LAS INTERLEUCINAS.

Se denomina interleucina a un conjunto de protenas solubles que actan como mensajeros porque permiten la comunicacin entre diferentes subpoblaciones de leucocitos que participan en la respuesta del sistema inmunitario. No obstante, la mayora de las interleucinas no se producen exclusivamente en los leucocitos ni comunican nicamente esta poblacin de clulas sanguneas. De todas maneras, el termino interleucina ha quedado por el uso. Las interleucinas representan el grupo mas amplio y diverso de las citosinas. Hasta ahora han sido identificadas 16 clases diferentes. Las interleucinas son glucoproteinas de bajo PM que estimulan la multiplicacin, la diferenciacin y la respuesta de los linfocitos T y B, as como tambin de varias otras clulas que participan en la respuesta del sistema inmunitario. Las interleucinas han sido consideradas como mensajeros necesarios para modular las reacciones inflamatorias, que representan los mecanismos eferentes ms importante de la respuesta inmunitaria. Sin embrago, las interleucinas tambin actan como factores que retroalimentan la actividad del tejido hematopoytico, que coestimulan la diferenciacin de linfocitos que han reconocido un antgeno y que modulan la produccin de hormonas por varias glndulas de secrecin interna. Las interleucinas controlan la intensidad, la duracin y, por lo tanto, la efectividad de la respuesta de los linfocitos. CRITERIOS DE CLASIFICACION: Para ser clasificadas como interleucinas, las molculas deben haber sido purificadas, clonadas molecularmente y expresadas por un grupo de clulas cultivadas. Los nucletidos de sus DNAc y los aminocidos que las componen deben tener secuencias distintas a las que ya han sido descritas para otras molculas conocidas. Adems, las molculas que con candidatas a interleucinas debe ser un producto natural, sintetizado pro las clulas del sistema inmunitario, mediadores de una o varias funciones potencialmente importantes para la respuesta del sistema y, preferiblemente, deben desarrollar mas de una

actividad biolgica. A continuacin se describen las principales caractersticas y actividades biolgicas de las 16 interleucinas que se conocen hasta ahora. Cuadro 1:

INTERACCIONES ENTRE INTERLEUCINAS Y CLULAS EN LA RESPUESTA INMUNE INNATA. Los agentes patgenos generalmente deben atravesar la barrera epitelial para poder multiplicarse dentro de los tejidos y as producir enfermedad. Las defensinas y los otros pptidos son unas de las primeras lneas de defensa

contra microorganismos. El mecanismo de toxicidad para estas molculas, consiste de una rpida permeabilizacin de la membrana celular del invasor. Otras protenas importantes, son los anticuerpos naturales, los cuales evitan la propagacin de infecciones por va sangunea. Los factores del complemento desempean un papel clave. Las bacterias gram negativas contienen peptidoglicanos en su pared celular que activan la va alterna del complemento (figura 1). El complejo de ataque de membrana, lisa especialmente a la Neisseria. Algunos receptores para reconocimiento del patrn son secretados por el hgado y funcionan como opsoninas. Los receptores lectina de unin a manana se unen a los carbohidratos de la pared celular de una gran variedad de microorganismos y la marcan para su reconocimiento por la va de las lectinas de la cascada del complemento: Esta va se diferenca de la clsica porque no requiere complejos antgeno-anticuerpo. Durante la activacin del complemento, tambin se generan mediadores de inflamacin, tales como C5a y C3a, los cuales reclutan macrfagos, NK y neutrfilos. Estos fagocitos ocasionan una reaccin inflamatoria local en el sitio de la infeccin

Figura 1.- Interaccin entre interleucinas y clulas en la respuesta inmune innata. Las plaquetas y fagocitos mononucleares liberan citocinas, tales como IL-1, TNF y TGF-b durante la etapa temprana de la infeccin, en los sitios del reconocimiento antignico.

Estas interleucinas inducen la secrecin de citocinas quimiotcticas IL-8 y MCP por las clulas estromales y la expresin de molculas de adhesin ELAM-I e ICAM-I en las clulas endoteliales, para iniciar la acumulacin de neutrfilos, macrfagos y clulas NK, que producen las interleucinas IFN-g, IL-12, IL-10, IL-15 e IL-18, para activar Linfocitos T y B (clulas de la respuesta inmune especfica) y as eliminar el antgeno del tejido blanco. Por otro lado, la respuesta heptica es activada por IL-1, IL-6 y TNF provocando el incremento srico de las protenas de fase aguda. La respuesta de los hepatocitos es modulada por el cortisol, el cual es producido en el SNC tras el estmulo de stas mismas interleucinas, que a su vez regulan la reaccin febril. Adems, la va alterna del complemento tambin participa en la fase efectora, ya sea a travs de la formacin del complejo de ataque de membrana o por la atraccin de clulas inflamatorias.

INTERLEUCINA 1: Es producida fundamentalmente por monocitos y macrfagos, pero tambin por clulas dendrticas, endoteliales, NK y otros tipos celulares. Existen dos formas, IL-1 alfa e IL-1 beta que, aunque solamente tienen un 25 % de homologa en su secuencia aminoacdica, comparten el mismo receptor y ejercen efectos biolgicos similares. Parte de sus efectos proinflamatorios se debe a que induce la liberacin de histamina en los mastocitos, generando vasodilatacin y aumento de la permeabilidad vascular en el lugar de la inflamacin. Es el principal pirgeno endgeno, induciendo fiebre a travs de la produccin de prostaglandinas. Tambin promueve la sntesis de protenas de fase aguda por los hepatocitos y acta sobre el SNC induciendo sueo y anorexia, tpicamente asociados con los procesos infecciosos.

