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FUNGOS
PRINCIPAIS GRUPOS E APLICAES BIOTECNOLGICAS
Ricardo Ribeiro da Silva & Glauciane Danuza Coelho
FUNGOS
Principais grupos e aplicaes biotecnolgicas
Ricardo Ribeiro da Silva Glauciane Danuza Coelho Doutorandos na Seo de Micologia e Liquenologia Instituto de Botnica
Macrolepiota dolichaula
Introduo
Os fungos so conhecidos popularmente como mofos e bolores. No entanto, na maior parte das vezes, so lembrados somente pelos danos que algumas espcies causam, seja parasitando plantas ou causando problemas de sade como alergias e micoses em animais. Podem promover a deteriorao de combustvel e grande variedade de materiais, como equipamentos pticos e outros materiais de grande valor como obras de arte e arquitetnicas. No entanto, os benefcios proporcionados pelos fungos no so to divulgados quanto os prejuzos. Todos os dias as pessoas so beneficiadas por produtos originados direta ou indiretamente de fungos. Pode-se citar como exemplo a ao fermentativa de fungos na sntese de lcool etlico e dixido de carbono, os quais so imprescindveis na produo de bebidas como vinho e cerveja, alimentos como pes e massas em geral. Outras espcies podem ainda proporcionar sabor e aroma distintos em diferentes tipos de queijos. O consumo de cogumelos comestveis prtica comum entre populaes de outros pases, principalmente os orientais, e em nosso pas, sua utilizao vem crescendo a cada dia. Na medicina, os fungos receberam especial ateno a partir do desenvolvimento de alguns antibiticos, destacando-se a penicilina sintetizada a partir de metablitos do fungo Penicillium chrysogenum. Esterides e hormnios para crescimento vegetal so oriundos tambm de metablitos desses organismos. Um dos exemplos notveis da utilizao dos metablitos fngicos na medicina a administrao de ciclosporina em pessoas submetidas a transplantes. Essa substncia foi isolada a partir de fungos de solo (Tolypocladium inflatum e Cylindrocarpon lucidum) na dcada de 70. Muitas enzimas fngicas vm sendo exploradas na indstria alimentcia e em outros processos biotecnolgicos envolvidos na fabricao de sucos de frutas e tambm na indstria papeleira. Tambm a partir de certas espcies de fungos possvel sintetizar substncias inseticidas que auxiliam no controle de pragas. Nas ltimas dcadas os fungos vm sendo estudados quanto sua aplicao para recuperao de ambientes degradados por poluentes qumicos.
As clulas fngicas agrupam-se em filamentos, podendo ou no apresentar septos entre elas, porm, mesmo quando presentes as funes metablicas ocorrem sem impedimentos entre as clulas. Esses filamentos celulares so denominados hifas - Hypha, Gr = teia (Figura 1) e o agrupamento intenso de hifas constituem o miclio (Figuras 2 e 3). importante salientar que miclios fngicos nunca constituem tecidos.
Bar = 5m
Figura 1: Micrografia eletrnica de hifas. Foto: C.W. Mims, extrada de Alexopoulos et. al, 1996.
