USMP FILIAL NORTE - MEDICINA HUMANA CURSO: EMBRIOLOGA Y GENTICA

UNIVERSIDAD DE SAN MARTN DE PORRES FACULTAD DE MEDICINA HUMANA DEPARTAMENTO ACADMICO DE CIENCIAS BSICAS ASIGNATURA: EMBRIOLOGA Y GENTICA HUMANA GUIA DE PRCTICAS Coordinadora de la Asignatura Dra. Karina Elizabeth Torres Villalba. Responsable: Dr. Cesar Ibaceta Tello. SEGUNDO AO I - SEMESTRE 2012 CHICLAYO - PERU

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PROLOGO La Facultad de Medicina Humana de la Universidad de San Martn de Porres, presenta a ustedes, estimados Alumnos y Profesores, la Gua de Prcticas de Embriologa y Gentica. La presente Gua ha ido mejorando en forma progresiva, hemos ido actualizando su contenido y hemos incluido los ltimos avances a nivel cientfico de la Embriologa y Gentica. Cierto es que las Ciencias Bsicas estn ocupando el lugar trascendente que le corresponde dentro de la formacin de nuevos Mdicos. La ontogenia y la filogenia se enriquecen cuando aparecen nuevos estudios experimentales que aportan nuevos conocimientos y conceptos, los cuales debemos incorporar en cada Semestre. En esta especialidad se cifra la esperanza de la terapia gnica, la que podra terminar con un sinfn de enfermedades con representacin cromosmica. El futuro es muy prometedor. Creemos a no dudarlo, que esta nuestra versin de la Gua de Practicas de Embriologa y Gentica ir mejorando semestre a semestre porque hay una razn para ello, los conocimientos van apareciendo da a da y debemos estar permanentemente actualizados.

Profesor Responsable de la Asignatura Embriologa y Gentica USMP CHICLAYO

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INTRODUC CION Una de las Ciencias Bsicas que ms notablemente ha avanzado es la Embriologa y la Gentica. De otro lado, la informacin bibliogrfica es de tal proporcin, que faltaran horas para mantenerse actualizado permanentemente. A la fecha hay ms de 200 textos de Embriologa y de Gentica, cada uno de ellos ms completo y complejo. La Ctedra de Embriologa y Gentica, comprendiendo que es importante aprovechar bien el tiempo, ha elaborado esta Gua para evitar las Clases tericas, a veces largas y tediosas. Les presentamos en forma resumida, las Prcticas de Embriologa y Gentica, que tienen las caractersticas de ser semielaboradas, de uso personal y con un cuestionario al final de cada Prctica, con la finalidad de poder asegurar los conceptos bsicos vertidos durante la prctica y la teora. Se adjunta una pequea bibliografa, no obstante en nuestra biblioteca tiene otros textos. No debemos dejar de nombrar a los artfices de esta Gua de Prcticas, quienes con entusiasmo se han motivado a publicar esta ayuda al interesante proceso de Enseanza - aprendizaje. Son Docentes jvenes, vidos de transmitirles parte de su conocimiento y experiencia. Todos son especialistas en distintas ramas de la medicina, Pediatra, Ciruga, Gneco-obstetricia y bilogos. Ellos se han fusionado y el producto es esta Gua de Prcticas renovada y actualizada. Chiclayo, Marzo 2012. Los Autores AUTORES

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PRACTICA N 01 APARATO GENITAL GAMETOGENESIS: OVOGENESIS/ ESPERMATOGENESIS COMPETENCIAS 1. Refuerza los conocimientos tericos en el origen, evolucin y morfologa de las estructuras secuenciales en el desarrollo de la gametognesis. 2. Integra los eventos morfolgicos del ciclo ovrico con su regulacin hormonal. 3. Reconoce microscpicamente los distintos tipos de folculos del ovario adulto, relacionndolos con la capacidad de secrecin de hormonas. 4. Reconoce microscpicamente las diferentes clulas de la serie espermtica y del espacio intersticial y su capacidad de secrecin de hormonas. 5. Identifica y esquematiza las diferentes estructuras en el desarrollo de la espermatognesis. MATERIALES 1. Gua de prctica 2. Microscopio ptico 3. Lmina de preparado histolgico de ovario (HE). 4. Lmina de preparado histolgico de testculo (HE). PROCEDIMIENTO Mediante la observacin microscpica con diferentes lentes y objetivos (x5, x10 y x40), reconocer la secuencia evolutiva celular gametogentica.

OVARIO Epitelio ovrico: Clulas cbicas simples. Corteza ovrica: Folculos en diferentes estadios de maduracin. Mdula ovrica: Zona Central. Folculo primordial: Ovocito primario (46 cromosomas), 1 capa de clulas epiteliales planas. Folculo primario: 1 capa de clulas epiteliales cbicas.
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Folculo en crecimiento: Ms de 1 capa de clulas cbicas (clulas foliculares o de la granulosa). Zona pelcida, lagunas foliculares, teca interna estrgeno), teca externa. Folculo de De Graff: Folculo maduro preovulatorio (23 cromosomas). Antro folicular (licor folicular), cmulos oophorus. Tecas. Cuerpo amarillo: progesterona. Cuerpo albicans: cuerpo amarillo degenerado. Folculos atrsicos: Folculos en crecimiento degenerados.

PREGUNTAS 1 1. Realice un esquema nominativo del folculo primordial, primario y en crecimiento. 2. Realice un esquema nominativo del folculo de De Graff. 3. Dnde se producen los estrgenos y la progesterona? 4. De qu hormonas depende el ciclo ovrico? 5. Cundo se completa la primera divisin meitica y cundo la segunda divisin meitica? TESTICULO Albugnea Zona cortical Zona medular: Tubos seminferos y espacios intersticiales Tubos seminferos: Secuencia evolutiva de la espermatognesis. o Membrana propia del tubo seminfero (pared del tubo seminfero) o Espermatogonio: 46 cromosomas. Adosados a la pared. o Espermatocito I: 46 cromosomas. Ms voluminosas. Ncleo fibrilar o granular. Divisin celular. o Espermatocito II (2): 23 cromosomas. Fugases. o Espermatide (4). 23 cromosomas. Redondeadas o alargadas. Espermiognesis. o Espermatozoides (4): 23 cromosomas. Luz del tubo seminfero. o Clulas de Sertoli: Clulas sustentaculares. Citoplasma triangular con basas hacia la pared. Espacio intersticial: o Clulas de Leydig: Testosterona. o Fibroblastos. o Vasos sanguneos (capilares, vnulas).

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PREGUNTAS 2 1. Realice un esquema nominativo del ciclo evolutivo de la espermiognesis. 2. Qu es la espermiognesis? 3. Cul es la importancia de las clulas de Leydig? 4. Colocar el nmero de cromosomas: Espermatogonio ( ) Espermatocito I ( ) Espermatocito II ( ) Espermatide ( ) Espermatozoide ( ) 5. Cuntos espermatozoides derivan de un espermatogonio?. BIBLIOGRAFIA 1. LANGMAN, Jan. Embriologa Mdica. Ed. Interamericana, 8va edicin. 2000. 2. MOORE, Persaud. Embriologa Clnica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 6ta. Edicin. 1999. 3. DI FIORI. Atlas de Histologa.