INTERLEUCINA 2: Es secretada por linfocitos T CD4+ y CD8+ activados en respuesta a un estmulo antignico. Inicialmente se describi como factor de crecimiento de clulas T, ya que es el principal agente que controla su proliferacin. Ejerce otros muchos efectos sobre el sistema inmune, teniendo un papel esencial en el desarrollo de las respuestas inflamatorias crnicas, tanto humorales como celulares. Es un factor estimulador del crecimiento de linfocitos T, B y NK. Promueve la actividad citotxica mediada por linfocitos T y clulas NK, as como el desarrollo de clulas LAK (clulas asesinas activadas por citocinas). Tras unirse a su receptor en linfocitos T, activa la secrecin de IFN-alfa, linfotoxina, IL-4, IL-3, IL-5 y GM-CSF. Sobre los linfocitos B estimula su crecimiento y diferenciacin e incrementa la expresin de molculas de MHC de clase II.

INTERLEUCINA 3: Es producida mayoritariamente por los linfocitos T activados y tambin por mastocitos. Induce la proliferacin y diferenciacin de progenitores hematopoyticos tempranos de todas las series sanguneas, por lo que tambin es conocida como multi-CSF. Induce fundamentalmente la hematopoyesis en situaciones de stress que requieren una respuesta rpida, siendo menos claro su papel en la hematopoyesis constitutiva.

INTERLEUCINA 4: Es producida por linfocitos Th2, mastocitos, basfilos, clulas del estroma de la mdula sea y, posiblemente, por determinadas subpoblaciones de clulas NK. Es una citocina muy pleiotrpica, ya que ejerce numerosos efectos en diferentes tipos celulares. Promueve la diferenciacin de linfocitos T vrgenes hacia clulas de tipo Th2, inhibiendo la generacin de clulas Th1. Posee efectos inmunosupresores, ya que inhibe la produccin de deteminados mediadores inflamatorios de los macrfagos e induce la produccin de IL-1Ra, que bloquea la accin de la IL-1. Por otra parte, promueve el desarrollo de las respuestas inmunes humorales a travs de la induccin del crecimiento y diferenciacin de linfocitos B, produciendo el cambio isotpico hacia IgG4 e IgE e incrementando la expresin de molculas CD23 en linfocitos B, basfilos y eosinfilos. Por todo ello, los efectos de esta citocina se han relacionado con el desarrollo de los procesos alrgicos y con el incremento de IgE en las infecciones parasitarias INTERLEUCINA 5: Es secretada en forma glicosilada por LT CD4+ activados del tipo Th2. Es esencial en la proliferacin y diferenciacin de las clulas precursoras de los eosinfilos, as como en el mantenimiento de la actividad de los eosinfilos maduros siendo la responsable de la eosinofilia en infecciones parasitarias. Sobre los linfocitos B acta incrementando su proliferacin y estimulando la produccin de IgA. INTERLEUCINA 6: Es producida fundamentalmente por monocitos/macrfagos, fibroblastos, clulas endoteliales, linfocitos T y clulas del estroma de la mdula sea. Junto con la IL-1 es la principal inductora de la sntesis de protenas de fase aguda, sobre todo de fibringeno. Adems de su efecto en la inflamacin, se ha observado que promueve la diferenciacin de linfocitos B hacia clulas plasmticas, induciendo la produccin de inmunoglobulinas. Tambin puede aumentar la produccin de IL-2 y el desarrollo de los precursores hematopoyticos dependientes de la IL-3.

IL-7. INTERLEUCINA 7: Es producida por clulas estromales de la mdula sea. Promueve la maduracin de progenitores pro- y pre-B hacia linfocitos B maduros en la mdula sea y de linfocitos T inmaduros en el timo fetal y adulto. Tambin acta como factor de crecimiento para linfocitos T y B. INTERLEUCINA 8: Es producida por linfocitos T activados. Tiene un amplio espectro de actividades no muy bien definidas entre las que se incluye la proliferacin de precursores eritroides. Al igual que la IL-7, tambin induce la proliferacin de LT y estimula la produccin de inmunoglobulinas en clulas B. INTERLEUCINA 9: Es una citocina producida por los linfocitos-T ms especficamente por CD4+ helper . IL-9 realiza varias funciones en las clulas linfoide y en los mastocitos. El gen que codifica esta citocina se cree que juega un papel el asma. Estudios genticos en ratones han demostrado que es un factor determinante en la hiperespuesta bronquial en el asma.

INTERLEUCINA 10: Es producida por linfocitos del tipo Th2, as como tambin por monocitos/macrfagos, linfocitos B, queratinocitos y otros varios tipos celulares. Es la citocina inmunosupresora por excelencia, inhibiendo la sntesis de muchas otras citocinas, entre las que podemos citar IFN-gamma, TNF-alfa, IL-2, IL-12, y la expresin de MHC-II y molculas de adhesin en monocitos. Tambin tiene efectos antiproliferativos sobre muchos tipos celulares. La IL-10 ejerce adems mltiples actividades inmunomoduladoras. Se ha visto que es un cofactor para el crecimiento de lneas y colonias de clulas mastocticas in vitro. Regula las funciones mediadas por linfocitos B induciendo la sntesis de IgG, y por linfocitos T, influyendo en el desarrollo de timocitos y clulas T. Tambin ejerce efectos reguladores sobre la angiognesis. El virus de Epstein Barr secreta una protena que posee una gran homologa estructural con la IL-10 humana (vIL-10), y que tras unirse con baja afinidad al propio receptor de la IL-10, ejecuta actividades biolgicas similares. Relacionadas estructural y funcionalmente con la IL-10 se han descrito recientemente nuevas molculas tales como la IL-19, IL-20 e IL-22, cuyas funciones son todava poco conocidas.

