1. Introduccin 2. Materiales y mtodos 3. Resultados y discusin 4. Conclusiones 5. Recomendaciones 6. Bibliografa RESUMEN.

Se aplic la tcnica de Biorremediacin a un rea impactada (20m3) con 58 barriles de pe trleo crudo de 14 API (petrleo pesado) de viscosidadaledaa a un pozo de petrolero si tuado en la Repblica de Cuba. El seguimiento de los tratamientos se realiz mediant e anlisis qumicos y microbiolgicos utilizando tcnicas valorimtricas, gravimtricas y es petrofotomtricas, mensualmente durante 369 das. El rea fue humectada y aireada perid icamente mediante un tractor con arado de disco. Se observ una disminucin en la concentracin de hidrocarburos totales del petrleo has ta obtener valores inferiores al 1% recomendado por lasnormas internacionales, S e logr recuperar el suelo impactado en un periodo de un ao. Se identificaron espec ies de microorganismos degradadores de hidrocarburos en el suelo tratado. No se encontr toxicidad por ninguno de los mtodos empleados en el suelo tratado. Se semb raron plantas en el rea tratada (Pion de jardn), que esto no fue efectivo, ya que l as plantas autctonas de la zona resultaron ms efectivas, de acuerdo con las condic iones existentes en el suelo. El anlisis econmico del proceso de Biorremediacin arr oj valores dentro del rango internacional estipulado para este tratamiento. INTRODUCCIN. La contaminacin de suelos por hidrocarburos es un problema importante en la mayor parte de los pases productores de petrleo. La matriz suelo es espacialmente varia ble y est demostrado que las propiedades qumicas, que juegan un papel importante e n la adsorcin del contaminante, tales comopH, textura y materia orgnica, muestran una distribucin altamente variable. La Biorremediacin es una tcnica innovadora que se ha desarrollado en las dcadas de los 80 y 90, la cual ha sido aplicada exitosamente en el tratamiento de suelos c ontaminados con hidrocarburos. Se caracteriza por ser una tcnica de bajo costo de operacin. La aplicacin de este tipo detecnologa ha encontrado cierta resistencia d e aplicacin por el tiempo que demanda completar un proceso hasta obtener las meta s de limpieza deseadas. La Biorremediacin es considerada como la va ms efectiva para la remediacin de suelos contaminados, en contraste a alternativas ms costosas como la incineracin. Los tr atamientos biolgicos de degradacin en suelos pueden ser eficientes y econmicos si l as condiciones de biodegradacin son optimizadas (lvarez, 2001) (Belloso, 1998) (Cu rsi y Calleja, 2000). Se define como Biorremediacin al proceso de aceleracin de la tasa de degradacin natural de hidrocarburos por adicin de fertilizantes para prov isin de nitrgeno y fsforo (Ercolli, y Glvez, 2001). El proceso de degradacin requiere control de variables operacionales tales como nutrientes, humedad y oxgeno. Esta tcnica puede ser aplicada in-situ, en el lugar donde se encuentra el suelo c ontaminado, o ex-situ, cuando el suelo se traslada a una instalacin para su trata miento. El tratamiento ex-situ de suelos, sedimentos y otros slidos contaminados con hidrocarburos se puede realizar en un variado nmero de procesos en fase slida y en fase lodo. Los procesos en fase slida son aquellos en donde el suelo se trat a con un contenido de agua mnima. En los casos de los procesos en fase lodo se su spende el suelo en agua (Saracino, 2001). La actividad de los microorganismos presentes en el suelo se puede favorecer mej orando determinadas condiciones edficas, aadiendo nutrientes, agua, oxgeno y modifi cando el pH. Otra forma es la introduccin de nuevas especies para aumentar la con centracin de microbiota presente. La medicin del CO2 producido por unidad de tiempo en un rea determinada es una med ida indirecta del proceso biodegradativo ya que tiene comoobjetivo evaluar la ac tividad respiratoria de los microorganismos del suelo durante el proceso de degr adacin de los compuestos orgnicos (Infante, 2001). Los componentes del petrleo son generalmente agrupados en cuatro clases de acuerd

