Seminrio de Engenharia Bioqumica

Tema: Biopolissacardeos
Alunos: Ieda Friedirich Miguel Tevos Sandro de Quadros

Florianpolis, 12 de setembro de 2008. ndice Introduo........................................................................................................ ................1 Polissacardeos Bacterianos..............................................................................................2 Sntese de polissacardeos extracelulares.........................................................................2 Pr-tratamento dos meios.................................................................................................5 Bactrias produtoras de exopolissacardeos......................................................................5 Parmetros envolvidos no processo de produo dos polissacardeos extracelulares......6 Recuperao e quantificao de exopolissacardeos..........................................................7 Composio dos Biopolmeros bacterianos e suas aplicaes............................................7 Goma gelana.............................................................................................................. .........8 Goma xantana............................................................................................................ .........9 Alginato............................................................................................................ ..................10 Goma curdlana........................................................................................................... ........10

Introduo Gomas, biopolmeros e polissacardeos, so algumas denominaes para materiais que possuem a capacidade de tornar sistemas aquosos mais espessos e viscosos ou formar gis, ou seja so substncias altamente hidroflicas que se dissolvem ou se dispersam em gua aumentando a viscosidade do sistema. Estes materiais originalmente obtidos de plantas e algas marinhas vm sendo gradualmente substitudos por biopolmeros obtidos atravs de processos fermentativos. Os exopolissacardeos ou gomas hidrossolveis, possuem propriedades fsicas, estruturais e qumicas bastante homogneas, em relao aos derivados de algas e plantas. A produo independente de condies climticas, maior rapidez na obteno do produto acabado e o espao necessrio relativamente pequeno; esses biopolmeros, tm sido amplamente estudados nos ltimos anos. Devido a ampla diversidade em estrutura e propriedades fsicas, os polissacardeos microbianos possuem muitas aplicaes em industria de alimentos, farmacutica, petrolfera, cosmtica, txtil, de tintas, produtos agrcolas entre outras. Algumas dessas aplicaes, dependendo de sua estrutura qumica, incluem seu uso como emulsificantes, estabilizantes, ligantes, agentes gelificantes, coagulantes, lubrificantes, formadores de filme, propriedades floculantes, adesivas e redutoras de frico. Este trabalho tem como objetivo discutir algumas generalidades no processo de produo e biossntese de exopolissacardeos produzidos por microorganismos. 1

Polissacardeos Bacterianos Na industria de alimentos a preferncia por biopolmeros microbianos deve-se principalmente s suas propriedades e caractersticas funcionais, que esto relacionadas capacidade de espessar, de manter partculas em suspenso e reter gua, somadas s vantagens de uma produo independente das condies climticas e sob condies controladas. A especificidade da biossntese dos microrganismos tambm um ponto importante, j que permite adicionalmente modificaes genticas, visando obter polissacardeos com propriedades caractersticas especficas. A capacidade de produzir polissacardeos amplamente encontrada entre diferentes espcies microbiana, especialmente em procariontes. Um grande nmero de polissacardeos bacterianos potencialmente til, mas relativamente poucos tm sido desenvolvidos comercialmente devido a possibilidade da bactria ser patognica, a produo pode ter custo elevado, a qualidade do produto pode ser dificilmente mantida e garantida ou o produto pode no alcanar aceitabilidade. Apesar desses problemas, vrios polissacardeos de bactrias gram-negativas so economicamente viveis e bastante utilizados, como a xantana e a gelana. A estrutura de muitos polissacardeos de bactrias Gram-negativas relativamente simples. So formados de homopolissacardeos (normalmente polmeros compostos de D-glicose) ou heteropolissacardeos, este ltimo normalmente composto de unidades repetidas e alinhadas desde dissacardeos at octassacardeos, compostos de dois a quatro tipos de monossacardeos diferentes e muitos contm grupos acetila e piruvato. As propriedades fsicas de um exopolissacardeo microbiano dependem de suas

