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Enzimas de restriccin
Corte: - Extremo cohesivo - Extremo romo
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Clonado
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Plsmidos
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Plsmidos Bacterifagos
Bibliotecas
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Plsmidos Bacterifagos Construccin de genotecas: - genmicas - de cDNA
Vectores de clonado
Plsmidos Bacterifagos Csmidos
Conjugacin
Transduccin
In vivo
In vitro (PCR)
Electroforesis
Electroforesis
Mtodos de deteccin
- Hibridacin de cidos nucleicos - PCR
Southern-blot - Sustrato: ADN Sonda: ADN o ARN Northern-blot - Sustrato: ARN Sonda: ADN o ARN
Hibridacin
in situ
Whole mount
in situ
hybridization
Transgnesis
-Integracin estable de ADN extrao dentro del genoma del husped, confiriendo nuevas propiedades al mismo. -Muy usada para estudiar la funcin de los genes en un organismo vivo.
Individuos transgnicos
Individuos que tienen secuencias insertadas en forma estable a travs de manos humanas. Animales transgnicos pueden ser creados por microinyeccin o infeccin viral de embriones, o por la manipulacin en cultivo de clulas madre embrionarias (ES cells) que son subsecuentemente incorporadas nuevamente al embrin. Plantas transgnicas pueden ser creadas por inoculacin de Agrobacterium (plsmido Ty) o por particle bombardment.
Principales aplicaciones
- Biomedicina -Produccin animal y vegetal (resistencia a enfermedades, mejora en la calidad, etc.) - Pharming - Produccin de protenas recombinantes de
inters comercial en animales (cabras, vacas) y plantas
Ej.: antitrombina humana III, activador de plasmingeno, anticuerpos monoclonales, antgenos para malaria, tela de araa, factores de crecimiento
Knock out