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PRACTICA N 02 CICLO UTERINO - ENDOMETRIO COMPETENCIAS 1. Recuerda los conocimientos tericos relacionados al ciclo uterino. 2. Relaciona el ciclo ovrico con el ciclo uterino y su regulacin hormonal. 3. Conoce las fases por las que atraviesa el endometrio durante el ciclo uterino de una mujer adulta. 4. Observa las caractersticas de la mucosa uterina en distintos periodos del ciclo endometrial y relaciona con su regulacin hormonal. 5. Juzga la importancia de la regulacin hormonal en el ciclo uterino. MATERIALES 1. Gua de prctica. 2. Microscopio ptico. 3. Lminas de preparados histolgicos de endometrio en fase proliferativa y secretora (HE). PROCEDIMIENTO Mediante la observacin microscpica con diferentes lentes y objetivos (x5, x10 y x40), reconoce las caractersticas del endometrio en fase proliferativa y secretora.

Fase proliferativa: Capas del tero: Endometrio, miometrio y parametrio. Epitelio endometrial: Clulas cilndricas.

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Capa funcional: Glndulas en corte tansversal, oblicuo y longitudinal, lumen regular, aspecto tubular, escasa secrecin en su interior. Corion (estroma endometrial): Espacios interglandulares. Capa basal. Miometrio. Fase secretora: Glndulas tortuosas, lumen irregular en diente de serrucho. Secrecin en el lumen. Corion o estroma endometrial, con infiltrado polimorfonuclear. PREGUNTAS 1. Cules son las fases del ciclo uterino? 2. De qu hormonas depende cada una de estas fases? 3. Cules son las caractersticas del endometrio en fase proliferativa? 4. Cules son las caractersticas del endometrio en fase secretora? 5. Qu pasa con el endometrio cuando se produce una gestacin? BIBLIOGRAFIA 1. LANGMAN, Jan. Embriologa Mdica. Ed. Interamericana, 8va edicin. 2000. 2. MOORE, Persaud. Embriologa Clnica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 6ta. Edicin. 1999. 3. DI FIORI. Atlas de Histologa.

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PRACTICA N 03 FETOMETRIA: DETERMINACION DE LA EDAD GESTACIONAL COMPETENCIAS 1. Conoce la duracin del embarazo en semanas, das, meses lunares y meses solares. 2. Analiza y aplica los mtodos para determinar la edad gestacional. 3. Distingue las caractersticas ms relevantes del feo humano desde los 2 meses hasta el trmino de la gestacin. 4. Valora la importancia de la determinacin de la edad gestacional en el control del embarazo. 5. Juzga la importancia del reconocimiento de los rasgos morfolgicos externos del embrin y feto y los relaciona con la edad gestacional. MATERIALES 1. Gua de practica 2. Maqueta con modelos de embriones y fetos humanos en diferentes etapas de gestacin. 3. Fetos humanos en distintas edades. PROCEDIMIENTO Edad gestacional extra tero 1. Por longitud del embrin y feto (LCN/LCT) 2. Por caractersticas morfolgicas externas. PREGUNTAS 1. Escriba las principales caractersticas externas de un feto de: a. 12 semanas b. 20 semanas c. 28 semanas d. 32 semanas e. 40 semanas BIBLIOGRAFIA 1. LANGMAN, Jan. Embriologa Mdica. 2001. 2. MOORE Persaud. Embriologa Clnica. 1999. 3. WILLIAMS. Tratado de Obstetricia. 2000. 4. MONGRUT. Tratado de Obstetricia. 1998.

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EDAD GESTACIONAL AUMENTO DE LONGITUD Y PESO DURANTE EL PERIODO FETAL

Semanas 09 12 13 16 17 20 21 24 25 28 29 32 33 36 37 40 EDAD Meses Lunares 3 4 5 6 7 8 9 10 LCN cm 58 9 14 15 19 20 23 24 27 28 30 31 34 35 36 LCT cm 10 16 25 30 35 41 45 50 PESO g 10 45 60 200 250 450 500 820 900 1300 1400 2100 2200 2900 3000 3400

EXTRAUTERO 3 SEMANA: CICLO MESTRUAL REGULAR (28 DIAS) FERTILIZACION (INICIO 3 SEMANA) IMPLANTACION (7 DIAS DESPUES) SANGRADO POR NIDACION 4 SEMANA FINAL 4 SEMANA: EMBRION VISIBLE (SIMPLE VISTA) VELLOSIDADES CORIALES (FUTURA PLACENTA) CONTACTO CON SANGRE MATERNA. INICIA PRODUCCION DE HGC. 5 SEMANA 10 mm. SACO AMNIOTICO IDENTIFICABLE (POCOS ml. DE LIQUIDO AMNIOTICO) SN PRIMITIVO (CEREBRO/MEDULA ESPINAL) CORAZON PRIMITIVO) 6 SEMANA 13 mm. SINTOMAS/ HCG + / ECO + /EX. GINECOLOGICO INICIA FORMACIN DE ORGANOS OJOS, PABELLONES AURICULARES, FOSAS NASALES: ESBOZOS BROTES DE BRAZOS Y PIERNAS CORAZON PRIMITIVO INICIA LATIDOS 7 SEMANA CABEZA MS HUMANA. INCLINACION ADELANTE OJOS YA FORMADOS ESBOZO DE NARIZ. VENTANILLAS NASALES
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MANDIBULA Y BOCA EMPIEZA APARICION BRAZOS Y PIERNAS BIEN IDENTIFICABLES.

8 SEMANA CASI TODOS LOS ORGANOS PRINCIPALES ESTAN FORMADOS. CABEZA MUY GRANDE (CEREBRO CRECE RAPIDO) PRIMEROS MOVIMIENTOS (ECO). EX. GINECOLOGICO: + 9 A 12 SEMANAS: (FETO) 10 cm. FINAL 10 s.: PABELLON A. INICIA CRECIMIENTO (FIN 12 s.: ADULTO) CABEZA GRANDE (1/2 LONGITUD CORONO-NALGA). PARPADOS UNIDOS. BRAZOS Y PIERNAS VISIBLES. DEDOS UNIDOS. ABDOMEN ABULTADO. GENITALES EXTERNOS DIFERENCIADOS. LF (DOPPLER). 13 A 16 SEMANAS 15 cm / 120 gr. CABEZA HA ENDEREZADO. CUERPO COMIENZA A ERGUIRSE. CEJAS Y PESTAAS. OREJAS DESPEGADAS DE LA CABEZA. CUERPO ROSADO PALIDO. APARECE LANUGO (VELLO FINO EN TODO EL CUERPO). DEDOS DE MANOS Y PIES SEPARADOS. UAS INICIAN DESARROLLO. 17 A 20 SEMANAS 25 cm. / 300 gr. LF (PNARD). MOVIMIENTOS FETALES (MULTIPARA: 17-18 s.). CABELLO COMIENZA A CRECER. CABEZA 1/3 LONGITUD CORONO - TALON. LANUGO EN TODO EL CUERPO. UAS BIEN DEFINIDAS. 21 A 24 SEMANAS 30 cm. / 600 gr. PIEL ARRUGADA (POCA GRASA SUBCUTANEA) CEJAS PESTAAS CRECEN. PARPADOS SEPARADOS (CERRADOS). VERNIX CASEOSO (SUST. GRASOSA DE GLANDULAS DE PIEL). 25 A 28 SEMANAS 35 cm. / 1000 gr. PIEL MENOS ARRUGADA (MAS GRASA SUBCUTANEA). VERNIX CASEOSO CUBRE TODO EL CUERPO.
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OJOS ABIERTOS. CABELLO ABUNDANTE. SI NACE: 80 % SUPERVIVENCIA.