estruturas primria, secundria e terciria. Extensos estudos com polissacardeos, por exemplo, a goma xantana produzida por bactrias selvagens e mutantes, tem fornecido alguma indicao da relao entre a estrutura do carboidrato, o grau de acilao e suas propriedades fsicas. Antes de se definir a aplicabilidade de qualquer biopolmero necessario obter primeiro estudos desse material em diferentes condies como efeito de sais, pH, temperatura, etc. Sntese de polissacardeos extracelulares Na literatura h poucas informaes sobre o processo da biossntese dos diferentes tipos de exopolissacardeos. Um bom entendimento do processo bioqumico importante, pois estas informaes podem ser usadas para controle e otimizao da produo e tambm para ter conhecimento das caractersticas fsico-qumicas dos mesmos. Com o conhecimento do processo biossnttico podem-se adaptar os processos tecnolgicos com o objetivo de diminuir os custos. Os biopolmeros sintetizados por bactrias dividem-se em trs grupos: intracelulares, integrantes da parede celular (como glucanas e mananas em leveduras) e extracelulares, segundo sua localizao morfolgica. A pesquisa visando aplicao industrial, de modo geral, est concentrada nos polissacardeos extracelulares, pois apresentam um processo de extrao e purificao mais simples, alm de possibilitarem uma produtividade mais elevada. Alguns biopolmeros microbianos podem ser produzidos em meio lquido, pelo cultivo do microrganismo ou por via enzimtica, utilizando enzimas purificadas, sem adio do 2 microrganismo. A utilizao, em processos fermentativos, de substratos alternativos de baixo custo, tais como: resduos agro-industriais, permite a reduo dos custos de produo, minimizando problemas ambientais, pois auxilia na destinao desses resduos. Glicose e sacarose so usadas como fontes de carbono preferenciais para a produo de biopolmeros, porm, algumas fontes alternativas tm sido sugeridas, tais como melao, resduo da indstria de soja, soro de leite entre outros. O melao um subproduto do processo de produo de acar, tanto o acar de beterraba quanto acar de cana, sendo definido como um xarope que escoa do estgio final da cristalizao do acar. uma das fontes de carbono mais econmica na indstria microbiana, sendo usado como substrato em fermentaes. O subproduto do processamento da soja, uma rica fonte de protenas, vendido como resduo, de baixo valor econmico. Dependendo do processo de obteno, possui tambm valores significativos de carboidratos; por exemplo, o resduo do processo de protena texturizada de soja possui em torno de 28-32% de carboidratos e 50-54% de protenas.

O soro de leite, resultante da fabricao de queijos vem sendo estudado como uma fonte alternativa para a produo de goma xantana. A produo diria de soro de leite atinge quantidades muito elevadas e seu descarte representa um srio problema ambiental. Entretanto, possui alto teor de lactose alm de protenas e sais minerais, constituindo um meio de cultura rico e de fcil obteno. Porm, os meios industriais utilizados para a produo de polissacardeos so bastante complexos e alguns de seus componentes podem ser responsveis pela inibio da produo destes, ou ainda, dificultar sua posterior recuperao e purificao. As bactrias Gram-negativas tambm tm sido apontadas como as de melhor aptido para o processo, obviamente que para biopolmeros de uso alimentar, a bactria no deve ser patognica. Os exopolissacardeos possuem a funo de proteger a clula bacteriana contra dessecao e ataque de fagos, bem como de antibiticos, compostos txicos e protozorios. Outra possvel funo do exopolissacardeo inclui sequestrar ctions essenciais e envolvimento na aderncia em superfcies slidas e formao de biofilmes. A produo de exopolissacardeos pode ser realizada com muitas espcies de bactrias Gram-negativas e Gram-positivas, algumas algas e muitos fungos. Para isto, podem ser usados os mais diversos substratos: glicose, frutose, sacarose, lactose, amido hidrolisado, metanol, diferentes hidrocarbonetos. O custo de produo dependente destes substratos. Diversas pesquisas tm tentado elucidar a rota biossinttica, as condies de crescimento, e a fisiologia bacteriana que leva produo de polissacardeos. Geralmente, a produo de exopolissacardeo em um microrganismo induzida pela limitao de um nutriente essencial, que no seja o carbono ou outra fonte de energia. Freqentemente uma relao C:N alta tem sido considerada como a condio ambiental mais significativa para a produo de polissacardeo. Alguns exopolissacardeos so sintetizados durante todo o crescimento bacteriano enquanto que outros so produzidos somente durante a fase logartmica ou na fase estacionria. A sntese de todos esses exopolissacardeos um processo intracelular utilizando acares difosfato nucleotdios. Embora sejam conhecidos dois mecanismos diferentes para a sntese de exopolissacardeos por bactrias, o utilizado na formao de dextrana, envolvendo enzimas extracelulares lipoproticas secretadas na superfcie da clula de bactrias Gram-positivas, tal como Leuconostoc mesenteroides, no se aplica s espcies Gram-negativas. Nestas, os exopolissacardeos (heteropolissacardeos e homopolissacardeos) so sintetizados intracelularmente. Os acares nucleotdeos (acar difosfato nucleotdio) fornecem as formas ativadas de monossacardeos e tambm fornecem clula bacteriana um meio de interconverso dos vrios monossacardeos atravs de reaes de epimerizao, desidrogenao e descarboxilao. Depois da polimerizao das unidades repetidas o polissacardeo excretado atravs do complexo parede/membrana para a

