Revista 1-07

Contenido
Diagnstico fitosanitario
Cepas de Trichoderma spp. para el control biolgico de Sclerotium rolfsii Sacc. 3
Sueli Corra M. Mello, Zil R. vila, Leonardo Minar Brana, Raquel R. Pdua y Diogo Gomes
Incidencia del virus mosaico de la alfalfa en semillas y plntulas de chile habanero (Capsicum chinense Jacq.)
en Yucatn, Mxico 11
Jos M. Tun Surez, Emma Zavaleta Meja, Daniel L. Ochoa Martnez, Prometeo Snchez Garca,
Marcos Soto Hernndez y Jairo Cristbal Alejo
Ecologa
Patogenicidad y virulencia de cepas de Pectobacterium carotovorum y Dickeya chrysanthemi en papa
(Solanum tuberosum L.) 15
Yuliet Franco Cardoza, Marusia Stefanova Nalimova y Mara F. Coronado Izquierdo
Influencia de la temperatura media, humedad relativa y precipitaciones en el comportamiento de tres especies
de insectos plagas asociados al cultivo del tabaco al sol en el municipio de Puerto Padre 19
Marlene del Toro Borrego y Alberto Mndez Barcel
Diversidad de insectos benficos asociados a Morinda citrifolia L. 25
Yaril Matienzo Brito, Esperanza Rijo Camacho, Ofelia Miln Vargas, Nersys Torres Nelson, Yoel Larrinaga Lewis,
Norma Romero Castillo y Delfn Pl del Campo
Control biolgico
Efectividad in vitro de Trichoderma harzianum Rifai para el biocontrol de Rhizoctonia solani Khn
y Pyricularia grisea Sacc. aislados en el cultivo del arroz (Oryza sativa L.) 29
Teresa Reyes Rondn, Giselle Rodrguez Gutirrez, Ana D. Pupo Zayas, Luciano Alarcn Prez y Yenny Limonta Cutio
Seleccin de cepas de Bacillus y otros gneros relacionados para el control biolgico de hongos fitopatgenos 35
Yaritza Reinoso Pozo, Daymara Vaillant Flores, Luis Casadess Romero, Ernesto Garca Prez

y Victoria
Pazos lvarez-Rivera
Comunicacin corta
Monitoreo de la piriculariosis (Pyricularia grisea Sacc.) en el cultivo del arroz (Oryza sativa L.) 41
Regla M. Crdenas Travieso, Elizabeth Cristo Valds, Noraida Prez Len, Mara Caridad Gonzlez Cerero
y Leonila Fabr Leal
Cosmoglyphus oudemansi (Zachvatkin, 1937) (Acari: Acaridae), un nuevo registro para Cuba 43
Acela Z. Martnez Gutirrez, Pedro E. de la Torre Santana, Eleazar Botta Ferret, Michel Castro Vzquez
y Neivys Gonzlez Mollinedo
Influencia de la preparacin del extracto de suelo en el crecimiento y la produccin de polihidroxibutirato
por Rhizobium tropici cepa 3 47
Yuliet Franco Cardoza, Gretel Gmez Jimnez y Jorge Martnez Silva
Comunicacin
Eduardo Sotolongo Dubroc y el arte de la fotografa al servicio de la sanidad vegetal 49
Olga Lidia Prez Moreno
Resumen de tesis
Aislamiento, seleccin e identificacin de bacterias de los gneros Bacillus, Brevibacillus y Paenibacillus
con potencialidades para el control biolgico de bacterias y hongos fitopatgenos del cultivo de la papa
Yaritza Reinoso Pozo
2/fitosanidad
Contents
Phytosanitary diagnosis
Trichoderma spp. Strains for Biological Control of Sclerotium rolfsii Sacc. 3
Sueli Corra M. Mello, Zil R. vila, Leonardo Minar Brana, Raquel R. Pdua and Diogo Gomes
Incidence of Alfalfa Mosaic Virus (AMV) in Seeds and Seedlings of Habanero Pepper (Capsicum chinense Jacq.)
in Yucatn, Mxico 11
Jos M. Tun Surez, Emma Zavaleta Meja, Daniel L. Ochoa Martnez, Prometeo Snchez Garca,
Marcos Soto Hernndez and Jairo Cristbal Alejo
Ecology
Pathogenicity and Maceration Ability of Pectobacterium carotovorum and Dickeya chrysanthemi Isolates in
Potato (Solanum tuberosum L.) 15
Yuliet Franco Cardoza, Marusia Stefanova Nalimova and Mara F. Coronado Izquierdo
Influence of Mean Temperature, Relative Humidity and Rainfalls on Behaviour of Three Pest Insects Species
Associated to Tobacco Crop in Puerto Padre Municipality 19
Marlene del Toro Borrego and Alberto Mndez Barcel
Diversity of Benefit Insects Associated to Morinda citrifolia L. 25
Yaril Matienzo Brito, Esperanza Rijo Camacho, Ofelia Miln Vargas, Nersys Torres Nelson, Yoel Larrinaga Lewis,
Norma Romero Castillo and Delfn Pl del Campo
Biological control
Effectiveness in Vitro of Trichoderma harzianum Rifai for Biocontrol of Rhizoctonia solani Khn
and Pyricularia grisea Sacc. Isolated from Rice Crop (Oryza sativa L.) 29
Teresa Reyes Rondn, Giselle Rodrguez Gutirrez, Ana D. Pupo Zayas, Luciano Alarcn Prez
and Yenny Limonta Cutio
Strains Selection of Bacillus and other Related Genera for Biological Control of Phytopathogen Fungi 35
Yaritza Reinoso Pozo, Daymara Vaillant Flores, Luis Casadess Romero, Ernesto Garca Prez
and Victoria Pazos lvarez-Rivera
Short communication
Monitoring of Pyricularia Disease (Pyricularia grisea Sacc.) in Rice Crop (Oryza sativa L.) 41
Regla M. Crdenas Travieso, Elizabeth Cristo Valds, Noraida Prez Len, Mara Caridad Gonzlez Cerero
and Leonila Fabr Leal
Cosmoglyphus oudemansi (Zachvatkin, 1937) (Acari: Acaridae), a new Record for Cuba 43
Acela Z. Martnez Gutierrez, Pedro E. de la Torre Santana, Eleazar Botta Ferret, Michel Castro Vzquez
and Neivys Gonzlez Mollinedo
Influence of Soil Extract Preparation on Growth and Production of Polyhydroxibutirate by Rhizobium tropici Strain 3 47
Yuliet Franco Cardoza, Gretel Gmez Jimnez and Jorge Martnez Silva
Communication
Eduardo Sotolongo Dubroc and the Art of Photography to the Service of Plant Health 49
Thesis abstract
Isolating, Selection and Identification of Bacteria from Genera Bacillus, Brevibacillus and Paenibacillus
with Potentialities for Biological Control of Bacteria and Fungi Phytopathogens to Potato Crop
fitosanidad/3
FITOSANIDAD vol. 11, no. 1, marzo 2007
D
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o
CEPAS DE TRICHODERMA SPP. PARA EL CONTROL
BIOLGICO DE SCLEROTIUM ROLFSII SACC.
Sueli Corra, M. Mello,
1
Zil R. vila,
2
Leonardo Minar Brana,
1
Raquel R. Pdua
1
y Diogo Gomes
2
1
Embrapa Recursos Genticos y Biotecnologa, CP. 02372 CEP 70770-900, Braslia, DF,
smello@cenargen.embrapa.br.
2
Bolsista-CNPqFaculdades Integradas da Terra, Q203 rea Especial lote 2, CEP 72610-300,
Recanto das Emas, DF.
RESUMEN
En Brasil se ha registrado la ocurrencia de Sclerotium rolfsii Sacc. en
diversos cultivos incluido el de soya (Glycine max L.). Informaciones
de literatura indican que el uso del control biolgico ofrece perspec-
tivas para disminuir las poblaciones del patgeno. Este trabajo tuvo
como objetivo enriquecer la coleccin de hongos para control biol-
gi co de fi topatgenos de Embrapa Recursos Genti cos y
Biotecnologa con nuevos aislamientos de Trichoderma, identifica-
dos a nivel especfico y seleccionar aquellos con potencial para el
control de S. rolfsii. La prospeccin de cepas nativas de Trichoderma
se desarroll en reas agrcolas de la regin de Brasilia (DF). Se
identificaron 20 cepas pertenecientes a las especies T. aureoviride,
T. harzianum, T. crassum y T. viride. La cepa CEN219, indicada como
perteneciente a la especie T. harzianum, se aisl de una muestra de
un producto comercial. El aislado S. rolfsii (CEN216) utilizado en los
ensayos se obtuvo de la coleccin de hongos fitopatgenos de
Embrapa Cerrados. La inhibicin del crecimiento radial de S. rolfsii
se estudi in vitro, en cultivo dual y mediante incorporacin de filtra-
do de colonias de Trichoderma al medio de agar-papa-dextrosa (BDA),
donde se sembr el patgeno. El potencial de control biolgico de
las cepas tambin se estudi in vivo. En general, las cepas ms
eficientes en las pruebas de inhibicin fueron tambin las que pre-
sentaron mejor actividad supresora sobre S. rolfsii en plantas de
soya.
Palabras claves: Glycine max, control biolgico, cada de plntulas
ABSTRACT
The fungus Sclerotium rolfsii Sacc., is a widespread soil-born pathogen
in Brazil, attacking a large number of cultivated plants including
soybean (Glycine max L.). Literature information has indicated the use
of Trichoderma species as a viable alternative for reducing the pathogen
populations. This work was carried out with the objective of enriching
the Culture Collection of Fungi for Biocontrol of Plant Pathogens from
Embrapa Genetic Resources and Biotechnology with new Trichoderma
spp. isolates identified at species level and to select isolates for
reducing the harmful effect of the pathogen. Twenty isolates, belonging
to the species T. aureoviride, T. harzianum, T. crassum and T. viride,
were collected from soil samples in cultured areas around Braslia
(DF). The isolate (CEN219) indicated as T. harzianum species was
obtained from a commercial formulation. The S. rolfii isolate (CEN216)
used in the essays was obtained from the collection of Embrapa Ce-
rrados. Inhibition of the mycelial growth of the pathogen isolate was
studied in vitro by dual culture method and by the incorporation of
culture filtrate of Trichoderma at potato-dextrose-agar media previous
to sow the pathogen. The potential of biological control of the isolates
was also studied in vivo. In general, isolates that performed high
mycoparasitic activity in vitro assay also demonstrated good reduction
of the disease in greenhouse.
Key words: Glycine max, biological control, damping off
INTRODUCCIN
Sclerotium rolfsii Sacc. es un hongo patgeno de suelo
que afecta alrededor de 500 especies en 100 familias
botnicas [Ferreira y Boley, 1992] en las regiones tro-
picales y subtropicales del mundo, y causa los snto-
mas de cada de plntulas, podredumbres de parte baja
del tallo y races y marchitamiento. En Brasil su dis-
tribucin es muy amplia y puede ocasionar prdidas
considerables en diversos cultivos, entre los que se des-
taca la soya (Glycine max L.). La supervivencia del
patgeno en el suelo es de extrema importancia
epidemiolgica y est relacionada a la formacin de
esclerocios, que permanecen viables por varios aos, en
condiciones de baja humedad con amplio rango de pH
y temperatura [Polanco y Castro, 2005]. Por otra par-
te, la actividad miceliar de este microorganismo es bas-
tante elevada en sustratos vegetales en proceso de des-
composicin [Pineda y Polaco, 2005]. En este aspecto,
la incorporacin de material orgnico al suelo incrementa
Corra y otros
4/fitosanidad
el potencial de inculo, lo que constituye un serio pro-
blema, especialmente en reas donde la rotacin se hace
basada en la alternancia de cultivos susceptibles.
Aunque los plaguicidas qumicos son efectivos, tienen
muchos atributos indeseables [Lima et al., 1997]. El
control biolgico de fitopatgenos constituye una al-
ternativa para disminuir el potencial de inculo del suelo
sin traer riesgos al medio ambiental. Dentro de los
microorganismos ms utilizados en el control biolgico
estn los hongos del gnero Trichoderma, los que toda-
va son objeto de investigacin y desarrollo en muchos
pases [Agrawal et al., 1977; Wells et al., 1972;
Mukherjee y Raghu, 1997; Tsahouridou y Thanassou-
lopoulos, 2002; Prez, 2005; Polanco y Castro, 2005].
Especies de Trichoderma se han reportado como
hiperparsitos de un gran nmero de hongos fitopat-
genos al atacar directamente y producir la lisis de
micelios y tambin de esclerocios de hongos [Benhamou
y Chet, 1996]. Los resultados de Lima et al. (1997) evi-
denciaron la accin de una quitinasa en la pared celular
de S. rolfsii y de Rhizoctonia solani. El-Katatny et al.
(2001) demostraron la actividad de enzimas quitinasa
y -1,3-glucanasa contra S. rolfsii en medio de cultivos
con las enzimas purificadas a partir de filtrados de co-
lonia del antagonista. Otros importantes mecanismos
de accin que usan estos hongos, en dependencia de la
especie y aun de la cepa utilizada dentro de una espe-
cie, estn relacionados con la secrecin de diversos
antibiticos, competencia por nutrientes y espacio, in-
duccin de resistencia en la planta y tolerancia a estrs
[Harman, 2000; Howell, 2003]. Tales mecanismos pue-
den operar de manera independiente o simultnea en
las interacciones microbianas [Howell, 2003]. Por otra
parte, la efectividad en controlar un hongo fitopatgeno
en particular puede variar para un aislamiento del an-
tagonista en la medida de su peculiaridad en termos de
adaptacin a las condiciones biticas y abiticas espe-
cficas [Dennis y Webster, 1971a; 1971b].
El objetivo del presente trabajo fue enriquecer la colec-
cin de hongos para control biolgico de fitopatgenos
de Embrapa Recursos Genticos y Biotecnologa, con
nuevos aislamientos de Trichoderma identificados a ni-
vel especfico, y seleccionar aquellos con potencial para
control de S. rolfsii.
MATERIALES Y MTODOS
Obtencin de cepas de Trichoderma y de hongo
fitopatgeno
Se desarroll una prospeccin de cepas nativas de
Trichoderma en reas agrcolas (Cooperbrs) de la re-
gin del Distrito Federal en Brasil. Las muestras se
procesaron segn el mtodo de diluicin seriada
[Dhingra y Sinclair, 1981] en medio de Martin (1950)
modificado por Homechin (1987), y las identificaciones
y descripciones de las cepas obtenidas se realizaron de
acuerdo con claves disponibles en la literatura corres-
pondiente [Gams y Bisset, 1988; Samuels, 2005]. La
cepa CEN219 indicada como perteneciente a la especie
T. harzianum se aisl de una muestra de un producto
comercial. Para los ensayos del biocontrol se utiliz un
aislado representativo del patgeno (CEN216) cedido
por el sector de fitopatologa de Embrapa Cerrado.
Evaluacin del antagonismo al hongo S. rolfsii
por las cepas aisladas Trichoderma spp. en cultivo dual
El antagonismo al hongo S. rolfsii se evalu con las
cepas aisladas de Trichoderma spp. en cultivo dual. En
las pruebas in vitro se sigui el mtodo de cultivo dual
de acuerdo con Dennis y Webster (1971a) y se utiliz el
medio de agar-papa-dextrosa (BDA). Para cada aisla-
miento se establecieron cuatro rplicas. La incubacin
se realiz a 25C. Para las evaluaciones se tomaron las
medidas de dimetro de colonias despus de 120 h de
incubacin y mediante observaciones de la formacin
de una zona de demarcacin entre los inculos. Se cal-
cularon los valores medios de porcentaje de inhibicin
del crecimiento radial (PICR) por la frmula
100 x
R1
R2 R1
PICR

donde:
R1: Dimetro del testigo
R2: Dimetro del organismo ensayado
Tambin se compararon las cepas con respecto a la ca-
pacidad antagonista, de acuerdo con la escala de notas
establecida por Bell et al. (1982):
Clase Caractersticas
Clase 1 Sobrecrecimiento de Trichoderma, que co-
loniz toda la superficie del medio y redu-
jo la colonia del patgeno
Clase 2 Sobrecrecimiento de Trichoderma, que co-
loniz al menos 2/3 de la superficie del me-
dio
Clase 3 Trichoderma y patgeno colonizaron medio
a medio (ms que 1/3 y menor que 2/3).
Uno no se sobrepuso al otro
fitosanidad/5
Cepas de Trichoderma spp. para el control...
Clase 4 Hongo patgeno coloniz al menos 2/3 de
la superficie del medio y resisti la inva-
sin por Trichoderma
Clase 5 Sobrecrecimiento del hongo patgeno que
coloniz toda la superficie del medio
Evaluacin del antagonismo a S. rolfsii
mediante incorporacin de filtrado
de colonias de Trichoderma al medio
Para las pruebas de produccin de sustancias difusibles
por las cepas aisladas de Trichoderma se utiliz el m-
todo descrito por Agrawal et al. (1977) con algunas
modificaciones, que consistieron en el cultivo de los ais-
lados en medio lquido de batata-dextrosa (BD) por 12
das con agitacin constante (50 rpm) sin presencia de
luz y temperatura de 25C. Despus de este perodo de
incubacin la parte lquida se colect en papel de filtro
y posteriormente esterilizada por filtracin en mem-
brana milipore de 0,45 m. El filtrado se adicion al
medio BDA en la proporcin de 25% (v/v). Para cada
aislamiento de Trichoderma se establecieron cuatro r-
plicas. Las placas de Petri con el medio se inocularon
en su centro con discos de micelio de S. rolfsii. La
incubacin se realiz a 25C, y cuando toda la superfi-
cie de las placas del testigo (colonias S. rolfsii crecidas
en ausencia de filtrado de Trichoderma) se present colo-
nizada por el hongo patgeno se realiz la medicin de
su crecimiento radial.
Evaluacin del antagonismo de las cepas obtenidas
de Trichoderma sobre S. rolfsii en casa de cultivo
Para la preparacin de inculo se utilizaron discos de
micelio de los hogos antagonistas y fitopatgenos, los
que se retiraron de la periferia de colonias cultivadas
en BDA por cinco das y se colocaron en frascos que
contenan granos de arroz humedecidos con agua desti-
lada (60% p/v) y esterilizados a 120C por 20 min. La
incubacin se realiz a 25C y 12 h diarias de luz du-
rante seis das.
En vasos de 500 g de capacidad con suelo fertilizado y
esterilizado se adicionaron 2,5 g de granos de arroz co-
lonizado por cada hongo (S. rolfsii y Trichoderma). Para
cada aislamiento de Trichoderma se establecieron cua-
tro rplicas; tambin se establecieron tratamientos sin
inculos de S. rolfsii, sin Trichoderma y sin ninguno de
ambos, para servir como testigos. Seguidamente el suelo
se humedeci y se mantuvo sin nuevos riegos por 24 h.
Entonces se realizaron las siembras de las semillas de
soya de la variedad BRS Milena, a razn de seis semi-
llas por vaso, las que se mantuvieron en la casa de cul-
tivo a una humedad relativa alrededor de 80% y tem-
peratura de 23-40C. A los 15 das de sembradas las
semillas se evalu el nmero de plantas vivas.
Los datos obtenidos en las evaluaciones se sometieron
a anlisis de varianza (ANOVA) y las medias compara-
das por la prueba de Tukey a un nivel de 5%.
RESULTADOS Y DISCUSIN
Obtencin de cepas de Trichoderma
y de hongo fitopatgeno
Se identificaron 20 cepas, de las cuales 15 pertenecen
a la especie T. harzianum. Las otras fueron T. aureo-
viride (2), T. crassum (2) y T. viride (1). La cepa 219
indicada como perteneciente a la especie T. harzianum
se aisl de una muestra del producto comercial. Las
cepas se incorporaron a la coleccin de hongos para
control biolgico de fitopatgenos de Embrapa Re-
cursos Genticos y Biotecnologa con sus respectivos
cdigos (Tabla 1).
Evaluacin del antagonismo al hongo
S. rolfsii por las cepas aisladas
Trichoderma spp. en cultivo dual
Los resultados de la actividad antagnica de las ce-
pas de Trichoderma por el mtodo de cultivo dual se
presentan en la Fig. 1 y en la Tabla 1. Todas las cepas
inhibieron el crecimiento del hongo patgeno cuando
se aislaron en cultivo dual, en la proporcin de 18,97
hasta 44,12%, comparado con el crecimiento del tes-
tigo. Las cepas CEN220, CEN249, CEN260, CEN262
y CEN266 fueron las que presentaron actividad anta-
gnica y parastica ms elevada, al mostrar una colo-
nizacin total sobre S. rolfsii a las 120 h, por lo que
recibieron calificacin de 1 en la escala de clasificacin
de Bell et al. (1982). Una vez alcanzada la zona de de-
marcacin entre los inculos, estas cepas continuaron
su crecimiento hasta invadir totalmente la superficie
de la colonia del hongo patgeno, sobre el que produ-
jeron esporas. Tambin las cepas CEN199, CEN207,
CEN219, CEN252, CEN254, CEN255 y CEN264 reve-
laron buenas potencialidades contra el patgeno en-
sayado, y recibieron calificacin de 2 en la misma es-
cala. De otra parte, las cepas CEN224, CEN250,
CEN251, CEN263 y CEN265 aparentemente no ejer-
cieron accin antagonista sobre el hongo patgeno,
pues este avanz sobre ellas al colonizar toda la super-
ficie del medio.
Corra y otros
6/fitosanidad
Tabla 1. Cepas de Trichoderma spp. obtenidas de muestras
de suelo colectadas en rea agrcola de la regin del Distrito
Federal, Brasil, y su clasificacin con respecto al antagonismo
sobre S. rolfsii en cultivo radial

Cdigo de registro Especie Clase*
CEN 199 T. aureoviride 2
CEN 207 T. harzianum 2
CEN 252 T. crassum 2
CEN 260 T. viride 1
CEN265 T. aureoviride 5
CEN 266 T. crassum 1
*Clasificacin en conformidad con la escala de Bell et al. (1982).

