REPLICAO

Daniela de Oliveira Pinto

INTRODUO
DNA ocupa uma posio central como repositrio das informaes genticas Suas seqncias de nucleotdeos codificam todos RNAs e protenas celulares Portanto, deve ser preservado sem alteraes e transmitido de uma gerao para outra intacto

COMPLICADORES DO PROCESSO
Tamanho da molcula Compactao e ligao a outras protenas Velocidade Simultaneidade Momento certo dentro do ciclo celular Fidelidade

Modelo: E. coli

REGULAO DO PROCESSO
Ciclo celular

REGRAS DA REPLICAO
1. A replicao um processo semi-conservativo

2. A replicao tem incio em uma origem e depois procede biderecionalmente

Origem de Replicao
- 245 pb;
- 3 repeties de 13 pb; - 4 repeties de 9 pb; (A=T)

- Em outros eucariotos, as seqncias de DNA nas origens de replicao variar. - Todas as origens formam uma base para a montagem de um grupo de protenas conhecidas coletivamente como a pr complexo de replicao (pr-RC) - Complexo de reconhecimento de origem (ORC) ligao da Cdc6 e Cdt1 - Este complexo de protenas que indica a origem de replicao est pronto para a ativao. Uma vez que a origem de replicao ativado, o DNA da clula ser replicado.

3. A sntese de DNA feita na direo 5 3 e semidescontnua

PRINCIPAIS ENZIMAS ENVOLVIDAS (SISTEMA DE REPLICAO DO DNA)

1. 2. 3. 4. 5. 6.

DNA Polimerases Helicases Topoisomerases Primases Ligases Telomerases

DNA Polimerases
principais enzimas envolvidas no processo; responsveis pela adio de nucleotdeos e reparo requerem um modelo e um primer (segmento de RNA sintetizado pela primase) complementares para incio alongamento 3 tipos principais : I, II, III I : importante no sistema de reparo III: principal e mais complexa (mais de 10 subunidades)

Adio de nucleotdeos
1

OUTRAS ENZIMAS
HELICASES: separao da dupla fita DNA-binding proteins (SSB): mantm as fitas separadas estabilizadas PRIMASES LIGASES: conectam fragmentos de fitas menores

ESTGIOS DA REPLICAO

1. INICIAO 2. ALONGAMENTO 3. TERMINAO

INICIAO
Reconhecimento da Origem de replicao.

Papel da: DnaA (principal)

DnaB (helicase) DnaC

2. ALONGAMENTO
Envolve duas operaes distintas, mas relacionadas: 1. Sntese da fita lder 2. Sntese da fita tardia

Incio comum na forquilha de replicao envolvendo:

helicases topoisomerase DNA binding proteins

SNTESE DA FITA LDER

1. Sntese de um RNA primer pela primase na origem de replicao 2. Desoxirribunocleotdeos so adicionados pela DNA polimerase III continuamente a partir da forquilha de replicao

SNTESE DA FITA TARDIA

1. Sntese de um RNA primer pela primase (DnaG) na origem de replicao
2. Sntese dos fragmentos de Okasaki 3. Uma s polimerase: so criadas alas para aproximar os dois pontos de replicacao ( das duas fitas) 4. Processo repetido diversas vezes

TERMINAO
-Procariotos: DNA circular, quando as duas forquilhas de replicao se encontram ela termina. Ainda h o sistema Ter-tus. -Eucariotos: seqncias de nucleotdeos especficas no final dos cromossomos, incorporadas a telmeros.

REGULAO
-nica fase regulada da replicao, de forma que s ocorra uma vez por ciclo celular ;
-afetada pela metilao de DNA -DAM metilase na (5) GATC sobre a fita parental

CONTROLE DA REPLICAO DENTRO DO CICLO CELULAR

Dois mecanismos de controle identificados:
1.Positivo: para ser replicada, cada origem de replicao deve estar ligada a: - ORC - licensing factors ( acumulam-se durante G1): CDC-6, CDT-1 , MCM 2. Negativo : o ncleo em G2 possui uma protena geminin- que impede a assimilao de MCM nas fitas recm-sintetizadas. Ela destruda aps a mitose, permitindo que os licensing factor se liguem novamente e tenha uma nova replicao em S.

PARTICULARIDADES DOS EUCARIOTOS

Diferenas fundamentais : - estrutura nucleoproteica complexa; - molcula de DNA maior ( 150 x 106 vs 4,7 x 106); - cromossomos lineares. Solues: - maquinrio enzimtico mais complexo; - mltiplas origens de replicao; - telmeros.