o a su solubilidad en solventes orgnicos: saturados, aromticos, resinas y asfalten os. No todos los componentes del crudo son rpidamente degradables, las parafinas de cadenas cortas son los sustratos fcilmente degradables por los microorganismos seguidos en orden descendiente por las parafinas de cadena larga, isoparafinas, cicloparafinas, aromticos, heterocclicos, resinas y asfaltenos. Los compuestos po lares y los asfaltenos son generalmente considerados resistentes a la biodegrada cin. El material remanente se denomina "hidrocarburos totales de petrleo" (TPH, to tal petroleum hydrocarbon) y es considerado biodegradable. La fraccin polar y los hidrocarburos totales de petrleo, juntamente, se nombran petrleo total, el cual p uede ser estimado gravimetricamente por evaporacin de los solventes usados para l a extraccin (Ercoli, 2001). El objetivo de este trabajo es ofrecer los resultados obtenidos en la aplicacin d el proceso de Biorremediacin a un rea de suelo afectado en la zona aledaa a un pozo de petrleo en la zona central de la Repblica de Cuba, utilizando la tcnica de bioe stimulacin de los microorganismos autctonos del lugar. MATERIALES Y MTODOS. Se aplic la tcnica de Biorremediacin a un rea impactada con 58 barriles de petrleo cr udo de 14 API de viscosidad aledaa a un pozo de petrolero situado en la costa nort e occidental de la Repblica de Cuba. Debido a la poca homogeneidad de la contamin acin, se establecieron dos zonas para el seguimiento del tratamiento: Zona A (rea ms contaminada) y Zona B (rea menos contaminada). El seguimiento de los tratamient os se realiz mediante anlisis qumicos y microbiolgicos utilizando tcnicas valorimtrica s, gravimtricas y espetrofotomtricas, mensualmente durante 369 das. El rea fue humec tada y aireada peridicamente mediante un tractor con arado de disco. Debido a las caractersticas del petrleo crudo a degradar, l cual al derramarse en e l suelo forma trozos muy grandes de difcil disgregacin, no fue fcil lograr una dist ribucin homognea sobre el rea de trabajo, razn por la cual se dividi la parcela en 2 partes: Zona A: rea ms contaminada Zona B: rea menos contaminada Es destacar que no se adicion suelo limpio ni material acondicionante para dismin uir la concentracin inicial de hidrocarburos, solamente se removi el rea impactada con el arado y despus se homogeniz con el equipo pesado denominado raspador. Acondicionamiento nutritivo - ambiental inicial. Independientemente de los contenidos iniciales de nutrientes existentes en el su elo, se adicionaron como fuentes de nitrgeno y fsforo, urea y diamino fosfato resp ectivamente, con el objetivo de estimular el crecimiento de los microorganismos de forma tal de obtener las siguientes relaciones: C/N = 60 C/P = 800 donde: C = HC * 0.78 C: contenido de carbono orgnico, expresado en g HC: contenido de hidrocarburos, expresado en % Sobre la base de la relacin HC-Nitrgeno-Fsforo prefijada, se incorporaron los sigui entes nutrientes: . Fuente de Fsforo............... 0.047 kg / m 2 . Fuente de Nitrgeno........... 0.22 kg / m2 Seguimiento del tratamiento aplicado. La toma de muestra de suelo para los anlisis del seguimiento del proceso de Biorr emediacin se utiliz un muestreo tipo estrella recomendado por el especialista japo ns Dr. Itaru Okuda. Las muestras fueron colectadas y envasadas en bolsas de nylon , se preservaron en congelacin hasta su posterior procesamiento y anlisis. Adems, p ara la determinacin de grasas y aceites las muestras fueron homogeneizadas, secad as, y tamizadas a travs de un tamiz de 2 mm, de donde se tom una muestra represent ativa para ser analizada. Para determinar la efectividad del tratamiento aplicado se realizaron los siguie ntes anlisis: Grasas y aceites e hidrocarburos totales, HC Saturados Resueltos, Saturados, Aro mticos, Resinas y Asfaltenos, Contenidos de nitrgeno total y fsforo total, Conteo d e microorganismos, Produccin de CO2 (Respirometra), Metales totales

