Tratamiento secundario

Captulo 13 Crecimiento de la biomasa y utilizacin del sustrato

La relacin entre el crecimiento celular y la utilizacin del sustrato puede ilustrarse con un simple reactor batch, empleando una botella tipo Winkler de las que se usan en el laboratorio para la determinacin de la DBO. Supngase que se vierte una cantidad de sustrato en la botella, y se inocula con un cultivo mezclado de microorganismos. Si S representa la cantidad de sustrato soluble (en miligramos por litro) y X representa la cantidad de biomasa (en miligramos por litro), la rapidez de consumo de sustrato es dS/dt, y la rapidez de crecimiento de biomasa es dX/dt, ambos fenmenos pueden representarse con las curvas que se muestran en la Figura 13.1.

Figura 13.1. Crecimiento de biomasa y consumo del sustrato.

Unidad 3.11

La curva de biomasa est formada por varios segmentos que justifican un examen minucioso. Los microorganismos tienen que aclimatarse primero a su ambiente y al alimento disponible. Este periodo de aclimatacin es llamado fase de retardo, y vara en extensin dependiendo de la historia de los microorganismos sembrados. Si los microorganismos estn adaptados a un ambiente y sustrato similares, la fase de retardo ser muy breve. Una vez que se ha iniciado el crecimiento, continuar rpidamente. Las clulas bacterianas se reproducen por fisin binaria, esto es, se dividen en segmentos para formar dos nuevas clulas independientes entre s. El tiempo de regeneracin, o tiempo requerido para que una clula madure y se separe, puede ser tan corto como 20 minutos, y depende tambin de factores ambientales y del suministro de sustrato. Cuando est ocurriendo el mximo crecimiento, el comportamiento es de tipo logartmico, razn por la cual se denomina a este segmento de la curva fase logartmica. La rapidez de reproduccin es exponencial, de acuerdo con la siguiente ecuacin

N ' 2n & 1 . . . . . . . . . (13.1)

donde N es el nmero de microorganismos producidos a partir de uno individual despus de n veces de regeneracin. El crecimiento mximo no puede continuar indefinidamente. El alimento disponible puede agotarse, las condiciones ambientales pueden cambiar (por ejemplo, sobrepoblacin, acumulacin de productos de desecho, etc.), y puede desarrollarse una poblacin de depredadores. Las clulas que son incapaces de obtener alimento de fuentes externas inician el catabolismo endgeno, es decir, catabolizan el protoplasma almacenado para mantener su energa. Otras clulas mueren, o se rompen liberando su protoplasma, el cual se agrega al alimento disponible. Esta etapa se representa en la Figura 13.1 con el nombre de fase estacionaria y representa el tiempo durante el cual la produccin de nuevo material celular es aproximadamente compensado por muerte y respiracin endgena. Mientras que en la fase estacionaria todava existe algo de reproduccin, la respiracin endgena y la muerte predominan en el cuarto segmento de la curva, denominado fase endgena. En esta ltima fase, la biomasa decrece lentamente, acercndose asintticamente al eje de las abscisas. El mtodo ms comn para la cuantificacin de biomasa es la prueba de slidos suspendidos. Cuando el agua residual contiene solamente material orgnico, esta prueba debe ser bastante representativa, aunque no hay distincin entre clulas vivas y muertas. La prueba de slidos suspendidos voltiles es una prueba ms adecuada cuando la muestra de agua residual contiene una fraccin medible de materiales inorgnicos suspendidos. Ninguna de las dos pruebas exhibe la diferencia entre slidos biolgicos y partculas orgnicas originalmente presentes en el agua residual. Durante la fase de crecimiento logartmico, la biomasa se incrementa de acuerdo con la siguiente expresin:

dX ' kX . . . . . . . . . (13.2) dt

Tratamiento secundario

donde: dX/dt = rapidez de crecimiento de la biomasa, mg l -1t -1 X = concentracin de biomasa, mg/l k = constante de rapidez del crecimiento, t-1 La evaluacin directa de la constante de rapidez de crecimiento es imposible para cultivos mezclados de microorganismos metabolizantes de materiales orgnicos mezclados. Sin embargo, se han desarrollado varios modelos para establecer en forma indirecta un valor de k. De estos modelos, el ms ampliamente aceptado es el de Monod. 13.1 Modelo matemtico de Monod