29 A 32 SEMANAS 41 cm. / 1700 gr. PIEL ESTIRADA (ACUMULO DE GRASA. UAS LLEGAN A YEMAS DE DEDOS. TESTICULOS EN ESCROTO. MAYOR POSIBILIDAD DE SUPERVIVENCIA. 33 A 36 SEMANAS 45 cm. / 2500 gr. DESAPARECEN ARRUGAS DE PIEL (DEPOSITO DE GRASA +++). LANUGO COMIENZA A CRECER. CABEZA LONGITUD CORONO TALON. HUESOS DE CRANEO AUN BLANDOS. UAS HASTA PUNTA DE DEDOS. 95% SUPERVIVENCIA. 37 A 40 SEMANAS 50 cm. / 3200 A 3500 gr. CRECIMIENTO Y DESARROLLO COMPLETO. LANUGO SOLO EN ESPALDA Y HOMBROS. VERNIX CASEOSO DISMINUYE. CIRCUNFERENCIA CEFALICA: 34 cm. UAS SOBREPASAN YEMAS DE DEDOS. TESTICULOS EN ESCROTO (XY). LABIOS MAYORES CUBREN LABIOS MENORES (XX).

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PRACTICA N 04 PLACENTA MACROSCPICA Y CORDON UMBILICAL COMPETENCIAS 1. Aplicar los conocimientos tericos relacionados con el origen, los componentes materno y fetal, las funciones e importancia de la placenta. 2. Diferencia la cara fetal, donde se inserta el cordn umbilical, de la cara materna, donde se encuentran los cotiledones. 3. Describe la forma, peso y dimensiones de la placenta. 4. Observa, compara y describe las caractersticas anatmicas de la placenta, tanto en la cara fetal como en la cara materna. 5. Clasifica y describe la insercin del cordn umbilical. 6. Clasifica y describe anomalas placentarias. 7. Valora la importancia del examen placentario con aplicacin para la salud materna fetal: calcificaciones, cotiledones. 8. Observa, compara y describe las caractersticas ecogrficas de la placenta, a travs de videos ilustrativos del estado intrauterino de l placenta. MATERIALES 1. Gua de prctica. 2. Placentas macroscpicas frescas. 3. Placentas fijadas en formol. 4. video de ecografas de la ubicacin de la placenta 5. Guantes, tijeras, pinzas (equipo de diseccin) 6. Balanza y cinta mtrica. PROCEDIMIENTO Observacin macroscpica Previa colocacin de guantes, procede a examinar la placenta diferenciando las caras materna y fetal. Describe la forma de la placenta. Pesa y mide la placenta. Describe a insercin del cordn umbilical y caractersticas de la cara fetal. Describe las caractersticas de la cara materna: surcos, cotiledones. PREGUNTAS 1. Cules son los componentes de la placenta? 2. Cules son las funciones de la placenta? 3. Qu cantidad de sangre circula por la placenta a trmino? 4. Qu es la placenta acreta? 5. Diferencia entre placenta increta y percreta. BIBLIOGRAFIA LANGMAN, Jan. Embriologa Mdica. Ed. Interamericana, 8va edicin. 2000. MOORE, Persaud. Embriologa Clnica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 6ta. Edicin. 1999. WILLIAMS. Tratado de Obstetricia. 1996

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PLACENTA MICROSCOPICA COMPETENCIAS 1. Aplica los conocimientos tericos relacionados con el origen, los componentes materno y fetal, la circulacin y la membrana placentaria. 2. Describe las caractersticas de la lmina corial. 3. Describe las caractersticas de la cara materna o desidua basal. 4. Observa, compara y describe las caractersticas de los troncos de las vellosidades coriales: primero, segundo y de tercer orden. 5. Reconoce los componentes de las vellosidades coriales. 6. Identifica y describe el espacio intervelloso, as como el contenido. 7. Describe los componentes de la Membrana Placentaria. MATERIALES 1. Gua de practicas 2. Microscopio ptico 3. Lminas de preparados histolgicos de placentas fijadas y coloreadas con Hematoxilina-Eosina, que comprendan desde la cara materna a la cara fetal de la placenta. PROCEDIMIENTO Observacin microscpica Mediante la observacin microscpica con diferentes lentes objetivo (x5, x10 y x40) reconoce las caractersticas microscpicas de la placenta.

CARA FETAL Reconocer la membrana amnitica o amnios que recubre la Lmina o Placa corial, en la que se encuentran los vasos coriales. Identificar y diferenciar los troncos de las vellosidades coriales. Caractersticas, componentes. Reconocer las vellosidades coriales libres, componentes y membrana placentaria. Espacio intervelloso y sangre materna. CARA MATERNA Reconocer la desidua basal y las clulas que las componen. Diferenciar los componentes y estructuras con respecto a la cara fetal. Identificar vellosidades de anclaje.

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PREGUNTAS 1. Qu es la decidua?. Tipos. 2. Qu hormonas produce la placenta? 3. Qu caractersticas tiene la placa corial? 4. Cmo estn formadas las vellosidades coriales? 5. Cmo est formada la membrana placentaria? Qu importancia tiene? BIBLIOGRAFIA 1. LANGMAN, Jan. Embriologa Mdica. Ed. Interamericana, 8va edicin. 2000. 2. MOORE, Persaud. Embriologa Clnica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 6ta. Edicin. 1999. 3. WILLIAMS. Tratado de Obstetricia. 1996.

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PRACTICA N 05 OBSERVACION DE EMBRIONES: SISTEMA NERVIOSO CENTRALY MASCARILLA FETAL 1. INTRODUCCION: Se denomina embrin al producto de la concepcin entre la cuarta y octava semana de desarrollo y es aqu donde se aprecia cambios en la formacin definitiva del futuro ser. Observaremos la cabeza y el sistema nervioso comprendido dentro de ella. COMPETENCIAS: 1. El alumno observar en el embrin los rganos que se encuentran en el trax, cabeza y sistema nervioso. 2. Aplica sus conocimientos para determinar el origen blastodrmico de las estructuras observadas 3. Elabora una lista de los cambios ms importantes de los rganos y su destino final 4. Confecciona un esquema en su cuaderno de prcticas de un corte longitudinal y trasversal del embrin. 5. Compara los rganos del embrin, feto y adulto. MATERIAL Y METODOS Se observar al microscopio cortes histolgicos de embriones en la parte que corresponde a la cabeza y sistema nervioso central. Se observar videos con contenido de ecografas de estructuras normales del sistema nervioso central. PROCEDIMIENTOS Al inicio se realiza una introduccin sobre el desarrollo de la prctica. Se dibuja en el pizarrn un esquema de lo que se va ha observar como tambin se observa los cortes histolgicos en el televisor que son reflejados directamente del microscopio. Seguidamente los alumnos observan los cortes histolgicos en sus mesas de trabajo reconociendo las estructuras ms importantes, determinando su origen, su funcin, a que rgano dar lugar y cuando termina su maduracin. Por ultimo reconocer estructuras a nivel ecogrfico y compara con lo visto anteriormente. CABEZA Y SISTEMA NERVIOSO Estomodeo: es la boca primitiva que se aprecia un poco ms arriba del trax identificando la lengua y al final de ella el repliegue de la epiglotis y por detrs el inicio del esfago. En la parte central de la cabeza se identifica los canales semicirculares que corresponden al odo interno.