superfcie celular no ambiente extracelular. Este estgio final da secreo do exopolissacardeo na membrana citoplasmtica envolve a passagem pelo periplasma, pela membrana e finalmente sua excreo para o ambiente extracelular. No exterior da clula microbiana os exopolissacardeos podem permanecer soltos (como muco viscoso) ou podem estar ligados covalentemente (a um fosfodister ou a um lipdio) na superfcie da clula. Neste ltimo caso, o material pode formar uma cpsula, que pode ser reconhecida microscopicamente e que pode estar aderida firmemente superfcie. Cada etapa requer uma srie de enzimas e substratos especficos. A ausncia de uma enzima ou substrato, em particular, inibe a sntese do exopolissacardeo. Em Xanthomonas campestris uma srie de enzimas de membrana formam a molcula aceptora do polmero. Um problema que pode ocorrer na sntese de exopolissacardeos a presena de polissacarases especficas ou polissacardeo-liases que degradam o exopolissacardeo produzido pela bactria. H produtos intracelulares localizados no periplasma, nos quais os genes estruturais esto estreitamente associados com aqueles para a biossntese de polissacardeos. Caso ocorra lise da clula durante o cultivo, as enzimas podem ser liberadas para o meio extracelular podendo ocorrer a degradao dos produtos polimricos e a reduo drstica da massa. Tais problemas so especialmente pertinentes durante a produo de alginato bacteriano e tambm na produo comercial de cido hialurnico. A produo de gelana por Sphingomonas paucimobilis tambm envolve uma gelana-liase enquanto Xanthomonas campestris produz uma celulase. Pr-tratamento dos meios Altas concentraes de metais pesados no meio causam problemas crticos durante a fermentao, tais como inibio do crescimento microbiano, influenciam o pH do substrato e esto envolvidos na inativao das enzimas associadas com a biossntese do produto. Entretanto, contaminantes como metais pesados e inibidores especficos so removidos parcialmente com pr-tratamentos. Estes pr-tratamentos clarificam o meio sem provocar prejuzos na fermentao, garantindo maior facilidade na extrao e purificao de bioprodutos. O pr-tratamento do substrato e a obteno do extrato aquoso de resduo depende logicamente do tipo do produto. Como ilustrao descrevemos aqui o caso do melao. A partir da soluo de melao na concentrao desejada. Ajusta-se o pH=3,0 com sol. H2SO4 1N. Repousa a temperatura ambiente por 24h. Centrifuga-se (5000 rpm / 15 min.)Ajusta-se novamente o pH=4,0 com sol. NaOH 2N. Por ltimo basta ler a absorbncia em 600nm (branco = gua destilada). Resultando na soluo de melao pr-tratado. O pr tratamento utilizado em uma infinidade de processos devido a complexidade dos meios geralmente utilizados. Bactrias produtoras de exopolissacardeos