Figura 1. Porcentaje de inhibicin del crecimiento radial (PICR) de S. rolfsii en
cultivo dual con Trichoderma spp. en el medio PDA despus de 120 h de incubacin
a 25C.
fitosanidad/7
Evaluacin del antagonismo a S. rolfsii
mediante incorporacin de filtrado
de colonias de Trichoderma al medio
El porcentaje de inhibicin del crecimiento de S. rolfsii
frente al testigo, a travs de incorporacin de filtrado
de colonias, fue distinto con las cepas de Trichoderma
ensayadas. El valor medio ms elevado se obtuvo con
la cepa CEN252 (PICR = 72,35%), que todava no se
diferenci de los valores obtenidos con CEN199, CEN260
y CEN266, que de otra parte no fueron diferentes de la
CEN254 (Fig. 2). Las cepas CEN219, CEN220 y
CEN249, que estuvieron entre las de buenas potencia-
lidades contra el hongo patgeno en prueba anterior,
no presentaron el mismo efecto en este ensayo, que no
permite el contacto directo entre las hifas. Por lo tan-
to, se puede inferir probablemente que no hay accin
por metabolitos txicos biolgicamente difusibles en el
medio de cultivo que recibi el filtrado de colonias de
cualquiera de estas tres cepas.
Evaluacin del antagonismo de las cepas obtenidas
de Trichoderma sobre S. rolfsii en casa de cultivo
De acuerdo con la Fig. 3, hubo diferencia significativa
con respecto a la capacidad de las cepas de Trichoderma
de suprimir S. rolfsii en la prueba desarrollada en casa
de cultivo. El tratamiento que recibi solo el hongo
patgeno present ms bajo porcentaje de plantas en
la evaluacin hecha 15 das despus de sembradas las
semillas. Por lo tanto, el tratamiento del suelo con
Trichoderma redujo la enfermedad y promovi la
germinacin y supervivencia de las plantas en niveles,
con variaciones entre 32 y 100%. El mejor resultado se
alcanz con la cepa CEN254, que no present diferen-
cia frente al tratamiento con Trichoderma en la ausen-
cia del hongo patgeno. El anlisis de varianza no mos-
tr diferencia significativa entre esta y otras 14 cepas,
donde 10 mostraron valores medios de porcentaje de
supervivencia de plntulas mayor que 60%.
Varios estudios sobre antagonismo de Trichoderma con-
ducidos en el pasado no describieron el hongo con que
se trabaj [Wells et al., 1972]. Hay discordancia ade-
ms entre taxonomistas con respecto a la clasificacin
del gnero Trichoderma. De acuerdo con el concepto de
Bisset (1991), que incluye todos los hongos de la fase
asexuada de Hipocrea en ese gnero, una clara defini-
cin morfolgica para Trichoderma constituye un pro-
blema, pues la estructura de conidiforos es altamen-
te variable y en muchos casos superficialmente semejan
los gneros Gliocladium Corda o Verticillium Nees.
Todo eso torna difcil diferenciar aislados en niveles
de especie y dentro de una misma especie. No obstan-
te, un anlisis de caractersticas morfolgicas perma-
nece como primer recurso para la identificacin de
especies y utilizado en este trabajo, con base en las
claves propuestas por Gams y Bisset (1998) y Samuels
et al. (2005), que emplean la clasificacin revisada por
Bisset (1991).
El primer trabajo que describe a Trichoderma como
agente de biocontrol fue publicado por Weindling (1932).
Desde entonces varias especies del gnero siguen en in-
vestigacin y desarrollo para el control de diversos hon-
gos patgenos, incluido S. rolfsii [Agrawal et al., 1977;
Elad et al., 1980; Bell et al., 1982; Polanco y Castro,
2005] en diferentes cultivos agrcolas. Este trabajo pre-
senta datos que indican la eficiencia de cepas de
Trichoderma contra S. rolfsii en plntulas de soya.
Figura 2. Porcentaje de inhibicin de crecimiento radial de S. rolfsii por filtrado de cepas
de Trichoderma aadido al medio BDA.
Corra y otros
8/fitosanidad
Aunque la mayora de los agentes empleados en control
biolgico de hongos patgenos presentan cierto grado
de especializacin, se han referido especies de
Trichoderma como parsitas de una amplia gama de
patgenos. El nivel de control de un patgeno puede
variar de acuerdo con la cepa utilizada y con su adap-
tabilidad a las condiciones biticas y abiticas especfi-
cas [Dennis y Webster, 1971a; 1971b], dentro y entre
especies de Trichoderma. Tambin Wells et al. (1972)
observaron que especies de Trichoderma pueden ser
diferencialmente selectivas contra diferentes hongos.
Bell et al. (1982), al comentar ese hecho, recomiendan
la seleccin de antagonistas contra enfermedad espec-
fica y la evaluacin de mezclas de antagonistas para
amplias aplicaciones. Este trabajo representa un es-
fuerzo para seleccionar aislados altamente activos con-
tra S. rolfsii. Varias cepas de Trichoderma se revelaron
altamente efectivas in vitro y en los ensayos conducidos
con soya en casa de cultivo. Ese potencial ahora necesi-
ta ser mejor examinado bajo condiciones de campo.
Finalmente, varios estudios han evidenciado que, ade-
ms del parasitismo directo [Benhamou y Chet, 1996],
algunos metabolitos secundarios pueden estar
involucrados en la accin antagonista de especies de
Trichoderma contra S. rolfisii, entre ellos los anti-
biticos [Dennis y Webster, 1971a] y una enzima
quitinasa [Lima et al., 1997; El-Katatny et. al., 2001],
as como -1,3 glucanasa [El-Katatny et al., 2001], en-
tre otras. Aun la actividad micoparsita de Trichoder-
ma spp. puede ser resultado de mecanismos distintos o
su combinacin [Harman, 2000; Howell, 2003]. En este
trabajo tres cepas elegidas entre las de buenas poten-
cialidades en los ensayos en cultivo dual no se destaca-
ron de igual manera en medio que contena filtrado de
cultivos, lo que es ndice que esas cepas no fueron tan
hbiles para producir metabolitos txicos en el medio.
Eso permite sugerir que por lo menos dos mecanismos
estn involucrados en la accin antagonista de cepas de
Trichoderma ensayadas contra S. rolfsii en el presente es-
tudio.
CONCLUSIONES
Se obtuvieron 20 nuevas cepas de Trichoderma spp.
en reas agrcolas de la regin de Brasilia (Brasil) y
se incorporaron a la coleccin de hongos para el con-
trol biolgico de fitopatgenos de Embrapa Recur-
sos Genticos y Biotecnologa.
Doce cepas mostraron buenas potencialidades contra
S. rolfsii en los ensayos, mientras cinco de estas se
destacaron aun en la prueba de produccin de
metabolitos txicos en el medio.
Son necesarios estudios de campo con las cepas ms
promisorias encontradas en este trabajo, con el fin
de conocer su comportamiento frente a las condicio-
nes ambientales en el sistema agroecolgico.
REFERENCIAS
Agrawal, S. C.; M. N. Khare; P. S. Agrawal: Biological Control of
Sclerotium rolfsii Causing Collar Rot of Lentil, Indian Phytopathology,
30:176-179, 1977.
Bell, D. K.; H. D. Wells; C. R. Markham: In Vitro Antagonism of
Trichoderma Species Against Six Fungal Plant Pathogens,
Phytopathology, 72:379-382, 1982.
Benhamou, N.; I. Chet: Parasitism of Sclerotia of Sclerotium rolfsii by
Trichoderma harzianum: Ultrastructural and Cytochemical Aspects
of the Interaction, Phytopathology, 86:405-416, 1996.
Bisset, J.: A Revision of the Genus Trichoderma II. Infrageneric
Classification, Canadian Journal of Botany, 69:2357-2372, 1991.
Figura 3. Control de S. rolfsii por diferentes cepas de Trichoderma
en plantas de soya bajo condiciones de casa de cultivo.
fitosanidad/9
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10/fitosanidad
fitosanidad/11
INCIDENCIA DEL VIRUS MOSAICO DE LA ALFALFA
EN SEMILLAS Y PLNTULAS DE CHILE HABANERO (CAPSICUM
CHINENSE JACQ.) EN YUCATN, MXICO
Jos M. Tun Surez,
1
Emma Zavaleta Meja,
1
Daniel L. Ochoa Martnez,
1
Prometeo Snchez Garca,
1
Marcos Soto Hernndez
1
y Jairo Cristbal Alejo
2
1
Colegio de Postgraduados. Km 35,5 Carretera Mxico-Texcoco, Montecillo, Edo. Mxico, CP 56230
2
Instituto Tecnolgico de Conkal. Km 16,3 Antigua Carretera Mrida-Motul, Conkal, Yucatn, CP 97345
RESUMEN
Se determin la incidencia del virus mosaico de la alfalfa (AMV) por
medio de la tcnica ELISA-DAS en semillas y plntulas de chile
habanero (Capsicum chinense Jacq.) de las variedades Criolla y Elsa
en Yucatn. La mayor frecuencia de AMV se detect en los embrio-
nes de las semillas de ambas variedades. En plntulas de la varie-
dad Elsa se detect el doble de incidencia del AMV (80%) que la
registrada en la Criolla (40%). La incidencia de AMV en plntulas
estuvo directamente relacionada con la incidencia que se registr en
los embriones de las semillas.
Palabras claves: Capsicum chinense, virus mosaico de la alfalfa,
transmisin por semilla
ABSTRACT
The incidence of alfalfa mosaic virus (AMV) in seeds and seedlings of
habanero pepper (Capsicum chinense Jacq.) of varieties Criolla and
Elsa of Yucatn, was determined by ELISA-DAS technique. The highest
frequency of AMV was present in seeds embryos of both varieties.
The incidence of AMV was twice as much in Elsa seedlings (80%)
than that registered for Criolla (40%). AMV incidence in seedlings
was directly related with the incidence registered in the seed embryos.
Key words: Capsicum chinense, alfalfa mosaic virus, seed trans-
mission
INTRODUCCIN
El virus mosaico de la alfalfa (AMV) es la especie tipo del
gnero Alfamovirus de la familia Bromoviridae. Es un virus
multiparticulado y presenta tres molculas de ARN en sen-
tido positivo, de cadena sencilla (csARN) encapsidados en
viriones baciliformes. Una cuarta molcula de ARN est
contenida en una partcula isomtrica codifica para la pro-
tena de la capside [Matthews, 1991; uti et al., 1999;
Fleysh et al., 2001; Bol, 2003].
El AMV se transmite de manera no persistente por
ms de quince especies de fidos entre los que se en-
cuentran Acyrthosiphon pisum, A. solani, Aphis
craccivora, A. fabae, A. medicaginis, Macrosiphum
euphorbiae, Myzus ligustri, M. persicae y Phorodon
cannabis. Este virus tambin se transmite a travs de
las semillas de alfalfa (Medicago sativa L.), chile
(Capsicum annuum L.) y algunas malezas como Datura
stramonium L., Solanum nigrum L., Chenopodium quinoa
Wild. y posiblemente Melilotus spp. El porcentaje de
transmisin en semillas comerciales de chile (Capsicum
annuum L.) oscila de 1 a 69% [uti et al., 1999]. Las
plantas de chile provenientes de semillas infectadas con
AMV retardan su crecimiento, y presentan escasa flo-
racin y amarre de fruto [Jaspars y Bos, 1980; Brunt
et al., 1990; uti et al., 1999].
La transmisin del AMV por semilla est asociada a la
infeccin del embrin. El virus presente en la testa y
en el endospermo puede inactivarse durante el proceso
de maduracin, almacenamiento y deshidratacin de
la semilla, de ah que la transmisin por este medio
est determinada por la invasin directa o indirecta del
embrin y por la sobrevivencia del virus durante la for-
macin de la semilla, almacenamiento y germinacin
[Johansen et al., 1994].
En Yucatn se detect en el 2003 la presencia del AMV
en plantaciones de chile habanero de las variedades
Criolla y Elsa. La presencia de AMV no estuvo asocia-
da con altas poblaciones de fidos vectores [Tun et al.,
indito], lo que sugiri que su presencia podra expli-
carse por contaminacin de la semilla provista por las
compaas semilleras.
Tun y otros
12/fitosanidad
La presente investigacin se realiz con el propsito de de-
terminar el porcentaje de transmisin del AMV en semi-
llas de chile habanero de las variedades Criolla y Elsa
(C. chinense) y conocer la incidencia del AMV en la testa,
endospermo y embrin de las semillas de estas variedades.
MATERIALES Y MTODOS
Testa, endospermo y embrin. Se incubaron 120 semi-
llas de cada una de las variedades Criolla y Elsa en
placas Petri de 10 cm de dimetro sobre papel de filtro
no.2 por 48 h. El papel se humedeci previamente con
5 mL de amortiguador de extraccin (300 mg de al-
bmina de huevo, 195 mg de Na
2
SO
3
, 300 mg de PVP-40,
3 mL de Tween-20; aforado a 150 mL con PBSt 1X (4 g
de NaCl; 0,58 g de Na
2
HPO
4
; 0,1 g de KH
2
PO
4
; 0,1 g
de KCl; 0,25 mL de Tween-20, aforado con agua des-
tilada a 1 L) para ablandar la testa. De cada variedad
se tomaron cinco grupos (repeticiones) de 20 semillas
y se disectaron en testa, endospermo y embrin con
ayuda de una pinza de relojero y un bistur bajo un
microscopio estereoscpico 4X. De cada estructura de
la semilla se extrajo el virus por maceracin en 2 mL
de amortiguador de extraccin para realizar la prue-
ba de ELISA-DAS.
Semillas y plntulas. Se pusieron a germinar 100 semi-
llas de cada variedad en contenedores de poliestireno
de 200 cavidades, rellenas con el sustrato a base de tur-
ba de Sphagnum de origen canadiense. El contenedor
se cubri con una malla antifidos para prevenir el con-
tacto con posibles vectores de virus. A los 58 das de
germinadas se tomaron 50 plntulas de cada variedad
y de cada una se colect 0,1 g de tejido de la parte a-
rea, y se extrajo la savia con la adicin de 2 mL de
amortiguador de extraccin para detectar la presencia
de AMV mediante la prueba de ELISA-DAS.
Deteccin de AMV. La presencia o ausencia de AMV en
plntulas y semilla (testa, endospermo y embrin) se
determin con la prueba de ELISA con la variante de
sndwich de doble anticuerpo ELISA-DAS [Clark y
Adams, 1977] para fosfatasa alcalina. Se utilizaron con-
troles positivos, negativos y anticuerpos. Los valores
de absorbancia de cada muestra se obtuvieron en un
fotocolormetro automtico, a una longitud de onda de
405 nm. La reaccin se consider positiva cuando la
lectura fue mayor al valor promedio de los controles
negativos ms dos veces la desviacin estndar [Sutula
et al., 1986]. Los resultados de densidad ptica de las
pruebas de ELISA-DAS se sometieron a anlisis de
varianza y comparacin mltiple de medias con ayuda
del paquete estadstico SAS versin 6.12 (1996).
Incidencia de AMV en testa, endospermo y embrin
de semillas de chile habanero
La presencia de AMV se detect en los embriones de
las semillas de las variedades Criolla y Elsa, en
endospermos de la Criolla y en las testas de la Elsa. La
mayor frecuencia de muestras positivas al AMV y con-
centracin viral (DO
405nm
) se registr en los embriones
de la variedad Elsa, seguido de los embriones y
endospermos de Criolla y testas de Elsa. Las muestras
de embriones y testas de la variedad Elsa detectadas
positivas provinieron de un total de 60 semillas. Para
la variedad Criolla las muestras positivas de endospermos
y embriones resultaron de 80 semillas (Tabla 1).
La incidencia del AMV registrada en la variedad Elsa
fue superior a las reportadas en semillas de chile (de 1 a
69%), alfalfa (de 1 a 46%), trbol egipcio (Trifolium
alexandrinum L., de 60 a 70%) y trbol rojo (Trifolium
pratense L., de 0,2 a 6%) [Frosheiser, 1974; Jaspars y
Bos, 1980; Mishra et al., 1980; Brunt et al., 1990; uti
et al., 1999].
Asimismo la transmisin de semilla atribuible a la con-
taminacin de la superficie o testa fue baja. Esto pu-
diera deberse a que las partculas del virus no son sufi-
cientemente estables para resistir los factores inherentes
de la deshidratacin, cosecha y almacenaje de la semi-
lla; y el virus viable entrar en contacto con la plntula
solo si ocurre la inoculacin mecnica durante el
transplante o manejo [Johansen et al., 1994].
Incidencia de AMV en plntulas
y semillas de chile habanero
El AMV se detect en plntulas de ambas variedades de
chile habanero, y fue significativamente mayor la con-
centracin viral (DO
405nm
) en la variedad Elsa. La inci-
dencia del AMV en la variedad Elsa fue el doble de la
registrada en la variedad Criolla con 40%; sin embargo,
a pesar de que esta variedad present una mayor inci-
dencia de AMV, su porcentaje de germinacin fue mayor
(80%) en comparacin con la Criolla 60% (Tabla 2).
La relacin entre el porcentaje de plntulas y la inci-
dencia de semillas infectadas con AMV fue de 40% en
la variedad Criolla y de 80% en la variedad Elsa. El
porcentaje de plntulas infectadas con AMV y la inci-
dencia de semillas con AMV sugiere que la transmisin
fitosanidad/13
Incidencia del virus mosaico de la alfalfa...
Tabla 1. Frecuencia y concentracin relativa (DO405nm)
de alfalfa mosaic virus (AMV) en testa, endospermo
y embrin de semillas de chile habanero de las variedades
Criolla y Elsa
Variedad
Testa
(DO405nm)
b

Endospermo
(DO405nm)
Embrin
(DO405nm)
Criolla
1
2
3
4
5
0/5
a

0,099
0,106
0,104
0,098
0,098
2/5
0,099
0,117
c

0,128
c

0,113
0,099
2/5
0,112
0,111
0,092
0,116
c

0,122
c

Elsa
1
2
3
4
5
1/5
0,099
0,113
0,109
0,115
c

0,105
0/5
0,107
0,107
0,100
0,108
0,110
3/5
0,136
c

0,127
0,101
0,124
c

0,106
c

Negativos
1
2

0,093
0,098

0,102
0,093

0,108
0,106
a
: Nmero de muestras positivas/total de grupos de semillas.
b
: (DO405nm): Valores de densidad ptica.
C
: Muestra positiva basada en la media de los valores de las lecturas
de las muestras negativas (DO405nm 0,1) ms dos veces la desviacin
estndar (0,0128) = 0,113 DO405nm.

del virus por semilla est asociada con la infeccin del
embrin, pues cuando se presenta en testa y endospermo
puede inactivarse durante el proceso de maduracin,
almacenamiento y deshidratacin de la semilla. Por
ejemplo, en las variedades Maris Kabul y Europe de
alfalfa el porcentaje de semillas infectadas con AMV
disminuye durante la maduracin de la semilla de 59 a
6,9%, y de 75 a 1,7%, respectivamente [Hemmati y
McLean, 1977; Pesic y Hiruki, 1986; Mink, 1993;
Johansen et al., 1994; Maude, 2000].
Tabla 2. Porcentaje de germinacin, incidencia, concentracin relativa (DO405nm)
y deteccin de alfalfa mosaic virus (AMV) por la prueba ELISA-DAS en plntulas
de chile habanero de las variedades Criolla y Elsa
Plntulas
Variedad
Semillas
sembradas
Germinacin
(%) Analizadas AMV +
a
DO405nm
x

Deteccin
(%)
Criolla 100 60 50 20 0,115
y
b 40
Elsa 100 80 50 40 0,123 a 80
a
: Reaccin positiva a AMV. Desviacin estndar = 0,0146, r
2
= 0,546, CV = 12,29.

x
:

Medias con la misma letra son estadsticamente iguales.
y
: Muestra positiva basada en la media de los valores de las lecturas de las muestras negativas
(DO405nm 0,1) ms dos veces la desviacin estndar (0,0128) = 0,113 DO405nm.

La reduccin en el porcentaje de deteccin (40%) regis-
trado en la variedad Criolla, que fue el doble de la va-
riedad Elsa, sugiere que la diferencia en porcentajes
obedece a los efectos de los procesos sufridos por las
semillas en su desarrollo, maduracin, limpieza y seca-
do que se traduce en valores representativos de su ca-
pacidad germinativa, vigor y contenido de humedad.
Estos factores aunados a las condiciones ambientales
(temperatura y humedad relativa) de conservacin in-
fluyen sobre la viabilidad de la semilla [Moreno, 1984;
Besnier, 1989; Egli, 1998; Hernndez-Verdugo et al.,
2001].
Tun y otros
14/fitosanidad
CONCLUSIONES
Las semillas de chile habanero de las variedades Elsa
y Criolla presentaron 60 y 40% de transmisin de
virus mosaico de la alfalfa (AMV), respectivamente.
En el embrin de las semillas de ambas variedades se
detectaron las mayores frecuencias de muestras po-
sitivas y concentracin viral de AMV (DO
405nm
) en
relacin con el endospermo y testa.
En la variedad Elsa se present la mayor incidencia
de plntulas positivas al AMV.
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fitosanidad/15
E
c
o
l
o
g
a
PATOGENICIDAD Y VIRULENCIA DE CEPAS
DE PECTOBACTERIUM CAROTOVORUM Y DICKEYA
CHRYSANTHEMI EN PAPA (SOLANUM TUBEROSUM L.)
Yuliet Franco Cardoza, Marusia Stefanova Nalimova y Mara F. Coronado Izquierdo
Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal. Calle 110 no. 514 e/ 5.
a
B y 5.
a
F, Playa, Ciudad de
La Habana, CP 11600
RESUMEN
La pudricin blanda causada por pectobacterias es una de las en-
fermedades bacterianas ms importantes que afectan al cultivo de la
papa, pues provocan prdidas significativas de hasta 100% durante
el almacenamiento de los tubrculos. En las campaas de papa en
Cuba, desde finales del 2002 hasta el 2004, se produjeron pudriciones
blandas de consideracin en el cultivo, y se obtuvieron numerosos
aislamientos bacterianos pertenecientes a las especies Pecto-
bacterium carotovorum y Dickeya chrysanthemi. Se realiz un estudio
en condiciones de laboratorio de la patogenicidad y la actividad de
maceracin de seis aislamientos de P. carotovorum y dos de D.
chrysanthemi en tubrculos de papa Spunta y Chieftain. Para ello se
inocularon tubrculos previamente pesados con 200 L de la sus-
pensin bacteriana a una concentracin de 10
8
ufc/mL. A los tres,
siete y diez das los tubrculos se lavaron para eliminar los tejidos
podridos y se pesaron nuevamente para determinar la reduccin del
peso por diferencia. Los resultados se analizaron estadsticamente.
Todas las cepas en estudio resultaron patgenas, aunque difirieron
en su virulencia. La mayor desintegracin de los tejidos ocurri entre
tres y siete das. A los diez das las cepas Q34 y Ms11, de la especie
D. chrysanthemi, provocaron reducciones de 5,2 y 15,7%, respectiva-
mente, en los tubrculos inoculados. Las cepas de P. carotovorum
causaron prdidas superiores, con valores entre 48 y 64% para el
mismo perodo de evaluacin.
Palabras claves: Pectobacterium sp., Solanum tuberosum, pudricin
blanda
ABSTRACT
Soft rot caused by pectobacterias is one of the most important diseases
that affect potato crop causing significant loses that can reach 100%.
During potato seasons from the end of 2002 until 2004, in Cuba,
considerable soft rot of tubers occurred and it was obtained several
isolates of Pectobacterium carotovorum and Dickeya chrysanthemi.
The aim of this work was to study the pathogenicity and maceration
ability of six P. carotovorum and two D. chrysanthemi isolates in Spunta
and Chieftain potato cultivars. Tubers of both cultivars were weight
and then inoculated, under laboratory conditions, with 200 L of the
bacterial suspension adjusted to a concentration of 10
8
ufc/mL. In
evaluations at three, seven and ten days, tubers were washed to
eliminate the decayed tissue and weighed again to determine the
reduction of weight. Results were analyzed statistically. All the strains
studied were pathogenic and they caused soft rot in the inoculated
tubers but they differed in virulence. After 10 days the strains Q34 and
Ms11 of D. chrysanthemi produced reductions of the inoculated tubers
of 5.2 and 15.7% respectively. Strains of P. carotovorum caused higher
lose with values between 48 and 64% for the same period of evaluation.
This last species showed a higher variability in virulence
Key words: Pectobacterium sp., soft rot, Solanum tuberosum
INTRODUCCIN
El cultivo de la papa (Solanum tuberosum L.) constitu-
ye una fuente valiosa de alimentacin en muchos pa-
ses, y representa aproximadamente el 50% de las pro-
ducciones mundiales de todas las races y tubrculos
[Estvez et al., 2001, citados por Rodrguez y Stefanova,
2005]. En Cuba este cultivo reviste gran importancia
en el programa alimentario, por lo que anualmente se
invierten numerosos recursos para garantizar la tecno-
loga adecuada a fin de obtener los mayores rendimien-
tos posibles [Mayea y Snchez, 1995].
La pudricin blanda causada por Pectobacterium
atrosepticum (sin. Erwinia carotovora ssp. atroseptica),
Pectobacterium carotovorum [Gardan et al., 2003] (sin.
Erwinia carotovora ssp. carotovora) y Dickeya chrysan-
themi [Samson et al., 2004] (sin. Erwinia chrysanthemi)
es una de las enfermedades bacterianas ms importan-
tes que afectan a este cultivo, pues provocan prdidas
significativas de hasta 100% durante el almacenamiento
de los tubrculos [Elphistone, 1987]. Las tres especies
se encuentran ampliamente distribuidas en el mundo,
y su predominio depende directamente de la tempera-
tura ptima para su desarrollo, con 15-20C para P. atro-
septicum, 27-30C para P. carotovorum y 34-37C para
D. chrysanthemi [Oliveira, 2001].
Franco y otros
16/fitosanidad
En las campaas de papa, desde finales del 2002 hasta
el 2004 se produjeron pudriciones blandas de conside-
racin en el cultivo y se obtuvieron numerosos aisla-
mientos bacterianos que se caracterizaron e identifica-
ron como pertenecientes a las especies P. carotovorum y
D. chrysanthemi. Para este trabajo se seleccionaron al-
gunos de esos aislamientos con el objetivo de estudiar
su patogenicidad y la actividad de maceracin sobre
tubrculos de papa.
MATERIALES Y MTODOS
El estudio se realiz en condiciones de laboratorio. Se
emplearon seis cepas de P. carotovorum y dos de D. chry-
santhemi (Tabla 1), pertenecientes al cepario de bacte-
rias fitopatgenas del Instituto de Investigaciones de
Sanidad Vegetal, crecidas en agar nutriente durante
24 h, y tubrculos de papa de las variedades Spunta y
Chieftain. Los tubrculos se pesaron previamente y
luego se inocularon mediante una incisin de 2 cm de
profundidad en la zona del estoln, donde se colocaron
200 L de la suspensin de la bacteria ajustada a una
concentracin de 10
8
ufc/mL, lo que corresponde a una
densidad ptica de 0,5 unidades de absorbancia a
550 nm [Lelliot y Stead, 1987] en espectrofotmetro
UV. Se utilizaron cinco tubrculos por variedad para
cada cepa. Despus del procedimiento los orificios se
sellaron con gasa estril, y las papas se colocaron en
cmara hmeda a temperatura ambiente, donde per-
manecieron hasta el final del ensayo. Durante todo el
experimento la humedad se mantuvo por medio de as-
persiones con agua. La misma cantidad de tubrculos
inoculados con agua estril constituy la variante con-
trol del experimento. Antes de iniciar el experimento
los aislamientos se refrescaron mediante un pase por el
hospedante. Se realizaron evaluaciones a los tres, siete
y diez das posteriores a la inoculacin, que consistie-
ron en el lavado de los tubrculos para eliminar los te-
jidos macerados, y pesarlos nuevamente para determi-
nar la reduccin del peso con respecto al valor inicial.
Los resultados se convirtieron en porciento y se realiz
el anlisis de medidas repetidas con el paquete estads-
tico SPSS para Windows versin 12.0.1 Inc (2003). Las
medias se compararon posteriormente por la prueba
de Tukey con 0,05 de probabilidad.
Tabla 1. Cepas utilizadas en el estudio
Cepa Especie bacteriana
Parte afectada
de donde se aisl
Ao
E3 P. carotovorum Tubrculo 2003
Q34 D. chrysanthemi Haces vasculares 2004
Ms11 D. chrysanthemi Tubrculo 2004