Si en un cultivo uno de los requerimientos esenciales para el crecimiento (sustrato y nutrientes), estuviera presente slo en cantidades limitadas, se agotara primero y el crecimiento cesara. El modelo matemtico de Monod (1942, 1949) asume que la rapidez de asimilacin del sustrato, y en consecuencia la rapidez de produccin de biomasa, est limitada por la rapidez de reaccin de las enzimas involucradas en el compuesto alimenticio que est en menor cantidad con respecto a sus necesidades. La ecuacin de Monod es

k'
donde: ko S Ks

k oS Ks % S

. . . . . . . . . (13.3)

= constante de rapidez mxima de crecimiento; t -1 = concentracin en la solucin del sustrato limitante del crecimiento, mg/l de DBO, DQO o COT = constante media de saturacin, esto es, la concentracin del sustrato limitante cuando k = 0.5ko, mg/l

La rapidez de crecimiento de biomasa es una funcin hiperblica de la concentracin de alimento, como se muestra en la Figura 13.2.

Unidad 3.13

Figura 13.2. Constante de rapidez de crecimiento de Monod, como una funcin de la concentracin de sustrato limitante. Con respecto a la ecuacin (13.3), cuando hay exceso de alimento limitante, esto es, S>>Ks, la constante de rapidez de crecimiento k es aproximadamente igual a la rapidez de crecimiento mximo ko de la ecuacin (13.3), y se dice que el sistema es limitado en enzimas. Dado que las enzimas son suministradas por la masa microbiana, se dice que el sistema es esencialmente limitado en biomasa, y la ecuacin

dX ' rx ' k oX dt
es una ecuacin de primer orden en la biomasa; esto es, la rapidez de crecimiento rx es proporcional a la primera potencia de la biomasa presente. Cuando S<<Ks, el sistema es limitado en sustrato, y en este caso rx = constante y la constante de rapidez de crecimiento es de orden cero en la biomasa; esto es, la constante de rapidez del crecimiento es independiente de la biomasa presente. Cuando S = Ks, la constante de rapidez del crecimiento es la mitad del mximo. Sustituyendo la ecuacin (13.3) en la ecuacin (13.2), la rapidez de produccin de biomasa se transforma en k SX . . . . . . . . . (13.4) rx ' dX ' o dt Ks % S

Tratamiento secundario

13.2

Crecimiento celular y utilizacin del sustrato

Si todo el sustrato fuera convertido en biomasa, entonces la rapidez de consumo de sustrato sera igual a la rapidez de produccin de biomasa en la ecuacin (13.4). Sin embargo, debido a que el catabolismo convierte parte del sustrato en productos de desecho, la rapidez de consumo de sustrato ser mayor que la rapidez de produccin de biomasa.

rx ' &Y
O bien

dS ' & Yr s dt

rs ' &
donde: Y

rx Y

'&

k oSX Y (Ks % S)

. . . . . . . . . (13.5)

= coeficiente de produccin bacterial mximo, definido como la relacin de la masa de clulas formada en comparacin con la masa consumida de sustrato, medida durante cualquier periodo finito del crecimiento logartmico, es decir

mg/l de biomasa mg/l de sustrato consumido

rs = dS/dt, rapidez de consumo del sustrato, mg l-1 t-1

El factor Y vara dependiendo del patrn metablico usado en el proceso de conversin. Los procesos aerobios son ms eficientes que los anaerobios con respecto a la conversin de biomasa y por ello tienen un valor mayor de Y. Para reacciones aerobias los valores tpicos de Y son de 0.4 a 0.8 kg de biomasa por kilogramo de DBO5, mientras que en las reacciones anaerobias vara de 0.08 a 0.2 kg de biomasa por kilogramo de DBO5. La ecuacin (13.4) estara incompleta sin una expresin que considere el agotamiento de la biomasa a travs de la respiracin endgena. El decaimiento endgeno tambin se supone como de primer orden en la concentracin de biomasa:

