Medicin de Microrganismos Calibracin del Micrmetro del Ocular

18 de abril de 2012

Orbegoso Huanca, Carlos 20100176h

1. Objetivos
Conocer el mtodo para calibracin de un microscopio ptico usando el micrmetro de platina Aprender el mtodo de medicin de microrganismos usando el micrmetro del ocular Identificar las ventajas de conocer el tamao de los microrganismos en el campo de tratamiento de aguas y aguas potables. Conocer los diversas aplicaciones que pueden sirgar lego de saber el tamao de MO con lo que vamos a trabajar

2. Marco Terico

Micrmetros
Para la calibracin de instrumentos de medicin ptica incluyendo todos los microscopios de luz; enmarcados en acero inoxidable para la ms alta precisin y duracin. Estos micrmetros de platina de alta calidad se utilizan para calibracin de rutina de una variedad de instrumentos pticos de medicin, desde microscopios pticos y oculares hasta platinas x-y, y bancos pticos El micrmetro de platina es en realidad utilizado como un "espcimen" para calibrar por ejemplo, una retcula de ocular. Para el usuario profesional del microscopio ptico o para el investigador, estos son los estndares definitivos de calibracin para sus microscopios de luz.

Los micrmetros de platina que estn disponibles son "rastreables" ya sea con o sin la certificacin Graticules

Micrmetro de Ocular La forma tradicional de realizar mediciones con el microscopio es usando un micrmetro de ocular; ste consiste en un disco de vidrio que tiene grabada una escala que se coloca en el diafragma del ocular. Los espacios no tienen un valor estndar por lo que deben ser calibrados para cada juego de ocular y objetivo. La calibracin se lleva a cabo con un micrmetro de platina que consiste en un porta objeto que lleva una escala grabada con valores conocidos, generalmente dcimas o centsimas de milmetro.

Medicin con el microscopio Para medir objetos con el microscopio se requiere que este tenga como accesorios: un micrmetro de platina, que es un porta objetos que tiene una escala dividida en centsimas de milmetros, y un micrmetro ocular, que es una placa circular con una escala graduada que va inserto en el ocular. Para realizar la medicin se procede de la siguiente manera: 1.- Se coloca el micrmetro ocular y se enfoca de manera que se observe con la mxima nitidez la escala. 2.-Se coloca el micrmetro de platina y se superponen las escalas. Como conocemos las dimensiones de la escala del micrmetro de platina, podemos calcular el valor de cada divisin de la escala del ocular. Una divisin del ocular es igual: al nmero de divisiones del micrmetro de platina x 0.01 mm entre el nmero de divisiones del ocular que se superponen.

Veamos un ejemplo. Si 9 divisiones del micrmetro objetivo (0,09mm) equivalen a 30 divisiones del micrmetro ocular, cada divisin del ocular equivaldr a: 0,09 = 0,003 mm. = 3 m

Quiere decir que para el objetivo calibrado y el ocular utilizado, cada divisin del micrmetro ocular equivale a 3 m. Una vez obtenido este dato para cada objetivo en la forma que hemos expuesto, teniendo el microscopio ocular podran hacerse todas las mediciones que se deseen