Os microrganismos produzem vrios insumos alimentares. Estes podem ser cultivados em vrios tipos de meio de cultura de baixo custo para a obteno do metablito desejado. Muitos microrganismos j foram isolados da natureza e utilizados industrialmente mais a maioria deles, potencialmente importantes, podem no ter sido ainda explorados, estimase que apenas 5% dos fungos e 2% das bactrias tenham sido devidamente identificados. Mesmo que muitas linhagens tenham sido melhoradas geneticamente em laboratrio, h sempre a possibilidade de que a natureza abrigue uma linhagem com maior potencial, seja na forma selvagem, seja por melhoramento gentico. Um grande nmero de bactrias conhecidas produz quantidades abundantes de exopolissacardeos, particularmente as patognicas de plantas como Xanthomonas, Erwinia e bactrias fixadoras de nitrognio Rhizobium, Beijerinkia e Azotobacter. Destas, os exopolissacardos de Xanthomonas campestris (xantana), Sphingomonas paucimobilis e Pseudomonas elodea (gelana), Acetobacter xylinum (celulose) e Rhizobium sp. (succinoglucana) esto sendo comercializados. A pesquisa de biopolmeros via fermentao microbiana tem uma longa histria. Entre os biopolmeros mais estudados esto os alginatos bacterianos produzidos por Pseudomonas sp., dextrana de Leuconostoc mesenteroides, xantana por Xanthomonas campestris, pequenas quantidades de cellulose de Acetobacter xylinium, cido hialurnico de Streptococcus equii, succinoglucana de Rhizobium e gelana de Sphingomonas paucimobilis e Pseudomonas elodea. Muitas bactrias Gram-negativas podem produzir mais de um exopolissacardeo: Xanthomonas campestris produz somente um nico exopolissacardeo, a xantana. Rhizobium e outras espcies de bactrias podem sintetizar dois ou mesmo trs polmeros extracelulares, juntamente com oligossacardeos intracelulares, contudo a sntese dessas molculas pode no ser expressada simultaneamente. Algumas bactrias cido lticas como Lactococcus lactis produzem polissacardeos extracelulares que so economicamente interessantes porque podem conferir efeitos funcionais nos alimentos e benefcios a sade. A maioria dos estudos de produo de exopolissacardeos por bactrias cido lticas focaliza a influncia das condies de desenvolvimento fisiolgico na biossntese de exopolissacardeos, na gentica da biossntese e na elucidao da composio da estrutura primria destes exopolissacardeos. Bactrias do gnero Sphingomonas produzem biopolmeros como gelana, welana, ramsana e diutana que tm caractersticas gelificantes, alta viscosidade e melhor estabilidade trmica do que outras gomas, despertando interesse das indstrias de alimentos, farmacutica e petroqumica.

Parmetros envolvidos no processo de produo dos polissacardeos extracelulares No processo de produo de polissacardeos deve-se considerar desde o microrganismo em estudo at a determinao dos parmetros de fermentao, onde se destaca o meio de produo e sua influncia na sntese, no rendimento e na composio dos exopolissacardeos. Os parmetros que mais influenciam o processo de biossntese de exopolissacardeos so o microrganismo produtor, a composio do meio de cultivo, o pH e a temperatura de incubao. Dessa forma as gomas de origem microbiana podem ser obtidas por bioprocessos de forma contnua, controlada e com a possibilidade de utilizao de subprodutos ou resduos agroindustriais como matria-prima. Nestes tm sido pesquisadas as limitaes das fontes de nitrognio, fosfato ou enxofre em presena de excesso de carboidrato e foi observado que podem conduzir a um aumento na sntese de polissacardeo, embora a quantidade seja tambm afetada pelo teor de oxignio, pH e temperatura. Cada cepa bacteriana difere em sua resposta ao efeito destas mudanas ambientais e fonte de carbono utilizada. Alm disso, as condies ideais para o crescimento bacteriano e a produo de polissacardeo em culturas descontnuas tambm so afetadas pela proporo entre o volume de ar e o de meio, a presena ou ausncia de agitao, o tamanho do inculo, a quantidade e a composio de micronutrientes. Portanto, a utilizao do meio de fermentao mais adequado para a produo de exopolissacardeos ir refletir nas propriedades funcionais de cada polissacardeo obtido. Durante a fermentao, a fonte de carbono convertida pela clula microbiana em biopolmero sob certos parmetros fixos (pH, temperatura, tempo de incubao, etc). Geralmente, concentraes limitantes de alguns nutrientes e excesso de carboidrato favorecem a produo de polissacardeos. Obtmse um alto rendimento quando ocorre a converso de 70-80% da fonte de carbono utilizada em biopolmero. Na literatura esto descritos vrios meios de produo, entretanto a composio qualitativa a mesma e cada suplemento apresenta uma determinada funo na produo de polissacardeo. Basicamente, os meios para produo de polissacardeos apresentam uma fonte de fsforo (fosfato de potssio) e nitrognio (sulfato de amnio) em concentraes adequadas para o crescimento do microrganismo; uma fonte de carbono (glicose, sacarose, manose, frutose e outras) como reserva energtica e ainda oligoelementos como Na+1, K+1,Ca2+, Mg2+, Fe2+ e outros, os quais tm um papel importante como cofatores enzimticos nas vias de produo do polissacardeo. Enzimas responsveis por alguns processos metablicos de transferncia de energia so afetadas por mudanas de pH e temperatura, afetando desta forma o balano energtico da clula. Por exemplo, a proporo de NADH/NAD+ influncia a atividade da enzima lactato desidrogenase; uma alta taxa inibe esta enzima.