Miclio
Figura 2: Morango mofado. Ilustrao da formao do miclio. Foto: Extrada de Raven et al., 1992
Figura 3: Miclio de Aspergillus fumigatus cultivado em placa de Petri, no laboratrio. Foto: Extrada de Raven et al., 1992
O crescimento das hifas apical, porm, existem algumas regies com extrema capacidade de crescimento, principalmente aquelas relacionadas s funes reprodutivas. Um diminuto fragmento de hifa pode originar um novo indivduo. As hifas interagem entre si mesmo quando originadas de miclios ou esporos diferentes e com isso, aumentam a superfcie e relaes que estabelecem com o ambiente. As clulas dos fungos no possuem plastdios e nem centrolo. As mitocndrias so constitudas por cristas planas. Tambm esto presentes a estrutura de Golgi e os peroxissomos. Possuem parede celular constituda principalmente por quitina e -glucanos. A membrana celular constituda por ergosterol, um esterol caracterstico de fungos, tambm presente em algumas microalgas. Flagelos podem estar presentes somente nas estruturas de reproduo em alguns grupos. So organismos heterotrficos que obtm nutrientes por absoro, ou seja, lanam enzimas aos substratos onde colonizam e absorvem os nutrientes atravs da parede e membrana celular. Nas clulas dos fungos existe um fluxo citoplasmtico o qual permite a difuso de nutrientes solveis favorecendo o metabolismo entre as clulas. Exibem reproduo sexuada e/ou assexuada de diversas formas, bem como o fenmeno de parassexualidade, que consiste na recombinao gentica na mitose. As estruturas de reproduo so diferentes daquelas somticas, exibindo uma variedade de formas, as quais so utilizadas na classificao dos fungos.
2. Importncia ambiental
estimado hoje que existam cerca de 1,5 milhes de espcies de fungos, e desse nmero so conhecidas pelos micologistas somente cerca de 69.000 espcies. Infelizmente, devido ao predatria do meio ambientes vrias espcies de fungos esto sendo extintas antes mesmo de serem conhecidas, causando prejuzo imensurvel para o equilbrio ecolgico, alm de no se obter conhecimento do potencial biotecnolgico dessas espcies. Foram agrupados em um reino a parte - Reino Fungi por apresentarem caractersticas peculiares que os diferem tanto de animais como de vegetais, alm do grande nmero de espcies encontradas por todo o planeta. Os fungos utilizam uma variedade de substratos como fontes de carbono, entretanto, alguns grupos se especializaram em degradar substratos particulares, tornando-se mais competitivos perante outros microrganismos. Por essa razo os fungos so encontrados em praticamente todos os ambientes no planeta. Apesar de estarem presentes na natureza em maior nmero que os animais, por exemplo, na maioria das vezes so observados somente quando espcies terrestres produzem bonitos cogumelos ou orelhas de pau. Porm, passa despercebida a importante ao desses organismos na manuteno e ciclagem de nutrientes na natureza.
Como no podem sintetizar molculas orgnicas a partir de molculas inorgnicas como fazem as plantas, os fungos so heterotrficos e obtm energia degradando material orgnico depositado na natureza e colonizado por eles. Podem tambm parasitar plantas, animais e ainda outros fungos. Esses organismos secretam enzimas no substrato onde se encontram e absorvem as molculas resultantes da ao dessas enzimas. Com isso, alm de obterem nutrientes para seu crescimento tambm disponibilizam os produtos resultantes da degradao para ao de outros microrganismos, e por essa razo so os degradadores primrios de material orgnico na natureza, participando ativamente nos ciclos de carbono, nitrognio e fsforo alm de outros nutrientes. Percebemos como os fungos so importantes para manuteno da vida no planeta se considerarmos que em uma floresta, por exemplo, ocorre grande deposio de material vegetal como troncos, galhos e folhas. A lignina, celulose e hemicelulose so molculas persistentes na natureza e esto presentes no tecido dos vegetais. Sem a atuao dos fungos no seria possvel a reciclagem desse material. Isso porque a lignina, um dos constituintes da parede celular dos vegetais, apresenta grande estabilidade qumica e por essa razo apresenta considervel resistncia no meio ambiente. Os fungos basidiomicetos lignocelulolticos, ao que parece, so os nicos organismos que possuem enzimas capazes de desestabilizar as molculas de lignina e assim, reciclar essa matria orgnica disponibilizando os produtos da degradao para ao de outros microrganismos e o crescimento de outras plantas e eventualmente de animais. Portanto, as atividades dos fungos na natureza so to necessrias para a continuidade da existncia do planeta, quanto so aquelas desempenhadas pelos organismos produtores. Muitos fungos tambm estabelecem relaes simbiticas com outros organismos. Por exemplo, os liquens so associaes simbiticas mutualsticas entre fungos (principalmente ascomicetos e basidiomicetos) e algas verdes ou cianobactrias. As algas fornecem aos fungos compostos carbnicos ricos em energia, enquanto os fungos fornecem s algas nutrientes minerais provenientes do ambiente, alm de proteo s variaes inspitas do ambiente. Essa relao entre esses dois simbiontes confere aos liquens a capacidade de viverem em diversos ambientes. Outra importante associao simbitica entre fungos e razes de grande parte das plantas superiores so as micorrizas (Figura 4). Nesse tipo de associao os fungos disponibilizam elementos essenciais para o desenvolvimento das plantas, como o fsforo, zinco, mangans e cobre. Em contrapartida, os fungos micorrzicos so providos de carboidratos oriundos das plantas que colonizam. Exitem dois tipos de micorrizas, as endomicorrizas, quando os fungos vivem internamente nas clulas das razes, e as ectomicorrizas, quando esto presentes envolvendo as clulas de razes, porm, sem penetr-las.