Tamao de microrganismos
Aunque pueda pensarse otra cosa, los microorganismos tienen tamaos muy diferentes que abarcan varios rdenes de magnitud. Por supuesto, en lo que a tamao se refiere, habra que diferenciar entre varios tipos de medidas (longitud, anchura, o volumen). Entre las bacterias, el record de longitud y volumen lo tiene en la actualidad Thiomargarita namibiensis con 750 micrometros (m) de longitud (0,75 mm) y un volumen de, aproximadamente, 2 x 10E8(200 millones) micrometros cbicos. Por su parte, Epulopiscium fishelshonii (una bacteria que vive en el intestino del pez cirujano del Mar Rojo) posee unas dimensiones de 800 x 600 m (0,8 x 0,6 mm), lo que no est nada mal. Escherichia coli (1 x 2 m) posee unas dimensiones normales, anlogas a las de muchas otras bacterias; as, Staphylococcus aureus tiene forma esfrica con un dimetro de 1 m. Las bacterias ms pequeas son, posiblemente y sin tener en cuenta a los simbiontes intracelulares obligados, los micoplasmas y organismos relacionados (0,2 m). Entre las arqueas, la ms grande conocida hasta la fecha es Staphylothermus marinus (15 m) y, la ms pequea, Termodiscus sp. Los virus son, generalmente, menores que las bacterias. No obstante, el mayor virus conocido en la actualidad (Mimivirus) mide unos 600 nanometros (nm) de dimetro, es decir 0,6 m y es, por tanto, mayor que algunas bacterias. De hecho, cuando se descubri, se pens que era una bacteria intracelular de su husped (una ameba). Otro virus grande es el de la viruela (300 nm). Entre los virus ms pequeos, se puede citar al virus de la poliomielitis (unos 25 nm de dimetro 0,025 m). En cualquier caso, no hay que olvidar que, en la naturaleza, las bacterias pueden sufrir considerables cambios de tamao en funcin, entre otras cosas, de lo favorables o desfavorables que sean las condiciones ambientales. Es bien conocido el caso del vibrin colrico (Vibrio

cholerae) cuyo tamao puede disminuir, en ausencia de nutrientes, desde algo menos de 1 m hasta menos de 0,1 m. En muchos de estos casos, resulta difcil en el laboratorio hacer que estas bacterias (que se denominan a veces ultramicrobacterias), que estn vivas, puedan volver al estado inicial (se habla de estado viable pero no cultivable. No obstante, es probable que, en ambientes especiales, existan bacterias viables y cultivables de muy pequeo tamao. Por ejemplo, recientemente se han cultivado bacterias capaces de atravesar filtros con poros de hasta 0,1 m de dimetro, a partir de muestras de hielo de 120 000 aos de antigedad extradas de un glaciar de Groenlandia. Seguramente, hay muchas mas cosas bajo el sol de lo que sospechamos Y eso sin tener que recurrir a las denominadas (y posiblemente inexistentes) nanobacterias.

3. PROCEDIMIENTO
Materiales: 1. 2. 3. 4. 5. microscopio micrmetro de platina micrmetro del ocular portaobjetos y cubreobjetos muestra (alga)

Procedimiento 1. Colocar el micrmetro de platina en el microscopio y el micrmetro del ocular en el ocular.

2. Hacer coincidir las divisiones de micrmetro de platina con los del micrmetro del ocular.

3. CALIBRACION DEL MICROMETRO DEL OCULAR Determinar Cuntos divisiones del micrmetro del ocular coinciden en la divisdion de micrmetro de platina? Con el objetivo de 10x y 43x 1 divisin de platina equivale a 10 divisiones del ocular X: divisin de platina Y: divisin de ocular 1x = 10y

Dato: 0.01 mm 1 (0.01) = 10 y 4. Medicin de los microrganismos

:: y= 0.001 mm= 1 u

Con el micrmetro del ocular se realiza la medida del microrganismo de 10x y 43y

5. Realizar un grafico. Medida en mm (u) vs unidades del ocular

4. Resultados

Numero de Microscopio

Calibracin (u) 10x 43x Largo

Medida (u) 10x Largo Ancho Ancho 77.14 67.28 69.30 19.64 34.50 33.95 43x

Error de Medicin (%) Largo 3.00 Ancho 1.80

1 15.38 2 15.00 4 15.00 5 16.67 6 13.33 7 13.80 9 14.92 10 15.00 11 15.20 12 14.29 13 14.30 14 14.30 16 33.30

