UNIVERSIDADE DE COIMBRA FACULDADE DE CINCIAS E TECNOLOGIA

DEPARTAMENTO DE BOTNICA

APONTAMENTOS DE FISIOLOGIA VEGETAL

Captulo I: As Plantas e a gua

Gil Silva Cruz 2006

As plantas e a gua
Porque importante a gua A gua de longe o constituinte mais abundante das clulas vivas das plantas. Ela constitui em mdia 80-95% do peso dos tecidos moles das plantas e desempenha nelas funes cruciais, designadamente: 1) o melhor e mais abundante solvente conhecido. Como solvente ela serve de meio onde ocorrem as reaces qumicas; 2) Ela prpria, ou os seus ies, participa como reagente em vrias reaces (hidrlise e desidratao); 3) o veculo de transporte das substncias em soluo (sais minerais, fitohormonas, acares, cidos orgnicos, aminocidos etc.), ou em suspenso, no interior da planta; 4) essencial para manter a estrutura e propriedades das membranas, proteinas, cidos nucleicos e outros constituintes do protoplasma; 5) Confere turgidez s clulas e tecidos e, nessa qualidade, responsvel por: - dar suporte mecnico s partes jovens no lenhificadas dos orgos das plantas; pelo crescimento celular; e por muitos movimentos realizados pelas plantas ou por orgos das plantas. Da totalidade da gua absorvida pelas raizes, apenas uma poro muito reduzida (2-5%) retida pelos tecidos e utilizada no crescimento ou em reaces qumicas. Todo o resto libertado pelas folhas sob a forma de vapor, um processo designado transpirao. Durante o seu ciclo de vida uma planta pode perder o equivalente a 100 vezes a sua massa, atravs das folhas, por transpirao. Tendo em conta que a gua desempenha funes to importantes nas plantas, sendo mesmo o recurso que mais limita a produtividade agrcola, estranho que um recurso to valioso seja, por elas, to mal gerido. Essa situao torna-se mais fcil de compreender se tomarmos em considerao que as vias atravs das quais a planta perde gua so tambm as portas de entrada do CO2 utilizado na fotossntese. A planta tem que gerir, frequentemente, o compromisso entre duas situaes extremas igualmente penalizantes: a de morrer de fome ou de desidratao. Nas plantas terrestres a gua absorvida do solo pelas raizes e, depois de atravessar radialmente a zona cortical, chega aos elementos condutores do xilema. Nestes a gua transportada at s folhas, na chamada corrente de transpirao, onde a maior parte perdida para atmosfera, principalmente atravs do estomas. Estabelece-se, assim, um fluxo contnuo de gua entre o solo e a atmosfera, com passagem pelo interior das plantas. Para compreendermos melhor os mecanismos e as foras responsveis pela manuteno deste fluxo, importa referir algumas das propriedades da molcula da gua. Propriedades da gua A forma como o tomo de oxignio e os dois tomos de hidrognio se associam na molcula de gua (Fig. 2) origina uma estrutura polar com uma regio electronegativa (tomo de oxignio) e as zonas correspondentes aos tomos de hidrognio com cargas fraccionais positivas. Esta estrutura polarizada permite o estabelecimento de ligaes de hidrognio com outras molculas de gua ou com molculas de outros compostos polares. A facilidade com que as molculas de gua estabelecem ligaes entre si e com as molculas de outros compostos polares, a responsvel pelas elevadas foras de coeso e de adeso, respectivamente, bem assim como pelas notveis propriedades trmicas que apresenta. As propriedades fsicas da gua fazem dela um meio nico para a vida. Em primeiro lugar a gua um excelente solvente da grande maioria de substncias. Isto deve-se em parte s pequenas dimenses da molcula e, por outro lado, sua natureza polar, que lhes permite orientar-se volta dos ies e dos solutos polares em soluo, mascarando a suas cargas

elctricas. Este facto diminui a interaco electrosttica entre as substncias polares, aumentando a sua solubilidade. Alm disso, as terminaes polares das molculas de gua podem orientar-se junto de grupos com cargas de macromolculas, formando camadas de hidratao.