energia - carboidratos 90 % das plantas superiores Relevante papel na agricultura Restabelecimento de reas florestais degradadas 2 tipos: ectomicorrizas e endomicorrizas fsforo, zinco, mangans e cobre, elementos essenciais para o crescimento.
Scleroderma citrinum
As Endomicorrizas (Figura 5) compreendem menos de 200 espcies de fungos do grupo dos zigomicetos, distribudos amplamente pelo planeta. As hifas das endomicorrizas penetram as clulas corticais das razes, formando estruturas ramificadas semelhantes a minsculas rvores, denominadas arbsculos ou ento, simples dilataes denominadas vesculas. Por essa razo, as endomicorrizas so freqentemente chamadas de micorrizas vesculo-arbusculares. As Ectomicorrizas (Figura 6) so comumente encontradas em regies temperadas. Esses fungos no penetram as razes, colonizando-as ao redor e tambm entre as clulas do crtex, formando uma estrutura conhecida como rede de Hartig. Essa rede funciona como uma interface entre o fungo e a planta, e prolonga a vida das suas clulas e tambm das clulas da raiz. Essas micorrizas so formadas por fungos basidiomicetos, incluindo muitos gneros de cogumelos, por ascomicetos, inclusive espcies formadoras de trufas, e tambm de espcies de zigomicetos. Cerca de 5.000 espcies esto envolvidas nesse tipo de associao, apresentando alto grau de especificidade.
Arbsculos crescendo dentro de clulas da raiz de alho porro, presentes em infeces jovens
Rede de Hartig
Figura 6: Seo transversal de raiz ectomicorrizada de Pinus sp. As hifas do fungo formam um manto ao redor da raiz e tambm penetram entre as clulas corticais formando a Rede de Hartig Foto: Imagem extrada de Raven et al., 1992.
intestino de cavalos, parecem estar associados com a importante funo de auxiliar na degradao das fibras vegetais no interior de intestinos de herbvoros.
Rhizophydium sp.
Figura 6: Representante dos Chytridiomycetes com rizides Foto: Carmen Ldia A. P. Zottarelli
Existem ainda fungos zigomicetos que tambm parasitam outros fungos, como espcies dos gneros Spinellus e Syzygites que so parasitas de cogumelos. Muitas espcies formam micorrizas com plantas superiores, principalmente os pertencentes ordem Glomales os quais formam endomicorrizas vesculo arbusculares com a maioria das angiospermas, com algumas gimnospermas e ainda com espcies de brifitas.
vitaminas B, quando cresceram na ausncia do fungo Smittium culisetae, o que no foi observado em larvas infestadas por esses fungos. Por outro lado, o fungo S. morbosum destri larvas de mosquitos por penetrarem em clulas da cutcula do intestino desses organismos. As hifas de tricomicetos so septadas prximas s estruturas de reproduo, entretanto, muitas espcies apresentam suas hifas totalmente septadas com septo perfurado no impedindo o fluxo de nutrientes entre as clulas. Esses fungos podem se reproduzir assexuadamente ou sexuadamente. Porm, no muito esclarecida a reproduo sexuada, exceto em alguns gneros.