Todas las cepas en estudio resultaron patgenas, sin
embargo, difirieron en su virulencia. A los diez das
las cepas Q34 y Ms11 de la especie D. chrysanthemi
provocaron reducciones en los tubrculos inoculados
de 5,2 y 15,7% del peso, respectivamente, sin diferen-
cias significativas entre ellas (Tabla 2). Las cepas de P. caro-
tovorum causaron prdidas superiores con valores en-
tre 48 y 64% para el mismo perodo de evaluacin
(Tabla 3).
La mayor desintegracin de los tejidos ocurri en el
perodo comprendido entre tres y siete das. Las cepas
de la especie P. carotovorum mostraron una mayor va-
riabilidad respecto a la virulencia. La cepa E10 provo-
c una maceracin correspondiente a 52%, mientras
que las cepas E8 y E9 produjeron una reduccin menor
con valores de 35 y 37%, respectivamente (Tabla 3). En
un experimento similar realizado por Franco et al.
(2004) con la variedad Spunta, la cepa E10 tambin fue
la que mayor merma provoc en los tubrculos.
Esta variacin en la virulencia de las cepas pudiera de-
berse a una diferencia en su produccin enzimtica,
hecho sealado con anterioridad por Collmer y Ried
(1986), quienes determinaron diferencia enzimtica en-
fitosanidad/17
Patogenicidad y virulencia de cepas...
tre cepas de Erwinia sp. Igualmente Duarte et al. (2004)
encontraron que aislamientos de Erwinia de papa de
Brasil poseen una capacidad mayor de maceracin y
por ende de patogenicidad, y causaron sntomas a los
tres das, en comparacin con una cepa tipo de E.c.
subsp. atroseptica que requiri siete.
Tabla 3. Porcentaje de prdidas de peso ocasionadas
por P. carotovorum en tubrculos de papas (p < 0,05)
Reduccin de peso de los tubrculos (%)
Cepas
3d 7d 10d
E3 3,42 b 44,64 bcd 61,75 cd
E5 4,54 b 42,40 bcd 57,81 bcd
E7 4,93 bc 46,12 bcd 61,23 bcd
E8 4,11 b 34,71 b 47,89 b
E9 3,94 b 37,06 bc 50,07 bc
E10 7,42 c 51,87 d 64,31 d
Testigo (agua) 0,30 a 3,87 a 4,20 a
CV (%) 2,94 3,20 3,37
ES 0,26 1,42 1,93

Tabla 2. Porcentaje de prdidas de peso ocasionadas por
D. chrysanthemi en tubrculos de ambas variedades (p < 0,05)
Reduccin de peso de los tubrculos (%)
Cepas
3d 7d 10d
Q34 1,54 4,57 5,18
Ms11 4,13 12,46 15,72
Testigo (agua) 0,30 3,87 4,20
CV (%) 2,73 4,30 4,51
ES 0,21 1,22 1,70

Tanto P. carotovorum como D. chrysanthemi provocan
graves prdidas en el cultivo cuando las condiciones son
favorables. En la literatura especializada las tempera-
turas ptimas reportadas para su desarrollo son de 28
y 35C, respectivamente, y tanto este como la hume-
dad son dos factores crticos para el inicio y desarrollo
de la pudricin blanda [Prombelon, 2002]. El hecho
de que los valores de reduccin de peso provocados por
las cepas Q34 y Ms11 de D. chrysanthemi no fueran
superiores, puede relacionarse con la temperatura, que
durante el experimento oscil entre 25 y 27C, valores
que no favorecen el desarrollo de esta especie. Dada la
importancia de la temperatura demostrada tambin en
este experimento, podra esperarse que, cuando est
por debajo de 30C en las condiciones de Cuba, predo-
minar la especie P. carotovorum.
Muchos autores han informado sobre la variacin en la
susceptibilidad de diferentes variedades de papa a es-
tas bacterias pectolticas [Bains et al., 1999; Benelli et
al., 2004], lo cual depende de diversos factores como la
concentracin del inculo, la temperatura y la varie-
dad del cultivo, entre otros. En este experimento, bajo
las mismas condiciones, la variedad Chieftain result
ms afectada que la Spunta, aunque ambas se mostra-
ron sensibles (Tabla 4).
En un estudio realizado en la provincia de Villa Clara
por Morales (1997) para determinar las prdidas que
se producen en este cultivo a consecuencia de las
pudriciones blandas causadas por estos gneros
bacterianos, se determin que la variedad Spunta fue
una de las dos que ms prdidas tuvieron en naves de
piln, y la variedad Chieftain en condiciones de campo.
Franco y otros
18/fitosanidad
CONCLUSIONES
Las cepas de P. carotovorum provocaron reducciones
de peso en los tubrculos mayores que las provoca-
das por D. chrysanthemi.
La variedad Chieftain result ms afectada por la
pudricin blanda que la variedad Spunta.
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dieffenbachiae sp. Nov. and Dickeya zeae sp. Nov., International
Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology 54:1-13, 2004.
SPSS para Windows, versin 12.0.1 Inc., 2003.
Tabla 4. Porcentaje de reduccin de peso producido
en los diferentes perodos de evaluacin en ambas variedades
Promedio de prdidas (%)
Tiempo (das)
Spunta Chieftain
CV (%) ES
3 3,7 a 3,9 a 2,32 0,37
7 27,7 b 33,9 a 3,31 1,58
10 34,8 b 46,9 a 4,08 2,30
fitosanidad/19
INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA MEDIA, HUMEDAD
RELATIVA Y PRECIPITACIONES EN EL COMPORTAMIENTO
DE TRES ESPECIES DE INSECTOS PLAGAS ASOCIADOS
AL CULTIVO DEL TABACO AL SOL EN EL MUNICIPIO
DE PUERTO PADRE
Marlene del Toro Borrego y Alberto Mndez Barcel
Facultad de Ciencias Agrcolas. Centro Universitario de Las Tunas. Ave. Carlos J. Finlay s/n,
Buenavista, CP 75200, Las Tunas, Cuba, marlene@ult.edu.cu; mendez@ult.edu.cu
RESUMEN
Se desarroll un estudio sobre el comportamiento de Epitrix hirtipennis
(Melsh.), Heliothis virescens (Fab.) y Phlegethontius sexta jamaicensis
(Butler) en tres zonas donde se concentr la produccin de tabaco
en el municipio de Puerto Padre en la campaa 2003-2004. Para las
relaciones de dependencia entre las variables del clima considera-
das y los niveles poblacionales de las plagas se emple anlisis de
correlacin y regresin, y se encontr que las temperaturas influye-
ron de forma directa y significativa en su desarrollo, as como baja o
moderada humedad relativa. Por otra parte, E. hirtipennis fue la prime-
ra especie que incidi en las parcelas experimentales de las tres
consideradas, y la zona de La Siguaraya ofreci mejores condicio-
nes para el desarrollo de las tres especies estudiadas seguida de la
zona de La Veguita.
Palabras claves: E. hirtipennis, H. virescens, P. sexta jamaicensis,
variables climticas
ABSTRACT
The behaviuor of Epitrix hirtipennis (Melsh.), Heliothis virescens (Fab.)
and Phlegethontius sexta jamaicensis (Butler) was studied during
campaign 2003-2004 in three zones of Puerto Padre municipality,
where the producti on of tobacco was concentrated. For the
relationships of dependence between climatic variables considered
and the population levels of the plagues was used analysis of
correlation regression, and it was found that temperatures, as well as
low or moderate relative humidity, influenced direct and significantly
plagues development. On the other hand, E. hirtipennis was the first
species that appeared in the experimental parcels of the three zone
considered, and Siguaraya zone offered better conditions for the
development of the three species studied followed by the zone of
Veguita.
Key words: E. hirtipennis, H. virescens, P. sexta jamaicensis, climatic
variables
INTRODUCCIN
En la prctica agrcola tunera el tabaco constituye un
cultivo en desarrollo cuya introduccin en trminos
extensivos se produjo en la campaa 1996-1997. Hasta
el presente las principales especies de insectos que han
incidido con niveles de inters agroeconmico son Acheta
assimilis (Fab.), Epitrix hirtipennis (Melsh.), Heliothis
virescens (Fab.), Myzus (N) persicae Sulzer, Nezara
viridula (Lin.), Phlegethontius sexta jamaicensis
(Butler), Spodoptera latisfacia (Walk) y Systena basalis
Duval, cada una de ellas con diferentes niveles de in-
tensidad de ataque en las distintas zonas agrcolas des-
tinadas al cultivo de la solancea y que, por supuesto,
no proporcionan las mismas condiciones agroecolgicas
[Remedio, 2003].
De ellas solo E. hirtipennis, H. virescens y P. sexta
jamaicensis logran explosiones poblacionales de consi-
deracin que obligan a tomar medidas de control, por
lo que se hace necesario estudiar regionalizadamente
los aspectos ms importantes de su comportamiento
en las condiciones edafoclimticas de las principales
zonas tabacaleras del territorio, sin que se deje de dar
la debida atencin a otras especies plagas.
MATERIALES Y MTODOS
La informacin primaria se obtuvo mediante observa-
ciones realizadas en las parcelas experimentales de ta-
baco, variedad Habana 2000, ubicadas en las fincas
Del Toro y Mndez
20/fitosanidad
La Siguaraya, La Veguita y Maniabn, con un marco
de siembra de 0,84 x 0,30 m, donde se distribuyeron
1200 plntulas en 12 surcos con una edad de 45 das y
una altura media de 13,9 cm, previamente desinfecta-
das con filitox 60% EC a dosis de 1 L/ha pc, de acuerdo
con las regulaciones establecidas por las Instrucciones
Tcnicas para el Cultivo del Tabaco [Espino, 2002] y en
la Estrategia Fitosanitaria del Tabaco [CNSV, 1999], y
se le brindaron todas las atenciones culturales que re-
quiere el cultivo segn el Instructivo Tcnico para aten-
ciones manuales [ITT, 2001]. Las parcelas se estable-
cieron en suelo pardo mullido con carbonatos, que
responde al agrupamiento agroproductivo sialitizado
clcico, similar a la mayora de las reas destinadas a la
produccin tabacalera en el municipio de Puerto Padre.
En las proximidades de las reas experimentales se situ
una trampa de luz cuyas capturas se cuantificaron cada
24 h. Los niveles poblacionales de las plagas se determina-
ron de acuerdo con el mtodo para su sealizacin [CNSV,
1985] adaptado a las condiciones de la experiencia.
Las relaciones de dependencia entre el comportamien-
to de los valores de las variables climticas (tempera-
turas medias, humedad relativa y precipitaciones) y
las fluctuaciones de los niveles poblacionales de las es-
pecies se interpretaron estadsticamente por medio del
anlisis de correlacin y regresin lineal simple del
Sofware Stadist GW-Basic versin 3.20, de forma que
el porcentaje de expresin de estas relaciones estuviera
representado por el coeficiente de determinacin (r )
[Guerra et al., 1998]. Se utiliz adems el programa
Curvefit versin 2.10-O para obtener las ecuaciones de
regresin y los coeficientes de determinacin.
Los valores de las variables climticas se obtuvieron
con un termmetro ambiental, un sicrmetro de aspi-
racin y un pluvimetro de cua en los lugares de la
experiencia. Las precipitaciones representan el acumu-
lado de lluvia en la semana.
E. hirtipennis (Melsh.) (Coleoptera: Chrysomelidae)
Esta especie es comn y a veces daina. En ese sentido
Hernndez y Garca (1990) informaron que sus ata-
ques son ms evidentes en semilleros o en las plntulas
poco despus del transplante, aunque en el actual tra-
bajo esto no coincidi completamente. Existieron in-
crementos en los ndices poblacionales en la medida en
que transcurri la fenologa del cultivo. La primera plaga
que se present en las parcelas experimentales fue E. hir-
tipennis entre siete y diez das despus del trasplante,
y los mayores ndices coincidieron con las temperatu-
ras ms altas, aspectos similares a los informados por
Mndez y del Toro (2005).
El menor ndice de poblacin en La Siguaraya se pro-
dujo en la IV semana de enero (Tabla 1), con tempera-
turas medias de 22,1C, baja humedad relativa y esca-
sas precipitaciones acumuladas, mientras que el mayor
ndice poblacional ocurri en la IV semana de marzo
con la mayor temperatura promedio de todo el perodo
(25,8C), y en ausencia de precipitaciones, comporta-
miento climtico que justifica el alto ndice de la plaga,
lo que se corrobor a travs de anlisis de correlacin,
y se encontr una relacin directa y significativa entre
los valores medios de la temperatura y el ndice
poblacional de la plaga (r = 0,56) con un porcentaje de
expresin dado por r
2
= 0,30. Las precipitaciones y la
humedad relativa no fueron significativas. La ecuacin de
regresin para las temperaturas fue Y = 272,7 + (253,3)/X
+ 143 807,4/X
2
.
Tabla 1. Comportamiento de la temperatura media, humedad relativa, precipitaciones e ndice
poblacional de E. hirtipennis (Melsh.) en la parcela correspondiente a la zona de observacin
de La Siguaraya durante la campaa 2003-2004

I semana II semana III semana IV semana
Mes
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Nov. 24,0 83 21,4 27,5 80 0 26,2 81 0 0 24,5 82 2,4 0
Dic. 24,8 84 32,6 0,14 24,0 80 0 0,12 23,5 84 0 0,10 23,2 80 0 0,06
Ene. 23,9 76 0 0,07 24,2 75 2,6 0,13 22,8 79 10,4 0,05 22,1 79 0,6 0,03
Feb. 24,6 78 0 0.13 25,7 77 0 3,6 24,4 78 0 0,11 24,0 76 0 0,09
Mar. 24,6 79 0 0,13 24,8 73 0 2,8 25,5 80 0 3,5 25,8 80 0 7,2

fitosanidad/21
Influencia de la temperatura media...
En La Veguita se registraron ndices poblacionales ba-
jos en la III y IV semanas de enero, mientras que los
ms altos se produjeron en la III y IV semanas de marzo.
Las precipitaciones fueron escasas (Tabla 2).
de La Veguita durante la campaa 2003-2004
Mes
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp
.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Nov. 23,0 82 22,0 - 23,5 80 0 - 24,2 81 0 0 24,5 82 0 0
Dic. 24,8 85 5,1 0,20 23,9 80 7,6 0,16 23,6 79 0 0,14 23,2 78 0 0,08
Ene. 23,9 79 0,3 0,16 24,2 80 3,2 0,18 22,4 81 15,2 0,03 22,0 82 0,5 0,03
Feb. 24,8 78 0 0,22 25,5 77 0,2 2,4 23,9 79 0 0,17 24,2 80 0 0,18
Mar. 25,1 79 0 3,2 25,6 75 0 3,6 26,5 74 0 4,1 26,2 73 0 5,5

El anlisis estadstico mostr una relacin directa y
altamente significativa entre los valores de la tempe-
ratura media y el ndice de poblacin del crisomlido
(r = 0,78), con un elevado porcentaje de expresin (r
2
= 0,61).
La ecuacin de regresin se representa por Y = (580,5)
+ 12,5X + 6689,7/X. Los valores medios de la hume-
dad relativa y el ndice infestivo de la plaga tambin
tuvieron una relacin altamente significativa e inversa
(r = 0,80) con un adecuado nivel de expresin (r
2
= 0,62).
Su ecuacin de regresin fue Y = 748,3 + 4,5X
+ 30 854,6/X.
En la zona de Maniabn los valores medios de la tem-
peratura fueron generalmente menores (Tabla 3), lo que
se correspondi con una menor magnitud del mayor
ndice poblacional calculado en la III y IV semanas de
marzo. El menor ndice infestivo de la plaga tambin se
inform en la IV semana de enero, por lo que en esta
zona igualmente existi una dependencia entre el ndi-
ce de poblacin de la plaga y el comportamiento de la
temperatura desde el punto de vista etolgico; sin em-
bargo, el anlisis matemtico indic una relacin signi-
ficativa entre los valores de la temperatura y el nivel de
poblacin de la plaga (r = 0,49 y r
2
= 0,23).
de Maniabn durante la campaa 2003-2004
Mes
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Nov. 25,4 84 31,4 26,5 83 0,0 24,5 84 0,0 0,21 25,6 82 4,4 0,23
Dic. 24,0 80 32,6 0.20 24,0 84 0,0 0,20 24,5 79 0,0 0,21 23,0 80 0,0 0,16
Ene. 24,5 77 0,0 0,21 24,0 78 1,6 0,20 23,0 78 9,3 0,16 22,6 80 0,0 0,14
Feb. 25,6 79 0,0 0.23 24,5 80 0,0 0,21 23,9 81 0,0 0,19 24,5 79 0,0 0,21
Mar. 24,5 79 0,0 0,21 25,8 75 0,0 3,9 24,9 80 0,0 3,1 25,0 79 0,5 3,2

Los valores de la humedad relativa y los acumulados
de las precipitaciones tuvieron una relacin inversa y
no significativa. La forma en que se relacionaron res-
ponde al comportamiento dinmico biolgico caracte-
rstico de la especie; sin embargo, la no significacin
pudo estar dada por las escasas precipitaciones y la
influencia de algunos elementos no considerados en la
experiencia.
H. virescens (Fab.) (Lepidoptera: Noctuidae)
A pesar de que en la campaa 2003-2004 los valores de
las temperaturas generalmente fueron altas y solo se
produjeron muy escasas precipitaciones, los niveles
poblacionales de H. virescens en La Siguaraya fueron
bajos. La valoracin estadstica mostr que los valores
de la temperatura media en cada semana y la distribu-
Del Toro y Mndez
22/fitosanidad
cin poblacional de la plaga tuvieron una relacin di-
recta y altamente significativa (r = 0,62), aun cuando
el nivel infestivo del insecto no alcanz valores altos.
Esta relacin con bajo porcentaje de expresin (r
2
= 0,37)
relacionado con el dbil comportamiento de la especie
corrobora el efecto de la temperatura en los agroeco-
sistemas, por lo que para estas circunstancias la ecua-
cin de regresin fue Y = 45,59 + 1,99X. La humedad
relativa se relacion de forma inversa y no significa-
tiva (r = 0,12), al igual que las precipitaciones (r = 0,01)
que fueron mnimas y espordicas.
Las capturas de adultos en trampa de luz (Fig. 1) se
correspondieron con los niveles poblacionales de larvas
en el rea experimental, y fueron menores en enero.
Figura 1. Cantidades totales de adultos de H. virescens (Fab.)
capturados en trampa de luz en el rea experimental de La Siguaraya.
En el rea de La Veguita las temperaturas fueron lige-
ramente superiores en algunas semanas, lo que pudiera
explicar que en esta zona los niveles infestivos de H. vi-
rescens tambin fueran superiores (Tabla 4). Las fluc-
tuaciones poblacionales de esta especie han mostrado
relacin directa con los valores de las temperaturas
[Gonzlez, 1976; Mendoza y Gmez, 1982 y Mndez,
2002; 2003].
poblacional de H. virescens (Fab.) en la parcela correspondiente a la zona de observacin
de La Veguita durante la campaa 2003-2004
Mes
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Nov. 23,0 82 22,0 23,5 80 0,0 24,2 81 0,0 0 24,5 82 0,0 0
Dic. 24,8 85 5,1 10 23,9 80 7,6 8 23,6 79 0,0 7 23,2 78 0,0 7
Ene. 23,9 79 0,3 8 24,2 80 3,2 10 22,4 81 15,2 4 22,0 82 0,5 3
Feb. 24,8 78 0,0 12 25,5 77 0,2 16 23,9 79 0,0 8 24,2 80 0,0 10
Mar. 25,1 79 0,0 15 25,6 75 0,0 18 26,5 74 0,0 20 26,2 73 0,0 19

