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Mg. Q.F. MARILU ROXANA SOTO VSQUEZ Docente de las ctedras de Farmacognosia y Farmacobotnica msoto@unitru.edu.pe
Las drogas vegetal Ocupan un lugar importante en el comercio de medicamentos Preparados fitoteraputicos
M O N O G R A F I A F A R M A C O P E A surge
A NIVEL MUNDIAL
La necesidad de garantizar su control de calidad con aplicaciones de tcnicas modernas y el uso de patrones adecuados.
DROGA VEGETAL
CALIDAD
SEGURIDAD EFICACIA
ORIGEN
CULTIVO
RECOLECCIN CONSERVACIN
ALMACENAMIENTO
F A R M A C O P E A
M O N O G R A F A
CONTROL DE IDENTIDAD
ENSAYOS BOTNICOS
EXAMEN ORGANOLPTICO
EXAMEN MACROMORFOLGICO
EXAMEN MICROMORFOLGICO
CONTROL DE IDENTIDAD
I.- ENSAYOS BOTNICOS
1.1. EXAMEN ORGANOLPTICOS
aromtico, aliceo, alcanforceo, nauseabundo, desagradable, a especia, etc. Olores caractersticos o suigeneris como: la menta, la canela, ans.
OLOR
COLOR
polvos de hojas, sumidades y tallos son de color verde cortezas y races son de color marrn oscuro o marrn rojizo.
SABOR
COLOR
ROJO: QUINA CASTAO: CANELA
SABOR
OLOR
Dulce: regaliz Amargo: nuez vmica, quina, genciana, acbar. Aromtico: canela, clavo
Plantas con aceites esenciales: Menta, hinojo, canela, romero, eucalipto, ans
CONTROL DE IDENTIDAD
tipo: leoso o herbceo, erecto o rastrero, redondeada Forma del limbo; tipo de nerviacin, presencia o no de pelos; textura, superficie Nmero de piezas del cliz y de la corola Tipos; forma y dimensiones; caractersticas del pericarpio, dehiscencia.
HOJAS
Tamao, color y forma; presencia o no de pelos Color; estriaciones; arrugas; fractura Zonas de crecimiento; radios medulares; vasos; fractura
Forma; aspecto de la superficie; caractersticas del corte transversal; consistencia Aspecto, coloracin: propiedades organolpticas.
CONTROL DE IDENTIDAD
I.- ENSAYOS BOTNICOS
1.3. EXAMEN MICROMORFOLGICO
El examen micromorfolgico es indispensable para confirmar la identidad de la droga y descartar la presencia de posibles adulterantes.
CORTES HISTOLGICOS
DROGAS PULVERIZADAS
CORTES HISTOLGICOS
DROGAS ORGANIZADAS Y NO PULVERZADAS
ENTERAS O TROCEADAS
Los estudios histolgicos se llevan a cabo mediante cortes transversales o longitudinales efectuados mediante el micrtomo, montados con tcnicas de aclarado y coloracin. REACTIVOS PARA ACLARAR(hojas y ptalos): hidrato de cloral, potasa alcohlica al 5%, lactoferol, hipoclorito de sodio. Los rganos oleaginosos(semillas) se desengrasan previamente introduciendo en alcohol. REACTIVOS DE MEMBRANA .Floroglucinol = colorea en rojo los tejidos lignificados Cloroioduro de zinc = azul violeta los tejidos celulsicos y en amarillo marrn los lignificados y suberificados.
HOJA
HOJA
Pelargonium hortorum
Zea mays
DROGAS PULVERIZADAS
En la droga pulverizada muchas clulas estn rotas excepto las paredes lignificada. Se puede encontrar tambin fragmentos de almidn, cristales de oxalato de calcio, aleurona, etc)
El examen microgrfico de las drogas pulverizadas
elementos celulares
se basa en el estudio de
contenido celular
Elementos conductores: vasos y traquedas Clulas epidrmicas Clulas de parnquima Clulas de colnquima Clulas de sber Clulas de esclernquima
GRANOS DE FCULA
GRANOS DE ALEURONA
CRISTALES
GRASA Y ESENCIAS
Clulas de parnquima
Clulas de sber
Clulas de colnquima
Clulas epidrmicas
Tradescantia (MO)
PRUEBAS MICROQUMICAS
vichayo
Las pruebas microqumicas se pueden realizar tanto como material fresco como de herbario y an conservado, siendo preferible al estado fresco. ALCALOIDES (Reactivo de Dragendorff) ALEURONAS (Gota de colorante organge G) ALMIDN (Reactivo de lugol) CELULOSA (Prueba de clorioduro de cinc) GRASAS Y ACEITES(Reactivo de Sudan III o Sudan Presencia de flavonoides (color IV) amarillo) y taninos (color rojo) LIGNINA(Prueba de floroglucina) MUCLAGOS(Azul de cesil al 1%) OXALATO DE CALCIO(Reactivo acetato cprico) PECTATO, SUSTANCIAS PCTICAS(Rojo de rutenio al 0,1%) QUITINA(Reactivo de lugol y cloruro de cinc) SAPONINAS(cidos sulfrico concentrado) Presencia de alcaloides de color TANINOS (Sulfato frrico) marrn (Dragendorff)
