotmetro em 630nm, acertando o zerando com o tubo branco.

CURVA DE CALIBRAO E LINEARIDADE:

A curva de calibrao a representao da relao entre os valores das absorbncias com os valores das concentraes de um conjunto de solues padro. A curva de calibrao demonstra a linearidade da reao at uma determinada concentrao, na qual pode ser determinado um fator de calibrao (F), de acordo com a Lei de Beer. A reao Linear at 6g/dL. Caso ocorra a obteno de valores mais elevados, diluir a amostra com soluo fisiolgica e realizar nova dosagem. Multiplicar o valor encontrado pelo fator de diluio. Este kit possui padro no intervalo de linearidade do mtodo de Verde Bromocresol, o laboratrio deve realizar o ensaio com o padro que acompanha o kit e calcular seu fator de calibrao (F), de acordo com os clculos. O fator deve ser refeito periodicamente e a cada lote do produto.

CLCULOS:

Como a reao corada segue estritamente a lei de Beer, basta a determinao de um fator (F) para o clculo dos resultados.

Albumina (g/dL) = Absorbncia do teste x F

Para obter o fator, a recomendao realizar trs tipos diferentes do padro, ler as absorbncias e tirar a mdia aritmtica das mesmas. Para expressar os resultados em unidades S.I basta multiplicar o resultado encontrado em g/dL por 10, transformando-o em g/L.

VALORES DE REFERNCIA: estabelecido de acordo com a populao atendida. Os seguintes valores so sugeridos: Albumina: 3,5 5,5 g/dL

SIGNIFICADO CLNICO: A albumina a protena mais importante e abundante no soro humano. Possui diversas funes importantes, como: Transporte de molculas hidrofbicas como a bilirrubina e os cidos graxos. Isto possvel devido zona hidrofbica que existe em sua estrutura, sendo essa propriedade utilizada para dosar a albumina pelo mtodo apresentado. Nutrio Manuteno da presso osmtica sangunea. A hiperalbuminemia rara e pode ocorrer em casos de desidratao. A reduo dos nveis, entretanto , pode ser observada em casos de sndrome nefrtica e na insuficincia heptica avanada (cirrosem, colangite, fgado cardado, hepatite crnica e neoplasia). O fgado a principal sede de sntese da albumina. Existem tambm casos de analbuminemia, rara anomalia congnita, devido a defeito na sntese, com hiperglobulinemia compensadora.

BIOSSEGURANA: Os funcinrios devem utilizar das vestimentas obrigatrias e preucaes: Cala comprida confeccionada em tecido resistente. Calas at os tornozelos, ou acima, no so admitidas. Calado fechado (sapato ou tnis). Blusa com manga curta ou comprida. As bijuterias como brincos, em tamanho e nmero discretos, podem ser utilizadas durante o trabalho tcnico, entretanto os anis, pulseiras e relgio devem ser evitados. Maquiagem pode ser utilizada, porm de forma discreta (ex. batom), uma vez que podem interferir com o resultado de alguns exames (ex. bases, e outras em forma de p) Cabelos compridos devem estar presos ao manusear equipamentos rotativos ou manipulao e coleta de material biolgico. Homens com barba devero seguir as mesmas precaues que indicadas para cabelos compridos. Equipamentos de proteo individual (EPIs): Jaleco branco, de manga comprida e com a logomarca da empresa Luvas de ltex Equipamentos de proteo coletiva (EPCs) Lava olhos Chuveiro Kit de primeiros socorros Extintores de incndio Capelas de exausto Cmara de fluxo laminar

Limpeza: Deve-se lavar a vidraria imediatamente aps o uso. Se uma lavagem completa no for possvel, coloca-se de molho gua. Caso isso no seja feito, a remoo dos resduos poder se tornar impossvel.

Descarte: Lixo Biolgico Sangue e produtos sangneos, secrees, aspirados, fezes e outros fluidos corporais que NO devem ser descartados diretamente no sistema de esgoto. Este tipo de lixo DEVE ser tratado de forma que se transforme em um lixo que no oferea risco ambiental. O principal tratamento a AUTOCLAVAO 121 oC/ 35 min. Prfuro-cortantes (contaminados ou no) Qualquer material capaz de causar perfuraes ou cortes na pele. Entre estes se incluem agulhas de seringas, pipetas e tubos quebrados. Estes devero ser descartados em uma caixa rgida AMARELA que devera ser autoclavada antes do descarte, (em caso de material contaminado). Equipamentos e aparelhos utilizados nos exames- Estes s podero deixar o laboratrio aps sofrerem uma rgida descontaminao a fim de minimizar os riscos de contaminao do pessoal de transporte e manuteno.

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SITEOGRAFIA:

Biossegurana Laboratorial: Disponvel em: http://www.biossegurancalaboratorial.com.br/index.php (acesso: 01/06/11) Bula de realizao do exame de Albumina: Disponvel em: http://intranet.doles.com.br/temp/produtos/instrucoes/ALBUMINA.pdf (acesso 19/05/11) Bula de realizao do exame de Albumina (LABORLAB): Disponvel para download ou leitura em: http://www.laborlab.com.br/new/index.php?menu=bq (acesso: 01/06/11) Dosagem de albumina (valores de referncia, amostra e conservao): Disponvel em: http://www.laboratorioreacao.com.br/procedimentospara-exames/albumina-alb-1 (acesso em 18/06/11)