A temperatura um fator crtico na sntese de polissacardeos. O maior crescimento e a maior produo de polissacardeo ocorrem na faixa de 25-35C, onde cada espcie bacteriana apresenta a sua temperatura tima. O oxignio necessrio para a sntese dos monmeros do polmero ou para a oxidao e reduo dos nucleotdeos. Entretanto, h pouca informao na avaliao do efeito da tenso de oxignio dissolvido e do oxignio utilizado para o crescimento e produo de polissacardeo durante a fermentao. Em geral o tipo e a concentrao da fonte de nitrognio tem uma influncia mdia no fluxo de carbono, na formao de produtos ou na formao de biomassa. Isto j foi relatado no caso da produo de xantana, alginato e gelana, onde uma alta proporo C:N favorece um acmulo de exopolissacardeo. Algumas tentativas tm sido feitas para melhorar as propriedades fsicas de polissacardeos comerciais utilizando vrios meios de cultura. A otimizao destas condies de cultura e do meio fermentativo tm tido xito no caso da goma xantana. Nesta, foi verificado que a viscosidade pode variar em funo da cepa bacteriana, do meio e condies de fermentao. A viscosidade um parmetro determinante para a seleo de cepas produtoras de biopolmeros. Na indstria o maior interesse por gomas que quando adicionadas em concentraes mnimas (0,01 3%), sejam capazes de promover altas viscosidades. Recuperao e quantificao de exopolissacardeos Ao longo dos ltimos anos, tm sido desenvolvidos diferentes mtodos de anlise de exopolissacardeos EPS. Os quais tipicamente envolvem a combinao de tcnicas de isolamento (ou recuperao), purificao e quantificao (em meios de cultura). Os meios de crescimento podem ser quimicamente definidos ou semi-definidos aos quais so muitas vezes adicionadas fontes de lactose como potenciadores de crescimento. A lactose pode no entanto surgir como interferente na quantificao dos EPS recolhidos, mesmo aps processos de dilise. Com o objetivo de avaliar at que ponto um meio quimicamente definido pode interferir na recuperao de EPS e na determinao da sua composio em acares, alguns estudos vem utilizando diferentes solues(modelo) e as influncias na adio de lactose podem assim ser avaliadas. Para a precipitao das protenas a relatos da utilizao de cido tricloroactico (TCA) e cido sulfo-saliclico submetendo juntamente a precipitao dos polissacardeos com etanol. Essa nova tcnica descrita apresenta melhores resultados apresentando menos perda de polissacarideo nos sobrenadantes.

Como exemplo podemos citar a produo de polissacardeos por Rizbios. Essa produo se refere a um processo biolgico de produo de um bipolmero de polissacardeo com propriedades similares a goma xantana por microorganismos do gnero Rhizobium e Bradyrhizobium, propondo a conformao de uma goma do tipo xantana que seja obtida por meio de microrganismos no patognicos e no apresenta a pigmentao amarelada caracterstica das gomas atualmente produzidas, fato este que reduz os custos de recuperao do polmero. Aps 4 a 5 dias de cultivo a goma produzida precipitada com lcool, seca e moda.