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Cabeza: en la parte mas superior se aprecia las cavidades que corresponden a los ventrculos cerebrales en cuyo interior se aprecian formaciones arbreas que corresponde a los plexos coroideos. El sistema nervioso primitivo se encuentra de adelante hacia atrs el prosencfalo, mesencfalo y rombencfalo con el IV ventrculo. Ojo: tiene la forma de un cliz donde se aprecia la retina con su parte nerviosa y pigmentaria. En el centro una esfera fuertemente coloreada que es el cristalino CUESTIONARIO 1. Qu estructuras origina el prosencfalo, mesencfalo, rombencfalo. 2. De donde se origina el cristalino? BIBLIOGRAFA 1. LANGMAN JAN Embriologa Mdica. 8ava Edicin. Editorial Interamericana 2000 MOORE PERSAUD Embriologa Clnica. Sexta Edicin. McGraw Hill Interamericana 1999

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OBSERVACION DE EMBRIONES: SISTEMA NERVIOSO CENTRALY MASCARILLA FETAL 2. INTRODUCCION: Se culminar esta seccin observando los rganos de los sentidos como ojo y odo, as como un breve repaso del sistema nervioso comprendido dentro de ella. COMPETENCIAS: 6. El alumno observar en el embrin los rganos que se encuentran en el trax, cabeza y sistema nervioso. 7. Aplica sus conocimientos para determinar el origen blastodrmico de las estructuras observadas 8. Elabora una lista de los cambios ms importantes de los rganos y su destino final 9. Confecciona un esquema en su cuaderno de prcticas de un corte longitudinal y trasversal del embrin. 10. Compara los rganos del embrin, feto y adulto. MATERIAL Y METODOS Se observar al microscopio cortes histolgicos de embriones en la parte que corresponde a la cabeza y sistema nervioso central. Se observar videos con contenido de ecografas de estructuras normales del sistema nervioso central. PROCEDIMIENTOS Al inicio se realiza una introduccin sobre el desarrollo de la prctica. Se dibuja en el pizarrn un esquema de lo que se va ha observar como tambin se observa los cortes histolgicos en el televisor que son reflejados directamente del microscopio. Seguidamente los alumnos observan los cortes histolgicos en sus mesas de trabajo reconociendo las estructuras ms importantes, determinando su origen, su funcin, a que rgano dar lugar y cuando termina su maduracin. Por ultimo reconocer estructuras a nivel ecogrfico y compara con lo visto anteriormente. BIBLIOGRAFA LANGMAN JAN Embriologa Mdica. 8ava Edicin. Editorial Interamericana 2000 MOORE PERSAUD Embriologa Clnica. Sexta Edicin. McGraw Hill Interamericana 1999

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PRACTICA N 07 OBSERVACIN DE EMBRIONES: ABDOMEN Y MDULA COMPETENCIAS 1. Explica y ubica el origen de los rganos derivados del tubo intestinal, observados en el embrin 2. Conoce las relaciones existentes de las asas intestinales entre s en el embrin 3. Reconoce y describe las glndulas anexas al aparato digestivo: origen, caractersticas y relaciones con otras partes del tubo digestivo. MATERIALES 1. Gua de prcticas. 2. Microscopio ptico 3. Laminas de preparados histolgicos de embriones de cerdo coloreados con hematoxilina-eosina, que comprendan desde la cavidad oral hasta el proctodeum. Se realiza el estudio en cortes longitudinales y transversales. 4. imgenes ecogrficas de estructuras ubicadas en cavidad abdominal. PROCEDIMIENTO Observacin microscpica Mediante la observacin microscpica con diferentes lentes y objetivos (x5, x10 y x40) reconoce mediante las caractersticas microscpicas del preparado embriolgico Observan el septum transversum y su relacin con el hgado Identificar el estomago y las asas intestinales. Observar sus relaciones y recordar su origen embriolgico. Observar y describir la medula espinal: Meninges, capa de la medula, epndimo, ganglios y nervios raqudeos. Observe y compare las estructuras mostradas en imgenes ecograficas. PREGUNTAS 1. De que capa embrionaria proviene el hgado?. Estructuras formadas a partir de cada una de ellas. 2. Dnde se forma la placa basal y placa alar de la mdula espinal? Importancia. 3. Cmo se forma el pncreas anular? 4. Qu malformaciones pueden presentarse en el desarrollo del tubo intestinal? BIBLIOGRAFA 1. LANGMAN, Jan. Embriologa Mdica. Ed. Interamericana, 8va edicin. 2000. 2. MOORE, Persaud. Embriologa Clnica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 6ta. Edicin. 1999. 3. WILLIAMS. Tratado de Obstetricia. 2000. 4. S.W.GRAY & J.E. SKANDALAKIUS. Embriogenesis, diagnostico y tratamiento.

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PRCTICA N 08 OBSERVACION DE EMBRIONES: MESONEFROS, METANEFROS, RION ADULTO. COMPETENCIAS 1. Reconoce y diferencia diferentes estados de desarrollo aparato urinario, as como su importancia. 2. Diferencia las gnadas y las glndulas suprarrenales 3. Identifica y relaciona los conductos genitales (mesonefrico y paramesonefrico) del embrin y su diferenciacin. MATERIALES 1. Gua de prcticas. 2. Microscopio ptico 3. Laminas de preparados histolgicos de embriones de cerdo coloreados con hematoxilina-eosina, que comprendan desde la cavidad oral hasta el proctodeum. Se realiza el estudio en cortes longitudinales y transversales. Imgenes ecogrficas de estructuras ubicadas en cavidad abdominal PROCEDIMIENTO Observacin microscpica Mediante la observacin microscpica con diferentes lentes y objetivos (x5, x10 y x40) reconoce mediante las caractersticas microscpicas del preparado embriolgico Observar las diferencias entre mesonefros y metanefros, as como la de sus conductos y recordar las estructuras a que dan origen. Observe y compare las estructuras mostradas en imgenes ecogrficas. PREGUNTAS 1.Qu importancia tiene el metanefros?. Como se diferencian los conductos de Wolf y de Muller? 2. Describa las estructuras observadas en las imgenes ecogrficas. BIBLIOGRAFA 5. LANGMAN, Jan. Embriologa Mdica. Ed. Interamericana, 8va edicin. 2000. 6. MOORE, Persaud. Embriologa Clnica. Mc Graw-Hill. Interamericana. 6ta. Edicin. 1999. 7. WILLIAMS. Tratado de Obstetricia. 2000. 8. S.W.GRAY & J.E. SKANDALAKIUS. Embriogenesis, diagnostico y tratamiento.
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PRCTICA N 09, 10 Y 11 OBSERVACION DE EMBRIONES: TORAX. CORAZON, VASOS SANGUINEOS, ARBOL BRONQUEAL Y PULMONES INTRODUCCION: Se denomina embrin al producto de la concepcin entre la cuarta y octava semana de desarrollo y es aqu donde se aprecia cambios en la formacin definitiva del futuro ser. Observaremos la cavidad torcica, y lo comprendido dentro de ella. COMPETENCIAS: 11. El alumno observar en el embrin los rganos que se encuentran en el trax, cabeza y sistema nervioso. 12. Aplica sus conocimientos para determinar el origen blastodrmico de las estructuras observadas 13. Elabora una lista de los cambios ms importantes de los rganos y su destino final 14. Confecciona un esquema en su cuaderno de prcticas de un corte longitudinal y trasversal del embrin. 15. Compara los rganos del embrin, feto y adulto. MATERIAL Y METODOS Se observar al microscopio cortes histolgicos de embriones en la parte que corresponde al trax, cabeza y sistema nervioso central. PROCEDIMIENTOS Al inicio se realiza una introduccin sobre el desarrollo de la prctica. Se dibuja en el pizarrn un esquema de lo que se va ha observar como tambin se observa los cortes histolgicos en el televisor que son reflejados directamente del microscopio. Seguidamente los alumnos observan los cortes histolgicos en sus mesas de trabajo reconociendo las estructuras ms importantes, determinando su origen, su funcin, a que rgano dar lugar y cuando termina su maduracin. TORAX: Se observa: Corte longitudinal: Corazn: Aurculas de paredes delgadas,ventrculos paredes gruesas musculosas y los msculos pectineos, pericardio Pulmn: Bronquios, pleura. Septum trasverso que forma el diafragma. Corte trasversal: De atrs hacia adelante mdula espinal y cuerpo vertebral, luego orificio de la traquea con su cartlago hialino, esfago, grandes vasos aorta, pulmonar, cartidas. Ms adelante el corazn con sus cavidades ya mencionadas. En las paredes laterales se aprecia el cartlago hialino de las costillas y el esternn.