dX (final) ' & k dX . . . . . . . . . (13.6) dt

donde: kd = constante de rapidez de decaimiento endgeno, t - 1

Unidad 3.15

La sustitucin de la ecuacin (13.6) en la (13.4) conduce a

dX ' ko SX & k X . . . . . . . . . (13.7) d dt Ks % S

El decaimiento endgeno tiene muy poco efecto en la rapidez de crecimiento global en las fases iniciales de la curva de crecimiento de la Figura 13.1. Sin embargo, en la fase estacionaria el decaimiento endgeno es igual a la rapidez de crecimiento y se vuelve predominante en la fase endgena. Como se expres en el Captulo 12, las tasas de rapidez de produccin de biomasa y consumo del sustrato pueden ser afectadas por muchos factores externos, entre los que puede mencionarse la temperatura, pH y txicos. Las constantes de rapidez aumentan cuando la temperatura se eleva en el intervalo de 0 a 55 oC, con el correspondiente incremento en la produccin de biomasa y consumo de sustrato. Los incrementos en las tasas de reaccin siguen aproximadamente la regla de vant Hoff-Arrhenius de duplicacin por cada 10 oC de incremento en temperatura por encima de la temperatura mxima. El calor excesivo desnaturaliza las enzimas y puede destruir al organismo. Tambin es importante el pH que rodea a los microorganismos, ya que los sistemas enzimticos tienen un intervalo estrecho de tolerancia. Los microorganismos que degradan los materiales orgnicos de las aguas residuales funcionan mejor cerca de un pH neutro, con un intervalo de tolerancia desde aproximadamente pH 6 a pH 9. En el crecimiento de la biomasa tienen influencia factores tales como la presencia de sustancias txicas, concentracin de sales y oxidantes. Las sustancias txicas envenenan a los microorganismos; la concentracin de sales interfiere con las relaciones de presin internaexterna, y los oxidantes destruyen las enzimas y materiales celulares. Los microorganismos tienen la capacidad de ajustarse a un intervalo muy amplio de la mayora de los factores ambientales, a condicin de que los cambios ocurran gradualmente. La repentina cada del pH o una descarga salada puede provocar un dao irreparable al cultivo.

Tratamiento secundario

Actividades de los alumnos para realizar por su cuenta.

Preguntas y problemas propuestos

1. 2. 3. 4. 5. 6.

Dibuja una grfica que represente el crecimiento de las bacterias de un cultivo puro, anotando el nombre que se da a cada segmento. Define: a) biomasa; b) fase de retardo; c) fase de crecimiento logartmico; d) fase estacionaria; e) fase endgena; f) cultivos suspendidos; g) cultivos adheridos; y h) flculos. Nombra, define y describe el mtodo ms comn para cuantificar la biomasa. Qu factores externos y de qu forma pueden afectar la rapidez de produccin de biomasa y de consumo de sustrato? Si la poblacin de microorganismos es 3.0 x 105 al tiempo t0 y 36 horas despus es 9.0 x 108, cuntas generaciones han ocurrido? Los siguientes datos se obtuvieron en un experimento de observacin del crecimiento bacteriano. Grafica los datos en papel logartmico. Aproximadamente en qu tiempo inici y en que tiempo termin el crecimeinto logartmico? Cuenta de bacterias 1 x 103 1 x 103 1.5 x 103 5.4 x 103 2.0 x 104 7.5 x 104 2.85 x 105 1.05 x 106 1.15 x 106 1.15 x 106

Tiempo, en horas 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45

7. Si el tiempo de regeneracin para las bacterias es de 20 minutos, calcule el nmero de bacterias que podr haber luego de 6 horas.

8. Si en un tiempo de regeneracin de 30 minutos hay 65 536 bacterias, calcule el tiempo requerido

para obtener este nmero por medio de la fisin binaria.

Unidad 3.17