Grande parte das espcies de leveduras so ascomicetos unicelulares que se distribuem em 60 gneros com aproximadamente 500 espcies conhecidas. As clulas de leveduras se reproduzem de maneira diferente, produzindo clulas filhas descendentes ou tambm se dividem por brotamento. Entretanto algumas leveduras tambm podem assumir crescimento micelial em condies ambientais propcias. Existem espcies que so parasitas do homem e no interior de tecidos humanos exibem crescimento em forma de leveduras. Porm, quando esto fora do corpo humano exibem crescimento micelial e inclusive se comportam como saprfitas.
Cogumelos
Agaricus sp.
Orelha de pau
Figura 8: Fungos basidiomicetos
Figura 9: Micrografia eletrnica de um tpico holobasdio, localizado nas lamelas de cogumelos. Foto: C.W.Mims, estrada de Alexopoulos et al., 1996.
A importncia dos basidiomicetos para o meio ambiente est relacionada com a capacidade em secretar enzimas capazes de degradar e desestabilizar molculas orgnicas persistente. Por essa razo, so pesquisados e utilizados para degradao de resduos lignocelulsicos persistentes no meio ambiente.
Nesse grupo existem muitos fungos produtores de cogumelos comestveis. Entretanto, muito importante que no se utilize cogumelos retirados da natureza para alimentao. Porque existem espcies txicas para o organismo humano, e somente especialistas teriam condies de observar no ambiente se a espcie ou no comestvel. Recomenda-se a utilizao de cogumelos comercializados os quais so provenientes de produtores especializados.
acentuao no sabor dos alimentos, tem-se a liberao de substncias benficas para o organismo humano, como muitas enzimas e polissacardeos. O Tempeh um fermentado de soja que a torna mais leve e nutritiva produzida a partir da utilizao dos fungos Rhizopus ligosporus, R. oryzae, R. arrhyzus ou R. stolonifer, e tambm com a participao, com menor relevncia, de bactrias e outros fungos. O Tofu, tambm chamado de queijo de soja, preparado a partir da fermentao da soja utilizando-se outros zigomicetos, como Actinomucor elegans ou outras espcies do gnero Mucor e de Rhizopus. O oncom, uma comida tpica da Indonsia, trata-se de uma pasta de amendoim fermentada pela espcie Rhizopus oligosporus. O acmulo de resduos agrcolas como palha de arroz, trigo e outros cereais, e tambm dos resduos agroindustriais dentre eles, tortas de algodo, soja e bagao de cana-de-acar, alm de serragem de madeira, muitas vezes representam problemas ambientais porque so substratos persistentes no meio ambiente difcil de serem degradados. Devido capacidade de converter lignina em CO2 e gua, fungos basidiomicetos so muito utilizados em processos biotecnolgicos a fim de degradar substratos lignocelulsicos, e muitas vezes, so utilizados como substratos para a produo de cogumelos comestveis (Figuras 10) ou ainda para produo de biomassa fngica a ser empregada em processos industriais. A bioconversso desses resduos em cogumelos comestveis j atividade bem estabelecida. Cogumelos possuem at cinco vezes mais protenas que a carne de bovinos e sunos, alm de serem destitudos das gorduras insaturadas altamente prejudiciais para o organismo de animais. Os produtos finais da degradao do substrato lignocelulsicos podem ainda ser utilizados como fertilizantes em plantaes, suplementos para rao de animais ou ainda serem reciclados e misturados a outros materiais orgnicos, para utilizao em terra de cobertura de plantaes de champignon. Com acentuado valor para indstria farmacutica e tambm para indstria alimentcia o -caroteno utilizado com fonte de provitamina A, sendo possvel sua extrao a partir de muitos fungos zigomicetos, os quais produzem esses carotenides. Como exemplos, destacam-se as espcies Blakeslea trispora, Phycomyces blakesleeanus, Choanephora cucurbitarum. A biotina - vitaminas H e B8 - produzida pelos fungos Rhizopus delemar e R. japonicus com grande nvel de pureza. Os cidos linolico e linolnico so produzidos por fungos do gnero Mortierella, sendo essenciais para mamferos. Outros produtos originados a partir do metabolismo de fungos zigomicetos so cidos ctrico, lctico, fumrico e succnico, amilases, proteases, cortisona e hidroxiprogesterona.