CONTROL DE IDENTIDAD
ENSAYOS FISICOQUMICOS - CUALITATIVOS
DROGA ENTERA DROGA PULVERIZADA EXTRACTOS
REACCIONES DE IDENTIFICACIN
A. Reacciones de coloracin o precipitacin
CORTEZA DE CSCARA SAGRADA(Rhamnus purshiana) + Sol. Amoniacal = coloracin roja(antraquinonas)
B.- FLUORESCENCIA
quinina
C.-MICROSUBLIMACIN
Se realiza con drogas con p.a. (principios activos) fcilmente sublimables (antraquinonas, alcaloides)
ANALISIS CROMATOGRAFICO
CROMATOGRAFA DE CAPA FINA Esta cromatografa es especialmente para aislar y purificar vitaminas, hormonas, diversos alcaloides, hetrosidos cardiotnicos, antraquinonas
CONTROL DE CALIDAD
1. Confirman la IDENTIDAD 2. Permiten VALORA la CALIDAD y la PUREZA
ESPECFICOS
Porcentaje de humedad Mtodos volumtricos Mtodos espectrofotomtricos Determinacin de Cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC) cenizas
Cromatografa de gases Determinacin de aceites esenciales ndice de acidez ndice de yodo ndice de saponificacin ndice de steres ndice de perxido ndice de yodo ndice de refraccin Poder rotatorio fluorometra ndice de hinchamiento
La humedad residual o lmite para la cantidad de agua, puede ser establecida mediante el estudio de secado de la droga.
Para esta determinacin puede ser empleados dos mtodos:
MTODO GRAVIMTRICO
MTODO AZEOTRPICO
Utilizado especialmente para drogas con aceites esenciales
AZEOTRPICO
En este mtodo el agua de la droga es arrastrada por destilacin con un disolvente no miscible con el cual forma una mezcla azeotrpica cuando se somete a una temperatura constante de ebullicin, en un aparato de destilacin a reflujo. El agua se acumula a una trampa y se lee directamente su volumen. Los vapores del azetropo se condensan por refrigeracin, separndose el agua del disolvente en dos capas, pudiendo entonces medir el volumen del agua separada de la droga.
Los disolventes utilizados pueden ser: Benceno (p.e. 80) Tolueno(p.e. 110C) Xileno ( p.e. 136 a 140C)
Segn la Farmacopea: Destilar 200mL de disolvente , al que se le aade 2 mL de agua. Luego se enfra y se mide el volumen de agua n separado en la parte del tubo. Se introducen 20 g de muestra triturada se somete a ebullicin con tolueno. Por 5 minutos, se enfria y se procede a la lectura del volumen de agua (n )
CENIZAS TOTALES
Las cenizas totales permiten determinar la cantidad de material remanente despus de la ignicin: Cenizas fisiolgicas, Derivados de los tejidos de la planta y Cenizas no fisiolgicas, que son el residuo despus de la ignicin de la materia extraa (Polvo, arena, tierra, etc.), adherida a la superficie de la droga.
CALCINACIN
INCINERACIN
700 -750C 2H
CENIZAS CIDO-INSOLUBLES
Las cenizas cido-insolubles son los residuos despus de la ebullicin de las cenizas totales con cido clorhdrico diluido. Esta determinacin mide la presencia de slice, especialmente de arena y tierra silcea.
Ceniza total + 2 a 3 ml HCl 10% hervir 10 + mufla (700 a 750 C)/2H Indican contaminacin con producto trreos
Estos mtodos se aplican a la mayora de los p.a. y estn basados en la capacidad de absorcin energtica que presentan ciertas molculas al ser expuestas a una determinada intensidad de energa y con La longitud de onda () un longitud de onda concreta. comprende entre 190 y
800 nm.
La cromatografa es una tcnica que permite identificar, cuantificar y purificar los componentes de una mezcla de compuestos qumicos.
CROMATOGRAFA GASEOSA
Determina con componentes voltiles (aceites esenciales, alcanfor, cidos vegetales, algunos alcaloides del opio y tabaco, resinas de la marihuana, sapogeninas y hetersido cardiactivos. Deteccin de cocana metabolitos en el organismo humano, de gran importancia en el campo forense.
INDICE DE HINCHAMIENTO
Aplicable a las drogas con muclagos es definido como el volumen en mililitros ocupado por un gramo de droga y muclago, despus de su hinchamiento por permanecer cuatro horas en contacto con un liquido acuoso. Por ejemplo: para el agar su valor es > a 15,y para la semilla de lino > 4 para la droga entera y > 4.5 para el polvo.