INTERLEUCINA 11: Es producida por fibroblastos del estroma de la mdula sea y otros tipos celulares. Estimula la megacariocitopoyesis y sinergiza con otras citocinas para estimular el crecimiento de otros precursores hemticos. Comparte algunas

funciones con la IL-6, como la induccin de protenas de fase aguda en el hgado. Tambin se ha descrito su capacidad como estimuladora de la secrecin de inmunoglobulinas por clulas B en respuestas T-independientes. INTERLEUCINA 12: Es producida mayoritariamente por monocitos/macrfagos, aunque su produccin puede ser tambin inducida en clulas dendrticas y linfocitos B. Inicialmente se describi como el factor estimulador de las clulas asesinas naturales (NK), pero la actual importancia de esta citocina deriva de su capacidad de dirigir la diferenciacin de los linfocitos Th hacia clulas efectoras tipo Th1 de la hipersensibilidad retardada. La forma madura de esta molcula (p75) est compuesta de dos subunidades, p35 y p40. La sntesis de ambas subunidades est regulada diferencialmente, siendo ambas necesarias para la actividad funcional del heterodmero. Esta citocina incrementa la actividad citotxica de las clulas NK e induce clulas LAK (linfocitos asesinos activados por linfocinas). Incrementa la produccin de IFN-g por linfocitos T y clulas NK y activa linfocitos T citotxicos. Recientemente se ha descrito un factor proteico denominado p19, sin actividad biolgica por s mismo, que se combina con la subunidad p40 de la IL-12 para dar lugar a una nueva citocina biolgicamente activa denominada IL-23. Esta citocina es producida por clulas dendrticas activadas, se une al receptor de la IL-12 y comparte algunas de las funciones biolgicas con ella. INTERLEUCINA 13: Es producida por linfocitos T activados del tipo Th2, compartiendo muchas de sus funciones con la IL-4 con la que se encuentra genticamente relacionada. Es una citocina con actividad inmunosupresora ya que inhibe, junto con la IL-4 y la IL-10, la produccin de citocinas inflamatorias por los monocitos (IL-1beta, TNF-alfa, IL-8, IL-6). Por otra parte, esta citocina incrementa la proliferacin y diferenciacin de monocitos y clulas B, incrementa la expresin de CD23 y promueve el cambio de clase de inmunoglobulinas hacia la produccin de IgE INTERLEUCINA 14: La interleucina 14 (IL-14) es producida por las clulas foliculares dentrticas y linfocitos T activados. Esta citocina parece jugar un importante papel en el

desarrollo de las clulas B memoria, aumenta la proliferacin de las clulas B activadas y disminuye su sntesis de inmunoglobulinas. INTERLEUCINA 15: Es secretada por una amplia variedad de clulas, entre las que se incluyen clulas epiteliales, monocitos, msculo esqueltico, hgado, pulmn y placenta. Aunque no es una citocina producida por linfocitos Th1 se incluye en este apartado por su similitud funcional con la IL-2, con la que comparte la mayora de sus actividades biolgicas, como la estimulacin de clulas NK, y la proliferacin y diferenciacin linfocitaria. INTERLEUCINA 16: Est producida por los linfocitos T CD8+ donde se acumula y se secreta en respuesta a la estimulacin con serotonina o histamina. Originariamente se identific como factor quimiotctico de linfocitos, recibiendo el nombre de linfotactina, debido a su efecto atrayente sobre los linfocitos T CD4+. En la actualidad es el nico miembro de la familia C de quimiocinas.

QUIMIOQUINAS
INTRODUCCION Durante las reacciones inflamatorias, las cuales son iniciadas por una amplia variedad de estmulos exgenos y endgenos, los leucocitos migran a travs de las paredes de los vasos sanguneos hacia el tejido extravascular donde ejercen gran variedad de funciones biolgicas. Tambin pueden salir de la circulacin bajo condiciones fisiolgicas como parte de su funcin de vigilancia. En ambas migraciones, tanto la inflamatoria como la homeosttica, algunas citoquinas con funciones muy especficas controlan la activacin y el aflujo de estas clulas . Desde 1986 un amplio nmero de citoquinas estrechamente relacionadas, que se especializan en activar y atraer leucocitos hacia los sitios de dao, han sido identificadas, clonadas y secuenciadas. Inicialmente se clasificaron como citoquinas quimiotcticas; hoy se sabe que cumplen adems funciones importantes en la proliferacin y apoptosis de diferentes clulas, la

morfognesis tisular, la hematopoyesis, la angiognesis y en el desarrollo de respuestas inmunes especficas, induciendo el trfico de las clulas dendrticas, los linfocitos Th1, Th2 y B en el tejido linfoide secundario, lo cual contribuye a la ubicacin celular en diferentes localizaciones anatmicas. Generalmente no inducen la produccin de otras citoquinas, no generan fiebre ni son reactantes de fase aguda. Las quimioquinas constituyen el grupo ms diverso y numeroso de citoquinas; son expresadas por gran variedad de clulas en respuesta a diferentes estmulos como: citoquinas, irritantes, antgenos y estmulos policlonales DEFINICION Las quimioquinas constituyen un grupo numeroso de citoquinas

proinflamatorias; hasta el momento se han caracterizado alrededor de 40 quimioquinas diferentes que provienen de variadas fuentes celulares y tienen acciones muy pleiotrpicas. Su estudio ha despertado gran inters debido a la selectividad que tienen para activar y dirigir el trfico de diferentes subpoblaciones de leucocitos, a diferencia de otros factores quimiotcticos que atraen por igual a los neutrfilos y monocitos. Adicionalmente, se ha observado que las quimioquinas estn involucradas en la hematopoyesis, angiognesis, morfognesis tisular, crecimiento tumoral y apoptosis. Debido a que las quimioquinas orquestan la migracin y funcin de los leucocitos, se ha propuesto que cumplen un papel muy importante en la fisiopatologa de algunas enfermedades como la glomerulonefritis inducida por inmunocomplejos, la isquemia reperfusin, la ateroesclerosis, la infeccin por el VIH y algunas reacciones autoinmunes. ESTRUCTURA Estas protenas tienen un peso molecular de 8 a 15KDa ; todas son dmeros, excepto el PF-4 que es un tetrmero; sin embargo, la mayora actan fisiolgicamente como monmeros. Todas las quimioquinas son estructuralmente similares; tridimensionalmente presentan tres lminas plegadas beta conectadas por asas (denominadas beta 1, beta 2 y beta 3), un asa en la regin NH2 terminal y una hlice a en el dominio C-terminal (Figura 1A).

Su extremo carboxilo es de carcter bsico y tiene afinidad para unirse a compuestos de tipo heparina, glicosaminoglicanos y molculas de azcar cargadas negativamente que se encuentran en la superficie celular y la matriz extracelular.