La tasa de biodegradacin se calculo segn la siguiente expresin: Concentracin Inicial Concentracin Final Tasa (%) = -------------------------------------------------------- * 100 Concentracin Inicial RESULTADOS Y DISCUSIN. En la tabla 1 se muestran los resultados obtenidos de los parmetros fundamentales medidos para el seguimiento de la efectividad del tratamiento de Biorremediacin. Despus de los 4 primeros meses del tratamiento aplicado y debido a la disponibil idad de equipos pesados, se realiz la homogenizacin del terreno impactado, obtenind ose una mejor distribucin de la contaminacin en el rea, observndose un incremento en los niveles de Grasas y Aceites e Hidrocarburos Totales del petrleo en las dos z onas y por consiguiente una disminucin en la tasa de biodegradacin. (Ver Tabla 1) Por otra parte, se observa que en la zona A, durante los primeros 38 das, ocurre una disminucin significativa en la concentracin de hidrocarburos totales, represen tada por una tasa de degradacin del 29,06 %, resultado ligeramente superior al 25 % recomendado por otros autores (Infante, 2001) (Ercoli, 2001). En general, a l os 369 das se obtuvo una reduccin en el contenido de hidrocarburos totales del 78. 08 %, favorable para este tipo de tratamiento. En la zona B se observa que a los 38 das de iniciado el tratamiento existe un aum ento en la concentracin de hidrocarburos totales del petrleo (HCTP), que esta dado , por contaminacin cruzada de la zona B originada por las operaciones de laboreo del terreno con el arado de discos, ya en los 63 das siguientes y tomando como co ncentracin de inicio la de los 38 das, se obtuvo una tasa de biodegradacin de 39.70 %, superior a lo recomendado por muchos autores para continuar el proceso de Bi orremediacin, al trmino del proceso existe una tasa de biodegradacin en esta zona d e 40.13 %. Es de sealar que ambas zonas se obtuvieron niveles de hidrocarburos in feriores a los 10 000 mg/kg recomendados para este proceso en las normas interna cionales consultadas (Louisiana, 2000). Es de destacar que como en esta zona se parten de valores cercanos a los 10 000 mg/kg de HCTP,para t = 0 das, la variacin en las concentraciones de stos resulta menos acentuada que en la zona A, esto se debe a que a estos niveles la velocidad del proceso de Biorremediacin resulta mas lenta y en ocasiones poco perceptibles debido al mtodo analtico empleado (gravime tra), que es muy efectivo para analizar altas concentraciones de HCTP. Si se comp aran los valores obtenidos de Hidrocarburos Totales del Petrleo con la norma de r eferencia para este proceso en Lousiana, se observa que los niveles son inferior es en ambas zonas a los 10 000mg/kg (1 %), valor recomendado para suelos contami nados por hidrocarburos, ntese que estos valores en la zona A se obtuvieron a los 265 das, ocurriendo posteriormente un periodo de meseta o de saturacin, donde el decrecimiento en los das subsiguientes no ocurre, si no que ligeramente aumenta o se mantiene en los niveles alcanzados en esa fecha. Se debe sealar, que en ambas zonas se apreci visualmente una mejora desde el punto cualitativo de las condiciones del suelo, recuperndose casi totalmente sus condic iones iniciales antes de la contaminacin. Es bueno sealar que la variacin en los ni veles encontrados, en algunos parmetros, se debe a la heterogeneidad de la matriz suelo y a la poca homogeneidad del rea impactada. Tabla 1. Resultados del seguimiento del tratamiento Para ver la tabla seleccione la opcin "Descargar" del men superior (1)Criterios para los constituyentes restrictivos de tierras en Louisiana, Regis tro de Louisiana, EUA, 2000 (referencia 11) La figura 1 muestra la variacin de los niveles de concentracin de hidrocarburos to tales reportados en tabla 1, para las zonas estudiadas. En el grfico se puede obs ervar una disminucin marcada de los hidrocarburos totales en el tiempo, lo que co rrobora la efectividad del tratamiento aplicado. Si observamos los valores de Hidrocarburos Totales del petrleo obtenidos en ambas zonas, se puede afirmar que desde t = 265 das existe un periodo estacionario o d e meseta anteriormente sealado, donde la disminucin de la concentracin es casi inap reciable, es lo que se conoce como periodo de saturacin, alcanzado este periodo s e puede dar por concluido el proceso de Biorremediacin. Si se requiere disminuir an mas este parmetro es necesario analizar si es factible desde el punto de vista econmico y del uso futuro que se le quiera a dar al suelo.