El primer nivel infestivo se cuantific en la I semana de
diciembre con 10% de distribucin que fluctu en de-
pendencia de la tendencia de los valores medios de la
temperatura. El mayor nivel de distribucin se regis-
tr en la III semana de marzo. A partir de ese momen-
to comenz a bajar hasta el inicio de la capadura. El
anlisis estadstico entre los valores de la temperatura
media y los de la distribucin poblacional de la plaga
en esta zona mostr una relacin directa y altamente
significativa (r = 0,79 y r
2
= 0,66). La mejor ecuacin
de regresin fue Y = 452,19 + (40,59)X + 0,92X
2
.
Los valores medios de la humedad relativa tuvieron
una relacin inversa y altamente significativa (r = 0,70).
La ecuacin de regresin se expresa por la funcin Y = 5,29
+ 1483,78/X. El acumulado de precipitaciones se rela-
cion de forma inversa sin significacin estadstica. Tam-
fitosanidad/23
Influencia de la temperatura media...
bin es importante la propia resistencia que puedan
tener las plantas de tabaco al ataque de la plaga.
En la zona de Maniabn, en la campaa 2003-2004, los
niveles infestivos de H. virescens fueron mnimos (5%).
Es probable que el cambio de las plantaciones para una
nueva rea posibilitara que las nuevas condiciones, ca-
racterizadas por suelos en barbecho por ms de cinco
aos y con cultivos de porte alto de otras familias bo-
tnicas, contribuyeran al desequilibrio que origin el
dbil comportamiento de la especie (Fig. 2).
Figura 2. Cantidad de adultos de H. virescens (Fab.) capturados en la
parcela experimental de la zona de Maniabn en la campaa 2003-2004.
Phlegethontius sexta jamaicensis (Butler)
(Lepidoptera: Sphingidae)
El comportamiento poblacional coincide con las obser-
vaciones realizadas por diferentes autores desde hace
varios aos [Bruner et al., 1975; Vzquez, 1979; De
Zayas, 1989 y Mndez, 2002]. Esta es una plaga impor-
tante con capacidad para defoliar grandes reas de ta-
baco en breve tiempo, aunque sus niveles de distribu-
cin no sean muy elevados.
Debido a las dimensiones y voracidad de las larvas,
pueden ocasionar prdidas de consideracin si no se
controlan a tiempo. En el rea experimental defoliaron
totalmente ms de 12% de las plantas.
En la campaa 2003-2004 (Tabla 5) los mayores niveles
poblacionales de esta plaga se produjeron cuando el
cultivo estuvo prximo a la cosecha, y sus incidencias
ms significativas se produjeron en el rea experimen-
tal de La Siguaraya, donde alcanz distribuciones
poblacionales de hasta 22% con temperaturas altas y
en ausencia de precipitaciones. Es posible que la ubica-
cin geogrfica de esta zona, ms cerca de la costa nor-
te donde las temperaturas son ms elevadas, hayan
influido en ese comportamiento. El nivel ms bajo se
cuantific en la IV semana de enero con el menor regis-
tro de temperatura. En ese perodo productivo se en-
cuentran adems otras solanceas hospedantes de esta
especie que pueden favorecer su dispersin y provocar
una disminucin de sus poblaciones en las plantaciones
de tabaco.
El anlisis estadstico mostr una relacin directa y
altamente significativa entre los valores de las tempe-
raturas medias y la distribucin de la plaga (r = 0,84)
con un alto porcentaje de expresin (r
2
= 0,61). La ecua-
cin de regresin representada por la funcin Y = 13,26
+ 102,65X + (1,95)X
2
.
Tabla 5. Comportamiento de la temperatura media, humedad relativa, precipitaciones
y distribucin poblacional de P. sexta jamaicensis (Butler) en el rea experimental
(La Siguaraya) durante la campaa 2003-2004
Mes
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Temp.
(C)
Hr
(%)
Prec.
(mm)
Ind.
(I/J)
Nov. 24,0 83 21,4 27,5 80 0 26,2 81 0 12 24,5 82 2,4 10
Dic. 24,8 84 32,6 11 24,0 80 0 9 23,5 84 0 7 23,2 80 0 5
Ene. 23,9 76 0 9 24,2 75 2,6 8 22,8 79 10,4 3 22,1 79 0,6 2
Feb. 24,6 78 0 6 25,7 77 0 20 24,4 78 0 10 24,0 76 0 9
Mar. 24,6 79 0 9 24,8 73 0 12 25,5 80 0 20 25,8 80 0 22

Del Toro y Mndez
24/fitosanidad
En las zonas de La Veguita y Maniabn los ataques
fueron espordicos y muy dispersos, lo que no permi-
ti una secuencia etolgica que pudiera responder a la
dependencia de alguno de las variables que se analizan
en el presente trabajo.
CONCLUSIONES
E. hirtipennis (Melsh.) fue la primera especie que
incidi en las parcelas experimentales de las tres con-
sideradas.
Altas temperaturas, baja o moderada humedad relati-
va y nulas o escasas precipitaciones favorecieron el de-
sarrollo poblacional de las tres especies consideradas.
La zona de La Siguaraya ofreci mejores condiciones
para el desarrollo de las tres especies estudiadas se-
guida de La Veguita.
La humedad relativa y las precipitaciones no siem-
pre lograron una relacin significativa.
REFERENCIAS
Bruner, C. S.; C. L. Scaramuzza; A. R. Otero: Catlogo de los insectos
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Habana, 1985, pp. 31-34.
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Tcnica en la Agricultura 3(7), CIDA, INRA, 1976.
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Fitosanidad 7(3):21-25, 2003.
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Chrysomelidae) y algunos aspectos de su biologa en un cultivar de
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CIDA, INRA, 1979.
fitosanidad/25
DIVERSIDAD DE INSECTOS BENFICOS ASOCIADOS
A MORINDA CITRIFOLIA L.
Yaril Matienzo Brito,
1
Esperanza Rijo Camacho,
1
Ofelia Miln Vargas,
1
Nersys Torres Nelson,
1
Yoel
Larrinaga Lewis,
1
Norma Romero Castillo
2
y Delfn Pl del Campo
3
1
Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal Calle 110 no. 514 e/ 5.
a
B y 5.
a
F, Playa, Ciudad
de La Habana, CP 11600, ymatienzo@inisav.cu
2
UBPC Organopnico Vivero Alamar. Ave. 160 esq. Parque Hanoi, Zona 6, Alamar, La Habana del Este,
Ciudad de La Habana
3
Tienda Consultorio Agropecuaria Armada. Vento e/ 4.
a
y Aranguren, Reparto Casino Deportivo, Cerro,
Ciudad de La Habana
RESUMEN
En la agricultura urbana se fomenta actualmente el cultivo de Morinda
citrifolia L. (noni), adems de otras especies arbreas asociadas a
hortalizas, granos y otros, con lo cual se promueve la conservacin
de la biodiversidad, incluidas las especies de insectos benficos
que regulan las poblaciones de plagas que afectan las plantas. Se
realiz una investigacin para describir la diversidad taxonmica y
la abundancia relativa de las especies de insectos benficos que se
asocian a esta planta en la Unidad Bsica de Produccin Cooperativa
Organopnico Vivero Alamar, ubicada en el municipio de La Habana
del Este de la provincia de Ciudad de La Habana, de septiembre del
2003 a marzo del 2004. Se muestrearon plantas de M. citrifolia con
una frecuencia semanal, para lo cual se revis el follaje y se contabi-
lizaron los insectos detectados. Las especies se identificaron en
laboratorio, y la diversidad se estim mediante la utilizacin de ndi-
ces ecolgicos. Se detectaron cinco rdenes, siete familias, diez
gneros y siete especies de insectos benficos, lo que se considera
como una alta diversidad de especies, as como una tendencia a la
equitatividad de las poblaciones, y en contraste una baja dominan-
cia. Las especies Cycloneda sanguinea limbifer (Casey) y Apis mellifera L.
presentaron una mayor abundancia relativa en septiembre, octubre y
noviembre, al alcanzar valores de 22,4; 34,8 y 31,6 individuos/planta
para la primera especie, y 8,2; 10 y 14 para la segunda, resultados
preliminares que indican el potencial de esta planta para la conser-
vacin de la entomofauna benfica.
Palabras claves: Morinda citrifolia, insectos benficos, diversidad,
abundancia relativa.
ABSTRACT
The crop of Morinda citrifolia L. (noni) is actually fomented in Urban
Agriculture, besides other arboreal species associated to vegetables,
grains and others, in order to promote biodiversity conservation, also
including all benefical insect species which regulate pest populations
that affect plants. A research was carried out in the Basic Unit of
Cooperative Production Organopnico Vivero Alamar, located in the
east of Havana, to describe taxonomic diversity and relative abundance
of benefical insects associate to this plant. The period of evaluation
was from September 2003 to March 2004. Foliage of M. citrifolia plants
were sampled weekly and all detected insects were counted in situ.
The species were identified in laboratory and the diversity was
estimated with ecological indexes. Five orders, seven families, ten
genera and seven species of benefical insects were detected, which
is considered a high diversity of species, as well as a tendency to the
uniformity of populations, and in contrast, a low dominance. Cycloneda
sanguinea limbifer (Casey) and Apis mellifera L. presented a bigger
relative abundance in the months of September, October and
November, reaching values of 22.4, 34.8 and 31.6 individuals/plants
for the first, and 8.2, 10 and 14 for the second, these preliminary
results indicate the potential of this plant for the conservation of
benefical insects population.
Keys words: Morinda citrifolia, benefics insects, diversity, relative
abundance.
INTRODUCCIN
Morinda citrifolia L. es una especie botnica que per-
tenece a la familia Rubicea, originaria de Malasia,
Polinesia y la India. Se encuentra propagada en Cuba,
donde se conoce comnmente con el nombre de mora
de la India, rbol del queso y noni. Florece y fructifica
durante casi todo el ao. Alcanza adems de tres a seis
metros de altura y posee grandes hojas ovales de color
verde oscuro. Ha adquirido mundialmente gran im-
portancia debido a sus propiedades teraputicas, que
inciden significativamente en el sistema inmunolgico
del hombre [Ramos, 2002].
Actualmente uno de los subprogramas que se ha desarro-
llado dentro de la agricultura urbana en Cuba es justa-
mente el relacionado con el cultivo de plantas medici-
nales [Companioni et al., 2001], dentro de las que se
encuentra esta especie. En este modelo de agricultura
Matienzo y otros
26/fitosanidad
se promueven prcticas agroecolgicas que favorecen la
conservacin de la diversidad biolgica, donde se le brin-
da gran importancia a la conservacin de la fauna
entomolgica que regula las poblaciones de organismos
que afectan a las plantas cultivadas.
Particularmente, en la regin latinoamericana uno de
los pases que ha desarrollado investigaciones enfoca-
das hacia la descripcin de la entomofauna asociada a
esta planta ha sido Per, con las que se han identifica-
do diversas especies insectiles de importancia para el
control biolgico de plagas agrcolas [Castillo y Celi,
2003].
Al considerar que el cultivo de M. citrifolia se ha in-
crementado en la agricultura urbana y que a la vez cons-
tituye una planta que florece durante todo el ao, cu-
yas flores poseen recursos necesarios (polen y nctar)
para la dieta alimentaria de los insectos benficos, re-
sult de inters estudiar la diversidad taxonmica y la
abundancia relativa de la entomofauna benfica aso-
ciada a esta planta.
MATERIALES Y MTODOS
El trabajo se realiz en la Unidad Bsica de Produc-
cin Cooperativa Organopnico Vivero Alamar, ubi-
cada en el municipio de La Habana del Este de la
provincia de Ciudad de La Habana, Cuba, en el pe-
rodo comprendido de septiembre del 2003 a marzo
del 2004.
Para registrar las especies de insectos benficos asocia-
dos a M. citrifolia se efectuaron muestreos semanales en
una barrera conformada por cinco plantas, a las que se
le revis el follaje en los niveles superior, medio e inferior
para contabilizar los insectos detectados. Los ejempla-
res colectados fueron colocados en frascos de cristal para
la posterior identificacin de la especie en el laboratorio,
con el auxilio de las claves taxonmicas [Alayo, 1968;
Alayo, 1976; Gordon, 1985; Alayo y Garcs, 1989].
Para evaluar la diversidad de insectos asociados a M. ci-
trifolia se estim el ndice de Shannon-Weaver, adems
de la equitatividad y la dominancia de especies mediante
el programa informtico Divers.exe de Prez y Sola-
Fernndez (1993).
Los valores decenales de temperatura, humedad y pre-
cipitaciones que se registraron en el perodo evaluado,
se obtuvieron del Boletn Agromet de la Estacin Me-
teorolgica de Casa Blanca [Agromet, 2003; 2004].
Durante el perodo muestreado se registr la presencia
de diferentes especies de insectos benficos, como
Cycloneda sanguinea limbifer (Casey), Chilocorus cacti (L.),
Delphastus pallidus Leconte, Chrysopa poeyi Navs,
Scymnus sp., Polistes cubensis Lepeletier, Condylostylus sp.,
Zelus sp., tres especies de Diptera: Tachinidae, adems
de los polinizadores Apis mellifera L. y Xylocopa cubaecola
Lucas (Tabla 1).
Tabla 1. Entomofauna benfica asociada a M. citrifolia
Orden Familia Especie
C. sanguinea limbifer
C. cacti
Scymnus sp.
Coleoptera Coccinellidae
D. pallidus
Vespidae P. cubensi
A. mellifera
Hymenoptera
Apidae
X. cubaecola
Neuroptera Chrysopidae C. poeyi
Hemiptera Reduviidae Zelus sp.
Dolichopodidae Condylostylus sp.
Indeterminada
Indeterminada
Diptera
Tachinidae
Indeterminada

fitosanidad/27
Diversidad de insectos benficos asociados...
Estudios realizados por Castillo y Celi (2003) en Tum-
bes, Per, coinciden con los obtenidos en esta investi-
gacin, en relacin con la diversidad taxonmica de es-
pecies benficas que se asocian a esta planta, al estar
representada de la misma manera por los rdenes
Coleoptera, Neuroptera, Hemiptera, Diptera e
Hymenoptera, aunque de familias, gneros y especies
diferentes a las detectadas en este trabajo.
Acerca de la fauna entomolgica de hbitos herbvo-
ros, la incidencia result baja. Solo se observaron
colmbolos ocasionalmente, aunque es importante se-
alar que en Per, Castillo y Celi (2003) detectaron que
las principales afectaciones las ocasionaron colepteros
y hempteros.
Si se consideran solamente los insectos benficos, los
resultados indican una alta diversidad en el cultivo, pues
el ndice de Shannon alcanz valores prximos al rango
ptimo, al oscilar de 0,97 hasta 2,11 (Tabla 2). La uni-
formidad mantuvo una tendencia hacia el incremento,
al alcanzar valores desde 0,47 hasta 0,88. El ndice de
Simpson no reflej dominancia de especie, dado justa-
mente por la alta riqueza especfica de insectos, la que
propici la estimacin de valores mnimo de 0,13 y
mximo de 0,49.
C. sanguinea limbifer y A. mellifera fueron las que pre-
sentaron una mayor abundancia relativa en septiem-
bre, octubre y noviembre, al alcanzar valores de 22,4;
34,8 y 31,6 individuos/planta de la primera especie, y
8,2; 10 y 14 de la ltima. Con posterioridad experimen-
taron un descenso y se mantuvieron en equilibrio en
los ltimos muestreos. En contraste, Condylostylus sp.
mostr una tendencia hacia el incremento de su pobla-
cin en este perodo (Fig. 1).
Tabla 2. ndices ecolgicos estimados en M. citrifolia
ndices ecolgicos
Shannon-Weaver
(H
'
)
Uniformidad
(E)
Dominancia de Simpson
(Dsp)
Mnimo Mximo Mnimo Mximo Mnimo Mximo
0,97 2,11 0,47 0,88 0,13 0,49

Las poblaciones ms altas de C. sanguinea limbifer y
A. mellifera se alcanzaron en septiembre, octubre y no-
viembre, y fueron mayores en los dos ltimos, en los que
se registraron temperaturas que disminuyeron de 27,1 a
23,5C, la humedad relativa vari entre 70 y 86%, y fue
mayor en septiembre y octubre. Condylostylus sp. mostr
mayores ndices por planta en enero, febrero y marzo, cuan-
do la temperatura se mantuvo ms fresca (22,9-23,1C).
Figura 1. Fluctuacin poblacional de insectos benficos en M. citrifolia.
Matienzo y otros
28/fitosanidad
Los imagos de las especies relacionadas por lo general
se detectaron en las flores de M. citrifolia. Es de sea-
lar que no se observaron estadios preimaginales. En
este sentido Ramos (2002) plante que esta planta flo-
rece y fructifica casi todo el ao, de manera que esto
favorece la presencia de insectos benficos de una for-
ma permanente en el cultivo. La sombra que brinda el
follaje de la planta propicia adems un ambiente favo-
rable para su permanencia, lo que muestra la potencia-
lidad de esta planta como tcnica de conservacin de
insectos benficos.
CONCLUSIONES
Se registraron cinco rdenes, siete familias, diez g-
neros y siete especies de insectos benficos asociados
a Morinda citrifolia L.
Se estim una alta diversidad de insectos benficos
asociados a esta planta.
Las especies Cycloneda sanguinea limbifer (Casey) y
Apis mellifera L. presentaron una mayor abundancia
relativa en septiembre, octubre y noviembre, al alcan-
zar valores de 22,4; 34,8 y 31,6 individuos/planta para
la primera especie, y 8,2; 10 y 14 para la segunda.
REFERENCIAS
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ga, Citma, vol. 25-36, 2003.
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Ramos, A. Q.: El noni (Morinda citrifolia L.): nuevo rbol para la
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fitosanidad/29
C
o
n
t
r
o
l