Son polipptidos con un dominio tipo quimioquina: la mayora presenta cuatro cistenas en posiciones altamente conservadas, unidas entre s por puentes disulfuro, excepto las g quimioquinas que presenta dos cistenas conservadas y un solo puente disulfuro (5). Dependiendo del nmero y la secuencia de estas cistenas en el dominio aminoterminal, las quimioquinas se dividen en 4 subfamilias, a, b, g, y d, tambin denominadas, respectivamente, como CXC (debido a que las dos cistenas cercanas al N-terminal estn separadas por un aminocido simple), las CC (las dos cistenas estn adyacentes), las C y las CX3C. La subfamilia CX3C tiene un solo miembro llamado fractalquina o neurotactina, es la nica quimioquina de membrana y posee una regin rica en mucina de 240 aminocidos ; se expresa en la membrana de las clulas endoteliales y est implicada en la adherencia y quimiotaxis de los monocitos y linfocitos T. Adems, presenta tres aminocidos entre las dos primeras cistenas . Todos los miembros de estas subfamilias son producidos como precursores inactivos, clivados enzimticamente dentro de las clulas y secretados en forma activa

QUIMIOQUINAS ALFA La subfamilia de quimioquinas CXC comprende dos grupos: las que tienen 3 aminocidos, ELR (cido glutmico-leucina-arginina), entre el N-terminal y la primera cistena, y las que no poseen la secuencia ELR. Esta secuencia corta de aminocidos pareceser necesaria, aunque no suficiente, para aquellas quimioquinas que activan y estimulan los neutrfilos y se sugiere que es esencial para la unin y activacin de sus receptores (CXCR1 y CXCR2) Las quimioquinas CXC que poseen ELR son la IL-8, GRO (a, b, g), ENA-78, GCP-2 y NAP-2; son potentes quimioatrayentes y activadoras de los neutrfilos, y adems muy angiognicas. Otras son CTAP-III y b-Tromboglobulina, pero no tienen actividad quimioatrayente sobre los neutrfilos a pesar de la presencia de ELR. Las quimioquinas CXC no ELR son BCA-1, PF-4, PBP,IP-10, MIG, I-TAC, SDF1a y SDF-1b; activan a otras clulas, especficamente linfocitos T y monocitos, y son adems angiostticas Las fuentes celulares de las a quimioquinas son muy diversas e incluyen: monocitos, macrfagos, queratinocitos, fibroblastos, hepatocitos, neutrfilos,

eosinfilos, astrocitos, plaquetas, linfocitos T, B y NK, endotelio, clulas epiteliales y clulas de melanoma Las clulas blanco de las quimioquinas CXC son: neutrfilos, fibroblastos, basfilos, condrocitos ,linfocitos B, clulas del msculo liso, linfocitos T, endotelio, clulas NK, monocitos, queratinocitos, megacariocitos y clulas de melanoma. Estas citoquinas inducen gran variedad de efectos biolgicos como: quimiotaxis de diferentes clulas (neutrfilos, linfocitos T, monocitos, basfilos); acti vacin y proliferacin celular; regulacin de la angiognesis (positiva o negativa); modulacin de la hematopoyesis (positiva o negativa); inducen la liberacin de histamina y la sntesis de glicosaminoglicanos y colgeno por los fibroblastos

La IL-1 y el TNF-a son los mayores estimulantes para la produccin de las quimioquinas CXC ELR+, en tanto que el IFN-g estimula la secrecin de las CXC ELR- y tiene un efecto inhibidor sobre las que tienen el motivo ELR. Dentro del grupo de las quimioquinas CXC ELR+ la ms representativa es la IL 8, conocida tambin como protena activadora de neutrfilos-1 (NAP-1); se encuentra en dos formas, una corta ms abundante que consta de 72 aminocidos, y una larga de 77 aminocidos llamada IL-8 endotelial por ser producida por las clulas endoteliales. Esta ltima, con actividad quimiotctica

in vivo similar a la forma corta, puede estar involucrada en la adherencia del neutrfilo al endotelio como un preludio de la diapdesis. La IL-8 es producida por una amplia variedad de clulas incluyendo monocitos, macrfagos, fibroblastos, linfocitos T, clulas endoteliales, epiteliales y los neutrfilos. In vitro, estas ltimas clulas expresan IL-8 al ser estimuladas con lipopolisacridos (LPS) o con citoquinas proinflamatorias como IL-1 o TNF-a . Debido a que la IL-8 es una de las principales citoquinas producidas por los neutrfilos, se sugiere que ejerce un efecto autocrino que los lleva a perpetuar su activacin. Adems, se ha encontrado que durante la activacin celular y especficamente durante la quimiotaxis, los neutrfilos modulan la expresin de esta protena, lo cual es regulado principalmente por un aumento en la traduccin del ARNm presente en las clulas en reposo, ms que por un control transcripcional La IL-8 tiene actividad angiognica , y se ha encontrado que puede activar in vitro a otras clulas como basfilos y linfocitos T . Sin embargo, la acumulacin in vivo de linfocitos T puede ser una consecuencia de la serie de eventos que siguen a la acumulacin y degranulacin de los neutrfilos; de esta forma, la liberacin de defensinas, CAP37/azurocidina y catepsina G, puede llevar al reclutamiento de clulas T, monocitos y neutrfilos adicionales. Las defensinas y la catepsina G son mitgenas para los linfocitos T, aumentan la produccin de IFN-g e IL-4 y promueven la produccin in vivo de anticuerpos en respuesta a un estmulo antignico. De esta manera, quimioquinas como la IL-8, por medio de la degranulacin de los neutrfilos, pueden iniciar una cascada inmunoestimuladora que ayuda a convertir una respuesta innata en una respuesta especfica (4). Otras propiedades atribuidas a la IL-8 incluyen la induccin de la expresin rpida de integrinas LFA- 1 sobre el neutrfilo y la activacin de su ligando, al igual que de la L-Selectina; induce tambin la liberacin de enzimas y de metabolitos derivados del oxgeno , estimula la induccin de IL-1 y de IL-1Ra in vivo y por ltimo, estimula la liberacin de histamina por los basfilos . Se ha observado in vivo que la neutralizacin con anticuerpos de conejo dirigidos contra la IL-8, y las protenas GRO y MIP-2, reduce significativamente