Figura 1 Variacin de la Concentracin de H/C totales del Petrleo en el tiempo Las Figuras 2 y 3 muestran las variaciones de los contenidos de nitrgeno y fsforo en ambas zonas, aprecindose una disminucin en el tiempo de los niveles de concentr acin de nitrgeno y fsforo, debido a su utilizacin por los microorganismos como compu estos esenciales para su crecimiento ydesarrollo del proceso biodegradativo (Ver Tabla 1). A los 100 das de tratamiento (despus de haber tomado la muestra para es e tiempo), el terreno fue fertilizado mediante la adicin de las cantidades necesa rias de DAP (fsforo) y nitrato de amonio como fuente de nitrgeno, con el fin de ma ntener la relacin C: N: P prefijada, observndose valores mximos para ambas curvas a los 166 das. Para ver el grfico seleccione la opcin "Descargar" del men superior Figura 2.Variacin de la Concentracin de Nitrgeno Total Figura 3 .Variacin de la Concentracin de Fsforo Total Adems, en las figuras antes citadas, se observa un decrecimiento ms marcado de las concentraciones de Nitrgeno y Fsforo a partir de t = 166 das, debido a que el labo reo del terreno despus de esa fecha se realiz semanalmente, ayudando as a una mejor utilizacin de los nutrientes por los microorganismos para su crecimiento y desar rollo. La tabla 2 muestra los niveles de concentracin de los componentes del petrleo tota l extrado del suelo de la Zona A y Zona B a tiempo = 0 (saturados, aromticos, resi nas y asfaltenos). Como se puede observar la mayor concentracin de hidrocarburos totales del petrleo (reportadas en la Tabla 1), en ambas zonas corresponde a la f raccin de saturados y en menor cuanta se encuentran los hidrocarburos aromticos, si endo ambos considerados biodegradables. Los niveles de concentracin de resinas y asfaltenos constituyen una parte importante del petrleo total extrado (40 - 56 %) y los mismos son considerados resistentes a la biodegradacin., se debe destacar q ue una vez finalizado el tiempo del tratamiento aplicado existe biodegradacin de esas fracciones, alcanzndose en la zona A un 41.10% y 23.4 % (respectivamente de las fracciones de resinas y asfaltenos) , lo que corrobora lo sealado por otros a utores (Ercoli, 2002, Infante, 2001), que todas las fracciones del petrleo son bi odegradables. En ambas zonas se observan incrementos de las diferentes fraccione s, pudiendo deberse a la heterogeneidad de la contaminacin en el suelo. Con relac in al contenido de hidrocarburos aromticos se aprecia una disminucin en ambas zonas al final del periodo analizado de un 32.32 % para la zona A y de un 25.21 % par a la zona B. Por otra parte, en dicha tabla se observa una disminucin significati va de la concentracin de los hidrocarburos saturados en el tiempo, debido a que e sta fraccin la conforman los sustratos ms susceptibles de degradar por los microor ganismos. Los niveles de concentracin relativamente bajos de Hidrocarburos Satura dos Resueltos muestran el carcter poco parafnico del petrleo contaminante del suelo tratado. De forma grafica, en la figura 4, se aprecia la variacin de los niveles de hidroc arburos saturados en ambas zonas, ntese la disminucin de las concentraciones de es tos compuestos antes sealadas. Para ver el grfico seleccione la opcin "Descargar" del men superior Figura 4. Variacin de la Concentracin de Hidrocarburos Saturados. La Tabla 2 muestra los contenidos de Metales Pesados obtenidos al trmino del trat amiento aplicado, los cuales se encuentran por encima de lo estipulado todos los casos, exceptuando el Zn, a la normativa internacional consultada y en la refer encia de CUPET. Los altos contenidos de Fe resultan significativos debido a las caractersticas ferralticas del suelo. Tabla 2. Contenido de Metales Pesados, expresados en mg/kg base seca Para ver la tabla seleccione la opcin "Descargar" del men superior (1) Regulaciones Ambientales 01/95 y 07/96, CUPET (referencias 1y 6) (2) Se regula Cromo VI. (23Criterios para los constituyentes restrictivos de tierras en Louisiana, Regis tro de Louisiana, EUA, 2000 (referencia 7) Si este suelo en un futuro se decidiera utilizar con fines agrcolas, que no es el caso debido a su ubicacin, (cercano a una zona cenagosa), donde la concentracin d e metales pesados fuera un parmetro importante a valorar, sera necesario utilizar