b
i
o
l
g
i
c
o
EFECTIVIDAD IN VITRO DE TRICHODERMA HARZIANUM
RIFAI PARA EL BIOCONTROL DE RHIZOCTONIA SOLANI
KHN Y PYRICULARIA GRISEA SACC. AISLADOS
EN EL CULTIVO DEL ARROZ (ORYZA SATIVA L.)
Teresa Reyes Rondn, Giselle Rodrguez Gutirrez, Ana D. Pupo Zayas, Luciano Alarcn Prez y Yenny
Limonta Cutio
Laboratorio Provincial de Sanidad Vegetal. Genaro Rojas 86 e/ Marcelino Diguez y Antonio Barrera, Las
Tunas, Cuba, CP 75200, lapsavlt@enet.cu.
RESUMEN
A partir de plantas de arroz de la variedad J-104 con sntomas de
Pyricularia grisea y Rhizoctonia solani se realizaron siembras in vitro
de partes de tallos, hojas y races daadas en agua-agar y agar-
peptona-dextrosa por los mtodos tradicionales. Se realizaron las
identificaciones y descripciones de los hongos aislados segn cla-
ves correspondientes con el objetivo de comprobar la efectividad
antagnica e hiperparastica de Trichoderma harzianum contra am-
bos patgenos. Para los ensayos de biocontrol se realizaron prue-
bas in vitro en cultivo dual de agar-peptona-dextrosa entre los
patgenos y dos aislamientos de T. harzianum, procedentes del cepario
de mantenimiento del Laboratorio Provincial de Sanidad Vegetal de
Las Tunas (cepas A-53 y A-34), generalizadas en la produccin para
el biocontrol de diferentes patgenos del suelo. Diariamente se mi-
di el dimetro de las colonias, as como el nivel de competencia por
el sustrato y el hiperparasitismo del patgeno, segn el nivel de
crecimiento y esporulacin sobre las colonias. Se demostr la eleva-
da actividad hiperparastica y competitiva de las cepas A-34 y A-53
de T. harzianum, que exhibieron buenas potencialidades para el con-
trol de estos patgenos. Estadsticamente se encontraron diferen-
cias altamente significativas a las 96 h, con un crecimiento promedio
lineal en 7,37 cm en la cepa A-53, y 7,10 cm en la cepa A-34. En el
caso de los patgenos el crecimiento promedio fue de 3,63 cm en
P. grisea y 2,62 cm en R. solani.
Palabras claves: Pyricularia grisea, Rhizoctonia solani, Trichoderma
harzianum, antagonista, hongos del suelo
ABSTRACT
Steams, leaves and roots pieces of rice plants of variety J-104 with
Pyricularia grisea (Sacc.) and Rhizoctonia solani Khn symptoms were
plated in vitro in agar-water and agar-peptone-dextrose by traditional
methods. Observed symptoms were identified and described by
suitable keys for verifying antagonist and hyperparasitic effectivity of
Trichoderma harzianum against both pathogens. Bioassays of dual
cultures agar-peptone-dextrose were realized for biocontrol tests
between pathogens and two T. harzianum strains (A-34 and A-53) from
the strain storage of biological control in Pant Health Provincial
Laboratory of Las Tunas, generalized in mass production against
different soil pathogens. Diameter of colonies was measured daily
and so was the competence l evel by the substrate and the
hyperparasitism of the pathogen, according to the growing level and
sporulation over colonies. Results demonstrated high hyperparasitic
and competitive activity of strains A-34 and A-53 of T. harzianum,
which exhibit good potentialities for the control of these pathogens.
Highly significant differences to 96 hours were found in statistic tests
with a lineal rate growing of 7.37 cm in A-34 strain and 7.10 cm in A-
53 strain. Rate growing was 3.63 cm P. grisea and 2.62 cm R. solani in
the case of pathogens
Key words: Pyricularia grisea, Rhizoctonia solani, Trichoderma
harzianum, antagonist, soil fungi
INTRODUCCIN
El arroz est considerado, junto al trigo y el maz, como
el cereal que ocupa la preferencia en el consumo mun-
dial, superado nicamente por el trigo [FAO, 1981]. Su
cultivo ha mantenido una evolucin positiva, con una
tendencia ascendente en reas sembradas y rendimien-
tos, desde la dcada de los sesenta del pasado siglo.
Aparejado al incremento de las siembras se han pre-
sentado problemas fitosanitarios, donde las enferme-
dades fungosas, insectos, virus y caros son los que
han hecho peligrar la cosecha.
Las plagas del arroz destruyen el 35% de la produccin
mundial, y corresponde a los patgenos el 12% [Pantoja
et al., 1997].
Durante los ltimos 15 aos la produccin arrocera en
Cuba se ha sustentado en la variedad J-04, la cual ha
Reyes y otros
30/fitosanidad
ocupado ms de 70% del rea sembrada en este pero-
do, por la alta adaptabilidad y potencial de rendimien-
to agrcola que presenta [IIA, 2001].
La piriculariosis causada por Pyricularia grisea Sacc.
constituye la ms difundida y destructiva entre las
enfermedades del arroz a escala mundial. Se ha repor-
tado en ms de setenta pases altamente productores
de este cereal [Cordero y Rivero, 2001]. El hongo afecta
todas las partes areas de la planta de arroz, la hoja,
los nudos del tallo, el cuello de la pancula y la pancula
misma. Las temperaturas de 22-29C y humedad rela-
tiva superior a 90% son responsables de prdidas
considerables. Si su ataque ocurre en la fase de plntulas
o de macollamiento quedan totalmente destruidas
[Correa-Victoria y Guimares, 1995].
El aublo de la vaina causado por Rhizoctonia solani
Knh est considerado actualmente como una de las
principales enfermedades del cultivo en las regiones tro-
picales y subtropicales. Se califica de alto riesgo en va-
rios pases de Amrica Latina, y su incidencia caus
una disminucin de los rendimientos de hasta 40% en
la variedad Orizica 1 en Colombia. Los sntomas se
observan inicialmente sobre las vainas y luego en las
hojas de la base del tallo. La enfermedad progresa r-
pidamente desde el inicio, y se extiende desde la vaina
hacia la hoja y en ataques severos destruye el tallo. El
patgeno est presente en todas las zonas arroceras, y
la disminucin del rendimiento, en condiciones de hu-
medad y temperaturas altas, se ha estimado de varias
maneras. En la hoja bandera pueden llegar hasta 20%,
y cuando todas las vainas y lminas foliares estn to-
talmente infectadas, esa prdida logra alcanzar hasta
40% [Correa-Victoria, 1992].
A partir de 1990 se realizaron diversos estudios de pros-
peccin de cepas promisorias, mecanismos de accin,
compatibilidad con agroqumicos, parmetros de repro-
duccin y aplicacin que permitieron la incorporacin
del hongo antagnico T. harzianum a las medidas para
combatir los patgenos fngicos del suelo en diversos
cultivos [Stefanova y Sandoval, 1995; Stefanova, 1997,
citados por Stefanova et al., 2004].
Actualmente se emplean formulados a base del hongo
antagonista Trichoderma sp. para el control biolgico
de hongos del suelo como Rhyzoctonia, Sclerotium,
Fusarium, etc., as como de enfermedades foliares como
mildiu y alternaria, que afectan un amplio rango de
cultivos. T. harzianum se encuentra en el suelo en di-
versos sistemas de produccin de arroz y despliega
mayor actividad bajo condiciones de secano. Tiene la
habilidad de descomponer los residuos de cosecha y de
parasitar a R. solani. Poco se sabe sobre su manejo y
su eficiencia en el campo [Correa-Victoria y Guimares,
1995].
Sobre la base de los resultados con el antagonista
Trichoderma sp. en el control de enfermedades fungosas
en otros cultivos, se traz como objetivo comprobar la
efectividad antagnica e hiperparastica de Trichoderma
harzianum Rifai contra los patgenos P. grisea y R. so-
lani en la variedad de arroz J-104.
MATERIALES Y MTODOS
A partir de plantas de arroz (Oryza sativa L.) con snto-
mas de P. oryzae y R. solani se realizaron siembras de la
partes del tallo, hojas y races afectadas. Las muestras
se procesaron segn los mtodos tradicionales de siem-
bra en agar-agar y en agar-papa-dextrosa, y las identifi-
caciones y descripciones de los patgenos se realizaron
de acuerdo con las claves correspondientes [CMI, 1983].
Para los ensayos del biocontrol se realizaron pruebas
in vitro en cultivo dual agar-dextrosa-peptona entre los
patgenos P. grisea y R. solani, procedentes de la colec-
cin de la seccin de micologa del laboratorio y dos
aislamientos de T. harzianum (cepas A-34 y A-53) de
la seccin de lucha biolgica, utilizados como antago-
nistas de diferentes patgenos del suelo.
Por cada aislamiento se establecieron seis rplicas. La
incubacin se realiz a 26 2C. Se midi diariamente el
dimetro de las colonias hasta su enfrentamiento. Se de-
termin el nivel de competencia por el sustrato, as como
el hiperparasitismo por el antagonista de acuerdo con el
nivel de crecimiento y esporulacin sobre la colonia.
Se utiliz un diseo completamente aleatorizado con
seis rplicas y cuatro tratamientos. Los datos se pro-
cesaron mediante la prueba de Student para muestras
pareadas mediante el programa Statistica, para el cre-
cimiento de las colonias de los fitopatgenos y la
interaccin entre estos y el antagonista. La compara-
cin de medias se realiz mediante la prueba de
Newman-Keuls de ANALEST V.2.0 [Instituto de Cien-
cia Animal, 1998].
Entre el comportamiento del crecimiento de las colo-
nias de la cepa A-53 y A-34 de T. harzianum y los pa-
fitosanidad/31
Efectividad in vitro de Trichoderma...
tgenos P. grisea y R. solani se produjeron diferencias
significativas entre el desarrollo del antagonista y los
patgenos a las 24, 48, 72 y 96 h. El crecimiento prome-
dio lineal fue de 7,375 cm en la cepa A-53 y 7,125 cm en
la cepa A-34, y de 3,633 y 2,620 cm en P. grisea y R. solani
respectivamente (Tabla 1).
Los resultados en la prueba in vitro demostraron que
T. harzianum present una elevada actividad antag-
nica e hiperparastica contra los patgenos R. solani y
P. grisea, al mostrar una colonizacin total sobre am-
bos patgenos. Se observ que ambos aislados del
antagonista mostraron una actividad parastica ele-
vada y buenas potencialidades contra los hongos en
estudio.
Existi una alta significacin entre las medias del creci-
miento y la desviacin estndar del antagonista con los
patgenos (Tabla 2), con valores de t de 8,15 y 10,44 al-
canzados para la cepa A-53 en ambos patgenos, y la
cepa A-34 con valores de t de 8,35 y 10,53. Se evidenci
que la cepa A-34 frente a estos patgenos mostr una
capacidad parastica superior a la cepa A-53. Los resul-
tados concuerdan con los estudios realizados por Sandoval
et al. (1993, 1995 y 1997), quienes plantearon que la cepa
estndar (A-34) de T. harzianum es la ms efectiva y de
mayor espectro de accin, lo que demostr buenas po-
tencialidades en el control de R. solani, as como su efec-
tividad contra el patgeno en su competencia por el
sustrato y el hiperparasitismo mostrado.
Tabla 1. Crecimiento lineal promedio (cm) de las colonias
de las cepas A-53 y A-34 de T. harzianum y de los patgenos
R. solani y P. grisea
Crecimiento lineal (cm)
Cepas
24 h 48 h 72 h 96 h
T. harzianum (A-53) 1,625 a 2,575 a 4,975 a 7,375 a
T. harzianum (A-34) 0,425 b 2,300 b 4,750 b 7,125 b
R. solani 0,000 c 0,180 c 0,800 c 2,620 c
P. grisea 0,000 c 0,633 d 1,700 d 3,633 d
Valores con letras desiguales difieren para p < 0,05.

Tabla 2. Actividad antagnica e hiperparastica de diferentes aislamientos
de T. harzianum hacia los patgenos del arroz
Actividad antagnica Actividad antagnica
Cepas
Trichoderma R. solani
t
Trichoderma P. grisea
t
T. harzianum (A-53) 3,358 a 0,542 b 8,15 3,860 a 0,390 b 10,44
T. harzianum (A-34) 3,267 a 0,546 b 8,35 3,515 a 0,245 b 10,53

Valores con letras desiguales difieren para p < 0,05.

Resultados similares obtuvo Gonzlez (2004) en ensa-
yos in vitro con T. harzianum (cepa A-34), con el mayor
efecto antagnico sobre R. solani, as como el ms alto
hiperparasitismo con la cepa C-66 y T. viride en frijol.
Srivastava et al. (2002) trataron semillas de garbanzo
afectadas por R. solani con T. viride (cepa PDBCTV 23
y 32) o T. harzianum (cepa PDBCRH 10). La cepa
PDBCTV 32 de T. viride result ser la de mayor com-
posicin protenica en la raz (378 g/mL) y la de ms
baja incidencia de la enfermedad en el cultivo (10,6%).
Varn y Ramrez (2004) obtuvieron buenos resultados
con un producto comercial de T. lignorum en Colombia
contra R. solani en la desinfeccin de semillas de arroz
con dosis de 400, 300 y 200 g/kg de semilla, con ttulo
de 10
10
esporas/g, con incidencias superiores a 55% en el
testigo e inferiores a 13% de infestacin en plantacin,
as como un ndice de 0,62 en los tratamientos y de 3 en
el testigo.
Quarles (1993), Lorito et al. (1993), Ghisalberti y Siva-
sithamparan (1991), Sivan y Chet (1989) [citados por
Stefanova et al., 2004] informaron la eficacia de T. har-
zianum contra los hongos del suelo, y su actividad como
antagonista se atribuye al micoparasitismo, produc-
cin de antibiticos y enzimas hidrolticas.
Reyes y otros
32/fitosanidad
Figura 1. Resultados del enfrentamiento de las cepas A-53 y
A-34 de Trichoderma harzianum con Rhizoctonia solani.
Figura 2. Resultados del enfrentamiento de las cepas A-53 y A-34
de T. harzianum frente a Pyricularia grisea en arroz variedad J-104.
En el caso de P. grisea no se ha tenido conocimiento so-
bre estudios realizados con este hongo. Investigadores
del Instituto de Investigaciones de Sanidad Vegetal se-
alaron la efectividad de Trichoderma sobre hongos del
orden Deuteromycetes, al cual pertenece este patgeno,
y donde han habido resultados satisfactorios [INISAV,
1992]. Borda y Arbelez (1993) sealaron como efectivo
el empleo de T. harzianum como biocontrol de hongos del
suelo en diversos cultivos, incluido el pepino.
Los estudios relativos a su uso como biopreparado foliar
son relativamente nuevos. En Cuba Prez y Echemenda
(1994), en condiciones de campo bajo infeccin natural
de Alternaria porri, informaron 20% de disminucin del
patgeno con la aplicacin de T. harzianum en plantas
de cebolla.
Rodrguez et al. (1998) mostraron igualmente el efecto
foliar de T. harzianum contra mildiu velludo y mildiu
polvoriento en pepino, con reducciones de la incidencia
en 35 y 23,2% respectivamente, as como estimulacin
del desarrollo de las plantas, incrementos en la longi-
tud del tallo, frutos y su peso.
El crecimiento del antagonista Trichoderma (cepas A-53
y A-34) frente a los patgenos R. solani y P. oryzae
ocurri a las 24 h despus de sembrado. El patgeno
R. solani comenz su crecimiento a las 48 h, y P. oryzae
a las 72 h (Figs.1 y 2). Esto demostr la capacidad de
Trichoderma para establecerse y competir con la obten-
cin de diferencias altamente significativas en el creci-
miento de las colonias de las cepas A-53 y A-34. Los
patgenos presentaron diferencias altamente significa-
tivas en el crecimiento negativo de sus colonias.
CONCLUSIONES
Trichoderma harzianum mostr ser buen hiperparsito
y antagonista de los hongos Pyricularia grisea Sacc.
y Rhizoctonia solani Khn in vitro.
fitosanidad/33
Efectividad in vitro de Trichoderma...
La cepa A-34 (T. harzianum) fue la ms efectiva y de
mayor espectro de accin sobre los aislados de P. grisea
y R. solani.
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34/fitosanidad
fitosanidad/35
SELECCIN DE CEPAS DE BACILLUS Y OTROS GNEROS
RELACIONADOS PARA EL CONTROL BIOLGICO
DE HONGOS FITOPATGENOS
Yaritza Reinoso Pozo,
1
Daymara Vaillant Flores,
2
Luis Casadess Romero,
1
Ernesto Garca Prez
1
y
Victoria Pazos lvarez-Rivera
1
1
Universidad de La Habana, Departamento de Microbiologa. Calle 25 no. 455 esq. a J, La Habana,
CP 10400, yreinoso@fbio.uh.cu
2
a
B y 5.
a
F, Playa, Ciudad
de La Habana, CP 11600
RESUMEN
Se aislaron del suelo cepas de Bacillus y otros gneros relacionados,
y se determin su efecto antagnico frente a los hongos fitopatgenos
Alternaria solani Sor y Rhizoctonia solani Khn mediante enfrenta-
miento de cultivos duales. El efecto antifngico de los metabolitos
producidos por los aislados antagonistas se evalu in vitro por el
mtodo de envenenamiento del medio de cultivo. Aquellas cepas que
mostraron los mejores resultados se identificaron hasta especie. Se
aisl un total de 85 cepas bacterianas, de las cuales 18 mostraron
efecto antagnico in vitro frente a A. solani y R. solani. Los metabolitos
producidos por la mayora de estas cepas inhibieron en ms de 50%
el crecimiento micelial de los hongos fitopatgenos. Fueron selec-
cionadas siete cepas como promisorias para el control biolgico in
vivo, las cuales pertenecen a las especies Bacillus subtilis, Paenibacillus
polymyxa y Bacillus licheniformis.
Palabras claves: Bacillus, control biolgico, Alternaria solani,
Rhizoctonia solani
ABSTRACT
Soil bacterias belonging to Bacillus and other related genera were
isolated from soil and screened for antgonism against fungal pathogens
Alternaria solani and Rhizoctonia solani by dual-culture assay. Antifungal
effect of metabolites produced by antagonistic bacteria was evaluated
in vitro using the method of culture media poisoning. Strains that
showed best results were identified up to specie. A total of 85 bacterial
strains were obtained, 18 of them showed antagonistic effect against
A. solani and R. solani in vitro. Metabolites produced by most of strains
inhibited the mycelia growth of pathogenic fungi in more than 50%.
Seven strains were selected as good candidates for biological con-
trol in vivo; these belong to the species Bacillus subtilis, Paenibacillus
polymyxa and Bacillus licheniformis.
Key words: Bacillus, biological control, Alternaria solani, Rhizoctonia
solani
INTRODUCCIN
Alternaria solani Sor y Rhizoctonia solani Khn son
hongos fitopatgenos que poseen un amplio rango hos-
pedero que incluye algunos cultivos de importancia eco-
nmica como la papa (Solanum tuberosum L.) y el to-
mate (Lycopersicum esculentum Mill) [Krechel et al.,
2002].
Para el control de estos patgenos se aplican diversos
fungicidas de accin protectora y tambin de carcter
sistmico [Almandoz et al., 2000]. Aunque el principal
mtodo de manejo de las enfermedades causadas por
A. solani y R. solani ha sido el control qumico, los
problemas de contaminacin ambiental que han
impactado negativamente en la biodiversidad de los
agroecosistemas, as como de seguridad y salud pbli-
ca inherentes al uso inadecuado de los agroqumicos,
condujeron a la bsqueda y desarrollo de nuevas alter-
nativas [Zavaleta-Meja, 2000].
Actualmente se prefiere en la agricultura el uso de prc-
ticas ms ecolgicas como el control biolgico, median-
te el uso de microorganismos antagonistas, los cuales
pueden limitar la iniciacin y propagacin de las enfer-
medades causadas por patgenos vegetales mediante
mecanismos de competencia, antibiosis, induccin de
resistencia, entre otros [Fernndez-Larrea, 2001].
Entre los agentes de control biolgico ms estudiados
se encuentran los microorganismos pertenecientes a los
gneros Streptomyces, Pseudomonas, Agrobacterium,
Trichoderma y Bacillus [Whipps, 2001]. Estos ltimos
estn considerados como excelentes candidatos para el
desarrollo de bioproductos aplicables en el campo para
el control de enfermedades de origen fngico.
Reinoso y otros
36/fitosanidad
Los objetivos del presente trabajo fueron aislar, selec-
cionar e identificar hasta especie, cepas de los gneros
Bacillus, Brevibacillus y Paenibacillus con potencialida-
des para el biocontrol de A. solani y R. solani, y deter-
minar el efecto inhibitorio de los metabolitos produci-
dos por las cepas antagonistas sobre el crecimiento in
vitro de los hongos fitopatgenos antes mencionados.
MATERIALES Y MTODOS
Como material biolgico se emplearon cepas de los hon-
gos Alternaria solani y Rhizoctonia solani, conservadas
en medio de cultivo PDA (OXOID), y la cepa Bacillus
subtilis BS18, conservada en medio de cultivo agar
nutriente, pertenecientes al cepario del Laboratorio de
Microbiologa General de la Facultad de Biologa de la
Universidad de La Habana.
Se colectaron muestras de suelos de unos 100 g proce-
dentes de regiones paperas de los municipios de Gines,
San Jos de las Lajas y Quivicn, de la provincia de La
Habana, tomadas a una profundidad de 2 a 5 cm, se
colocaron en bolsas de plstico para trasladarlas al la-
boratorio y se conservaron en un lugar fresco hasta su
utilizacin.
Para el aislamiento de bacterias de los gneros Bacillus,
Brevibacillus y Paenibacillus se resuspendi aspti-
camente 1 g de suelo en 10 mL de agua destilada est-
ril, y se realizaron diluciones seriadas hasta 10
3
, y esta
ltima se someti a un tratamiento trmico de 85
o
C
durante 15 min. Se tomaron alcuotas de 100 L de la
dilucin tratada y se sembraron con esptula de
Drigalsky en placas Petri con medio de cultivo agar
nutriente. Las placas se incubaron durante 72 h a 30 1
o
C.
Transcurrido este tiempo se colectaron las colonias de
morfologa variada y se sembraron nuevamente para
garantizar la pureza del cultivo. A las 24 h se realiz la
prueba de la catalasa y a las 48 h una tincin simple
con violeta cristal, y se observ al microscopio ptico
con un aumento de 1000X. Los aislamientos que resul-
taron positivos a la catalasa y esporulados con morfo-
loga bacilar se conservaron en frascos con agar nutriente
a 4
o
C hasta su posterior uso, y se les coloc un cdigo
de letras y nmeros de acuerdo con el lugar de proce-
dencia y al orden de aparicin hasta su identificacin a
nivel de especie.
El efecto antagonista de las cepas aisladas frente a los
hongos A. solani y R. solani se determin por el mto-
do de enfrentamiento de cultivos duales, para lo que se
sembraron las cepas bacterianas en un extremo de pla-
cas con medio de cultivo PDA, y en el extremo opuesto
del crecimiento bacteriano se colocaron discos de 1 cm
de dimetro de cultivos de los hongos fitopatgenos
crecidos durante cinco das. Las placas se incubaron
durante siete das para A. solani y cuatro para R. solani
a 30 1
o
C. Los experimentos se realizaron por dupli-
cado, y como control positivo se utilizaron placas con
PDA sembradas con cada uno de los hongos fitopa-
tgenos, en ausencia de las cepas bacterianas en el ex-
tremo opuesto al disco fngico. Aquellas cepas
bacterianas que no permitieron el pleno desarrollo
micelial de los hongos fitopatgenos se seleccionaron
para el experimento siguiente.
El efecto inhibitorio de los metabolitos producidos por
las cepas antagonistas frente a A. solani y R. solani se
determin por el mtodo de envenenamiento del medio
de cultivo, a partir de cultivos de 24 h de crecimiento
en medio agar nutriente en plano inclinado, se prepa-
raron suspensiones de las cepas bacterianas correspon-
dientes al patrn 0,5 (10
8
UFC/mL) de la escala de
MacFarland y se inocularon en frascos con 50 mL de
medio de cultivo de caldo-papa-dextrosa. Los cultivos
inoculados se colocaron en zaranda orbital termostatada
durante 72 h a 120 rpm y 30 1C. Trascurrido este
perodo se tomaron alcuotas de 1,5 mL de los cultivos
bacterianos centrifugados durante 15 min, se desech
la biomasa bacteriana y el sobrenadante se filtr al vaco
con filtros de 0,2 m. Se aadi 1 mL de sobrenadante
de cada una de las cepas bacterianas a 25 mL de medio
de cultivo PDA fundido. Una vez solidificado el medio
se colocaron en el centro de la placa discos de PDA de 1 cm
de dimetro con crecimiento fngico de los hongos
fitopatgenos. Las placas se incubaron a 30 1
o
C du-
rante los perodos de incubacin establecidos para cada
hongo fitopatgeno. Cada tratamiento se realiz por
triplicado y se utiliz como control positivo placas con
los hongos fitopatgenos en medio PDA inoculado con
1 mL de medio de caldo-papa-dextrosa estril. Poste-
riormente se midi el dimetro de las colonias y se de-
termin el porcentaje de inhibicin mediante la frmu-
la descrita por Bashan et al. (1996):
100
DCC
DCT DCC
(%) Inhibicin

=
donde:
DCC: Dimetro de la colonia control
DCT: Dimetro de la colonia tratada
fitosanidad/37
Seleccin de cepas de Bacillus y otros...
Las cepas antagonistas que mostraron los mejores efec-
tos inhibitorios se identificaron hasta especie segn las
pruebas fisiolgicas y bioqumicas propuestas por Claus
y Berkeley (1986) para el gnero Bacillus en el Manual
de Bacteriologa Sistemtica de Bergey, y de acuerdo
con la metodologa descrita por Harrigan y McCance
(1984). Se realizaron pruebas de produccin de cido,
gas y acetona a partir de la glucosa, produccin de
cido a partir del manitol, hidrlisis del almidn, gela-
tina y casena, crecimiento en agar nutriente suplemen-
tado con NaCl (7%), agar citrato de Simmons, agar
Sabouraud, crecimiento anaerobio, prueba de reduccin
de nitratos y produccin de lecitinasa. Se emple ade-
ms el sistema miniaturizado API 50CHB/E y como
control la cepa Bacillus subtilis BS18.
Los datos se procesaron mediante anlisis de varianza
de clasificacin simple, se verific la normalidad y ho-
mogeneidad de varianza mediante las pruebas de Kolmo-
gorov Smirnov y Bartlett respectivamente, y las medias se
analizaron mediante la prueba de Tukey (p 0,05) por el
programa Statistica versin 6.0.