la inflamacin mediada por neutrfilos en varios modelos de inflamacin aguda (15). Se propone entonces que la IL-8, adems de otras quimioquinas, puede tener un papel importante en la patognesis de la respuesta inflamatoria Otra quimioquina CXC importante es GRO-a, conocida tambin como MGSA o actividad estimuladora de crecimiento de melanoma, por sus efectos mitgenos sobre las lneas celulares de este tumor. Es secretada por clulas mononucleares junto con la IL-8, y tiene adems similar potencia para activar los neutrfilos. As, la administracin intradrmica de IL-8 humana induce una rpida infiltracin de neutrfilos dependiente de la concentracin, que llega a su pico 4 horas despus de la aplicacin; la inyeccin de GRO-a induce una respuesta quimiotctica similar a la IL-8, mientras que la NAP-2 (tambin activadora y quimioatrayente para los neutrfilos) es significativamente menos activa . Adems, in vitro se ha observado que la IL-8 es ms potente que la GRO-a y la NAP-2 en inducir la activacin de la fosfolipasa D, en la expresin de CD11b/ CD18 (MAC-1) y en la induccin de la quimiotaxis bajo agarosa ENA-78 fue aislada originalmente de clulas epiteliales pulmonares humanas estimuladas con IL- 1 (18); los fibroblastos y macrfagos de tejido sinovial de pacientes con artritis reumatoidea tambin producen niveles significativos in vitro al ser estimulados con TNF-a . Recientemente se ha encontrado que tambin se expresa en clulas endoteliales de pulmn humano inflamado y de otros tejidos. ENA -78 muestra caractersticas comunes con la IL-8 y una actividad biolgica similar, aunque en una proporcin de 5 a 10 veces menor. Se le atribuye la habilidad de inducir la adhesin y migracin de neutrfilos , adems de regular la expresin de MAC-1 sobre la superficie celular de los neutrfilos. Su induccin en cultivos de clulas epiteliales de colon humano mostr un patrn prolongado con respecto a la IL-8, y se propone que puede ser importante en el reclutamiento de neutrfilos en la lmina propia dentro de la capa epitelial . QUIMIOQUINAS BETA La sub familia de las quimioquinas CC es la ms numerosa y comprende, entre otras, las citoquinas MCP- 1 a 4, MIP-1a y b, RANTES, eotaxina-1 y 2, I-309,

HCC-1 y 2, TARC, PARC, TECK y MIP-3 a y b. stas son especialmente quimioatrayentes de monocitos y linfocitos T, aunque tambin actan sobre eosinfilos, basfilos, clulas dendrticas, linfocitos B, timocitos, NK, progenitores mieloides y megacariocitos

Las fuentes celulares de las quimioquinas b son muy diversas, entre ellas las siguientes: monocitos, macrfagos, clulas dendrticas, eosinfilos, fibroblastos clulas NK, endotelio, clulas epiteliales, mastocitos, hepatocitos, linfocitos T, basfilos, plaquetas y clulas epiteliales tmicas Entre sus efectos biolgicos se encuentran: son quimiotcticas para linfocitos T, monocitos, eosinfilos, basfilos, clulas NK y clulas dendrticas; inducen la activacin del endotelio, los eosinfilos, basfilos y clulas NK; regulan la degranulacin y liberacin de enzimas por las clulas NK y T citotxicas; modulan la apoptosis; controlan el crecimiento de las clulas hematopoyticas; modulan la diferenciacin de las clulas T hacia un fenotipo Th1o Th2 y aumentan la produccin de Ig E e Ig G4. La MCP-1 (protena quimioatrayente para monocitos- 1) fue la primera en ser purificada en un medio de cultivo celular de msculo liso artico de babuino, y se comprob in vitro su habilidad para atraer monocitos pero no neutrfilos. La versin humana de MCP-1 (tambin llamada MCAF) fue aislada poco despus de lneas celulares de tumor.

La MCP-1 induce la expresin de las integrinas requeridas para la quimiotaxis; tiene accin sobre los monocitos, linfocitos T de memoria, basfilos y clulas NK; induce la liberacin de grnulos por las clulas NK y los linfocitos T CD8+; es potente inductora de la liberacin de histamina por los basfilos y no atrae eosinfilos, en comparacin con MCP-2 y 3. RANTES es inducible por mitgenos o antgenos en una variedad de lneas de clulas T y linfocitos circulantes. In vitro es un potente quimioatrayente de monocitos, como la MCP1, pero es mucho menos efectivo para estimular la exocitosis. Atrae tambin linfocitos T CD45RO+, CD4+, NK, eosinfilos, y es el ms potente quimioatrayente para clulas CD8+; tambin induce la liberacin de histamina (4). Existen una quimioquinas CC fundamentales en la organizacin del tejido linfoide, pues regulan el trfico y la ubicacin de los linfocitos T y B en estos sitios; las caracterizadas por esta funcin son TARC, PARC, LARC, ELC (MIP3a) y SLC (MIP-3b). La quimioquina DC-CK1 (quimioquina 1 de las clulas dendrticas) atrae selectivamente los linfocitos T CD45RA+ y contribuye de esta manera a la induccin de la respuesta inmune primaria QUMIOQUINAS DELTA Y GAMMA Las quimioquinas C son un grupo conformado por la linfotactina y el SCM-1 (motivo C solitario); las clulas que las producen son los linfocitos T CD8+, timocitos, mastocitos y clulas NK. Actan principalmente sobre linfocitos T y clulas NK, induciendo su activacin y quimiotaxis .