la Fitorremediacin, donde con la utilizacin de plantas adecuadas para este proceso , se logra la disminucin del contenido de metales pesados, terminado el proceso, estas plantas son cortadas y tratadas adecuadamente. Comportamiento de las Poblaciones Microbianas. En la tabla 3 se reportan las concentraciones de microorganismos encontrados en el tratamiento a diferentes tiempos, pudindose apreciar la variacin de stas durante todo el periodo analizado. A partir de los 265 das, comienza el decrecimiento de la concentracin de microorganismos hetertrofos totales, coincidiendo con el perio do de saturacin alcanzado en los niveles de hidrocarburos. Es de destacar que la concentracin de microorganismos viables se mantuvo durante todo el proceso en el orden entre 106 y 108, valores favorables para que se efecte el proceso biodegrad ativo. Tabla 3. Conteo de microorganismos hetertrofos totales, expresados en UFC/g x 108 Para ver la tabla seleccione la opcin "Descargar" del men superior En la figura 5 se puede observar de forma grfica el comportamiento de la concentr acin de microorganismos en ambas zonas durante el proceso de Biorremediacin aplica do al suelo impactado en reas del Pozo Gusimas 18, ntese las variaciones que se obs ervan en las mismas debido al tiempo del proceso analizado en que de forma cclica , crecimientos y decrecimientos, se repiten las fases de desarrollo de los micro organismos: adaptacin, crecimiento acelerado, rgimen estacionario y muerte sbita. Para ver el grfico seleccione la opcin "Descargar" del men superior Figura 5. Comportamiento de la concentracin de microorganismos Lo niveles de microorganismos degradadores de hidrocarburos encontrados fueron: Zona A: 7.2 x 105 a t = 229 das Zona B: 4.8 x 106 a t = 229 das En ambos casos estas concentraciones resultaron superiores al rango de 103 y 104 recomendado en la literatura (Ercoli, 2000) para que se efectu el proceso de Bio rremediacin satisfactoriamente. De las concentraciones de microorganismos degradadores de hidrocarburos anterior mente sealadas, se aislaron un total de 7 cepas diferentes en medio agar - petrleo , 5 de bacterias y 2 de hongos. Las cepas de bacterias se identificaron por el A PI 20 NE y resultaron ser: Pseudomona putida, Pseudomona stutzen, Pasteurella sp p, Sphingo spiitevorum y Brevum vesicularis.. Estas bacterias son bacilos, aerob ias, Gram negativas. Las Pseudomonas sp es reportada por otros investigadores (Lawlor y colaboradores , 1997) como el grupo de bacterias hetertrofas aerbicas degradadoras de hidrocarbu ros mas comnmente encontradas en el pool de microorganismos en suelos contaminado s por petrleo. En la tabla 4 se muestran los valores de la produccin de CO2 para el caso de estu dio. Los valores obtenidos para la produccin de CO2, se corresponden con las conc entraciones de microorganismos encontradas para cada zona siendo los valores may ores para la zona A de acuerdo con los microorganismos presentes. Tabla 4. Produccin de CO2, expresada en mg de CO2/ cm2. h 0 41 76 122 166 201 229 265 293 329 Zona A 86 91 112 106 109 106 109 89 80 79 Zona B 86 95 85 111 100 111 100 86 83 82 De forma grafica (Figura 6) se puede observar que en ambas zonas se observan pat rones tpicos de procesos biodegrativos, valores de produccin de CO2 entre 80 y 140 mg de CO2/ cm2. h, segn experiencias de los autores en otros trabajos realizados a escala de campo (lvarez, Ramos, Nez y otros, 2003), indicando que se est llevando a cabo la biodegradacin del crudo. Para ver el grfico seleccione la opcin "Descargar" del men superior Figura 6. Variacin de la Produccin de CO2 Se sembraron plantas en el rea tratada (Pion de jardn), lo cual, no result efectivo debido a las condiciones existentes en el suelo, siendo el crecimiento de las pl antas autctonas de la zona indicativo de la recuperacin del suelo, Se realizaron ensayos de toxicidad al suelo tratado por dos mtodos diferentes, bi