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PRCTICA N 12 EL ARBOL GENEALGICO FAMILIAR, HEREDOGRAMA O PEDIGR El rbol genealgico, heredograma o pedigr es un diagrama que representa la lnea de antecesores y que incluye una compilacin cuidadosa de los registros fenotpicos de una familia en varias generaciones. COMPETENCIAS 1. Introduce a la forma cmo se investiga la herencia de los caracteres genticos, enfermedades genticas (cmo se heredan?, Son dominantes?, Son recesivos?, Son mendelianos?, etc.) 2. Usa la simbologa caracterstica en la elaboracin del rbol genealgico. 3. Construye un rbol genealgico real utilizando como material de investigacin a su grupo familiar. MATERIALES 1. Hoja cuadriculada tamao A4. 2. Lpiz y borrador. 3. Simbologa para la elaboracin del rbol genealgico familiar (hoja adjunta). PROCEDIMIENTO El estudio se inicia con la persona o propsitus (la persona que acude al mdico como paciente), revisando sus antecedentes familiares. La tarea en clase es construir su rbol genealgico. Los pasos a seguir son los siguientes: 1. Escribe los datos personales del propsitus a.Nombre, sexo, edad, direccin y telfono. b.Antecedentes perinatales y postnatales. c.Antecedentes familiares y otros datos importantes. 2. La elaboracin del rbol genealgico se inicia con el propsitus. a.Los hombres son representados por smbolos cuadrados y las mujeres con smbolos circulares. b.Una lnea trazada entre el cuadrado y el crculo representa un casamiento entre el hombre y la mujer. c.Dos lneas trazadas entre el cuadrado y el crculo indica un casamiento consanguneo. (ver otras situaciones en la tabla de smbolos Apndice I) d.Cuando es posible el cuadrado deber ser colocado a la izquierda y el crculo a la derecha de la lnea de casamiento. e.Las generaciones estn conectadas por una lnea vertical que se extiende hacia abajo desde la lnea de casamiento hasta la prxima generacin. f.Los hijos de un casamiento estn conectados por una lnea horizontal unidos por lneas verticales cortas. El primer hijo es colocado a la izquierda del segundo, el segundo a la izquierda del tercero y as sucesivamente. Utilice
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la simbologa correspondiente para casos de abortos, gestacin, etc., ubicndoseles en el orden en que corresponden. g.Solo el hijo(a) del matrimonio que esta en relacin directa con el propsitus (es decir los padres del propsitus) podrn ser colocados juntos pero sealando entre parntesis el lugar que ocupan dentro de su familia. h.Los individuos normales se representan por smbolos abiertos, cuadrados o crculos dependiendo del gnero, y los afectados por smbolos cerrados (sombreados). i.Cada generacin es enumerada a la izquierda de las lneas filiales con nmeros romanos. j.Todos los individuos de cada generacin (los filiales) son enumerados desde la izquierda con nmeros arbigos. k.Terminado de elaborar su rbol genealgico se dispondr a identificar los rasgos genticos que usted considere caracterstico de su familia (mnimo dos rasgos). l.Del mismo modo identificara los individuos afectados (enfermos) con smbolos cerrados. m.En la leyenda debern indicarse el rasgo gentico y la afectacin de los individuos de cuales se ha referido. En la leyenda tambin pueden indicarse otros datos que usted considere pertinentes. Ejemplo (ver figura): Con un solo carcter gentico: Forma de pelo

En este ejemplo se seala a un individuo varn con pelo ondulado (el propsitus) primognito de un matrimonio cuyo padre fue el segundo de 4 hermanos, siendo el primero afecto de un mal sanguneo y que tiene pelo lacio. La madre fue la primera de 4 hermanos, tambin con pelo lacio. En la actualidad los padres del propsitus esperan un siguiente hijo. Se pueden ver otros detalles de esta familia. Por ejemplo, el individuo II 9, que tiene pelo lacio ha tenido dos relaciones, uno con un
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consanguneo de pelo lacio con quien tuvo un aborto afectado y otra relacin convivencial con quien tuvo un hijo normal de pelo lacio. PREGUNTAS 1. Qu entiende por individuos afectados e individuos portadores? 2. Qu son caracteres genticos? 3. Qu son alelos? 4. Explicar y graficar con rboles genealgicos ejemplos de: Herencia autosmica dominante Herencia autosmica recesiva Herencia dominante ligada al cromosoma X Herencia recesiva ligada al cromosoma X Caracterstica Smbolo Caracterstica Smbolo Herencia ligada al cromosoma Y 01. Propsitus o probando 02. Individuo de sexo masculino 5. En el ejemplo de arriba, explique porque el propsitus tiene el pelo ondulado si sus 03. Individuo de sexo femenino padres tienen el pelo lacio. Cul04. Individuo de sexo indefinido de que el hermano o es la probabilidad o desconocido hermana que va ha nacer tenga tambin el pelo ondulado? 05. Aborto espontneo de sexo 06. Aborto espontneo de sexo
masculino 07. Aborto espontneo de sexo BIBLIOGRAFIA indefinido 09. Aborto gemelar dicigtico Strachan, T. & A.P. Read. femenino 08. Aborto inducido X 10. Aborto Humana. Ediciones Omega. 1999. Gentica Molecular gemelar monocigoto de sexo masculino Stansfield, gemelar monocigoto de 11. Aborto W. Teora y problemas de Gentica. McGraw-Hill. 1995. 12. Aborto gemelar de cigocidad sexo femenino desconocida El 13. Natimuerto de sexo masculino rbol genealgico de su salud. En: 14. Natimuerto de sexo femenino http://www.vhl.org/es/espcopy/arboldesalud.pdf fallecido de sexo 15. Mujer portadora de un carcter 16. Individuo ligado a "X" masculino La historia gentica sexo familiar en su prcticaRepresentacin de varios profesional. En: 17. Individuo fallecido de 18. http://www.nchpeg.org/newsletter/NotJustforGeneticists.pdf de fem enino caracteres en un mismo individuo, sexo masculino Geneloga y cromosoma (sexo no Y. En: 19. Representacin de varios 20. Gestacin actual http://www.hispagen.org/ponencias/cromosomaY.pdf caracteres en un mismo individuo, de conocido) sexo femenino Actitud ante el(sexo recin nacido con malformaciones congnitas. En: 21. Gestacin actual 22. Gestacin actual (sexo fem enino) http://aeped.es/protocolos/genetica/2-rnmalformacion.pdf masculino) 23. Hijo adoptivo (interno o familiar) 24. Hija APENDICEadoptiva (interno o fam iliar) SIMBOLOSadoptivo (externo o no EN LA ELABORACION DEL ARBOL GENEALOGICO MAS USADOS 25. Hijo 26. Hija adoptiva (externo o no ECAA fam iliar) familiar) 27. Nmero de hermanos sin identificar sexo 29. Nmero de hermanos de caracteres normales, de sexo fem enino 31. Individuos afectados, femenino 33. Individuo afectado fallecido de sexo femenino 35. Individuo heterocigoto de sexo fem enino 37. Gemelos monocigticos o idnticos, de sexo masculino 39. Gemelo de cigocidad desconocida 41. Cruzamiento ilegtim o o convivientes 43. Divorcio 45. Matrimonio sin descendencia o 28. Nmero de herm anos de caracteres normales, de sexo masculino 30. Individuos afectados, masculino