Goma Gelana A goma gelana um importante polissacardeo (comercializado pela Kelco Co.(EUA)) que vem sendo apontado como um dos mais eficientes e multifuncionais hidrocolides desenvolvidos at o momento. Foi o segundo polissacardeo de origem microbiana a ser aprovado para uso em alimentos pelo FDA, em 1992. Sua descoberta deu-se em 1977, quando a bactria produtora Pseudomonas elodea foi identificada pela primeira vez durante uma pesquisa sobre microrganismos sintetizadores de gomas isolados do ambiente. A estrutura da gelana uma cadeia linear composta pela repetio de glicose, raminose e unidades de acido glucurnico. A goma gelana apresenta geralmente boa estabilidade em relao ao pH, sais, calor e tambm compatibilidade com outros ingredientes. A deacilao feita a partir de alclis. A alta acilao forma produtos leves, elsticos e gis noquebradios, enquanto que cadeias pouco aciladas so formados produtos firmes, inelsticos e gis quebradios. Portanto, adicionando-se uma razo dessas duas formas pode-se obter inumeras texturas. As funes da goma gelana em alimentos estrutural e como agente gelificante em uma grande variedade de alimentos. Assim podemos encontrar essa goma tanto em produtos pr-preparados como em reconstitudos de misturas secas. Em meios microbiolgicos a goma gelana tem sido uma alternativa ao uso do agar devido a sua pureza e tambm a sua translucidez. Em papis a goma gelana um excelente formador de filme para aumentar a resistncia interna do papel e melhorar a sua impressibilidade. Na industria farmacutica essa goma tem sido utilizada na fabricao de plulas, cpsulas, em produtos de cuidado pessoal, no shampoo, pasta de dente, cremes e loes. Essa grande aplicabilidade devido principalmente as suas propriedades gelificante e estabilizante. Assim aplicada em tantos outros produtos nos quais til a sua pseudo plasticidade. Goma Xantana

Dos polmeros de origem bacteriana, a goma xantana tem sido a mais estudada, uma vez que seu uso em alimentos foi permitido pela Food and DrugAdministration (FDA), desde julho de 1969 (FDA,1969). A goma xantana comercial produzida pela linhagem de Xanthomonas campestris utilizando xarope de glicose como fonte de carbono, derivados de amnia como fonte de nitrognio e fatores de crescimento sob condies aerbias a 28oC e agitao constante. Essa goma produzida por fermentao aerbica em submerso. A produo da goma xantana geralmente envolve vrios passos na inoculao, seguidos pela fermentao em grandes tanques de ao inoxidvel . O equipamento de fermentao esterilizado antes do uso e tcnicas asspticas rigorosas so seguidas para se garantir a cultura pura. No meio de composio a aerao, agitao, pH, e temperatura so controlados para se garantir resultados timos e a reprodutibilidade do processo. Depois de se completar a fermentao o produto pasteurizado para matar os microorganismos antes desse produto ser recuperado. Tipicamente, a goma xantana precipitada com lcool. O lcool ento removido e o produto resultante seco, triturado e testado. Cada unidade dessa goma consiste de cinco aucares residuais: duas glicose, duas manose e um cido glucurnico. O seu peso molecular aproximado de 2 milhes de daltons. Devido a esse alto peso molecular , o qual forma aglomerados moleculares complexos atravs de pontes de hidrognio a goma xantana altamente pseudo plstica, ou seja, sua viscosidade diminui com aumento da tenso de cisalhamento. A xantana amplamente utilizada na industria de alimentos devido as propriedades de suspenso, estabilizao, floculao e caractersticas pseudoplsticas de suas solues aquosas. Pode tambm ser empregada na indstria farmacutica, em pesticidas agrcolas, na fabricao de tintas e indstria txtil devido sua alta viscosidade em pequenas concentraes, compatibilidade com sais minerais e boa estabilidade em uma ampla faixa de pH, temperatura e fora inica. Um exemplo ilustrativo da produo de xantana descrito a seguir. A produo do biopolmero ocorre em duas fases, utilizando-se meios de cultura diferentes. No primeiro estgio a cepa inoculada em erlenmeyer de 125mL contendo 6mL de meio. O inculo incubado em shaker a 28C, 150rpm durante 24h, para aumento da massa celular. Essa massa celular usada na fase seguinte, que a fase de sntese da xantana. Na segunda fase, o inculo transferido para erlenmeyer de 250mL contendo 45mL de meio de cultura. A produo realizada a 28C, 200rpm, pH livre durante 72h. Aps, o caldo fermentado centrifugado para remoo da massa celular e o biopolmero precipitado pela adio de lcool etlico 96GL sendo posteriormente seco a 56C at peso constante. Posteriormente o biopolmero pesado e calculado a produo de cada cepa em g.L-1. O biopolmero de cada cepa triturado, e preparada uma soluo aquosa a 3% (m/v). A determinao da viscosidade aparente analisada em remetro rotativo a 25C, usando sensor placa-placa, aplicando uma taxa