Se obtuvieron 85 aislados bacterianos con caractersti-
cas morfolgicas semejantes a las de los gneros Bacillus,
Brevibacillus y Paenibacillus. Todas las cepas respon-
dieron positivamente a la tincin de Gram y a la prue-
ba de la catalasa, presentaron endosporas bacterianas
y clulas vegetativas con morfologa bacilar.
En estudios realizados por otros autores tambin se ha
empleado el suelo para obtener aislados de estos gne-
ros, ya que a pesar de la ubicuidad de estos microor-
ganismos se plantea que el suelo es uno de sus princi-
pales hbitats. Garbeva et al. (2003) realizaron estudios
de la microbiota de suelos agrcolas mediante tcnicas
de PCR (Polymerase Chain Reaction) y determinaron
que aproximadamente 95% del ADN presente en ellos
perteneca a especies de los gneros Bacillus y
Paenibacillus.
Del total de cepas bacterianas aisladas solo 18 (21,17%)
inhibieron el pleno desarrollo micelial de A. solani (Fig. 1A),
mientras que 17 (20%) tuvieron este mismo efecto sobre
R. solani (Fig. 1B).
A
B
Control
Control
Enfrentamiento
Enfrentamiento
Figura 1. Antagonismo in vitro de las cepas bacterianas aisladas frente a A. solani y R. solani. A: Efecto inhibitorio de la cepa S6
frente a Rhizoctonia solani. B: Efecto inhibitorio de la cepa G23 frente a Alternaria solani.
De forma general existen diversas informaciones del
efecto antifngico in vitro de cepas del gnero Bacillus
frente a hongos fitopatgenos, entre los que se encuen-
tran Fusarium solani, A. solani, Pythium ultimun y R. so-
lani [Fernndez-Larrea, 2001] [Yoshida et al., 2001]
[Moussa, 2002].
Okumoto et al. (2001) tuvieron resultados semejantes
a los presentes en el control de A. solani in vitro me-
diante cepas de Bacillus spp., algunas de las cuales se
consideraron por estos autores como aislados
promisorios para el control in vivo, dados los efectos
antagnicos observados in vitro. En la literatura se en-
cuentra poca informacin actualizada relacionada con
el uso de Bacillus y otros gneros afines para el
biocontrol de A. solani. Ello puede deberse a que ac-
tualmente existe la tendencia de emplear estos
microorganismos para la induccin de resistencia
sistmica en plantas, como un nuevo mecanismo de con-
trol biolgico que provee una proteccin efectiva frente
al ataque de hongos fitopatgenos, causantes de enfer-
medades foliares como el tizn temprano, provocado
por A. solani [Silva et al., 2004].
Entre los microorganismos empleados para el control
biolgico de R. solani se destacan Pseudomonas fluo-
rescens y miembros del gnero Bacillus [Asaka y Shoda,
1996]. Los resultados del presente trabajo coinciden
con otros reportados en la literatura sobre el biocontrol
de R. solani, en los que utilizan cepas de Bacillus. Faltin
Reinoso y otros
38/fitosanidad
et al. (2004) desarrollaron una estrategia para probar
las potencialidades de bacterias asociadas a plantas en
el biocontrol de R. solani. Entre los principales aisla-
dos antagonistas hallaron cepas de Bacillus spp. De
forma semejante Talbot y Larkin (2005) compararon
la eficacia de diferentes agentes de control biolgico para
el control de R. solani, y demostraron que los trata-
mientos ms efectivos fueron aplicaciones de una cepa
de Bacillus y Trichoderma viridens. Estos estudios su-
gieren que los miembros de este gnero pueden em-
plearse de forma eficaz en el control de este hongo fito-
patgeno.
Aproximadamente el 44,4% de las cepas produjo
metabolitos que inhibieron al 100% el crecimiento de A.
solani. Los metabolitos secretados por las cepas G10, G11,
Q2, Q7, Q8, Q18 y S1 produjeron, en todos los casos, ms
de 60% de inhibicin, y no se observaron diferencias sig-
nificativas entre los efectos inhibitorios producidos por
ellos (Fig. 2). Los metabolitos secretados por las cepas Q4
y G20 fueron los de menor actividad antagnica.
Figura 2. Efecto inhibitorio de los metabolitos producidos por las cepas
antagonistas sobre el crecimiento micelial de A. solani.
Solamente los metabolitos producidos por la cepa Q15
inhibieron al 100% el crecimiento micelial de R. solani
(Fig. 3). La mayora de las cepas antagonistas produ-
jeron metabolitos que inhibieron en ms de 55% el cre-
cimiento de R. solani. En estas condiciones experimen-
tales los metabolitos producidos por las cepas Q4 y Q5
fueron los de menor efecto inhibitorio sobre el creci-
miento de este hongo fitopatgeno.
Algunas especies de los gneros Bacillus, Brevibacillus
y Paenibacillus producen varios tipos de metabolitos,
algunos de los cuales poseen actividad antifngica. Es-
tos compuestos tienen una importancia fundamental
en el control biolgico de hongos fitoptogenos como
Rhizoctonia, Alternaria, Sclerotinia, Fusarium,
Gaeummanomyces, Pythium y Phytophthora, y por su
importancia muchos se han estudiado y caracterizado.
Tal es el caso de los compuestos de naturaleza peptdica
y lipopeptdica, entre los que se encuentran las mi-
cobacilinas, iturinas, bacilomicinas, micosubtilinas y
fungistatinas [Souto et al., 2004]. Existen cepas de es-
tos microorganismos que pueden coproducir adems
metabolitos antifngicos voltiles y enzimas quiti-
nolticas [Montealegre et al., 2003; Sadfi et al., 2001]
con efecto antifngico, lo que podra explicar el hecho
de algunos de los aislados bacterianos empleados en este
estudio inhiban totalmente el crecimiento micelial de
A. solani y R. solani.
Estas propiedades de los miembros del gnero Bacillus
se han aprovechado para la obtencin de formulaciones
lquidas comercializables, cuyo principio activo est
constituido por los metabolitos antifngicos produci-
dos por estas bacterias, como el elaborado a partir de
una cepa patentada de Bacillus subtilis (QST713), que
contiene ms de treinta compuestos bioqumicos de
tipo lipopeptdico y que provee un control efectivo para
un amplio espectro de enfermedades en frutales, hor-
talizas y flores causadas por hongos [McSpadden,
2002].
fitosanidad/39
Seleccin de cepas de Bacillus y otros...
Se identificaron hasta especie siete cepas antagonistas que
inhibieron el crecimiento micelial de A. solani y R. solani
Figura 3. Efecto inhibitorio de los metabolitos producidos por las cepas
antagonistas sobre el crecimiento micelial de R. solani.
ms de 80%. Los resultados de identificacin mediante el
sistema API 50 CHB/E se muestran en la Tabla 1.
Tabla 1. Identificacin de los aislados antagonistas
con mejores resultados mediante el sistema API
Cepas Especie Similitud (%)
B1 Bacillus licheniformis 99,0
B4 Paenibacillus polymyxa 98.7
G9 Paenibacillus polymyxa 99,7
G16 Bacillus subtilis 98,7
Q15 Bacillus subtilis 99,9
S2 Bacillus subtilis 97,6
S6 Bacillus licheniformis 93,3
BS18 Bacillus subtilis 99,9

Las cepas B1 y S6 se identificaron como Bacillus
licheniformis. Drahos y West (2004) aislaron una cepa
de esta especie del suelo que presenta efecto antagnico
frente a un amplio grupo de hongos fitopatgenos de
los gneros Sclerotinia, Rhizoctonia, Bipolaris,
Aspergillus y Pyricularia, lo que demuestra las poten-
cialidades de algunas cepas de esta especie para el
biocontrol. Sin embargo, a pesar de que Bacillus
licheniformis es muy abundante en el suelo, sus posi-
bles aplicaciones como agente de control biolgico de
microorganismos fitopatgenos no se han estudiado con
intensidad.
Las cepas B4 y G9 corresponden a la especie Paeni-
bacillus polymyxa, antiguamente Bacillus polymyxa.
Otros autores han empleado cepas de esta especie ais-
ladas de diferentes ecosistemas para el control biolgi-
co de hongos fitopatgenos como Botrytis cinerea
[Helbig, 2001], Leptosphaeria maculans [Beatty y
Jensen, 2002], Sclerotinia spp., Rhizoctonia solani,
Alternaria spp., Pythium spp., Aspergillus spp. y
Penicilium spp. [Kharbanda et al., 2003].
Las cepas G16, Q15 y S2 corresponden a la especie
Bacillus subtilis que se encuentra ampliamente distri-
Reinoso y otros
40/fitosanidad
buida en ambientes naturales como el suelo. Entre el
grupo de bacterias utilizadas como agentes de control
biolgico, quizs una de las especies ms estudiadas sea
Bacillus subtilis.
Las bacterias de esta especie muestran efecto inhibito-
rio sobre el crecimiento de diversos hongos fitopatgenos
como Pythium spp., Phytophthora spp., Botrytis spp.,
Penicillium spp., Rhizoctonia spp., Alternaria spp.,
Fusarium spp., Monilinia spp., entre otros [Lehman et
al., 2003], y producen varios tipos de metabolitos con
efecto antifngico y siderforos que facilitan el meca-
nismo de competencia por el hierro con los microor-
ganismos fitopatgenos [Leclere et al., 2005].
Existen bioproductos comercializables que contienen
esta especie como componente biolgico activo y se uti-
lizan en campo para el control de enfermedades causa-
das fundamentalmente por hongos del suelo que ata-
can la raz de las plantas [McSpadden, 2002].
CONCLUSIONES
Se obtuvieron 85 aislados bacterianos con caracte-
rsticas semejantes a las de los gneros Bacillus,
Brevibacillus y Paenibacillus.
El 21,17% de las cepas bacterianas aisladas inhibi
el pleno desarrollo micelial de A. solani, mientras
que 20% tuvo este mismo efecto sobre R. solani.
Siete cepas se seleccionaron como promisorias para
el control biolgico de los hongos fitopatgenos es-
tudiados, correspondientes a las especies Bacillus
subtilis, Bacillus lichiformis y Paenibacillus polymyxa.
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fitosanidad/41
MONITOREO DE LA PIRICULARIOSIS (PYRICULARIA
GRISEA SACC.) EN EL CULTIVO DEL ARROZ (ORYZA SATIVA L.)
Regla M. Crdenas Travieso,
1
Elizabeth Cristo Valds,
1
Noraida Prez Len,
1
Mara Caridad Gonzlez
Cepero
1
y Leonila Fabre Leal
2
1
Instituto Nacional de Ciencia Agrcolas. Gaveta Postal 1. Carretera a Tapaste Km , San Jos
de las Lajas, La Habana, CP 32 700, rmaria@inca. edu cu
2
Complejo Agroindustrial Arrocero Los Palacios. Calle 26 no. 1920 e/ 19 y 21, Los Palacios, Pinar
del Ro, Cuba
C
o
m
u
n
i
c
a
c
i
n

c
o
r
t
a
La frecuente ocurrencia de desastres naturales en los
ltimos aos constituye una evidencia de la variabili-
dad en el comportamiento climtico en el mbito mun-
dial, lo que se ha denominado como cambios globales, y
la agricultura no est exenta de sufrir sus consecuen-
cias. En la historia de la agricultura cubana se ha de-
terminado que los principales agentes productores de
las ms terribles enfermedades en cultivos de impor-
tancia econmica son los hongos, por lo que se hace
necesario estar alertas para evitar las consecuencias de
un brote de estos patgenos [Herrera, 2003].
La piriculariosis, producida por el hongo Magnaporthe
grisea Barr. (fase asexual: Pyricularia grisea Sacc.) es
la enfermedad ms importante del cultivo del arroz a
escala mundial, por su amplia distribucin y poder des-
tructivo [Crdenas et al., 2000]. En Cuba es ms dai-
na en la regin occidental, y constituye un problema
patolgico, fundamentalmente en la provincia de Pi-
nar del Ro [Fabregat, 1982]. El desarrollo de varieda-
des resistentes es el mtodo ms econmico y efectivo
para controlar tal enfermedad; sin embargo, la resis-
tencia es de poca duracin [Prado et al., 1998]. En la
actualidad la estrategia de mejoramiento para minimi-
zar la infeccin incluye la seleccin de lneas y varieda-
des en el rea Experimental de la Granja Caribe, per-
teneciente el Complejo Agroindustrial Arrocero Los
Palacios, en la provincia de Pinar del Ro, donde la
piriculariosis es uno de los factores limitantes en la
produccin. Las evaluaciones de la enfermedad se eje-
cutan en las fases del desarrollo del cultivo de plntula
y paniculacin, donde la enfermedad hace los daos de
mayor importancia, y durante las campaas de fro y
primavera, en condiciones de camas de infeccin de
piricularia [Crdenas et al., 2005] y estudio regional de
variedades [Crdenas et al., 2002].
Los resultados revelaron que en la campaa de fro 2004-
2005 las lneas evaluadas en camas de infeccin de
piricularia mostraron una elevada severidad de la en-
fermedad en la hoja, con un rea foliar afectada (AFA)
de 27,25 y 10,69% en evaluaciones correspondientes
a 36 y 46 das de germinado (ddg) el cultivo, respecti-
vamente, lo que equivale a una resistencia promedio
de 6,7 y 5,3 grados, respectivamente, en la escala de
nueve propuesta por IRRI (2002), mientras que en la
campaa de primavera de 2005 la infeccin fue menor
(3,12 y 1,49% AFA), con grados de resistencia de la
enfermedad en la hoja de 2,75 y 2,0 en evaluaciones
correspondientes a 33 y 56 ddg, respectivamente. En el
estudio regional de variedades en la campaa de fro,
todas las variedades se catalogaron como susceptibles
a la infeccin en la hoja. Posteriormente se clasificaron
como resistentes a la infeccin en el cuello de la pancula,
con valores inferiores a 10% en todas las variedades
evaluadas.
En la primavera del 2005 no se registr infeccin en la
hoja en las variedades tratadas en el estudio regional
de variedades, mientras que en el cuello de la pancula
todas resultaron susceptibles, con registros superiores
a 18,25%. Se sabe que la manifestacin de la enferme-
dad en el cuello de la pancula est influenciada por las
condiciones climticas imperantes en el momento de la
emisin de la pancula, que son ms favorables para el
desarrollo de la enfermedad en esta poca.
En la campaa de fro la infeccin en la hoja fue mayor
que en primavera, tanto en camas de infeccin de
Crdenas y otros
42/fitosanidad
piricularia como en el estudio regional de variedades.
En esta campaa, que comprende de diciembre a febre-
ro, se registran los mayores incrementos de ozono (O
3
),
que

en el pas ocurren principalmente de octubre a mar-
zo. Estudios internacionales han demostrado que el
exceso de O
3
provoca la aparicin de

plagas y enferme-
dades en numerosos cultivos, y se considera que su in-
cremento es un problema ambiental cada vez ms fre-
cuente en el mundo, por lo que en lo adelante se hace
necesario el estudio de este fenmeno relacionado con
la enfermedad [Pelez, 2005].
El monitoreo y observancia de la piriculariosis permite
conocer el estado del potencial de inculo de Pyricularia
grisea Sacc. en el agroecosistema arrocero de la provin-
cia, al mismo tiempo que proporciona informacin acer-
ca del comportamiento de las variedades comerciales y
promisorias ante esta enfermedad. Circunstancialmente
permite hacer deducciones acerca de posibles causas que
motiven un comportamiento atpico, lo que ayuda a
mantener la vigilancia para minimizar la posibilidad de
desastres causados por la severidad de este patgeno.
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fitosanidad/43
COSMOGLYPHUS OUDEMANSI (ZACHVATKIN, 1937)
(ACARI: ACARIDAE), UN NUEVO REGISTRO PARA CUBA
Acela Z. Martnez Gutirrez,
1
Pedro E. de la Torre Santana,
2
Eleazar Botta Ferret,
3
Michel Castro
Vzquez
1
y Neivys Gonzlez Mollinedo
1
1
Laboratorio Provincial de Sanidad Vegetal. Carretera de Malezas Km 2,
,
Santa Clara, Villa Clara,
Cuba, sanidadvegetalve@enet.cu
2
Centro Nacional de Sanidad Vegetal. Ayuntamiento 231 e/ San Pedro y Lombillo, Plaza
de la Revolucin, Ciudad de La Habana, entomologia@sanidadvegetal.cu
3
a
B y 5.
a
F, Playa, Ciudad
de La Habana, CP 11600, ebotta@inisav.cu
INTRODUCCIN
Entre los caros del orden Astigmata se encuentran
las familias que contienen las principales especies pla-
gas de los productos almacenados como Acaridae,
Histiostomatidae, Ebertiidae y Winterschmidtiidae,
que son en su mayora de hbitos micfagos, saprfagos,
fitfagos o parsitos [Flechtmann, 1986; Hughes, 1976;
Krantz, 1978; Philips, 1990, citados por Mineiro y
Moraes, 2002].
Dentro de la familia Acaridae, el gnero Cosmoglyphus,
especie tipo Tyroglyphus krameri Berlesse 1881, fue es-
tablecido por Oudemans en 1932. Zakhvatkin (1937) lo
ubic como subgnero de Eberhardia Oud. 1924. Poste-
riormente, en 1941 el mismo autor incluy a ambos
gneros en Acotyledon Oud. 1903; sin embargo, los
hipopus y adultos de Cosmoglyphus y Acotyledon han
sido difciles de separar genricamente de Caloglyphus,
por lo que a partir de la revisin realizada por Hughes
en 1941 se decide sinonimizarlos en este ltimo gnero.
Este autor no consider que la presencia de la seda
supracoxal agrandada y pectinada, y la tenencia de una
sola seda expandida distalmente en el tarso I del ma-
cho, eran caractersticas suficientes para separar a es-
tos gneros [Hughes, 1976].
Recientemente OConnor (1998), en su revisin de la
familia, ubica como gneros diferentes a Acotyledon,
Caloglyphus (= Sancassania Oudemans, 1916) y Cosmo-
glyphus (Eberhardia Oud., 1924; Murodania Kugoh,
1957; Stunkardacarus [Fain, 1979].
Hasta el momento en Cuba solo se han informado los
siguientes gneros de caros pertenecientes a la familia
Acaridae: Acarus, Aleuroglyphus, Caloglyphus, Lardo-
glyphus, Michaelopus, Rhizoglyphus, Suidasia,
Tyroborus y Tyrophagus [Cuervo et al., 1994], Acotyledon
y Shwiebea Surez (2004). El presente trabajo se reali-
z con el objetivo de informar la presencia de una nue-
va especie de acrido en el pas.
MATERIALES Y MTODOS
Los individuos analizados se colectaron sobre semi-
llas de jamboln (Syzygium cumini Skeels.) en noviem-
bre del 2004, provenientes de la Empresa Municipal
Agropecuaria (EMA) Jibacoa, en Villa Clara, y en
cabecilla de arroz para la produccin de Bauberia
bassiana (agosto del 2005) procedente del Centro de
Reproduccin de Entomfagos y Entomopatgenos
(CREE) de Hoyo de Manicaragua, en la misma pro-
vincia.
Los ejemplares hembras y machos colectados se deco-
loraron en cido lctico y se colocaron 14 hembras, seis
machos y cuatro hipopus en medio Hoyer para su pos-
terior observacin mediante el microscopio biolgico y
con el apoyo de las claves de Hughes (1976) y OConnor
(1998).
Para la determinacin y descripcin de la especie se
utiliz la nomenclatura de Hughes (1976). Se realiza-
ron dibujos del escudo prodorsal, la seda supracoxal y
las tibias y tarsos de las patas I y II de las hembras
con ocular de dibujo Zeichenov 8x y microscopio ptico
Olympus con objetivos 40 y 100x.
Martnez y otros
44/fitosanidad
Segn los caracteres morfolgicos indicados en la clave
para la determinacin de los caros domsticos y de
productos almacenados elaborada por Hughes (1976),
y la descripcin original del material biolgico colecta-
do sobre semillas de jamboln y cabecilla de arroz para
la produccin de B. bassiana, los ejemplares correspon-
dieron a Cosmoglyphus oudemansi [Zakhvatkin, 1937].
Diagnstico de la especie
El macho presenta escudo prodorsal con margen pos-
terior recto; seda vertical externa (Ve) en el borde, a la
mitad del escudo; seda escapular externa (sce) de dos a
tres veces ms larga que la interna, y sus bases
equidistantes entre s; seda supracoxal curva y aplana-
da con prolongaciones laterales; las sedas dorsales va-
ran en longitud y apariencia; las sedas d1, d2, la, hi, hv
son cortas y lisas; las d3, d4, lp, sae y sai son largas; sae
es al menos tres veces ms larga que di; en la pata I y
II; el solenidio 1 es ligeramente engrosado en la pun-
ta; la porcin distal de la seda f es expandida en una
lmina transparente. En el tarso IV las ventosas se
encuentran equidistantes de la base y del pice del seg-
mento.
La hembra con idiosoma es muy similar al de los ma-
chos con sedas cortas en proporcin al largo del cuerpo;
seda d3 y d4 terminan en punta; ventralmente poseen
seis pares de sedas anales pequeas, y ausencia de se-
das expandidas apicalmente en los tarsos I y II.
El hipopus con idiosoma circular de coloracin pardo
rojiza, superficie dorsal arqueada con borde fino y trans-
parente se extiende en toda su longitud; sedas del
idiosoma finas, escudos externales y ventrales son cla-
ramente definidos y separados unos de otros; la placa
coxal III est abierta y presenta un par de sedas en el
extremo anterior del apodema IV. El borde posterior
de las placas coxales IV es delimitado por una lnea
convexa; placa de ventosas del margen posterior es nor-
mal; hay presencia de un par de ventosas en la placa
coxal I y III; solenidio 1 de la pata I est desarrolla-
do; tibia y gena de la pata I se halla con espina grande
y aplanada en su lado externo.
Caracteres del material colectado en Cuba
En los ejemplares colectados se confirm que la seda
vertical externa (Ve) se encuentra localizada aproxima-
damente en la mitad del escudo prodorsal, entre las
verticales internas (Vi) y las escapulares (sc); la longi-
tud de las sedas ve es mayor de 10 m (16,78 m); el
escudo prodorsal est bien desarrollado (Fig. 1A); la
seda supracoxal se halla hinchada basalmente y arma-
da de espinas (Fig. 1B); los tarsos I y II con seda ba
presente, filiforme, no est asociada con el solenidio 1;
en la hembra la seda f no es folicea; las tibias I y II
tienen un par de sedas ventrales (Fig. 2).
Figura 1. Cosmoglyphus oudemansi [Zachvatkin, 1937]. Hembra, material cubano. A: Escudo
prodorsal mostrando setas verticales internas (Vi) y externas (Ve). B: Detalle de la seda
supracoxal.
fitosanidad/45
Cosmoglyphus oudemansi (Zachvatkin, 1937)...
Figura 2. Cosmoglyphus oudemansi [Zachvatkin, 1937]. Hembra, material cubano. Vis-
ta dorsal de las tibias y tarsos de las patas I y II.
La especie se conoce originalmente de nidos de hormi-
gas Plagiolepis longipes (Jerdon), y en nueces hmedas
del Brasil, que se almacenaron por largo tiempo. Tam-
bin se ha encontrado en plantas en descomposicin y
bajo pacas de heno. Est distribuida en Inglaterra, Ita-
lia, Rusia, Australia, Java y la India [Hughes, 1976].
Recientemente Stejskal (2003) la seala como una de
las plagas ms abundantes de productos almacenados
en la Repblica Checa.
El ataque de este caro ocasion deterioros en la pro-
duccin de B. bassiana del CREE de Manicaragua, Vi-
lla Clara, Cuba. Lo mismo ocurri con semillas de
jamboln almacenadas que fueron completamente car-
comidas y quedaron inservibles para la siembra. Esta
planta se ha diseminado con el objetivo fundamental
de reforestar la provincia, principalmente las riberas
del ro Jibacoa. Est incluida en la Lista oficial de
variedades comerciales de la Repblica de Cuba
[Minagri, 2005].
De acuerdo con la intensidad del ataque de C. oudemansi,
y por ser un nuevo registro para el pas, se recomienda
trabajar para determinar su posible distribucin en
Cuba, as como realizar bsquedas en diferentes
hospedantes.
REFERENCIAS
Cuervo, N.; J. L. Gonzlez; M. Reyes; H. Martnez: Lista alfabtica de
las especies de caros de Cuba (Arachnida: Acari), Instituto de
Ecologa y Sistemtica y Laboratorio Central de Cuarentena, La Ha-
bana, 1994.
Fain, A.: Lista de nouveaux taxa dcrits par le Dr Alex Fain, http://
www.kbi ni rsnb.be/srbe/al ex_fai n/l i ste_des_nouveaux_taxa_
decrits_par_le_dr_alex_fain.pdf, 2002.
Hughes, A. M.: The Mites of Stored Food and Houses, Techn. Bull. 9,
Ministry of Agric. Fish. & Food, Londres, 1976.
Mineiro, J. L. de C.; G. J. de Moraes: Actinedida e Acaridida (Arachnida:
Acari) Edficos de Piracicaba, Estado de So Paulo, Neotrop.
Entomol., vol. 31, no.1, Londrina, jan./mar. 2002.
Ministerio de la Agricultura: Lista oficial de variedades comerciales,
Registro de Variedades Comerciales, subdireccin de Certificacin
de Semillas, Repblica de Cuba, 2005.
OConnor, B. M.: Key to North American Genera of the Family Acaridae
1998, http://insects.ummz.lsa.umich.edu/PEET/nagenera.html
Stejskal, V.; J. Hubert; Z. Kuerov; Z. Munzbergov; J. Luk;
E. rkov: The Influence of the Type of Storage on Pest Infestation
of Stored Grain in the Czech Republic, Plant Soil Environ., 49(2):55-
62, 2003
Surez, Aurora: Catlogo de caros de la provincia de Guantnamo,
Fitosanidad 8(1):23-31, 2004.
46/fitosanidad
fitosanidad/47
INFLUENCIA DE LA PREPARACIN DEL EXTRACTO DE SUELO
EN EL CRECIMIENTO Y LA PRODUCCIN DE POLIHIDROXIBUTIRATO
POR RHIZOBIUM TROPICI CEPA 3
Yuliet Franco Cardoza,
1
Gretel Gmez Jimnez
2
y Jorge Martnez Silva
3
1
a
B y 5.
a
F, Playa, Ciudad
de La Habana, CP 11600
2
Instituto Nacional de Ciencias Agrcolas. Carretera a Tapaste Km 3, San Jos de Las Lajas,
La Habana, Gaveta Postal 1
3
Centro de Estudio de Protenas. Facultad de Biologa, Universidad de La Habana, Calle 25 no. 455,
Ciudad de La Habana, CP 10400
Las bacterias diaztrofas del gnero Rhizobium son
capaces de producir poli--hidroxibutirato (PHB), un
polmero biodegradable constituido por monmeros de
-hidroxibutirato. Entre los usos ms frecuentes de este
biopolmero est la fabricacin de envases para dife-
rentes productos de limpieza y farmacuticos. Tambin
pueden emplearse en el rea mdico-farmacutica para
la fabricacin de prtesis, hilos de sutura y cpsulas
que liberan los medicamentos lentamente al torrente
sanguneo, ya que son biocompatibles y fcilmente ab-
sorbidos por el organismo [Bohmert et al., 2002].
El uso del PHB puede contribuir a la disminucin de la
contaminacin ambiental provocada, entre otras cau-
sas, por el crecimiento industrial, la urbanizacin y las
malas prcticas agrcolas, ya que al ser biodegradable
se garantiza su desaparicin del ambiente en un tiem-
po mucho menor que el de los plsticos basados en el
petrleo, y adems no se emplean tecnologas contami-
nantes en su produccin [Franco, 2003].
El medio S [Lasala, 2000], utilizado para el crecimien-
to y para la produccin de PHB por Rhizobium tropici
y otras rizobiaceas, tiene entre sus componentes el ex-
tracto de suelo [Atlas y Park, 1993]. La elaboracin de
este extracto resulta trabajosa, pues primero se debe
esterilizar durante una hora, luego filtrar al vaco y
por ltimo centrifugar durante 20 min. Dadas las difi-
cultades de este proceso, tanto a escala de laboratorio
como industrial, en estudios anteriores se trat de sus-
tituir este componente por una solucin salina de
microelementos y vitaminas, pero la cepa 3 de
Rhizobium tropici perteneciente al cepario del Depar-
tamento de Microbiologa del Centro de Estudio de
Protenas de la Facultad de Biologa no creci bajo esas
condiciones [Careaga, 1999].
Como solucin alternativa a esta dificultad se realiz
este estudio con el objetivo de determinar la influencia
de la forma de preparacin del extracto de suelo sobre
el crecimiento y la produccin de PHB por R. tropici
cepa 3.
Se utilizaron erlermeyers de 100 mL con 20 mL de
medio S lquido preparado con extracto de suelo es-
terilizado y sin esterilizar. Cada erlenmeyer se ino-
cul con 2 mL (10% del volumen final) de un cultivo
preinculo de 24 h preparado a partir de la bacteria
crecida en medio S slido. El cultivo se mantuvo en
agitacin en zaranda orbital a 70 rpm y 30 2C
durante 24 h. Posteriormente se monitore el creci-
miento y la produccin de PHB mediante la medi-
cin en espectrofotmetro de la densidad ptica a
650 nm para el primero y a 214 nm para el segundo,
segn el procedimiento descrito por Careaga (1999).
Se utilizaron seis rplicas para cada tratamiento. A
los resultados se les realiz un anlisis de varianza
de clasificacin simple (ANOVA) con el programa
Statistica 4.0.
No hubo diferencias significativas entre los tratamien-
tos en el crecimiento bacteriano ni en la produccin del
polmero (Tabla I). Estos resultados indican que se
puede emplear el extracto de suelo sin tener que some-
terlo a tratamiento trmico durante 1 h, lo cual resulta
beneficioso, pues implica menor gasto energtico del
proceso y ms facilidad para su elaboracin a mayor
escala.
Franco y otros
48/fitosanidad
Tabla 1. Densidad ptica para el crecimiento (650 nm)
y la produccin de PHB (214 nm) en los extractos estudiados
PHB
Extracto
sin esterilizar
Extracto
esterilizado
Crecimiento (X ES) 3,30 0,05 a 3,43 0,08 a
Produccin de PHB (X ES) 1,16 0,03 b 1,28 0,10 b