Aceites fijos
Caracteres organolpticos: olor, sabor y color Ensayos fisicoqumicos Solubilidad Indice de acidez: Cantidad en mg de KOH necesaria para neutralizar los cidos libres presentes en 1 g de sustancia Indice de refraccin Indice de hidrxidos Indice de saponificacin: Cantidad de KOH (mg) necesaria para neutralizar los cidos libres y saponificar los steres, en 1 g de sustancia
Control de calidad de drogas de origen vegetal. Ctedra de Farmacognosia. FFyB-UBA-
Indice de yodo: Cantidad de yodo fijada a 100g de sustancia. Indice de ster: Diferencia entre los dos ndices anteriores Indice de perxidos: Es el nmero que expresa en mEq de O2 activo la cantidad de perxido contenido en 1000 g de sustancia. Insaponificable: Es el % de sustancias no voltiles a 100-105C, obtenidas por extraccin con un disolvente orgnico, de una disolucin de la muestra previamente saponificada. Rotacin ptica Densidad relativa Espectros UV e IR Anlisis cromatogrfico: TLC y GC
Control de calidad de drogas de origen vegetal. Ctedra de Farmacognosia. FFyB-UBA-
Aceites esenciales
Caracteres: Se incluye la apariencia y el olor del aceite esencial y si se considera adecuado, el sabor.
Identificacin: La identificacin de los aceites esenciales debe efectuarse mediante el perfil cromatogrfico por cromatografa de gases. En su defecto puede utilizarse la TLC.
www.usac.edu.gt/investigacion/iiqb/ponencia9.pdf
Ensayos
Densidad relativa
Indice de refraccin
Poder rotatorio
Acidos grasos y aceites esenciales resinificados Residuo de evaporacin Agua Solubilidad en alcohol
FLUORIMETRA
Se fundamenta en las propiedades de algunos compuestos de emitir fluorescencia. En los alcaloides la fluorescencia es proporcional a la concentracin. Se emplea para la valoracin de la quina y quinidina, aprovechando sus propiedades fluorescentes en medio sulfrico. La absorcin al ultravioleta tiene el inconveniente que requiere extractos muy purificados. Permite valorar simultneamente mezclas de alcaloides de forma independiente. para ello es preciso que cada uno cumpla la ley de Lambert-Beer: absorciones mximas diferentes, absorciones aditivas.
NDICE DE REFRACCIN
Las determinaciones del ndice de refraccin son especialmente tiles para el establecimiento de la pureza de esencias y aceites fijo y mucho de su valores indican en las farmacopeas. Por ejm: ndice de refraccin de menta (Mentha piperita) es 1,459- 1,45 y el de la esencia de lavanda inglesa (Lavandula officinalis Chaix ex Villars) es de 1,460 1,474.
PODER ROTATORIO
La mayora de los aceites esenciales tienen componentes pticamente activos y su pureza puede deducirse del sentido del poder rotatorio y de su magnitud. As el poder rotatorio de la esencia de limn (Citrus limon L.) es mayor de 57y menor de 65 o el de la esencia de menta (Mentha piperita L.) no es menor de -16 ni mayor de -3
3 CONTROL DE PUREZA
- Ausencia de elementos extraos - Determinacin de pesticidas - Determinacin de metales pesados - Determinacin de sustancias radiactivas - Determinacin de contaminacin microbiana
PUREZA
Materia extraa: consiste en realizar al ojo y estereoscopicamente las caractersticas de la muestra en anlisis ya sea contaminacin animal, vegetal, mineral, etc. Materia extraa <5% tallos/ <2% materia extraa. <7%tallos/ <3% . materia extraa Referencia Ph Helv Vll Ph Helv Vll
Perdida por secado:Contenido de humedad que contienen la planta determinada por desecacin de la muestra, expresado en % m/m
% Humedad Eucalyptus sp. <10% Ocicum basilicum <12% Anethum graveolen <13% Referencia DAB 10 Ph Helv Vll DAB 10
DETERMINACIN DE PESTICIDAS
Se procesan las muestras mediante la metodologa establecida en estndares internacionales. Se utiliza la Cromatografa Gaseosa con detector de captura electrnica (organoclorados) o detector de nitrgeno fsforo para rgano fosforados. Tambin puede trabajarse acoplando a espectrometra de masa.
La normativa oficial de la Unin Europea permite unos niveles mximos de contaminacin radioactiva de 600 beq/Kg (alimentos)
Contaminacin microbiolgica
Las plantas son contaminadas por microorganismos presentes en la tierra, en el ambiente, etc. Esta contaminacin varia por lo general entre 103 y 106 UFC por gramo de planta.
Detectndose a veces la presencia de estreptococos fecales, pseudomonas y enterobacterias. Las plantas se contamina en la recoleccin, disminuyendo la tasa de contaminacin con el secado.
BIBLIOGRAFA
Capasso R, Borreli F, Longo R, Capasso F. Farmacognosia Aplicatta: Controllo di Qualit de lle Droghe Vegetali. Italia. Springer. 2007 Villar del Fresno. Farmacognosia General. Madrid. Edit. Sntesis. 1999. OMS. Quality control method for medicinal plant materials. 1998. Disponible en: http://apps.who.int/medicinedocs/fr/d/Jh1791e/ Farmacopea de las plantas medicinales del Caribe. Disponible en: http://www.funredes.org/tramil/espanol/ Arbo M, Gonzlez A. Botnica Morfolgica: Morfologa de las plantas vasculares. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. 2005. Disponible en: www.hiperbotanica.net