32. Individuo afectado fallecido de sexo masculino 34. Individuo heterocigoto de sexo masculino 36. Gem elos dicigticos o fraternos 38. Gem elos monocigticos o idnticos, de sexo femenino 40. Cruzamiento legtimo o casados 42. Separacin 44. Unin entre consanguneos 46. Azoospermia (infertilidad) o

47. Persona de sexo masculino de quien se ignora si tiene o no el rasgo 49. Progenitor nico y su descendencia (pareja normal sin im portancia para el anlisis)

48. Persona de sexo femenino de quien se ignora si tiene o no el rasgo 50. Descendencia por orden de nacimiento. Nmeros rom anos indican generaciones. Nmeros arbigos indican orden de nacimiento dentro de cada generacin

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I II 1 2 3

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PRCTICA N 13 CROMOSOMAS HUMANOS. MACROSCOPA: CARIOTIPO COMPETENCIAS: 1. Observar como se presentan los cromosomas coloreados mediante mtodo convencional y bandeo GTG en cada una de las fotografas y/o fotocopias y contar el nmero total de cromosomas. 2. Identificar la morfologa de cada uno de los cromosomas segn el tamao y la posicin del centrmero (metacntrico, submetacntrico y acrocntrico) 3. Clasificar y analizar cada uno de los cromosomas por grupos segn Convencin de Denver. 4. Confeccionar el cariograma de cada fotografa. 5. Aplicar los conocimientos tericos y Evaluar el tipo de alteracin cromosmica que se presente en cada fotografa. 6. Juzga y relaciona el cariotipo con las alteraciones fenotpicas del sndrome. MATERIALES: Gua de Prcticas Fotografas y/o fotocopias de cariogramas. Vinifan o mica, tamao A-4 (transparente). Lpiz de cera Markin (para pintar vidrio) y/o plumn indeleble Tijeras. Cinta adhesiva o clips Cuatro hojas de papel bond blanco A-4. PROCEDIMIENTO: Con las fotografas y/o fotocopias confeccionar los cariogramas correspondientes de cada una de ellas. Segn las siguientes pautas: 1. Realizar el recuento de los cromosomas de cada una de las metafases sealadas. 2. Colocar una hoja de plstico transparente sobre una fotografa y calcar o copiar con lpiz MARKIN cada uno de los cromosomas: reconociendo sus elementos. 3. Transportar la copia sobre una hoja de papel bond blanco, en la que se anotarn los nombres de los cromosomas con letras. 4. RECONOCER E IDENTIFICAR los elementos: brazos p o brazo corto, brazo q o brazo largo, centrmero o constriccin primaria, satlite, tallo o talo. 5. RECORTAR los cromosomas de cada una de las fotocopias. 6. FORMAR los pares homlogos y colocarlos en orden decreciente de tamao. 7. DISTRIBUIR los cromosomas en grupos: A, B, C, D, E, F, G, y cromosomas sexuales X o Y, segn la clasificacin de DENVER. 8. Hacer el RECUENTO e IDENTIFICACION de los cromosomas autosmicos y sexuales. 9. ORDENAR LOS PARES DE CROMOSOMAS y colocarlos en una hoja de cartulina o papel bond de 80 gramos. 10. DIAGNOSTICAR el complemento cromosmico y sndrome correspondiente.

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Repetir la tarea con cada una de las fotografas. PREGUNTAS: 1.- Defina brevemente y en forma grfica, lo siguiente: Quinetochoro o Kinetochoro - Cromtide Cromosoma - Crommera Satlite - Tallo o Talo Cariograma - Cariotipo Haploidia Constriccin Secundaria Complemento cromosmico - Genoma Cromosoma acrocntrico Cromosoma Telocntrico Mitosis - Tetraploidia Monosoma - Meiosis Aneuploidia - Mosaico II. Segn el modelo de CARIOTIPO NORMAL a) Arme los cariogramas correspondientes a cada una de las fotocopias de las metafases sealadas. b) Diagnosticar el complemento o Frmula cromosmica en cada caso. c) Mencionar los sndromes correspondientes a cada uno de ellos. III Explique el fundamento y para qu se usan los mtodos de marca como: Bandas C, G, R, Q, NOR, FISH BIBLIOGRAFIA: Armendares Salvador. CITOGENETICA HUMANA. De Robertis Emery Alan. GENETICA MDICA. Edicin en espaol: Marbn Libros, S.L. capitulo 3 pp. 29-34 Gonzles Santander Egozcue J, y colaboradores. GENETICA MDICA. Grouchy J, y colaboradores. ATLAS DE ENFERMEDADES CROMOSOMICAS. Solari A. GENETICA HUMANA. Fundamentos y aplicaciones en Medicina. Thompson & Thompson. GENETICA EN MEDICINA. Lisker, Armendares, INTRODUCCION A LA GENETICA HUMANA. ANEXO 1 CARACTERSTICAS MORFOLOGCAS DE LOS CROMOSOMAS: CROMOSOMAS AUTOSOMICOS: Grupo A: Pares 1, 2 y 3. Cromosomas grandes, submetacntrico. metacntricos. El segundo par ligeramente

Grupo B: Pares 4 y 5 Cromosomas grandes submetacntricos.