Letras iguales indican que no hay diferencias significativas para p 0,05.

REFERENCIAS
Atlas, R. M.; L. C. Parks: Handbook of Microbiological Media, CRC
Press, Boca Ratn, Florida, 1993.
Bohmert, K.; I. Balbo; A. Steinbchel; G. Tischendorf; L. Willmitzer:
Constitutive Expression of the Ketothiolase Gene in Transgenic
Plants. A Major Obstacle for Obtaining Polyhydroxybutyrate-Producing
Plants, Plant Physiol. 128:1282-1290, 2002.
Careaga, Z.: Produccin de poli--hidroxibutirato en un medio simple
por una cepa de Rhizobium tropici, Trabajo de Diploma, Facultad
de Biologa, Universidad de La Habana, 1999.
Franco, Yuliet: Optimizacin de la agitacin-aeracin en fermentador
de 7L para la produccin de polihidroxibutirato. Escalado del proce-
so a 75 L, Trabajo de Diploma. Facultad de Biologa, Universidad de
La Habana, 2003.
Lasala, Ftima: Mesorhizobium plurifarium 4033, una nueva especie
productora de polihidroxialcanoatos (PHAs); estudio de la sntesis a
escala de zaranda, Trabajo de Diploma, Facultad de Biologa, Uni-
versidad de La Habana, 2000.
fitosanidad/49
EDUARDO SOTOLONGO DUBROC Y EL ARTE
DE LA FOTOGRAFA AL SERVICIO DE LA SANIDAD VEGETAL
Instituto de Investigaciones Fundamentales en Agricultura Tropical Alejandro de Humboldt. Calle 1.
a
esq.
a 2, Santiago de las Vegas, Ciudad de La Habana
Mencin en el concurso Historia de la Sanidad Vegetal (2004)
C
o
m
u
n
i
c
a
c
i
n
INTRODUCCIN
El presente trabajo es un sencillo y sentido homenaje
a los hombres y mujeres que trabajaron en la otrora
Estacin Experimental Agronmica (EEA) de Santia-
go de las Vegas, actualmente Instituto de Investigacio-
nes Fundamentales en Agricultura Tropical (Inifat) a
los cientficos que calladamente hicieron grandes apor-
tes al desarrollo agrcola del pas y especialmente a
Eduardo Sotolongo Dubroc, el primer fotgrafo ofi-
cial de la estacin, al que se deben las fotografas ms
antiguas que hoy se conservan.
Como dato curioso y a la vez muy significativo es deber
sealar que el trabajo de fotografa en los cien aos de
existencia del instituto ha estado centralizado fundamen-
talmente en tres fotgrafos: Eduardo Sotolongo Dubroc,
Eligio Torres Illeras y Lincoln Gonzlez Hernndez.
Sotolongo Dubroc trabaj durante cuarenta y cinco
aos en la EEA, al igual que Eligio Torres. Lincoln
Gonzlez trabaja ya desde hace treinta y cinco aos.
Salta a la vista la sistematicidad del trabajo de foto-
grafa y la continuidad que ha tenido a travs de estos
tres hombres, de ah que los objetivos de este trabajo
estn encaminados a:
Resaltar la figura de Eduardo Sotolongo Dubroc,
primer fotgrafo de la EEA en el contexto del cente-
nario de la institucin (abril, 2004).
Destacar su trabajo durante cuarenta y cinco aos
vinculado a las ciencias agrcolas en general y con la
sanidad vegetal en particular.
Analizar la importancia de su obra fotogrfica
como una coleccin de valor artstico, histrico y
cientfico.
La tesis defendida es que lo legado con su trabajo, des-
de el punto de vista cientfico, fue decisivo para el auge
de la agricultura en el pas, que como documento hist-
rico muestra las transformaciones ocurridas en el ins-
tituto durante sus primeros cincuenta aos. Artstica-
mente utiliz una tcnica de finales del sigo XIX y
principios del XX hoy en desuso, que es la fotogra-
fa en soporte de vidrio, a la que imprimi un sello
particular.
Como dijera Pegudo Gallardo en 1947, en la vida con-
tempornea la fotografa representa un papel de los ms
importantes []. No hay apenas una forma de activi-
dad humana que no la emplee de una manera o de otra.
Se ha hecho indispensable tanto en la ciencia como en
la industria. La fotografa constituye ya una parte de
la vida diaria. Se ha incorporado a la vida social y se-
gn sus aplicaciones tiene cada vez una funcin social
ms definida.
Sobre Eduardo Sotolongo Dubroc
Al ingresar en la EEA el 19 de junio de 1909, Eduardo
Sotolongo Dubroc se convirti en el primer fotgrafo
oficial de la estacin. Los trabajos de fotografa en la
Estacin Central Agronmica (1904-1909) los realiz
C. F. Pooter a partir de 1906, quien se desempeaba como
primer ayudante en el Departamento de Botnica.
Sotolongo tena entonces cuarenta y un aos de edad y
veinte de experiencia profesional como fotgrafo en La Ha-
bana. Se reconoca como natural de Jovellanos, Matan-
zas, y nacido en 1868, aunque esta fecha es un dato que
no se ha podido corroborar, pues no aparece registrado
Prez Moreno
50/fitosanidad
en ninguna de las iglesias de Jovellanos, Perico o Ma-
tanzas. Hijo de Gregorio y Manuela, segn consta en
su expediente laboral residi en Jess del Monte 163
(altos), posteriormente en San Francisco 55 (altos) y
finalmente en Meireles 9, Calabazar, donde vivi hasta
su muerte.
En 1909 el cargo de fotgrafo de la EEA estaba subor-
dinado a la direccin con un salario de 1200 pesos anua-
les. En el mismo ao se reorganizaron los empleos y el
presupuesto, y queda anexo al Departamento de Vul-
garizacin Agrcola (hoy sera como uno de Divulga-
cin).
En aos sucesivos los empleos y el presupuesto se re-
ajustaron segn la situacin econmica del pas. En 1931
lleg a percibir un salario anual de 691 pesos. Segn el
testimonio de los que lo conocieron, era una persona
afable, dispuesta a servir en lo que se necesitara. A la
vez exiga respeto hacia su persona y su profesin.
Fue un hombre que vio quebrantarse su salud poco a
poco durante su vida laboral en la estacin. Present y
solicit 56 certificados mdicos y licencias retribuidas
que siempre le fueron concedidas por la estima y pres-
tigio de que gozaba, tanto en la EEA como en la Secre-
tara de Agricultura, Comercio y Trabajo. Estuvo aque-
jado de frecuentes estados gripales, alergias en las
manos, problemas en una pierna, iredectoma y cata-
rata en el ojo derecho. No obstante en algunas ocasio-
nes, aunque estuviera de reposo, acept hacer trabajos
que con urgencia se requeran en la estacin. Estuvo
casado con Rosala Santana y Romero, y tuvieron dos
hijos: Salvador y Mara Teresa.
En noviembre de 1934 present su primera solicitud de
jubilacin; en 1939 una segunda que solo se hizo efecti-
va en diciembre de 1954 a los ochenta y seis aos de
edad, veinte aos despus de haberla pedido por pri-
mera vez. Adquiri una bveda a su nombre en 1944 en
el Cementerio de Coln (calle C e/ 12 y 14), y all repo-
san sus restos desde el 6 de junio de 1957 en que falleci
vctima de un infarto cardaco.
Labor realizada en la rama agrcola
De los veinte aos de trabajo como fotgrafo en la ciu-
dad de La Habana no existe constancia, salvo su pro-
pia declaracin jurada al ingresar en la EEA. Su traba-
jo vinculado a la rama agrcola durante cuarenta y cinco
aos es muy grande, como importante y diversa la co-
leccin que ha legado.
Del trabajo interno que como fotgrafo desarroll
Sotolongo para los distintos departamentos quedan los
diversos legajos y expedientes del archivo del Inifat,
donde se renda cuenta mensualmente del trabajo rea-
lizado y entregado a las distintas reas, y una intere-
sante y variada coleccin de fotografas en soporte de
vidrio, o negativo en vidrio, como tambin se le conoce.
Como fotgrafo particip en el apoyo al resto de los
departamentos en la Exposicin Nacional de Agricul-
tura, Arte y Labores de la Mujer el 23 de noviembre de
1910.
Por orden de la Secretara de Agricultura, Comercio y
Trabajo, en agosto de 1913 viaj por todo el pas para
fotografiar centrales azucareros y hacer un libro con
datos tcnicos y estadsticos que destacaran el pro-
greso que haba alcanzado en Cuba la industria azu-
carera. Este trabajo lo realiz con el ingeniero Ramn
Jimnez Alfonso, jefe de la Regin Occidental de Mon-
tes y Minas. De esta coleccin de centrales azucareros
se tienen en el archivo del Inifat 180 en soporte de
vidrio. Tambin entreg fotografas del cultivo del ta-
baco, trabajo solicitado por el inspector general de
Agricultura.
Por la misma secretara fue designado en agosto de 1916
para viajar a las antiguas provincias de Camagey y
Oriente, y tomar datos estadsticos y grficos relacio-
nados con el estado de la cra caballar.
Tambin trabaj en el municipio de Artemisa en 1915
y 1919; en la Quinta de los Molinos, en La Habana, en
1916 y 1918 fotografiando sementales equinos; en el
municipio de Baha Honda el 31 de julio 1917. Con el
entonces ayudante patlogo S. C. Brunner tom fotos
sobre enfermedades de los ctricos. El 30 de mayo de
1917 el director J. T. Crawley emiti una carta de felici-
tacin por su trabajo.
En 1918 tom fotografas en el municipio de San Anto-
nio de los Baos con el doctor Alejandro E. Barthe so-
bre la instalacin de maquinarias y de cultivos en la
finca El Palmar, de la Compaa Cubana Agrcola In-
dustrial, y tambin en el de Bacuranao a cultivos de
higuereta. Fotografi adems cultivos en los munici-
pios habaneros de Ceiba del Agua, Wajay y Caimito.
Particip en una comisin a Sagua la Grande con la
Secretara de Agricultura, Comercio y Trabajo el 23 de
mayo de 1919 para fotografiar la Estacin de Zootec-
nia y algunas cras de sementales de esa secretara en
aquella zona.
fitosanidad/51
Eduardo Sotolongo Dubroc y el arte...
En julio de 1920 prest servicios en la Seccin de Vete-
rinaria y Zootecnia en La Habana, y simultane esta
actividad con su trabajo en la EEA. En 1921 trabaj
en el central Soledad, en Cienfuegos, y en 1929 colabor
con la revista agrcola El Campo, de La Habana. Parti-
cip en los trabajos para realizar las memorias presi-
dencial y de la estacin en 1930. En ese mismo ao en-
vi fotos sobre insectos al doctor G. N. Woleott, autor
de varias obras de entomologa, quien tena en prepa-
racin un libro de texto sobre la entomologa agrcola
de las Indias Occidentales. Tambin colabor con el
envo de fotos sobre asuntos agrcolas a la Escuela Nor-
mal para Maestros de La Habana y al profesor Myron
A. Cobb de la Escuela Normal Central del Estado, para
que fueran utilizadas en vistas fijas de proyeccin para
conferencias sobre agricultura mundial.
En 1931 la Comisin Nacional de Propaganda y Defen-
sa del Tabaco Habano le encarg fotografas de campos
de tabaco atacados de mosaicos, y el secretario de la
Alianza Tabacalera Jos Rivero Muiz tambin busc
su aporte para ilustrar el libro El tabaco y su historia.
Colabor en 1932 con la Revista de Agricultura y Zoo-
tecnia, que solicit fotos de distintas reas internas de
la EEA. En 1933 colabor con la revista Bohemia, e
ilustr un Tratado de geografa militar de Cuba, esto l-
timo a solicitud de L. Hernndez Sabio, comandante
del Estado Mayor de la Seccin de Ingeniera.
El cnsul general de Austria en La Habana se interes
en 1934 por fotos sobre frutas y rboles tropicales para
hacer un libro tcnico relacionado con el trfico mun-
dial de frutas y vegetales, y recibi una amplia colabo-
racin de este fotgrafo.
Para ilustrar la revista La Chacra en 1937, la Casa
Editora Atlntida de Argentina gestion fotos del
movimiento agrcola cubano y de la EEA. En 1938
Sotolongo acompaa al ingeniero Rodolfo Arango, jefe
del Servicio de Publicidad y Divulgacin para realizar
un estudio sobre la explotacin del henequn en Cuba
y las posibilidades de extender su cultivo, para lo que
se traslad a centros henequeneros de Mariel, Matan-
zas y Crdenas, y a otras zonas cuyas tierras sirvieran
para extender ese cultivo.
En mayo de 1939 se le comision para obtener fotografas
de la pia en diversos aspectos, solicitadas por la Unin
Panamericana, Washington DC para ilustrar un extenso
trabajo en preparacin sobre el cultivo y produccin de la
pia en los pases donde se cosechaba esta fruta.
En 1945 tom fotografas de varias escuelas, entre ellas
la Escuela Normal Rural Jos Mart, en General Peraza,
La Habana, donde los nios trabajaban en el huerto
escolar. De noviembre de 1946 a febrero de 1947 parti-
cip con el Departamento de Fitopatologa y Entomo-
loga, y el doctor S. C. Brunner en la investigacin so-
bre el valor relativo del caldo bordols y dithane (D-14)
para combatir el tizn tardo de la papa.
Eduardo Sotolongo Dubroc y su local de trabajo (1954).
Prez Moreno
52/fitosanidad
Publicaciones. Vinculacin con la sanidad vegetal
Las Revista de Agricultura, Comercio y Trabajo (1918-
1933), y la Revista de Agricultura del Ministerio de la
Agricultura (1934-1954) recogieron la mayor parte de
la obra de Sotolongo que se ha publicado, siempre ilus-
trando los ms diversos artculos que en ellas apare-
cen, fundamentalmente los vinculados a la sanidad ve-
getal, encaminados a instruir al campesinado en todo
lo concerniente a plagas y enfermedades, controles bio-
lgicos y otros modos y medios para combatirlos.
La magnitud y la trascendencia de su obra se apoyan
en el resultado econmico, no solo para Cuba, sino para
otros pases tropicales, que con su labor de promocin
y divulgacin trasciende an en nuestros das. En este
trabajo se relacionan 98 artculos con ilustraciones de
Sotolongo que ejemplifican estas ideas.
No solamente en publicaciones seriadas de la poca,
como las ya citadas, se recoge la obra de Sotolongo.
Tambin tiene trabajos en publicaciones no seriadas
vinculados a la sanidad vegetal, pues trabaj en esa
comisin en varias ocasiones, como en febrero de 1930
con Rodolfo Arango, jefe de Cuarentena de Sanidad
Vegetal. Sobre esta colaboracin existe una nota publi-
cada en la Revista de Agricultura, Comercio y Trabajo de
octubre de 1931 reconociendo el trabajo de Eduardo
Sotolongo:
Nota: Se est distribuyendo una nueva edicin de la car-
tilla de sanidad vegetal.
La Secretara de Agricultura acaba de publicar una nue-
va edicin la tercera de la Cartilla de sanidad vegetal,
que ha alcanzado mucha popularidad en nuestra pobla-
cin agricultora, especialmente por la forma concisa, cla-
ra y muy sencilla en que est redactada, y que la pone al
alcance de todas las inteligencias.
En esta nueva edicin su autor, el seor Rodolfo Arango,
jefe del Servicio de Cuarentena, ha valorado an ms la
cartilla aumentando considerablemente sus pginas e ilus-
trndolas con magnficas fotografas que se deben a la ar-
tstica cooperacin del seor Eduardo Sotolongo, jefe del
Departamento Fotogrfico de la Estacin Experimental.
La distribucin de esta cartilla se est haciendo en la
seccin de Sanidad Vegetal, y las personas interesadas
en conocer las plagas y enfermedades de los cultivos y
medios de combatirlos deben solicitar oportunamente su
ejemplar, que es gratis.
Sotolongo envi a la seccin de Sanidad Vegetal sus tra-
bajos fotogrficos sobre los parsitos enemigos natu-
rales de la mosca prieta en el insectario de la EEA y
para el Anuario de este departamento en 1930.
En los fondos del Archivo del Inifat las fotografas en
soporte de vidrio vinculadas a la sanidad vegetal as-
cienden aproximadamente a mil, y muestran insectos,
hongos, plagas de diversos tipos y las afectaciones que
ocasionan a los cultivos, as como el modo de combatir-
las y los materiales y medios con que contaban para
ello. Tambin orienta cmo embarcar los productos para
no afectar su calidad.
Importancia de su obra artstica, histrica y cientfica
Es indiscutible que la fotografa como documento origi-
nal habla por s sola, tiene un lenguaje extraordinaria-
mente expresivo y es portadora de una considerable car-
ga de informacin. A travs de ella queda el testimonio
grfico y palpable de los resultados en los cien aos de
existencia de la estacin. Su valor artstico est dado
por lo que su autor, en este caso el fotgrafo, le imprime
de s, su sello personal que permite reconocer su autora,
aunque no siempre estn firmadas las placas.
Desde el punto de vista cientfico la obra de Sotolongo
tiene plena vigencia, por lo que puede ilustrar a las pre-
sentes y futuras generaciones de cientficos, y utilidad
prctica, pues de las placas de vidrio se pueden obtener
fotografas en soporte de papel.
La fotografa es un documento histrico por toda la
informacin que puede aportar a quien la estudie, ya
sea desde la propia evolucin de la tcnica fotogrfica,
los materiales o soportes utilizados, los fotgrafos que
las realizaron, as como por las ideas que comunican y
por los temas o asuntos fotografiados. De todo lo ante-
rior se deriva que la fotografa puede ser de inters no
solo para los profesionales de la agricultura, sino para
los de cualquier rea o rama del saber humano.
Anlisis de la coleccin
En el Archivo Histrico se conservan en condiciones
desfavorables un total de 6330 fotografas en soporte
de vidrio, que como ya se ha dicho, es una tcnica uti-
lizada a finales del siglo XIX y principios del XX, con
la emulsin de colodin y el soporte de cristal.
Quedaron para la historia diversas vistas de la EEA,
la decoracin de las oficinas, los cambios en la portada
y las cercas perimetrales, la construccin de la carrete-
ra de acceso y la siembra de las palmas en esa va, la
evolucin de los jardines, as como la fotografa de los
directores de la estacin y visitas de personalidades
importantes de todas las pocas.
fitosanidad/53
Para la ciencia quedaron plasmados insectos y plagas
que afectan los cultivos, frutales, hortalizas, races y
tubrculos, tabaco, pastos y forrajes, implementos agr-
colas, plantas medicinales, ornamentales, industriales
y maderables, caa, ctricos, vegetales, avicultura, ani-
males, etc.
De la coleccin en soporte de vidrio se conoce que de las
6330 placas que hoy existen hay alrededor de seiscien-
tas que estn en mal estado, ya sea por partidura del
vidrio o por levantamiento de la emulsin. Se conside-
ra que esas son de valor II, en atencin a lo poco comn
que resulta ese tipo de fotografa y a la tcnica utiliza-
da en su realizacin. Las restantes 5730 placas conser-
vadas en buen estado son consideradas de valor I, por
la informacin que aportan y por lo cerrada que resul-
ta esta coleccin, pues es prcticamente imposible
incrementarla.
Se debe sealar que las fotografas tomadas por Eduar-
do Sotolongo Dubroc por lo general estn firmadas,
aunque no siempre es as ni utiliz siempre la misma
firma. En 1930, cuando era director el ingeniero F. B.
Cruz, se le orient a Sotolongo llevar un control de las
fotografas que haca, y se le orden poner en un regis-
tro el nmero de plancha, motivo de la fotografa, da,
mes y ao que se imprimi y por orden de quin. En la
plancha pondra sus iniciales, el ao y el nmero, a fin
de poderla identificar y de que saliera grabado en cada
copia: ES-30, No. , es decir, Eduardo Sotolongo 1930 y
el nmero que le corresponde a la placa.
A pesar de la diversidad de firmas, o de no estar firma-
das las fotos, o de no estar enumeradas todas las placas,
conjugar la informacin brindada por su expediente per-
sonal y por los informes mensuales de su departamento
con la informacin que brindan las fotografas por s
mismas permite confirmar su autora. Es objetivo del
Inifat conservar esta coleccin para el uso y disfrute de
las generaciones venideras, como muestra del quehacer
pasado, presente y futuro de este instituto.
CONCLUSIONES
La figura de Eduardo Sotolongo Dubroc y su obra
fotogrfica, que ha trascendido hasta el presente re-
sistiendo el paso de una centuria, es la mejor expre-
sin del arte al servicio del desarrollo de la ciencia.
Con su aporte fue posible divulgar y hacer llegar de
forma sencilla, amena y grfica al campesino cubano
los logros y los retos que se deban vencer en el largo
y difcil camino hacia un desarrollo agrcola.
Su trabajo didctico fue vital para divulgar entre
los agricultores las plagas y enfermedades que apa-
recan en los campos del pas, y lo ms importante:
cmo combatirlas, por eso es destacable de manera
especial su aporte a la sanidad vegetal.
Su obra de valor artstico, histrico y cientfico es
expresin y testimonio de la creacin humana, de la
evolucin de la naturaleza, y tiene especial relevan-
cia con la historia, la ciencia y la cultura en general.
Los fotgrafos que han dejado sus huellas a travs de
estos cien aos en la EEA legaron a las siguientes gene-
raciones un inmenso caudal de imgenes histricas y
cientficas que formarn para siempre la memoria viva
del desarrollo agrcola de Cuba.
Fotografas tomadas por Sotolongo y publicadas en revistas, cartillas
y otros documentos relacionados con la sanidad vegetal
Ambulancia de Sanidad Vegetal para el trabajo de divulgacin
sobre plagas y medios de combatirlas.
Bibijagua (Atla insulares Guer.) (foto muy ampliada)
Prez Moreno
54/fitosanidad
fido o pulgn verde del maz (Aphis maidis),
insecto transmisor del mosaico (vista ampliada).
El pasador del tabaco (larva o gusano, pupa y
adulto) (vista ampliada).
A la izquierda, la Guagua verde. A la
derecha, la Guagua hemisferica.
Abajo, el hongo del suelo (Fulvifomes cedrelae).
Arriba, secciones longitudinales y transversales
de madera del cedro afectadas por el hongo.
Hojas de caf atacadas por el tizn de hilo
debido al hongo Pellicularia koleroga (ta-
mao natural).
Seccin longitudinal de una pia en estado verde
mostrando la pudricin del hongo Thielaviopsis.
fitosanidad/55
Vainas y semillas de habas de lima mostrando el dao causado
por las larvas u orugas de la Maruca testulalis. La larva fuera de
la vaina rara vez se encuentra en esa posicin, saliendo general-
mente solo cuando se va a transformar en crislida.
Mariposas. Estado adulto de la Maruca mostrn-
dose en las dos posiciones caractersticas (vista
aumentada de ejemplares vivas).
Aparato funcionando con un pitn can muy apro-
piado para fumigar rboles de considerable altura.
Tomate enfermo de culillo que no puede ni debe ser
exportado.
Publicaciones que incluyen fotografas tomadas
por Sotolongo en trabajos relacionados con la sanidad
vegetal
Revista de Agricultura, Comercio y Trabajo
Cruz, Francisco B.: El cultivo del tabaco en Cuba, abril de 1918, pp.
172-183.
Ballou, C. H.: Los mejores mangos para Cuba, abril de 1918, pp. 187-191.
: Para mejorar el ganado en Cuba, junio de 1918, pp. 284-289.
Castro Ramrez, Rafael: El caballo en la agricultura, junio de 1918,
pp. 290 y 291.
Calvino, Mario: Cultivo de la higuereta, junio de 1918, pp. 307 y 308.
: La hierba elefante (la zinya munga), julio de 1918, pp. 340 y 341.
: El Congreso Agrcola en Santiago de las Vegas, agosto de
1918, pp. 396-405.
: El abono verde y la rotacin de los cultivos, octubre de 1918,
pp. 544-550.
Gonzlez Jstiz, Fernando: Cultivo del cacao, noviembre de 1918.
Barthe, A. E.: Cultivo industrial de la higuereta, diciembre de 1918,
pp. 620-629.
Barreto, B. T.: Empleo de insecticidas. Debe prestarse mayor aten-
cin al uso de insecticidas, enero-febrero de 1919, pp. 30-32.
Bruner, S. C.: La enfermedad del mosaico o de rayas amarillas de la
caa de azcar en Cuba, septiembre de 1919, pp. 437-441.
: Notas sobre la enfermedad del mosaico de la caa de azcar,
noviembre de 1919, pp. 532 y 533.
Arango, Rodolfo: La palma real, su belleza ornamental y utilidad prc-
tica, noviembre de 1919, pp. 557-559.
Bruner, S. C.: La mosca del mango (nota entomolgica), abril de
1922, pp. 11 y 12.
Barreto, B. T.: El bao de agua caliente de las estacas de caa es muy
til bajo todo concepto, junio de 1923, pp. 20-23.
Calvino, Mario: Un sorgo de grano muy interesante para Cuba. El
Dwarf Hegari, junio de 1923, p. 24.
Agete, Fernando: Cmo obtener una buena cosecha de boniatos
mediante la seleccin, junio de 1923, pp. 40-43.
Calvino, Mario: Doce puntos relacionados con el mosaico de la caa
y el modo de combatirlo, 1924, pp. 6 y 7.
Prez Moreno
56/fitosanidad
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Agete, Fernando: El cultivo del mango en Cuba, enero de 1927, pp.
3-13.
Bruner, S. C.: El tratamiento del cianuro de calcio Cyanogas contra la
bibijagua, enero de 1927, pp. 39-43.
Agete, Fernando: Cultivo del aguacate en Cuba, marzo de 1927, pp.
3-16.
: Cultivo del rosal, abril, mayo, junio de 1927, pp. 24-37.
:Incubadoras: Su manejo, agosto de 1927, pp. 15-24.
: El cartn cobertor en el cultivo de la pia, septiembre de 1927,
pp. 4-13.
: Cultivo de la fresa en Cuba, diciembre de 1927, pp. 4-11.
: Indicaciones sobre la papaya, diciembre de 1927, p. 22.
: Cultivo de la berenjena, enero de 1928, pp. 13-16.
: Consejos al horticultor, febrero de 1928, pp. 35-44.
: Cultivo del ajo, marzo, abril, mayo junio de 1928, pp. 31-35.
Martnez Fortn, Gonzalo: Seleccin de variedades de caa, marzo,
abril mayo, junio de 1928, pp. 47-51.
Cruz, Francisco B.: El cultivo de la patata, noviembre de 1928, pp.
25-28.
Muoz Guinarte, B.: Cultivo de la caa de azcar, diciembre de
1928, pp. 11-25.
Agete, Fernando: Experiencias sobre el cultivo de la pia, diciembre
de 1928, pp. 31-35.
: Cultivo del pimiento, febrero de 1929, pp. 13-18.
Garca Rubio, Rafael: La puerca, febrero de 1929.
Agete, Fernando: Cultivo de la col. Informe del Departamento de Hor-
ticultura de la EEA, junio de 1929, pp. 7-10.
Muoz Guinarte, B.: Cultivo del man (cacahuete), julio de 1929.
: Cultivo del ajonjol, septiembre de 1929, pp. 17 y 18.
Agete, Fernando: El frijol de terciopelo en las arboledas, noviembre
de 1929, pp. 9-11.
: Propagacin del aguacate, su cultivo, parsitos y hongos que
lo atacan y manera de combatirlos, diciembre de 1929.
Cruz, Francisco B.: Una inspeccin en los campos de variedades de
caa de la EEA de Santiago de las Vegas, enero de 1930, pp. 11-15.
Muoz Guinarte, B.: Cultivo del man. febrero de 1930, p. 40.
: La EEA y el comandante Jesus L. Vega, abril de 1930, pp. 7-13.
Bruner S. C.; F. Agete; L. Boucl: Informe sobre tratamiento de habas
de l i mas verdes para destrui r el i nsecto Maruca testul al i s
(Lepidoptera-pyralidae), abril de 1930, pp. 31-36.
: El cultivo del algodn en Cuba, mayo de 1930, pp. 38 y 39.
: Variedades de caa de azcar, junio de 1930, pp. 9-12.
Cruz, Francisco B.: Una hermosa conquista de la agricultura contem-
pornea, enero de 1931, pp. 4-12.
: Resumen de algunos trabajos experimentales que se vienen
realizando en el cultivo de la caa en la EEA, enero de 1931, pp. 33-
40.
Agete, Fernando: Nuevas variedades de aguacates en la EEA, mayo
de 1931, pp. 14-17.
Bruner, S. C.; Cecilio Aguiar: Informe sobre experiencias con dixido
de azufre para evitar la pudricin negra de la pia (Thielaviopsis),
septiembre de 1931, pp. 20-31.
Mayola, Ramn: Cultivo de rboles frutales, septiembre de 1931, pp.
32-42.
Gonzlez, A. de J.: Cultivo y utilizacin de los millos como forrajes,
julio de 1932, pp. 66-78.
: Cultivo y utilizacin de la soya como forraje, septiembre de
1932, pp. 5-43.
Horvath, A. A.: El frijol soya como alimento nacional, septiembre de
1932, pp. 43-66.
Agete, Fernando: El huerto escolar (I.), septiembre de 1932, pp. 67-
85.
: El huerto escolar (II.), noviembre de 1932, pp. 11-46.
: El huerto escolar (III.), diciembre de 1932, pp. 7-28.
: El huerto escolar, febrero de 1933, pp. 9-29.
: El huerto escolar. Broche de Oro (V.), abril de 1933, pp. 3-20.
Sedeo, Ascensin: La enseanza de la agricultura en la Escuela de
Ciegos de La Habana, mayo de 1933, pp. 11-18.
Agete, Fernando: Las huertas de demostracin (IV.), junio de 1933,
pp. 3-15.
: Notas sobre el caf, julio de 1933, pp. 80-85.
: La fresa, noviembre de 1933, pp. 23-34.
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Agete, Fernando: Estudio econmico de una explotacin de toma-
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Bruner, S. C.: Sobre la destruccin de palmas reales por el picudo
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Scaramuzza, L. C.: Un buen mtodo para combatir el pasador del
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Bruner, S. C.: El taladrador (bypsipyla) y otras plagas del cedro en
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Gonzlez, A. de J.: La rotacin de los cultivos, febrero de 1936,
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Nez Parra, M. L.: Cedro contra marab, febrero de 1936, pp. 154-158.
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Agete, Fernando: La violeta (Viola odorata Lin.), marzo de 1936,
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Navarro, Jorge: Las industrias oleaginosas y su importancia actual,
marzo de 1936, pp. 44-48.
Gmez, Julio; Servando Carrillo: Estudio econmico de regado de
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Jimnez Cabrera, J.: Nuestros apiarios comerciales, marzo de 1936,
pp. 107-110.
Agete, Fernando: Instrucciones para el cultivo de otras plantas orna-
mentales, abril de 1936, pp. 70-80.
: Cmo las vitaminas defienden la vida, abril de 1936, pp. 84-90.
: Plantas ornamentales y de jardn, mayo-junio de 1936, pp. 49-67.
: Diversas especies de fcil cultivo, julio de 1936, pp. 81-96.
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Portada, octubre de 1934.
fitosanidad/57
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La Habana, 1919.
Arango, Oscar: Preparacin y aplicacin de insecticidas, EEA, Cir-
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Arango, Rodolfo: Cartilla de sanidad vegetal (enfermedades e insec-
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: La caa de azcar t. I y II, La Habana, 1946.
Arango, Rodolfo: Notas y observaciones sobre el cultivo del man en
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58/fitosanidad