Fig. 1 Estrutura da molcula da gua e a formao de ligaes de hidrognio A elevada fora de coeso entre as molculas de gua permite que as colunas de lquido, que preenchem os vasos lenhosos, se mantenham intactas e ascendam s partes mais elevadas das rvores mais altas, mesmo quando sujeitas a tenses muito fortes. Por outro lado, as molculas de gua tambm so atradas por outras molculas polares (adeso) o que lhes permite aderir a superfcies slidas como as das paredes celulares e formar camadas de hidratao volta de ies e macromolculas como as das proteinas e dos cidos nucleicos. Por sua vez, os elevados calor especfico e calor de vaporizao habilitam as molculas de gua a absorverem quantidades relativamente elevadas de calor sem que a sua temperatura sofra alteraes significativas, e a permanecerem no estado lquido numa vasta gama de temperaturas. Potencial hdrico O movimento da gua no contnuum solo-planta-atmosfera um processo fsico, inteiramente passivo, que no requer a utilizao de energia metablica. Em qualquer sistema (solo, planta, atmosfera), a gua desloca-se de um lugar para outro em resposta a diferenas de energia potencial ou potencial qumico (). A diferena entre a energia potencial da gua () num determinado sistema (por conseguinte sujeita a todos os tipos de foras ou influncias que actuam sobre esse sistema), e a energia potencial da gua pura e livre ( o), sujeita presso atmosfrica normal e mesma temperatura da gua do sistema, dividida pelo volume molal parcial da gua (Vm) chamada potencial de gua ou potencial hdrico e designa-se, abreviadamente, pela letra (psi). = (- o)/Vm Nas clulas vegetais, ou entre as clulas vegetais e o seu meio envolvente, a gua flui de reas de potencial hdrico mais elevado para reas de potencial hdrico mais baixo. Se no existirem barreiras, o movimento da gua s acabar quando se atingir o equilbrio termodinmico. Significa isto que a direco do movimento da gua num sistema determinada por diferenas (gradientes) de potencial hdrico. Por conveno, foi estabelecido que o valor do potencial hdrico da gua pura e livre presso atmosfrica, ao nivel do mar zero. Por conseguinte, o potencial hdrico duma soluo, nas mesmas condies, um valor negativo porque a concentrao (energia livre) da gua na soluo menor que a da gua pura. O mesmo sucede quando a gua se

encontra adsorvida (aderente) a partculas do solo ou a tecidos das plantas, sendo, nestes casos, necessrio fornecer energia para levar o potencial da gua ao valor 0. O potencial da gua livre aumenta com a temperatura, com a presso exercida sobre ela e quando elevada (colocada a um nivel superior). Embora o potencial hdrico seja uma expresso da energia livre da gua nas condies existentes num dado sistema relativamente gua pura em condies padro, ele normalmente expresso em unidades de presso (Pascals, MegaPascals (MPa), ou ainda bares e atmosferas; 1 bar = 0.987 atm. = 0.1 MPa) por estas serem mais fceis de medir que as unidades de energia. O potencial hdrico pode tambm expressar-se em funo da presso do vapor de gua da atmosfera em equilibrio com a soluo aquosa, de acordo com a expresso: = RT/V ln(e/eo) em que R representa a constante dos gases perfeitos (8,31 J K-1 mol-1); T a temperatura absoluta (K) e e e eo a presso de vapor da atmosfera e do estado de saturao da mesma para aquela temperatura, respectivamente. Como e/eo representa o conteudo relativo de vapor de gua da atmosfera (%Humidade Relativa /100), a expresso anterior tomar a forma seguinte para uma temperatura de 20 C e se passarmos para logaritmos decimais: = 311,5 log %HR/100 Componentes do potencial hdrico Como j foi dito, o potencial hdrico da gua pura e livre, presso atmosfrica, foi fixado arbitrariamente como sendo igual a zero. A adio de solutos, presses fsicas e a presena de partculas slidas (ou superfcies) hidroflicas modificam o potencial da gua pura. Assim, o potencial hdrico de um determinado sistema (por ex. uma clula) ser igual ao somatrio dos diversos potenciais componentes (osmtico ou de solutos, de presso, matricial, etc.) que actuam sobre o referido sistema. = s+ p + m +.....+ em que s representa o potencial osmtico ou de solutos; p o potencial de presso ou de turgescncia; e m o potencial matricial ou de matriz. Vejamos como cada um destes componentes afecta o potencial hdrico das plantas. Potencial Osmtico ( s) O potencial osmtico proporcional ao nmero de partculas de soluto dissolvidas e independente do tipo de partculas. A partcula pode ser uma molcula de acar, um io de clcio, ferro ou nitrato, ou ainda uma qualquer substncia qumica dissolvida. Estas partculas em soluo interactuam com, e reduzem, a actividade das molculas de gua, dimuindo a sua energia potencial. Deste modo, a adio de solutos faz sempre baixar o valor do potencial hdrico e o potencial osmtico sempre uma grandeza negativa (s<0). O potencial osmtico das folhas de muitas plantas cultivadas est, geralmente, contido entre -1 e -2 MPa. Muitas vezes, em vez de se referir o potencial osmtico, que negativo, usa-se o termo presso osmtica ( = - s) para designar o efeito dos solutos dissolvidos na gua, a qual uma grandeza positiva. Ela pode definir-se como a fora (presso) que preciso aplicar a uma soluo contida num osmmetro mergulhado em gua pura para impedir que o volume de soluo dentro do osmmetro se altere. Tanto o potencial osmtico, como a presso osmtica esto relacionados com a fraco molar ou actividade da gua (moles de gua /moles de gua + moles de soluto) ou, ainda,

com a concentrao de partculas de solutos dissolvidos. Para muitas solues biolgicas (diluidas) o potencial osmtico pode calcular-se pela equao de van`t Hoff: s = - RTC sendo C a concentrao de solutos expressa em mol . m-3 de solvente. De acordo com esta frmula, uma soluo molal dum soluto no inico apresenta, para uma temperatura de 20C, um potencial osmtico de 2,43 MPa. No caso de solues de solutos ionizveis