oensayo con lombrices de tierra y por el equipo MICROTOX, no encontrndose toxicid ad por ninguno de los mtodos empleados. El anlisis econmico del proceso de Biorremediacin arroj valores dentro del rango int ernacional estipulado para este tratamiento (51.10 USD/ m3), CONCLUSIONES. 1. El tratamiento de Biorremediacin aplicando la tcnica de bioestimulacin al re a impactada del pozo result efectivo, observndose una disminucin en la concentracin de hidrocarburos totales del petrleo hasta obtener valores inferiores al 1% recom endado por las normas internacionales 2. Mediante la adicin de nutrientes esenciales para el desarrollo de los mic roorganismos existentes, aireacin y humectacin peridica del rea tratada., se logr rec uperar el suelo impactado en un periodo de un ao. 3. Se han identificado las especies de microorganismos degradadores de hidr ocarburos en el suelo tratado. 4. De acuerdo a los ensayos toxicolgicos, los suelos remediados no presentan toxicidad para el desarrollo de la biota del suelo y confirman que la contamina cin. 5. La reforestacin artificial con la especie de planta seleccionada no resul t efectiva, creciendo en el suelo recuperado la vegetacin autctona del lugar. 6. La evaluacin econmica del tratamiento aplicado di valores dentro del rango internacional para la tecnologa de Biorremediacin, resultando muy atractiva desde este punto de vista para ser generalizada en el tratamiento de suelos contaminad os por hidrocarburos en pases en vas de desarrollo. 7. Se ha desarrollado un esquema tecnolgico para aplicar el proceso de Biorr emediacin en nuestras condiciones naturales, aunque debe sealarse que no existe un tratamiento de Biorremediacin nico para los suelos contaminados ya que todos difi eren entre s y como tal se deben tratar. RECOMENDACIONES. Generalizar el uso de la tecnologa de Biorremediacin para el tratamiento de suelos contaminados por hidrocarburos en la Repblica de Cuba. BIBLIOGRAFA. 1. Abboud, S.A. Comunicacin Personal. Alberta Research Council. Canada, 2000 . 2. lvarez, J. A, E. Ramos, B. Fernndez, A. Nez. Gestin de residuos slidos petroli zados. Petrleo Internacional (en imprenta), EUA, 2001. 3. lvarez, J. A, E. Ramos, A. Nez. P2307, Impacto ambiental ocasionado por la actividad petrolfera en Cuba y sus soluciones tecnolgicas, Etapa 5.1, 5.3.1 CUPET. C. Habana, 2002. 4. APHA. Standard Methods for the examination of water and wastewater. 17th ed. Ediciones Daz de Santos S. A., Madrid, 1992. 5. APHA Standard Methods for the examination of water and wastewater. 18th ed. APHA-AWWA- WEF, 1995. 6. Belloso Claudio. XXVI Congreso Interamericano de Ingeniera Sanitaria y Am biental. Biodegradacin de Suelos Contenidos en Terrarios. 1998 7. Carls, M. G. y col. Persistence of oiling in mussel beds after the Exxon Valdez oil spill. Marine Environmental Research 51 (2): 167-190, 2001. 8. CCME. Interim Canadian Environmental Quality Criteria for Contaminated S ites. Report CCME. EPC-C534. Canada, 1991. 9. CIPP. Regulacin Ambiental de CUPET 01/95(Revisin 2). Manejo de Residuales durante la perforacin de pozos de petrleo en tierra (onshore), Habana, Cuba, 1999 10. CIPP. Regulacin Ambiental 07/96. Restauracin de sitios de perforacin en tie rra (onshore) CUPET, La Habana, 1996 11. Criterios para los constituyentes restrictivos de tierras en Louisiana, Registro de Louisiana, EUA, 2000 12. Cursi, E.; Calleja, C. Biorremediacin de suelos contaminados con Hidrocar buros. U.E. Mendoza, Argentina, 2000 13. EPA 3050 B. Digestin cida de sedimentos, lodos y suelos. USA, 1996 14. EPA. Innovative Remediation and site characterization technologies resou rces. USA, 2000. 15. Ercoli, E. y otros. Anlisis y evaluacin de parmetros crticos en biodegradacin