de deformao de 0,01 a 100s-1 por um perodo de 300s, obtendo-se um total de 50 pontos. As anlises so realizadas em triplicata.

Alginato

O cido algnico um heteropolissacardeo composto dos cidos -Lglucurnico e -D-manurnico. Utilizado na industria para a produo de microesferas de alginato. Esse polieletrlito carboxlico solvel em gua e precipita na forma de um coacervato na presena de ons metlicos multivalentes como Ca, Co, Zn, Ba, Fe,Fe e Al. Na produo de alginato por Azotobacter vinelandii o peso molecular do polmero influenciado pela taxa de oxignio dissolvido no meio e pela agitao do caldo de fermentao, onde alta tenso de oxignio produz mais alginato e baixas rotaes (< 300 rpm) levam o microrganismo a produzir polmeros de alto peso molecular.

Goma Curdlana um polissacardeo produzido por bactrias como Alcaligenes faecalis variedade myxogenes. Foi Aprovada em 16 de dezembro de 1996, pelo FDA para uso como aditivo alimentar nos Estados Unidos. comercializada na forma de p, obtido atravs do mtodo spray-dring. Em suspenso aquosa, a curdlana capaz de formar gel por aquecimento e de acordo com a temperatura de aquecimento, h formao de dois tipos de gis. O gel low-set, que formado quando a suspenso aquosa de curdlana aquecida a 50 C- 60 C e ento resfriada a temperaturas inferiores a 40 C, sendo este um gel termoreversvel similar ao agar-agar e a gelatina. E o gel high-set, que formado quando a suspenso aquosa de cudlana aquecida temperatura de 80 C ou superior, sendo um gel firme, resistente, no termoreversvel, bastante estvel a uma ampla faixa de temperatura de congelamento. Curdlana pode

formar gel em uma ampla faixa de pH (pH 2,0 a pH 10,0), sendo isto uma vantagem em relao a outros agentes gelificantes. A goma curdlana tem notvel potencial como sistema mimetizador de gordura em alimentos, usada individualmente ou em conjunto com outros hidrocolides. utilizada como aditivo alimentar em pequenas quantidades cerca de 0.1-3.0%. Na rea farmacutica tem importante aplicao como medicamento contra infeces virticas e bacterianas.

Concluso

Com todas as informaes citadas acima, pudemos constatar que os biopolissacardeos microbianos possuem uma grande e crescente importncia no mercado. Desde a sua larga aplicabilidade na indstria de alimentos at setores como indstria petrolfera, farmacutica, txtil, tintas, etc. Por isso, to importante o incentivo a estudos nesta rea. Para que se descubra tanto novos biopolissacardeos como tcnicas timas para sua produo. Desde as primeiras etapas at a recuperao do produto deve-se estudar cada passo. Uma vez que praticamente todas essas etapas esto ligadas ao mecanismo enzimtico (responsvel pela produo do produto). Assim como a sua produo a determinao das propriedades fsicoqumicas dos produtos tambm um fator importante. Determinando-se suas propriedades podemos saber qual as suas possibilidades de uso e ento, utilizar o produto obtido da forma mais adequada possvel.

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