3.57 3.45 3.50 4.00 3.13 3.63 3.60 3.33 3.62 3.13 3.45 3.30 7.66

69.28 75.00 75.00

20.00 30.00 30.00

10.30 15.00 7.60 7.38 9.11 3.49 2.30 1.33 13.16 16.65 7.90 4.96 2.04 6.67

133.36 36.67 53.33 91.08 49.20 26.66 27.60 19.40

144.00 44.00 65.45 29.04 50.40 32.37 29.04 19.80

135.00 30.00 76.00 56.48 71.50 85.70 24.32 15.32 25.74 28.60

133.20 28.00 89.80 52.19 62.10 86.70 76.90 24.84 14.87 20.70 30.00

18.16 2.14 7.59 2.95

15.13 24.34 1.15 4.67 2.40

179.82 79.59

180.72 2.49

5. Conclusiones y recomendaciones:

La medida encontrada de las algas que hemos medido estn en los promedios ya encontrados en base de datos Para una mejor medida de los MO se necesita calibrar muy bien los oculares, para ello la calibracin debe hacerse con calma y con precisin Debe de limpiarse adecuadamente los lentes y objetivos para no tener problemas al calibrar, adems debe de enfocarse bien para tener mayor precisin.
Debe de ubicarse una clula que se encuentre en el centro del campo para se mas fcil su reconocimiento cuando se cambie de objetivo

6. Cuestionario:

1. Mediante un esquema o grafico indique el tamao relativo de los microrganismos 2. Este cuadro muestra los tamaos aproximados de los diversos tipos de microrganismos y virus.

Microrganismo Bacteria Algas Protozaoarios Hongos Rotiferos Virus

Tamao 0.5 - 5 um 20 - 50 m 10-50 m 2 - 10 um 100 a 500 um 10-300 nu

3. Describa las principales caractersticas de los siguientes microrganismos: bacterias, algas, protozoarios, hongos, rotferos y virus BACTERIAS.

Las bacterias son microorganismos unicelulares cuyo tamao suele oscilar entre los 0,5 a 5 micrometros (m), son los organismos ms abundantes de la Tierra siendo en su mayora inocuas para el ser humano, las podemos encontrar en cualquier medio bien sea en el suelo, en el agua e incluso en medios donde no sera posible la vida, pueden presentar formas variadas como esferas, hlices, comas y/o barras.

En funcin de la presencia de determinadas estructuras que le confieren su funcionalidad, las bacterias se clasifican dentro de los procariotas ya que a diferencia de los eucariotas como son las clulas de los seres humanos, carecen de ncleo y de algunos orgnulos internos, adems de presentar una pared celular de peptidoglicano. Algunas de ellas, dentro de su estructura, presentan flagelos, fimbrias o pilis que intervienen en la movilidad de la bacteria o en procesos de reproduccin.

Se estima que en el cuerpo humano hay tantas bacterias como clulas poseemos, concentrndose en la piel y en el tracto digestivo. ALGAS

Son primariamente fotoautotrofas. La mayora poseen pared celular, que contiene carbonato silico o slice; es una protena. La mayora viven en el agua, otras en rocas, plantas y en animales. Su color varia, las hay verdes (carofitas, clorofilas), rojas, amarillas, cafs. Las tres ltimas, su color se debe a los pigmentos accesorios, que le dan esa caracterstica a las algas para poder atrapar la luz solar a distintas profundidades.

Se clasifican en:
o

Unicelulares:

Unicelulares mviles por flagelos. Unicelulares inmviles. Ameboides (no tienen pared celular).

Algunas unicelulares se agrupan unidas por muclagos formando el cenobio.

Multicelulares:

Algunas algas se agrupan formando tejidos filamentosos, acintados, cenociticos y septados, en forma de "hojas", talo. Poseen pigmentos accesorios: ficobilina, xantofila, carotenos. Tienen clorofila: A, B, C, D, E y la combinacin de estas dando como por ejemplo, A1, B2, E2, ETC. Los tipos de algas estn dadas por su pigmentacin. Todas poseen sustancias de reserva (almacenan la energa producida por el desdoblamiento de algunos organelos (ATP).