de HC en suelos. Univ. Nac. de Cuyo, Argentina, 2001. 16. Ercoli, E.C.y otros. Biorremediacin de suelos altamente contaminados. ING EPET 99, Lima, Per, 1999. 17. Ercoli E. y otros, Total petroleum hydrocarbon monitoring in biodegradat ion of weathered crude oily residues. Univ. Nac. de Cuyo, Argentina, 2001 18. FAO. Manual of Methods in Aquatic Environment Research. Part 1. Methods for obtention measurement and monitoring of water pollution. FAO. Fish. Tech. Pa p. 137, 1975. 19. Flores, N. y col. Utilizacin de lodos residuales en la restauracin de suel os contaminados con hidrocarburos. VI Congreso Nacional de CienciasAmbientales, Pachuca; Mxico, 2001 20. Glvez de la Cruz, GM. Microorganismos. Caractersticas de las principales f amilias de microorganismos, 2001 21. Harrigan, WFy col. Mtodos de Laboratorio en Microbiologa. Ed Academia, Esp aa, 1986 22. Holiday, G. y Ll. E. Deuel. Soil remediation for the petroleum industry. PennWell, Oklahoma, 2000. 23. Infante, C. Comunicacin Personal, 2001 24. ISO 4833:1991 (E). Microbiology-general guidance for the enumeration of micro organism colony count technique at 30 C. (1991) 25. Borwitsky, H y col. Journal of High Resolution Chromatography. Vol. 22, No. 12 , pp 683 - 86, 1999 26. Lawlor, K. y col. Lonng-term effects of crude oil contamination and bior emediation in soil ecosystem. Battelle Memorial Isntitute, 41-50, 1997 27. Luque, J. y otros. Caractersticas edficas de suelos afectados por derrames de petrleo. BIP (Junio): 10-16, 1995. 28. Martnez, J. y col. Manual Prctico de Microbiologa. Pueblo y Educacin, 5 221, 1985 29. Norma Cubana NC 28016 Determinacin de Fsforo Total. 1983. 30. Ramos, I. y col. Proyecto 4304. Etapa 2. Aplicacin de mtodos no convencion ales en el saneamiento de la Baha de la Habana, La Habana, 2001. 31. Santschi, P. H. y col. Marine Environmental Research 52 (1): 51-79, 2001 . 32. Saracino, C.; Ercoli, E.;Glvez, J.; Videla, O..Evaluacin de dos aos de experi encias de campo en Biorremediacin de suelos. Universidad de Cuyo, Argentina, 2001 33. Sawatzky, H, Albert, E et al. Hydrocarbon type separation of heavy petro leum fractions. Vol. 55,16, Canada, 1976 34. Viale, R. e Infante, C. Protocolo para medir produccin de CO2 en suelo. D ocumento Tcnico. INTEVEP. INT- STE 0966.97. 1997. ANEXO Para ver el grfico seleccione la opcin "Descargar" del men superior Figura 1. rea Impactada AGRADECIMIENTOS. El colectivo de autores de este trabajo quiere agradecer especialmente a: los do ctores Carmen Infante e Itaru Okuda por su asesora y colaboracin en la implantacin de esta tecnologa en Cuba. MSc. Jos A. lvarez Gonzlez, MSc. Ana C. Nez Clemente, Tec. Gisela Novoa Rodrguez, Dr. Miguel A. Daz Daz, Lic. Silvia Acosta, Lic. Esther Ramos Padrn, Lic. Ricardo Campos Rodrguez, Lic. Sandra A. Miller Palmer, Tec, Cristina Laffitta Rivera, Tec. Francisca Gonzlez. Centro de Investigaciones del Petrleo Washington # 169, Cerro, Ciudad de la Habana, Cuba.

Telef. 6494101 Comentarios Martes, 23 de Noviembre de 2010 a las 21:17 | 0 adriana adriana Holas buenas noches: soy estudiante de ing. quimica lei su trabajo y tome ciertas ideas para un traba jo solo que me gustaria colocar de manera correcta y completa su bibliografia. S eria usted tan amable de proporcinarmela? se lo agradeceria mucho m se despido d eseandole exito y esperando su pronta respuesta.