La nica quimioquina CX3C, conocida como fractalquina o neurotactina, posee varias regiones: un extremo aminoterminal tipo quimioquina, una larga extensin tipo mucina con repeticiones serinatreonina, muchos polisacridos laterales, una regin transmembrana y un corto dominio citoplasmtico. Su nica fuente celular descubierta hasta el momento es el endotelio. Las clulas blanco son los linfocitos T y los monocitos, en los que estimula la adherencia al endotelio y la quimiotaxis REGULACION DE LA EXPRESION DE LAS QUIMIOQUINAS Como se ha descrito, existe una gran diversidad en las clulas que secretan las diferentes quimioquinas, y son las condiciones particulares del microambiente en el que se desarrolla una respuesta inmune las que generalmente determinan cules son secretadas (tipo de inflamacin y de clulas infiltrantes). La mayora de ellas se producen en respuesta a estmulos proinflamatorios e inmunomoduladores. Sin embargo, la expresin constitutiva del ARNm para algunas quimioquinas ha sido demostrada en tejidos particulares; en el intestino delgado se ha encontrado ARNm para eotaxina, sugiriendo su papel en la defensa contra los parsitos; el MCP-4 se ha hallado en el pulmn y el corazn; MDC en timo, pulmn y bazo, y TARC en el tejido linfoide. Algunas citoquinas con actividad proinflamatoria como la IL-1 y el TNF-a son potentes inductoras de la expresin de las CC y CXC en gran variedad de clulas . El IFNg aumenta la produccin de RANTES, MCP-4 y eotaxina, mientras que la IL- 4 y la IL-13 aumentan la expresin de eotaxina. La IL-10 y el TGF-b disminuyen la produccin general de quimioquinas . El tratamiento crnico con glucocorticoides inhibe la expresin de RANTES, eotaxina, MCP-1, MCP-4 y MIP-1a. La regulacin negativa se hace en los niveles transcripcional y postranscripcional. La regulacin transcripcional, dependiente de ADN, ocurre cuando el receptor del glucocorticoide unido a su ligando se fija directamente a secuencias de respuesta negativa (GREs) en las regiones promotoras del gen blanco. Alternativamente, los glucocorticoides pueden ejercer regulacin por una va

independiente del ADN, alterando la unin de los factores transcripcionales a los elementos respondedores del ADN, por ejemplo el bloqueo de NF-kb y AP-1. En la regulacin postranscripcional, los glucocorticoides aceleran la degradacin de ARNm por la interaccin con las secuencias AUREs del ARNm (Elementos Asociados al UTR del RNAm) y por otros mecanismos an no conocidos. El ARNm para algunas quimioquinas es rico en AUREs: eotaxina, MCP- 1, MIP-1a e IL-8; stas son secuencias presentes en el 3UTR (Regin no traducida localizada en extremo 3) y regulan la vida media del ARN, al acelerar su degradacin por ribonucleasas. RECEPTORES DE LAS QUIMIOQUINAS Los receptores para las quimioquinas y otros agentes quimioatrayentes pertenecen a la superfamilia de los receptores con 7 dominios transmembrana tipo serpina o rodopsina, la mayora de ellos acoplados a protena G, con tres asas intracelulares y tres extracelulares. Todos presentan un extremo Nterminal extracelular y un C-terminal intracelular La porcin intracelular carboxiterminal contiene residuos serina y treonina, los cuales son fosforilados y participan en la transduccin de seales. Todos tienen dos cistenas conservadas, una en el dominio N-terminal y otra en la tercera asa extracelular, que se asume son encargadas de formar un puente disulfuro que es importante en la formacin de un surco de unin con el ligando. La interaccin entre la quimioquina y el receptor ocurre en el extremo aminoterminal y una de las asas extracelulares Estos receptores tienen una secuencia de aminocidos nica, DRYLAIV, en la segunda asa del dominio intracelular, que los hace diferentes de los dems receptores para otros quimioatrayentes . La protena G que est acoplada a dicho receptor es heterotrimrica (cadenas ab g) y se encuentra unida a la segunda asa intracelular que contiene el motivo DRY (aspartato, arginina, tirosina); dicho motivo ha sido implicado en la transduccin de seales. Cada receptor en particular se asocia con una protena G especfica, como por ejemplo Ga12, Ga14, Ga15, etc.

Hasta la fecha, han sido clonados e identificados cinco receptores para la subfamilia CXC (CXCR1-5)y diez para la CC (CCR1-10) . Las quimioquinas muestran gran redundancia en la utilizacin de sus receptores; de esta manera, varias quimioquinas pueden acoplarse a un mismo receptor y una quimioquina puede ligarse a varios receptores. Por otro lado, los leucocitos, principalmente los activados, expresan mltiples receptores debido a la modulacin por factores exgenos y endgenos, permitiendo as que en una misma clula la activacin de sus receptores por quimioquinas diferentes produzca seales intracelulares distintas. Por lo anterior, se considera que las quimioquinas y otras citoquinas son pleiotrpicas en sus actividades A veces, la unin quimioquina-receptor induce la internalizacin del complejo; este mecanismo es importante importante en la patognesis del VIH, proceso que es mediado por los receptores CCR5 y CXCR4, o por otros receptores en una manera dependiente de la cepa del virus Es importante considerar otro receptor para quimioquinas, el antgeno Duffy conocido tambin como DARC; ste tiene la capacidad de unir miembros de las subfamilias CXC y CC. La unin ligandoreceptor origina la internalizacin pero no lleva a la transduccin de seales; al parecer, el antgeno Duffy tiene un papel regulador similar al que se observa en CCR9, que consiste en impedir el dao inflamatorio mediado por las quimioquinas . Adems, se considera til para el transporte y depuracin de stas en la circulacin . Este receptor se expresa en los glbulos rojos, endotelio de vnulas postcapilares, clulas de Purkinje del cerebelo y linfocitos T activados. Los dos receptores para la IL-8, CXCR1 y CXCR2 se expresan sobre los neutrfilos; ellos muestran un 77% de homologa entre sus aminocidos y sus genes se localizan en el cromosoma 2q-35. Tambin se expresan en monocitos, basfilos y eosinfilos, pero las respuestas son mucho menos significativas que las de los neutrfilos (9); la presencia de estos receptores sobre las clulas T CD8(+) y CD26(-) es controversial, y las clulas endoteliales carecen de ellos . El receptor CXCR1 se une solamente a la IL-8 con alta afinidad; el CXCR2 tiene buena afinidad no slo por la IL-8 sino tambin por GRO-a, NAP-2 y ENA-78 (5,15,21). Los neutrfilos pueden migrar ante bajas concentraciones de IL-8 debido al receptor CXCR2 y responden a altas concentraciones de IL-8 a travs del CXCR1