PROTOZOARIOS Un protozoario es un protozoo o animales unicelulares, en donde la nica clula realiza todas las funciones: nutricin, relacin y reproduccin. Son algunos auttrofos porque fabrican su propio alimento y otros son hetertrofos. Son eucariotas porque el material gentico adn o cromosomas se encuentra dentro del ncleo rodeado por la carioteca o membrana nuclear y no se encuentra disperso en el citoplasma. Estos animales viven en aguas dulces, algunos en agua salada. Se los encuentra en las aguas estancadas de charcos o de floreros a la gran mayora. Se mueven mediante prolongaciones finas denominadas cilias (ciliados: paramecio), por pseudpodos (rizopodarios: ameba), por flagelos (flagelados: euglena) y por contracciones (esporozoarios: plasmodium malarie). La palabra protozoario significa "pequeo animal". Son llamados as porque muchas especies se comportan de manera semejante a animales minsculos.

Ellos buscan y recolectan bacterias, algas y otros protozoarios como alimento. Son unicelulares que poseen estructura celular tpica. Son animales generalmente microscpicos, cuyo cuerpo est formado por una sola clula o por una colonia de clulas iguales entre s, es decir, aunque son unicelulares deben reconocerse como organismos completos en cuyas estructuras se llevan a cabo todas las funciones propias de animales multicelulares. Se reproducen por segmentacin. Cada clula da lugar a dos clulas hijas. A veces pueden intercambiar material gentico. Algunos absorben el alimento a travs de sus membranas celulares. Otros, como las amibas, rodean el alimento y lo engullen (tragar la comida sin masticarla, es decir, tragar la comida atropelladamente y sin mascarla). Otros tienen aberturas llamadas poros bucales, con los cuales barren el alimento. Todos los protozoarios digieren su alimento dentro de compartimientos similares a estmagos llamados vacuolas.

HONGOS.

Los hongos organismos eucariotas ya que a diferencia de las bacterias presentan una serie de estructuras como:

Ncleo definido. Mitocondrias. Retculo endoplsmico. Pared celular compuesta por quitina, glucano o manano. Membrana citoplasmtica rica en esteroles.

Pueden ser unicelulares como es el caso de las levaduras o pluricelulares como es el caso de los mohos u hongos filamentosos, en el primer caso, los mohos, estn formados por estructuras tubulares llamadas hifas que se entrelazan para formar el micelio, algunas especies pueden presentarse en forma de levadura y en su forma pluricelular.

En relacin a su metabolismo, ste puede ser aerobio, hetertrofo y su reproduccin puede ser de cuatro tipos:

Asexual por gemacin. Sexual. Por esporulacin. Por fragmentacin.

Algunos de ellos pueden llevar vida saprofita y otros parasitaria. ROTIFEROS Los rotferos son organismos microscpicos, acuticos y semiacuticos, ms conocidos en la limnologia por ser componentes del plancton (microplancton) aunque estn muy bien representados en las comunidades litorales y tambin forman parte del zoomicrobentos. La mayora es de vida libre, hay pocos parsitos, generalmente son solitarios, pero hay especies que forman colonias de variable tamao.

Son organismos muy diversos en formas que se caracterizan por dos elementos particulares como son la corona de cilios de la cabeza y el trophi oestructura masticatoria. Constituyen comparativamente un pequeo filum pero son muy importantes en los ambientes continentales a causa de su tasa reproductora, su habilidad para ocupar rpidamente los nichos vacantes, constituyendo ms del 30% de la biomasa planctnica, son recicladores eficientes de la materia orgnica y responden rpidamente a los cambios ambientales La gran mayora ocupa aguas continentales ya que son comparativamente muy pocas las especies marinas. Colonizan ambientes con distinto grado de salinidad, pH y temperatura, tolerando muchos de ellos concentraciones muy bajas de oxgeno. En general se reproducen por partenognesis, producen machos por muy breves perodos, en condiciones desfavorables dan lugar a huevos deresistencia; hay casos comprobados de huevos que han eclosionado 20 aos despus. Actualmente se considera que existen unas 2000 especies. Los rotferos dulceacucolas se renen en dos grandes Sub-clases Monogonta y Bdelloidea. La Sub- clase Monogonta es la ms importante en los ambientes acuticos continentales, rene 95 gneros y 1600 especies Caractersticas

