EFECTOS ANTIOXIDANTE, ANTIPROLIFERATIVO, ANTI-INFLAMATORIO Y QUIMIOPREVENTIVO DE LA Buddleja incana (Quishuar).

El objetivo de este trabajo fue determinar: la capacidad antioxidante, los niveles de polifenoles y flavonoides, la actividad antiinflamatoria, y los efectos sobre el sistema inmune, sobre la proliferacin de clulas tumorales y fibroblastos normales y sobre la inflamacin aguda y crnica in vivo, de los extractos acuoso y metanlico de la planta peruana Buddleja incana.

La actividad antiinflamatoria se determin en ratas midiendo la inhibicin de COX-1 y COX-2 en un modelo de inflamacin aguda gastrointestinal. Mientras que la produccin de IL-2 y IFN- fue

determinada en cultivo de linfocitos humanos mediante la tcnica ELISPOT. El efecto sobre la proliferacin celular se evalu sobre la lnea celular de hepatocarcinoma humano (ATCC) mediante la tcnica XTT y fibroblastos normales de ratn. El efecto sobre la inflamacin crnica fue evaluado en el modelo murino usando como agente inflamatorio y promotor del cncer cutneo el Forbol 12-miristato 13acetato (PMA) (Sigma Inc.,) y como marcadores de inflamacin crnica y premalignidad las molculas COX-2 y NF-kB.

Los resultados muestran que la Buddleja incana tiene baja capacidad antioxidante (0,82 mM/100 g ms) pero alto contenido de polifenoles (11,78 g Ac glico/100g ms) y flavonoides (112,86 mg

catequina(+)/100 g ms) en comparacin con 14 plantas estudiadas

previamente. Tiene alto efecto antiinflamatorio al inhibir

COX-2 en

yeyuno y estmago de ratas con inflamacin gastrointestinal aguda inducida por Indometacina, manteniendo niveles normales de COX-1.

Acta favorablemente sobre el sistema inmune al estimular

la

produccin de IL-2 y IFN- en linfocitos humanos normales. In vitro mostr notable efecto antiproliferativo de la lnea celular

hepatocarcinoma humano produciendo una TIC de 83% a dosis de 60g/mL mientras que la TIC sobre fibroblastos normales fue de 59%. In vivo demostr inhibicin de COX-2 y NF-kB en la piel de ratones tratados con Forbol por 39 das as como de las lesiones premalignas encontradas en el grupo control.

Se concluye en que la Buddleja incana tiene moderados efectos antioxidantes, alto porcentaje de polifenoles y flavonoides, efecto antiproliferativo sobre clulas notable

de carcinoma heptico

humano(HepG2) y bajo sobre fibroblastos normales, inhibe la inflamacin gastrointestinal aguda y cutnea crnica in vivo, y tiene efectos quimiopreventivos de la promocin del cncer cutneo inducido experimentalmente inhibir, por Forbol 12-miristato 13 acetato, al

tanto lesiones histolgicas, como, la produccin del Factor

Nuclear kappa B y Ciclooxigenasa-2.

Figura 1. Ratones luego del tratamiento con PMA. Se muestran animales representativos de cada grupo, G-I: grupo control que recibi suero fisiolgico topical. G-II: tratados solamente con PMA, notar reas alopcicas con pequeas granulaciones. G-III. Grupo control del solvente. G-IV: grupo tratado con PMA y decoccin de B. incana por va oral, notar ausencia de lesiones cutneas en rea tratada.

Figura 2. Histopatologa de la piel de los 4 grupos de estudio. G-I piel normal de ratn. GII: tratados con PMA, apreciar notable hiperplasia epidermal y dermal. G-III: tratados con solvente. G-IV: PMA + decoccin de B. incana oral, se aprecia ligera hiperplasia epidermal. Flecha amarilla indica epidermis. Tincin H/E. 10X.

Figura 3. Patrn histolgico de inflamacin crnica y lesiones pre neoplsicas del grupo GII con Forbol. (A) hiperplasia epidermal, atrofia folicular, vasculitis e hiperemia. (B) Dermis con atrofia glandular, clulas balonizantes, necrosis, intensa proliferacin celular. (C) Aumento de matriz extracelular y colgeno, hiperplasia de fibroblastos, polimorfismo celular con clulas muy basfilas, figuras mitticas. (D) Clulas balonizantes en epitelio glandular, anisocitosis y anisocariosis, necrosis. H/E. 40X.

Figura 4. Inmunohistoqumica de doble marcacin para detectar COX-2 y NF-kB. (A) G-I (control)ausencia de inmunoreactividad (0). (B) G-II(Forbol) intensa marcacin de COX-2 (+++) en epidermis (flechas azules) y regular marcacin de NF-kB(+) (flecha amarilla). (C) G-IV (B. incana)muy escasa marcacin de COX-2 (0) (flecha azul) y ausencia de NFkB. (D) G-II dermis con expresin de COX-2 (++) (flechas azules)y abundante NF-kB (+++). 40X.