Las quimioquinas CXC ELR+ tienen in vitro acciones redundantes sobre los neutrfilos, incluyendo estmulo de la quimiotaxis, cambios de forma, flujos de calcio, degranulacin y activacin de la explosin respiratoria. Ambos receptores, CXCR1 y CXCR2, son capaces de activar las mismas funciones en los neutrfilos, y la va quimiotctica independientemente, como se ha observado en clulas Jurkat transfectadas. Sin embargo, estos receptores in vitro parecen ser regulados en forma diferente en los neutrfilos humanos, sugiriendo que ellos podran operar durante diferentes fases de la respuesta inflamatoria . El CXCR2 al parecer tiene un papel clave en el reclutamiento de los neutrfilos, mientras que el CXCR1 es importante en la mediacin de seales hacia el sitio de la inflamacin, es decir, exocitosis, polimerizacin de actina y cambios en el pH intracelular

TRANSDUCCION DE SEALES La transduccin de seales a partir de los receptores para quimioquinas requiere un acople inicial con el ligando, seguido por la activacin de la protena G . Ocurre un cambio en la subunidad a de la protena G, de un estado de unin al GDP por otro de unin al GTP, resultando en una disociacin de la subunidad a de las subunidades bg; la subunidad a libre puede activar las fosfolipasas C (PLC), b1 y b2, mientras el complejo bg puede activar la PLCb2. La activacin de las PLC resulta en la hidrlisis del fosfatidilinositol 4,5-bifosfato (PIP2) para generar dos segundos mensajeros: inositol 1,4,5-trifosfato (IP3) y diacilglicerol (DAG). El IP3 moviliza Ca2+ de los sitios de almacenamiento, aumentando su flujo intracelular. El DAG estimula la PKC, la que fosforila y activa un nmero de efectores como las MAP quinasas. Por otro lado, la activacin de la PKC y el aumento del Ca2+ citoslico pueden adems inducir las fosfolipasas C y D. Las quimioquinas tambin inducen frecuentemente la fosforilacin de tirosinas quinasas, las cuales participan en el flujo positivo de la cascada de las MAP quinasas.

Las seales dependientes de la protena G conducen a la polimerizacin de actina, la reconfiguracin de molculas de adhesin y otras respuestas celulares que contribuyen a la migracin celular ; estas respuestas son dependientes de PKC y del flujo de Ca2+, mientras la fosforilacin de tirosinas y la interaccin DAG/PLD promueve la activacin del sistema NADPH-oxidasa.

FUNCIONES BIOLOGICAS DE LAS QUIMIOQUINAS

Quimiotaxis
Las quimioquinas han sido involucradas en la migracin de los leucocitos, tanto en los procesos homeostticos como inflamatorios. Las quimioquinas CXC pueden dividirse de acuerdo con la actividad quimiotctica en: 1. Protenas con el motivo ELR (Glu-Leu-Arg) en la regin aminoterminal, que son quimiotcticas para neutrfilos y no para macrfagos o monocitos. 2. Sin motivo ELR, son quimiotcticas para clulas mononucleares y no para neutrfilos . Las quimioquinas CC generalmente atraen monocitos y linfocitos, pero no neutrfilos. Son quimiotcticas para los eosinfilos: eotaxina-1, eotaxina-2, MCP- 2, MCP-3, MCP-4, RANTES, MDC, MIP-1a (10); algunas de ellas tambin atraen basfilos. El CCR3 es el receptor que media la mayora de los efectos quimiotcticos de los eosinfilos y es el nico receptor para eotaxina-1 y eotaxina-2. El rol selectivo de los CCR en la migracin de los linfocitos T, monocitos, eosinfilos y basfilos, ha estimulado los estudios relacionados con la inflamacin alrgica. Muchas quimioquinas tipo CC y CXC regulan la migracin de los linfocitos T: IP-10, MIG, RANTES, MIP-1a, MIP-1b, linfotactina (2). Los linfocitos T vrgenes expresan receptores CXCR4 (para SDF-1) y CCR7 (para ELC), importantes para el trfico basal de estas clulas. Las clulas dendrticas tambin tienen CCR7; este receptor se utiliza para colocalizar clulas dendrticas y linfocitos T vrgenes en los ndulos linfoides Algunas quimioquinas muestran selectividad por la migracin de los linfocitos T activados: MIG, I-TAC, IP-10, 6-C-Kine y STCP-1. La polarizacin de los linfocitos T hacia Th1 y Th2 tambin se caracteriza por diferencias en la expresin de receptores para las quimioquinas; los linfocitos Th1 expresan CXCR3, CCR1 y CCR5, mientras que los Th2 expresan CCR3 y CCR4

Migracin transendotelial
Estudios in vitro han sugerido que la IL-8 es necesaria para la migracin transendotelial de los neutrfilos activados; previamente se requiere una seal

producida por las citoquinas proinflamatorias IL-1 y TNF-a, que activa a las clulas endoteliales para interactuar con los leucocitos activados por las quimioquinas, en especial la IL-8. El RANTES induce la migracin transendotelial de los eosinfilos activados por IL-5. Las clulas endoteliales expresan quimioquinas en la superficie luminal, especficamente en los proteoglicanos (glicoclix), estableciendo un gradiente quimiotctico local; la respuesta migratoria a este estmulo se llama Haptotaxis. Varias quimioquinas aumentan transitoriamente la adhesividad de las integrinas; por ejemplo, RANTES activa el VLA-4 en los eosinfilos y MCP-3 activa el MAC-1. Otras quimioquinas regulan positivamente la expresin de las integrinas: MIP-1a aumenta la expresin de CD11a y CD11c en monocitos. Algunas quimioquinas pueden funcionar como molculas de adhesin: la fractalquina y CX3CR1 estn en la membrana y regulan el trfico de monocitos y linfocitos.