Simetra bilateral, sin verdadera segmentacin, tres capas germinativas, cuerpo formado generalmente por un nmero fijo de clulas. Cuerpo algo cilndrico, con un disco ciliado anterior y un pie bifurcado en el extremo posterior. La pared del cuerpo es un sincicio cubierto por una cutcula dura. Tubo digestivo con aparato triturador complejo (mastax). Dos protonefridios, arrollados y ramificados con clulas flamgeras. Un ganglio nervioso dorsal y varios nervios (no cordones), rganos de los sentidos en forma de penacho o manchas oculares. Sexos separados; los machos suelen ser diminutos y degenerados o no existen; las hembras con ovario, glndula vitelina y oviducto; reproduccinpartenogentica y sexual.

VIRUS.

Curiosamente los virus se definen como parsitos intracelulares obligados, esto quiere decir que para poder multiplicarse necesitan de la maquinaria gentica de la clula para poder realizar

dicha funcin, y as, expandirse. Dentro de su estructura, los virus estn compuesto de 4 elementos como mximo:

Material gentico que puede ser de ADN o de ARN y que forma parte de la clasificacin de un virus. Envoltura proteica llamada cpside. Protenas viralesque tienen funciones estructurales y enzimticas, dentro de las cuales se encuentran: 1. Neuraminidasa. 2. Transcriptasa. 3. Transcriptasa inversa. 4. Proteasa. Envoltura lipdica, en algunos casos, que envuelve a la cpside.

Su tamao es variable, pero todos coinciden en que no son visibles mediante un microscopio ptico, necesitan ser visualizados mediante un microscopio electrnico, como ejemplos de este tipo de microrganismos se tienen el virus de la gripe, el virus de la polio o el virus del papiloma humano.

4. Explique Por qu es importante conocer el tamao de los microrganismos? El llevarse al cabo ciertos tipos de procesos se necesitan tener en cuenta muchos factores el cual podran disminuir la eficiencia, en el caso de tratamiento de aguas y aguas residuales, uno de estos factores el tamao del material que esta presente el agua que se va a tratar. Como el tamao de los huevos de helmintos que caen por gravedad en las plantas de tratamiento de aguas y aguas residuales, o los filtros y filtros biolgicos que se instalan. Para todo ello hay que tener en cuenta el tamao de los microrganismos a los cuales se los quiere reducir.

5. Describa las aplicaciones practicas, referente a la informacin sobre medicin de microrganismos: a. Proceso de filtracin en las plantas de tratamiento de agua b. Proceso biolgico de tratamiento de aguas residuales: filtro percolador, Wetland c. Mtodo de filtro de membrana (determinacin de coliformes)

Filtro percolador
Un filtro percolador es una cama de grava o un medio plstico sobre el cual se rocan las aguas negras pretratadas. En este sistema de filtro percolador, los microorganismos se apegan al medio del lecho y forman una capa biolgica sobre ste. A medida que las aguas negras se percolan por el medio, los microorganismos digieren y eliminan los contaminantes del agua. El filtro percolador era una tecnologa comunmente usada para tratar las aguas negras municipales antes de que las ciudades empezaran a usar el sistema de aireacin de lodo activado. Actualmente, las casas y los negocios usan los filtros percoladores en los sistemas individuales para el tratamiento de aguas negras. Cada sistema de filtro percolador tiene varios componentes:

Un tanque sptico, que elimina los slidos que se asientan y flotan de las aguas negras. Un tanque de dosificacin clarificador. Es un tanque de hormign o de fibra de vidrio que permite que los materiales biolgicos se sedimenten del agua. Tambin tiene una bomba para dosificar el agua por encima del filtro. Un filtro percolador. Es un tanque con algn tipo medio, ya sea de grava o de material plstico. Las aguas negras se distribuyen sobre el medio y fluyen hacia abajo a travs de la superficie del medio en una capa fina. Luego, sale por abajo del tanque y fluye hacia el tanque de dosificacin/clarificador. Un sistema de aplicacin al suelo. Distribuye el agua tratada por debajo de la superficie del suelo.