finais incuos ou na sua mineralizao (transformao do composto nos seus constituintes minerais). So muitas as espcies de zigomicetos que so utilizadas em biorremediao. Por exemplo, espcies de zigomicetos degradadores de hidrocarbonetos so Cunninghamella bainieri, C. elegans e Syncephalastrum racemosum. As que promovem oxidaes de alcanos so Absidia spinosa, Rhizopus stolonifer, e muitas espcies de Cunninghamella. Os fungos basidiomicetos lignocelulolticos tambm so utilizados para biodegradao de substncias qumicas recalcitrantes degradao biolgica no meio ambiente. Esse interesse baseia-se na capacidade desses organismos de degradar diversas molculas poluentes como pesticidas clorados (DDT), dioxinas (2,3,7,8 tetraclorodibenzo-p-dioxina), hidrocarbonetos aromticos (benzo--pireno), alm de bifenilas policloradas, pentaclorofenol e hexaclorobenzeno. A capacidade desses fungos em degradar tais substncias est relacionada ao sistema enzimtico inespecfico que possuem, capaz de desestabilizar molculas com grande estabilidade qumica, alm do fato de lanarem as enzimas no substrato onde colonizam, caracterstica essa de todos os fungos, e dessa maneira, sofremndo menos a ao txica dessas substncias. Desse modo, tem sido largamente estudada a utilizao destes fungos em processos de biorremediao (Figura 11) de materiais, como solos, resduos e efluentes industriais, contaminados com substncias recalcitrantes degradao biolgica.
A C
Figura 11: A) Biorreatores utilizados em estudos que utilizam basidiomicetos para biorremediao de solos contaminado com organoclorados. B) Solo contaminado com organoclorado colonizado por basidiomicetos. C) Detalhe do fungo colonizando solo
6. Bibliografia sugerida:
Alexopoulos, C.J.; Mims, C.W.; Blackwell, M, 1996. Introductory Mycology. John Wiley & Sons, INC, New York. 4th ed, 869p. Bononi, V.L.R. (org), 1998. Zigomicetos, Basidiomicetos e Deuteromicetos: noes bsicas de taxonomia e aplicaes biotecnolgicas. So Paulo: Instituto de Botnica, Secretaria de Estado do Meio Ambiente. 184p. Bononi, V.L.R.; Capelari, M.; Mazieiro, R.; Trufem, S.F.B., 1995 Cultivo de cogumelos comestveis.So Paulo, cone. 206p. Raven P. H., Evert, R.F., Eichhorn, S.E., 1992. Biologia Vegetal. Rio de Janeiro, Guanabara Koogan S.A. 5 ed. 728p.
Agradecimentos:
Dr. Dcio Roberto Matheus, pela orientao dedicada no trabalho de doutorado alm da reviso desse texto. Dra. Ktia Maria Gomes Machado, por toda ajuda no trabalho de doutorado e tambm pela reviso desse texto; Dra. Marina Capelari, pelo fornecimento e permisso de uso de imagens; Dra. Adriana de Mello Gugliota, pelo apoio e reviso ao texto; Dr. Jos Ivanildo de Souza, pelo fornecimento e permisso de uso de imagem; CAPES pelo auxlio financeiro atravs da bolsa de doutorado, concedida pelo Programa de PsGraduao em Biodiversidade Vegetal e Meio Ambiente do Instituto de Botnica de So Paulo.