La migracin de leucocitos a sitios inflamatorios depende de una cascada de eventos, mediados en parte, por quimioquinas y sus receptores y regulados por una variedad de seales. Se pueden distinguir cuatro pasos fundamentales en el proceso de extravasacin de leucocitos: 1) Distintas molculas proinflamatorias como LPS (lipopolisacrido),

TNF(tumor necrosis factor ) e IL-1 (interleuquin-1) pueden activar a las clulas endoteliales para que expresen molculas de adhesin como por ejemplo selectinas, las cuales son capaces de unirse a molculas de tipo mucinas que se expresan sobre los leucocitos, producindose as el rodamiento de los leucocitos sobre el endotelio vascular 2) Las clulas endoteliales secretan factores quimioatractivos (quimioquinas) que se unen a sus receptores sobre la superficie de los leucocitos y activan a las integrinas, resultando en una firme adhesin entre leucocitos y clulas endoteliales 3) Debido a que las integrinas se unen a molculas de adhesin de la familia de las inmunoglobulinas que se expresan sobre el endotelio vascular (3,4), los leucocitos migran a travs de las clulas endoteliales interactuando con la molcula de adhesin PECAM-1 ( platelet endothelial-cell adhesion molecule (CD31)) expresada tanto sobre los leucocitos como sobre las membranas intercelulares de las clulas endoteliales

4) Los leucocitos migran siguiendo un gradiente de quimioquinas, el cual se genera por liberacin de las mismas por clulas endoteliales y macrfagos como consecuencia de una injuria producida en el tejido (5). As, los leucocitos llegan selectivamente al lugar donde se produce el proceso de inflamacin, dependiendo del tipo de quimioquina que se secrete. El reclutamiento de leucocitos depende de la especificidad de las quimioquinas producidas en el sitio de inflamacin La IL-8 (interleuquina 8), actualmente CXCL8, y el MCP-1 (monocyte chemotactic protein-1), actualmente CCL2, son las quimioquinas ms importantes para el reclutamiento de clulas polimorfonucleares (PMN) y monocitos, respectivamente. En la inflamacin aguda el infiltrado es inicialmente de PMN y despus de 24 a 48 horas predominan los macrfagos. Este proceso de transicin entre estos dos tipos de leucocitos estara relacionado a la cintica y propiedades funcionales de las quimioquinas IL-8 y MCP-1 respectivamente. Cuando los PMN y otras clulas son estimuladas por citoquinas inflamatorias, la IL-8 es producida tempranamente y por 24 horas, reclutando y activando localmente ms PMN. Una prolongada produccin de IL-8 puede producir una alta concentracin de esta quimioquina en los vasos, lo cual inhibe la adhesin de PMN al endotelio y la extravasacin de los mismos (7). La produccin de MCP-1 est usualmente retardada pero sostenida por varios das, su produccin no sensibiliza a las clulas y conduce a un tardo reclutamiento de monocitos (8,9). Es interesante destacar que la estimulacin de neutrfilos con citoquinas inflamatorias por varias horas produce selectivamente MCP-1 y no IL-8 observndose adems que el complejo IL-6sIL-6Ra puede activar a las clulas endoteliales para secretar IL-8 y MCP-1 (10). Estas interrelaciones entre citoquinas y quimioquinas se producen en todos los procesos biolgicos donde intervienen estas protenas y es lo que hace tan dificultoso su estudio in vivo.

Hematopoyesis y angiognesis
Los efectos de las quimioquinas van ms all del reclutamiento y activacin de los leucocitos; tienen tambin efectos en la hematopoyesis, angiognesis, desarrollo embrionario, fibrosis, metstasis de tumores y apoptosis. Varias

quimioquinas son reguladoras de la proliferacin y diferenciacin de las clulas hematopoyticas y las clulas progenitoras. Algunas inhiben la proliferacin de clulas madre inmaduras como la PF-4, b-TG, NAP-2 e IL-8. La eotaxina, junto con SCF, promueve el desarrollo de los mastocitos, efecto mediado por el CCR3 que se expresa en las clulas embrionarias hematopoyticas; tambin afectan positivamente el desarrollo de los eosinfilos. Las CXC ELR(+) tienen propiedades angiognicas ; as, la IL-8, ENA-78, GRO, GCP-2 y NAP-2 son importantes en la cicatrizacin, crecimiento tumoral y metstasis, y proliferacin vascular en la artritis reumatoidea. Las CXC ELR(-) inhiben la angiognesis y el crecimiento tumoral. El balance entre ambos tipos de quimioquinas CXC determina si un tejido presenta o no proliferacin vascular Las quimioquinas han sido relacionadas con la patognesis de diferentes enfermedades: infeccin por el VIH, isquemia-reperfusin, sndrome de estrs respiratorio del adulto, glomerulonefritis inducida por inmunocomplejos, arterioesclerosis, reacciones autoinmunes y periodontitis destructivas

Quimioquinas y VIH
Se ha encontrado que el SDF-1 inhibe la invasin de los linfocitos T por cepas VIH-1 linfotrpicas, al ocupar el receptor CXCR4 que es el correceptor del virus en estas clulas. Las quimioquinas CC RANTES, MIP-1a y MIP-1b tambin podran prevenir la infeccin de los monocitos/macrfagos por el VIH al ocupar el receptor CCR5. El 1% de los individuos caucsicos tienen la mutacin delta-32 en el gen que codifica para el receptor CCR5, haciendo que la mayora de ellos sean resistentes a la infeccin por el VIH. Un nuevo receptor para quimioquinas, el STRL33, es un cofactor para la fusin a los linfocitos T de cepas del VIH tanto monotrpicas como linfotrpicas. Se han caracterizado otros correceptores para la infeccin por el VIH: CCR3 y CCR2B

BIBLIOGRAFIA Hernndez-Urza Miguel A., Alvarado-Navarro.Anabell, Interleucinas e inmunidad innata. Centro de Investigacin en Inmunologa y Dermatologa (CIINDE), Universidad de Guadalajara. Guadalajara, Jalisco, Mxico. Rev Biomed 2001; 12:272-280. Garca Tamayo Fernando, Fundamentos de Inmunobiologa. UNAM, 1997 - 544 pginas.