Un filtro percolador es un tanque de medio, como grava o material pastico

Filtro de membrana
La tecnologa de membrana se ha convertido en una parte importante de la tecnologa de la separacin en los ltimos decenios. La fuerza principal de la tecnologa de membrana es el hecho de que trabaja sin la adicin de productos qumicos, con un uso relativamente bajo de la energa y conducciones de proceso fciles y bien dispuestas. La tecnologa de la membrana es un trmino genrico para una serie de procesos de separacin diferentes y muy caractersticos. Estos procesos son del mismo tipo porque en todos ellos se utiliza una membrana. Las membranas se utilizan cada vez mas a menudo para la creacin de agua tratada procedente de aguas subterrneas, superficiales o residuales. Actualmente las membranas son competitivas para las tcnicas convencionales. El proceso de la separacin por membrana se basa en la utilizacin de membranas semi- permeables. El principio es bastante simple: la membrana acta como un filtro muy especfico que dejar pasar el agua, mientras que retiene los slidos suspendidos y otras sustancias. Hay varios mtodos para permitir que las sustancias atraviesen una membrana. Ejemplos de estos mtodos son la aplicacin de alta presin, el mantenimiento de un gradiente de concentracin en ambos lados de la membrana y la introduccin de un potencial elctrico. La membrana funciona como una pared de separacin selectiva. Ciertas sustancias pueden atravesar la membrana, mientras que otras quedan atrapadas en ella. La filtracin de membrana se puede utilizar como una alternativa a la floculacin, las tcnicas de purificacin de sedimentos, la adsorcin (filtros de arena y filtros de carbn activado, intercambiadores inicos), extraccin y destilacin. Hay dos factores que determinan la efectividad de un proceso de filtracin de membrana: selectividad y productividad. La selectividad se expresa mediante un parmetro llamado factor de retencin o de separacin (expresado en l/m2 h). La productividad se expresa mediante un

parmetro llamado flujo (expresado en l/m2 h). La selectividad y la productividad dependen de la membrana.

La filtracin de membrana se puede dividir en micro y ultra filtracin por una parte y en nanofiltracin y smosis inversa (RO o hiperfiltracin) por la otra. Cuando la filtracin de membrana se utiliza para retirar partculas ms grandes, se aplican la microfiltracin y la ultrafiltracin. Debido al carcter abierto de las membranas su productividad es alta mientras que las diferencias de presin son bajas. Cuando se necesita desalinizar el agua, se aplican la nanofiltracin y la smosis inversa. La nanofiltracin y las membranas de RO no actan segn el principio de porosidad; la separacin ocurre por difusin a travs de la membrana. La presin requerida para realizar la nanofiltracin y la smosis inversa es mucho ms alta que la requerida para la micro y ultra filtracin, mientras que la productividad es mucho ms baja.

La filtracin de membrana tiene bastantes ventajas frente a las tcnicas existentes de purificacin del agua:

Es un proceso que puede ocurrir a baja temperatura. Esto es principalmente importante porque permite el tratamiento de los materiales sensible al calor. Es por esto que se aplican ampliamente para la produccin de alimento. Es un proceso de bajo coste energtico. La mayor parte de la energa requerida es la necesaria para bombear los lquidos a travs de la membrana. La cantidad total de energa utilizada es mnima comparada con las tcnicas alternativas, tales como evaporacin.

7. Bibliografa

http://www.lenntech.es/tecnologia-de-membrana.htm http://en.wikipedia.org/wiki/Microorganism http://es.wikipedia.org/wiki/Rotifera www.ucm.es/info/tropico/docencia/Textos Sistemas individuales para el tratamiento de aguas negras Agrilife Extension Texas A&M system