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Grupo C: Pares 6, 7, 8, 9, 10, 11 y 12 Los pares 6, 7, 8 y 11 son medianos metacntricos Los pares 9, 10 y 12 son medianos submetacntricos. Los cromosomas sexuales X se encuentran en este grupo. Grupo D: Pares 13, 14 y 15 Cromosomas grandes acrocntricos y presentan satlites. Grupo E: Pares 16, 17 y 18 El par 16 es pequeo metacntrico El par 17 es pequeo submetacntrico. El par 18 es pequeo submetacntrico mediano. Grupo F: Pares 19 y 20 Cromosomas metacntricos, los ms pequeos. Grupo G: Pares 21 y 22 Cromosomas pequeos, acrocntricos Presentan satlites. El cromosoma sexual Y se encuentra en este grupo. CROMOSOMAS SEXUALES: CROMOSOMA SEXUAL X: Es metacntrico mediano. Con respecto a su tamao, es ms grande que el cromosoma N 6, y ligeramente ms pequeo que el tercer par del grupo A. Sus brazos p y q son rectos y paralelos entre s. CROMOSOMA SEXUAL Y: El cromosoma es pequeo acrocntrico Es ms grande que los cromosomas de su grupo (Grupo G) Sus brazos p son compactos y gruesos, se visualizan fcilmente. Sus brazos q son rectos y paralelos entre s. No presentan satlites.

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ANEXO 2 Ideograma del patrn de Bandas GTG.

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ANEXO 3

ANEXO 4

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PRACTICA N 14 A - DETERMINACION DEL CORPUSCULO X CROMATINA SEXUAL I. COMPETENCIAS: Observa en los ncleos de las clulas epiteliales en Interfase los elementos determinantes del sexo, identificando la presencia del cromosoma X en forma de corpsculo de Barr. Diferencia los ncleos positivos y negativos que le permitan diagnosticar el sexo cromatnico en la muestra estudiada. II. GENERALIDADES La masa cromatnica que se encuentra en las clulas de los mamferos hembras incluyendo a la especie humana, con excepcin de la zarigeya, constituye la CROMATINA SEXUAL, CUERPO DE BARR, O CORPSCULO X Puede encontrarse en diferentes tipos de clulas, pero debido a la sencillez del procedimiento y a la rapidez de la tcnica empleada se le estudia en clulas epiteliales de la mucosa oral. En las clulas epiteliales se encuentra ADHERIDA A LA MEMBRANA INTERNA DEL NUCLEO COMO DESCANSANDO EN ELLA. Su tamao normal vara de 0.7 a 1.2 micras (). Su forma puede ser triangular, semiesfrica, alargada o circular. Su nmero por ncleo vara de 0-4 corpsculos. En las clulas nerviosas se encuentra ubicada al centro del ncleo. En los neutrfilos segmentados se encuentra a manera de palillo de tambor

Su utilidad se evidencia porque ayuda en el diagnstico de los estados intersexuales, en el hermafroditismo especialmente en los Sndromes de Turner y Klinefelter, en estudios cromosmicos para determinar el nmero de cromosomas X presentes. La regla para determinar el nmero de cromosomas X puede indicarse en la siguiente frmula

NCS = NCX - 1
El nmero de cromatina sexual es igual al nmero de cromosomas X menos uno Esto se puede observar en el siguiente cuadro

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Si el corpsculo de Barr es pequeo, es decir menor de 0.7 o es grande, es decir mayor de 1.2, dar lugar a anomalas estructurales del cromosoma X como se observa en el siguiente cuadro:

Para el diagnstico debe examinarse por lo menos 100 ncleos por lmina y se obtendr el promedio expresado en porcentaje. Para la tcnica del Carbol-fucsina, de 0-5% es negativo y ms de 5% es positivo. III MATERIALES: Lminas o porta-objetos, Laminillas o cubre-objetos Lpiz Markin o marcador de lminas, Esptulas de madera o baja lenguas. Alcohol ter al 50%, Batera completa de coloracin, Blsamo del Canad, Aceite de inmersin, Microscopio con lentes de inmersin. IV. PROCEDIMIENTO 1. OBTENCION DE LA MUESTRA: - Limpiar las lminas y marcarlas con lpiz de vidrio.

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Realizar el raspado de las clulas epiteliales de la mucosa oral (carrillos derecho e izquierdo). Hacer el extendido de las muestras en las lminas. Fijarlas en alcohol-ter al 50% durante 5 a 10 minutos.

2. COLORACION: METODO DE CARBOL-FUCSINA - Hidrolizar las lminas con solucin de cido clorhdrico al 50% durante 10 minutos. - Lavar con agua destilada o agua corriente. - Colorear con carbol-fucsina durante 5 a 10 minutos. - Diferenciar en alcohol absoluto de 95% (aproximadamente 10 minutos). - Cambiar a alcohol absoluto por 1 minuto. - Clarificar con Xilol (2 cambios) - Montar en Blsamo de Canad 3. LECTURA Y DIAGNOSTICO: 3.1 OBSERVAR A 10X: - Ubicar la muestra en la lmina y observar estructuras puntiformes de color fucsia o lila. 3.2 OBSERVAR A 40X: - Diferenciar los ncleos buenos de los inadecuados e identificar el corpsculo X si es posible. - 3.3 OBSERVAR A 100X - Diferenciar los ncleos que presentan corpsculo de Barr (positivos) y los ncleos sin corpsculo (negativos). - Observar la morfologa y el tamao de los corpsculos. - Realizar el conteo de por lo menos 100 ncleos buenos, indicando los porcentajes analizados, luego obtener el promedio total. - Diagnosticar el sexo cromatnico, segn los criterios establecidos. - Esquematizar sus observaciones en el microscopio

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Ncleo negativo

Ncleo positivo V. CUESTIONARIO: 1. Defina: Cromatina Eucromatina Heterocromatina Cromatina positiva Cromatina negativa Clava o palillo de tambor Heteropicnosis Isopicnosis 2. Explique la hiptesis de Mary Lyon: Concepto, fundamento, propuesta resumen y conclusiones 3. Cules son los factores que alteran la cantidad y el tamao normal del corpsculo de Barr? 4. En que da de formacin y desarrollo embrionario se puede observar la cromatina sexual? VI. BIBLIOGRAFIA 1. CUMMINGS,HERENCIA HUMANA. 1. EGOZCUE,GENETICA MEDICA. 2. JORDE-CAREY -WHITE. GENETICA MEDICA 3. SOLARI, GENETICA HUMANA: FUNDAMENTOS Y APLICACIONES EN MEDICINA. 8. LISKER - ARMENDARES. INTRODUCCION A LA GENETICA HUMANA. B - CROMOSOMAS HUMANOS: MICROSCOPIA: I. COMPETENCIAS: Reconoce bajo el microscopio los elementos responsables de la herencia: LOS CROMOSOMAS EN LOS CULTIVOS CELULARES IN VITRO (CULTIVO DE LINFOCITOS) cuando las clulas estn en Interfase y en divisin (metafase).

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Comprueba el nmero de cromosomas en la especie humana diferencindolos por grupos (A, B, C, D, E, F, G Y SEXUALES) mediante el METODO CONVENCIONAL que podran corresponder a anomalas numricas. Observa los cromosomas mediante el METODO DE BANDAS GTG (bandeo G, Tripsina Giemsa) para identificar los cromosomas y poder averiguar anomalas estructurales.