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fitosanidad/59
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AISLAMIENTO, SELECCIN E IDENTIFICACIN
DE BACTERIAS DE LOS GNEROS BACILLUS,
BREVIBACILLUS Y PAENIBACILLUS CON POTENCIALIDADES
PARA EL CONTROL BIOLGICO DE BACTERIAS Y HONGOS
FITOPATGENOS DEL CULTIVO DE LA PAPA (SOLANUM
TUBEROSUM L.)
Facultad de Biologa. Departamento de Microbiologa y Virologa, Universidad de La Habana. Calle 25
no. 455 e/ I y J, Plaza de la Revolucin, Ciudad de La Habana, CP 10400, yreinoso@fbio.uh.cu
Tesis en opcin al grado acadmico de
Mster en Microbiologa, mencin Microbiologa General
La pudricin blanda bacteriana, el tizn temprano y la
rizoctoniasis son enfermedades comunes de la papa
(Solanum tuberosum L.) que se presentan con gran inci-
dencia en el pas y provocan daos productivos consi-
derables. Dada la importancia econmica de este culti-
vo y la tendencia al desarrollo de prcticas agrcolas
ms ecolgicas, el presente estudio tuvo como objetivo
general aislar cepas de los gneros Bacillus, Brevibacillus
y Paenibacillus con potencialidades para el control bio-
lgico de bacterias y hongos fitopatgenos del cultivo
de la papa. Durante la campaa 2004-2005 se colecta-
ron muestras de suelo procedentes de regiones paperas
de los municipios de Gines, Quivicn y San Jos de
las Lajas, de la provincia de La Habana, a partir de las
cuales se realiz el aislamiento de las cepas de inters
mediante diluciones, tratamiento trmico y siembra en
medio de cultivo agar nutriente. Se determin el posi-
ble efecto antagnico in vitro de los aislados bacterianos
frente a las bacterias Pectobacterium carotovorum,
Pectobacterium atrosepticum y Dickeya chrysanthemi, y
hongos los fitopatgenos Rhizoctonia solani y Alternaria
solani. Las cepas que inhibieron el crecimiento in vitro
de las bacterias fitopatgenas se emplearon en experi-
mentos in vivo y se estudi el efecto inhibitorio de los
metabolitos producidos por las cepas bacterianas que
mostraron efecto antagnico frente a R. solani y A. so-
lani. Los aislados bacterianos que mostraron los mejo-
res efectos inhibitorios se identificaron hasta especie me-
diante pruebas bioqumicas y el minikit API 50CHB/E.
Se obtuvieron 85 aislados con caractersticas correspon-
dientes a los gneros Bacillus, Brevibacillus y Paeni-
bacillus, de los cuales 33 (32,82%) mostraron efecto an-
tagnico in vitro frente a las bacterias fitopatgenas
empleadas. El tratamiento con cultivos lquidos bacte-
rianos de cuatro de las cepas antagonistas previno total-
mente el desarrollo de la pudricin blanda en rodajas y
tubrculos de papa inoculados con P. carotovorum. Del
total de cepas aisladas solo 18 (21,17%) inhibieron el
pleno desarrollo micelial de A. solani, mientras que 17
(20%) tuvieron este mismo efecto sobre R. solani. Los
metabolitos producidos por los aislados antagonistas,
con excepcin de las cepas Q4 y Q5, inhibieron ms de
50% del crecimiento micelial de los hongos fitopatgenos.
Las cepas seleccionadas como promisorias para el con-
trol biolgico de estos microorganismos fitopatgenos
corresponden a las especies Bacillus subtilis, Bacillus
licheniformis, Paenibacillus polymyxa, Brevibacillus brevis
y Brevibacillus laterosporus.
60/fitosanidad
Normas Editoriales
Fitosanidad tiene como objetivo divulgar
de forma sistemtica el quehacer de los
investigadores y especialistas del Insti-
tuto de Investigaciones de Sanidad Ve-
getal, as como de otros centros del pas
o extranjeros, vinculados al trabajo de
la sanidad vegetal.
El Comit Editorial de esta publicacin,
que se edita trimestralmente, agradece
el envo de colaboraciones y observa-
ciones que ayuden a hacer mejor nues-
tra labor.
Los artculos deben reflejar los resulta-
dos de investigaciones bsicas o de apli-
cacin prctica, asimismo aquellos que
se encuentren en proceso de extensin
o generalizacin.
Igualmente resultan de importancia los
trabajos en que se comuniquen nuevos
procedimientos o innovaciones, as
como los que aborden temas novedosos.
Tipo de artculos
La revista acepta manuscritos origina-
les (inditos) en cualquiera de las espe-
cialidades directa e indirectamente vin-
culadas a la sanidad vegetal. Estos
pueden ser: artculos cientficos, rese-
as, comunicaciones cortas, resmenes
de tesis, informes tcnicos. Los artcu-
los cientficos no deben exceder de sie-
te cuartillas, las reseas de quince, las
comunicaciones de dos y los informes
tcnicos de cinco.
Lenguaje
El lenguaje oficial de la revista es espa-
ol, aunque excepcionalmente se acep-
tarn contribuciones en ingls, francs
y portugus. El estilo de escritura debe
ser totalmente impersonal, con criterio
de exactitud, brevedad y prrafos cor-
tos. Debe utilizarse el sistema mtrico
decimal. Los nombres cientficos se es-
cribirn completos, incluyendo el autor,
y siguiendo los cdigos internacionales
(ejemplo: Leucoptera coffeella Guerin
Meneville). Si es necesario utilizarlos en
varias partes del texto, entonces se es-
cribirn completos la primera vez que
aparezcan y luego se abrevian (ejemplo:
L. coffeella). Se escriben en cursiva o se
subrayan.
Estructura de los artculos
Los artculos cientficos tendrn la es-
tructura siguiente: ttulo, autor(es),
afiliacin de los autores, resumen y
palabras claves (espaol e ingls), intro-
duccin, materiales y mtodos, resulta-
dos y discusin, conclusiones (si las
hubiera), agradecimientos (si los hubie-
ra), referencias.
Las reseas adoptarn la siguiente es-
tructura: ttulo, autor(es), afiliacin de
los autores, resumen y palabras claves
(espaol e ingls), introduccin, el con-
tenido se estructura a criterio del au-
tor, agradecimientos (si los hubiera),
referencias.
Las comunicaciones cortas incluirn: t-
tulo, autor(es), afiliacin de los auto-
res, texto de la comunicacin, incluyen-
do las referencias principales.
La estructura de los informes tcnicos
ser: ttulo, autor(es), afiliacin de los
autores, resumen y palabras claves (es-
paol e ingls), introduccin, desarro-
llo y referencias.
Elaboracin del texto
El ttulo debe ser claro y conciso, pro-
curando que no sea extenso. Debe te-
ner correspondencia con el contenido.
No se incluirn abreviaturas.
De los autores se escribirn nombres y
dos apellidos. Si el autor tiene un se-
gundo nombre, este se abrevia con la
inicial. La afiliacin de los autores se
escribir con su nombre completo, las
siglas slo se emplearn entre parnte-
sis, si lo consideran necesario. Debe in-
cluirse la direccin postal, fax y correo
electrnico si los posee.
El resumen no debe exceder de 250 pa-
labras, y debe tener una sntesis de los
mtodos y resultados, mencionndose
los nombres cientficos completos y
valores cuantitativos de los resultados,
es decir, debe tener el contenido sufi-
ciente de forma comprimida.
Las palabras claves son aquellas que per-
miten identificar el contenido del art-
culo y que facilitan la identificacin en
los ndices de materia. Debe incluir las
taxas de los entes biolgicos.
La introduccin debe tener una breve
referencia de los antecedentes especfi-
cos del trabajo, as como una revisin
breve de las referencias ms recientes
que se relacionan con el tema que se
presenta. Tambin se incluir el objeti-
vo del trabajo.
Los materiales y mtodos deben ser cla-
ros y concretos, se redactarn segn un
orden lgico de los mtodos empleados.
De igual forma se escribirn claramente
los procedimientos analticos y estadsti-
cos utilizados. Se pueden citar los mto-
dos y procedimientos, siempre que ha-
yan sido publicados en revistas cientficas.
Los resultados se pueden expresar apo-
yados en tablas y/o figuras, con una dis-
cusin a partir de referencias actuales.
Deben presentarse de manera lgica,
interpretando las conclusiones. Las fi-
guras se deben elaborar solamente en
Word u otro programa compatible.
Las referencias slo sern de publica-
ciones disponibles en las bibliotecas, y
se presentarn en orden alfabtico. Se
colocar el primer apellido del autor
principal y luego las iniciales de los nom-
bres; para los dems autores, primero
la inicial y luego los apellidos, en todos
los casos separados por comas. Cuando
una obra lleve ms de tres autores, se
pondr el apellido y nombre del prime-
ro y a continuacin et al. (en cursiva). A
continuacin, el ttulo del artculo, el
nombre de la revista, as como volumen,
nmero, pginas y ao. En el caso de
los libros y folletos, despus del ttulo,
nmero de la edicin, lugar de la publi-
cacin (ciudad), casa editorial y pgi-
nas. Los ttulos de los artculos y po-
nencias se entrecomillarn, mientras
que los referidos a libros y publicacio-
nes peridicas irn en cursiva, o en su
defecto subrayados. En el texto las refe-
rencias se citan con el apellido del pri-
mer autor y el ao entre parntesis; ms
de un autor se anota como et al.
Envo de manuscritos
Deben entregarse un original mecano-
grafiado, a doble espacio, en papel blan-
co tamao 28 x 21,5 cm, utilizando una
sola cara, con mrgenes de dos centme-
tros a los lados y tres en la parte supe-
rior e inferior. Cada cuartilla debe ser
enumerada. La letra que ha de utilizarse
debe ser Arial, con puntaje 11. Adems,
debe entregar una copia en disquete,
utilizando el procesador de texto Word,
ya que el consejo de redaccin no dispo-
ne de capacidades para mecanografiar los
artculos. Se acepta el envo de manus-
critos por correo electrnico, como do-
cumentos adjuntos al mensaje o carta de
presentacin, siempre que no posean fi-
guras. Los manuscritos se enviarn a:
Instituto de Investigaciones de Sanidad
Vegetal. Calle 110 no. 514 e/ 5a.B y 5a.F,
Playa, Ciudad de La Habana
No se aceptan manuscritos que no es-
tn acompaados de la Declaracin del
Autor.
Tambin pueden enviarse por correo
electrnico: lvazquez@inisav.cu
Revisin de los manuscritos
Los trabajos enviados al Comit Edito-
rial sern sometidos a un proceso de
arbitraje y correccin de estilo. Los au-
tores colaborarn con los rbitros y co-
rrectores a evacuar cualquier duda al
respecto y efectuar, si es preciso, las
modificaciones que se le sugieran. El
Comit Editorial se reserva el derecho
de aprobar o rechazar los trabajos pro-
puestos, lo cual ser notificado oportu-
namente a los interesados.

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