II. GENERALIDADES La clula en divisin est formados por elementos en forma de varillas llamados cromosomas, que viene de Chroma = color y Soma = cuerpo. Es decir que se tien intensamente con los colorantes bsicos como la fucsina, osena, hematoxilina, etc. Cada especie animal o vegetal posee un complemento cromosmico propio y caracterstico en cuanto al nmero y formas de los cromosomas. El ser humano tiene 46 cromosomas. III. PROCEDIMIENTO Lmina N 1 Mtodo Convencional (Coloracin Giemsa). Lminas preparadas con cultivo de linfocitos en sangre perifrica. OBSERVAR A 10X: - Corpsculos pequeos de forma esfrica, intensamente teidos de color fucsia o lila (linfocitos en Interfase) Linfocito en Interfase

Linfocito en divisin

- Elementos puntiformes y/o alargados e intensamente coloreados formando grupos (linfocitos en divisin o metafases). - Esquematizar sus observaciones. OBSERVAR A 40X: - Realizar el recuento de los cromosomas en cada metafase. - Identificar los cromosomas reconociendo la morfologa de cada uno de ellos - Esquematizar sus observaciones.

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OBSERVAR A 100X: - Cromosomas en metafase identificando sus cromtide y la posicin de sus centrmeros. - Identificar los cromosomas por grupos (A, B, C, D, F, G y sexuales). - Esquematizar sus observaciones.

Brazo p Centrmero Brazo q Cromtide

Lmina N 2 Mtodo de Marca: Bandas GTG - Seguir el mismo procedimiento realizado en la lmina N1 observando detenidamente a 10X y a 40X.

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Cromosoma Metacntrico Cromosoma Sumetacntrico Cromosoma Acroctrico

OBSERVAR A 100X: - Cromosomas de los grupos antes mencionados. - Diferenciar las bandas en cada uno de los cromosomas buscando sus pares homlogos. - Comparar cada uno de los cromosomas y tratar de identificarlos con la ayuda del patrn de bandas que se presentan en la hoja adjunta. - Esquematizar los cromosomas 1, 2, 7, 19, 21 y los sexuales X e Y. Cromo. X Cromo. 2

Cromo. 19

Cromo. 1 Cromo. Y

Cromo.7

IV. PREGUNTAS: 1. Defina los siguientes conceptos: - Sitios frgiles - Polimorfismo de los satlites - Heteromorfismo cromosmico - Polimorfismo del cromosoma Y - Heterocromatina constitutiva 2. Mencione la importancia del uso de los siguientes reactivos en los cultivos celulares para obtener cromosomas in vitro.
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Fitohemaglutinina Solucin hipotnica Colchicina Glutamina

- Tripsina - Quinacrina - Fijador Carnoy - Solucin Hans

3. Explique cul es el fundamento y para qu se usan los mtodos de marca como: - Bandas G - Bandas C BIBLIOGRAFIA 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. CUMMINGS, MICHAEL. HERENCIA HUMANA. DE ROBERTIS, E. BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR. GROUCHY-TURLEAU. ATLAS DE ENFERMEDADES CROMOSOMICAS LISKER-ARMENDARES. INTRODUCCION A LA GENETICA HUMANA. MULLER-YOUNG. GENETICA MEDICA EMERYS SANCHEZ CASCOS Y COL GENETICA AL DIA Editorial Labor. THOMPSON, THOMPSON. GENETICA MDICA. - Bandas Q - Bandas NOR - Bandas R - Bandas G11 - FISH - ICH

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PRACTICA N 15 USO DE MARCADORES MOLECULARES DE ADN PARA LA DETERMINACIN DE VARIANTES I / D EN EL GEN ACE, ASOCIADO CON ENFERMEDADES CARDIOVASCULARES FUNDAMENTO El sistema RAS (Renin Angiotensin System) cumple una funcin muy importante en la homeostasis cardiovascular. La enzima ACE (Angiotensin Converting Enzyme) cataliza la reaccin del paso de Angiotensina I a Angiotensina II. La Ang II es una potente vasoconstrictora que ejerce su influencia sobre el corazn y los vasos sanguneos a travs de sus efectos hemodinmicos y celulares directos. Se ha reportado que la inhibicin farmacolgica de ACE conduce al mejoramiento en algunos pacientes con desrdenes cardiovasculares (por ejemplo, hipertensin, enfermedades coronarias e hipertrofia ventricular izquierda), razn por lo cual el anlisis gentico del polimorfismo de ACE y de otros genes asociados, es de suma importancia ya que conllevara a dilucidar los alelos implicados en dichas enfermedades. En algunos estudios previos en diferentes poblaciones, los individuos con genotipo DD tienen una propensin superior en 3 a 4 veces para sufrir algunas enfermedades cardiovasculares, sin embargo esto no sucede en todas las poblaciones, por ello estamos caracterizando la distribucin de los alelos ACE en pacientes y controles de la poblacin peruana. OBJETIVOS Identificar los genotipos I/I, I/D, y D/D en las muestras sanguneas MATERIALES Muestras sanguneas (1 ml) Guantes Agarosa Buffer de carga (azul de bromofenol,xilenecyanol, sucrosa) Buffer 1XTBE Solucin de EtBr Micropipetas Gradillas Equipo de electroforesis, fuente de poder, termociclador Transiluminador UV PROCEDIMIENTO 1. Extraccin de ADN de sangre perifrica (lavados de clulas con Tris-EDTA, lisado con N-Laurylsarcosine, digestin proteica con Proteinasa K, precipitacin con etanol y sales). 2. Amplificacin de un sector del intron 16 del gen ACE (locus 17q23). La tcnica de PCR (Polymerase Chain Reaction) se basa en la aplicacin de la Taq ADN polimerasa, que sintetiza las cadenas complementarias de ADN, iniciando desde dos oligodesoxinucletidos (primers F y R) en todo el rea especfico del genoma
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a) b) c) 3. 4. 5.

previsto para la amplificacin. El material bsico de construccin es la mezcla de los cuatro desoxinuclesidotrifosfatos (dNTPs), es decir, A (adenina), G (guanina), T (timina) y C (citosina). Para que los oligodesoxinucletidos hibridizen con la doble espiral de ADN, es necesario antes denaturar y separar las dos cadenas de ADN a una temperatura adecuada con la finalidad de que cada cadena sirva de matriz molde para la sntesis respectiva. En principio, se cumplen tres etapas de reacciones: Denaturacin del ADN ( 94C ) Hibridacin ( 58C ) Elongacin con la Taq ADN polimerasa ( 72C ) Gel electroforesis en 1,4 % de agarosa, voltaje ~ 100v Tincin en solucin de bromuro de etidio Visualizacin del ADN amplificado en luz UV

Fig. 1. Electroforesis de los productos PCR de un sector del intrn 16 del gen ACE
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18

490 bp 190 bp DD II ID M

300 bp

Fig.2 Esquema del gen ACE y de la regin polimrfica (delecin insercin)

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El polimorfismo consta de dos fragmentos allicos: uno de 490 bp denominado insercin (I) y el otro de 190 bp denominado delecin (D). II = Homocigota para la insercin ID = Heterocigota insercin/delecin DD = Homocigota para la delecin M = Marcador de tamao 100 bp 1-18 = Individuos diferentes

Fig.3 Localizacin del gen ACE en el cromosoma 17

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