Fig. 2 Osmmetro de Dutrochet ter que se ter em considerao o nmero efectivo de partculas osmoticamente activas (molculas no dissociadas e ies) presentes na soluo de acordo com o grau de dissociao. Potencial de Presso ( p) O potencial de presso uma presso fsica que representa a diferena em presso hidrosttica para a referncia (presso atmosfrica normal). Pode ser positiva ou negativa (tenso). A gua dos vasos lenhosos duma planta a transpirar activamente, encontra-se normalmente sob presso negativa, podendo esta atingir valores inferiores a -2MPa. Pelo contrio, a gua contida nas clulas vivas encontra-se geralmente sujeita a uma presso positiva (turgor), sendo, nesse caso, p>0. As alteraes do valor de p das clulas podem fazer variar o seu volume dentro de certos limites. Assim, quando a gua entra numa clula, faz aumentar o volume vacuolar e exerce uma presso, denominada presso de turgescncia, sobre as paredes celulares. Ao mesmo tempo, desenvolve-se na direco oposta, isto , das paredes para o interior, uma presso de igual valor, denominada presso da parede, que, actuando como uma presso hidrosttica, aumenta o estado energtico da gua da clula e representa o potencial de presso. Esta componente apresentar valores positivos sempre que o vacolo exera presso sobre as paredes e diminuir, aproximando-se de zero, medida que a clula vai perdendo gua e o vacolo se contrai. Quando a presso de turgescncia atinge o valor zero, diz-se que a clula se encontra em plasmlise incipiente. Nesta altura o vacolo deixa de exercer presso sobre as paredes. Algumas vezes, tm sido referidos valores negativos para a presso de turgescncia, quando as paredes so atraidas (sugadas) para dentro em consequncia da contraco vacuolar. Potencial matricial ou de matriz ( m) O potencial matricial resulta das foras que retm as molculas de gua por capilaridade, adsoro e hidratao fundamentalmente por superfcies hidroflicas como sejam as paredes celulares e vrios componentes da matriz citoplasmtica. No primeiro caso, as

microfibrilhas de celulose entrelaadas formam numerosos microcanais, nos quais a gua retida devido, principalmente, tenso superficial que gera uma presso negativa na interface gua/ar. No citoplasma, a gua adsorvida por vrias macromolculas e colides. Nas clulas em que a matriz celular representa uma pequena fraco do volume celular total (clulas bastante vacuolizadas), a componente matricial tem pouca expresso e pode ser desprezada (casos das clulas de parnquima jovens com paredes finas). J o mesmo no acontece em clulas densamente citoplasmticas, ou ricas em materiais mucilaginosos, como acontece com as clulas meristemticas de mesfitas e nas clulas de algumas plantas xerfitas, respectivamente, bem assim como nos casos de tecidos vegetais desidratados, sementes secas e solos. Em qualquer caso, o potencial de matriz representa a fora exigida para remover a gua das superfcies que a retm. A adsoro, ou adeso, das molculas da gua diminui a sua energia potencial, pelo que o potencial matricial ( p) sempre < 0. Entrada e sada da gua nas clulas O movimento da gua nas plantas (e noutros sistemas) pode assumir duas modalidades principais: difuso (incluindo-se nesta modalidade a osmose e a embebio) e fluxo em massa. O primeiro um movimento lento das molculas individuais, que se realiza a curta distncia, accionado por gradientes de concentrao. Ocorre, normalmente entre clulas vizinhas ou entre as clulas e o meio circundante prximo. O fluxo em massa consiste no movimento conjunto da gua e solutos nela dissolvidos; faz-se a longa distncia e comandado por diferenas de presso. mais rpido que a difuso e faz-se numa s direco. Quando se consideram as relaes hdricas das clulas vivas com o meio exterior, ou com clulas vizinhas, predomina um tipo especial de difuso chamado osmose. Este fenmeno consiste na difuso das molculas de gua atravs duma membrana semipermevel, como pode ser considerada a membrana citoplasmtica, a qual permevel gua, mas no o (igualmente) aos solutos. Difuso Vrios fenmenos nas plantas dependem da difuso (a fotossntese depende da entrada do CO2 para dentro das folhas; a transpirao depende da sada do vapor de gua para a atmosfera; a absoro inica depende do movimento dos ies minerais da soluo do solo para a superfcie da raiz; as reaces bioqumicas dentro das clulas dependem do movimento dos reagentes que lhes permite encontrarem-se; etc.). Trata-se de um movimento lento, a curta distncia e ao acaso, de partculas individuais duma regio de maior concentrao (energia) para outra de menor concentrao. O movimento dirigido das partculas continuar at que se estabelea uma distribuio uniforme em todo o sistema, uma situao a que corresponde uma maior desorganizao e uma menor energia livre do sistema. Nesse momento estabelece-se um equilbrio dinmico em que no se observa ganho de partculas de uma regio relativamente a outras. Num dado sistema, a direco de difuso das molculas ou ies de uma substncia independente da direco de difuso de outras substncias nele presentes, dependendo apenas da direco do gradiente de concentrao dessa substncia. O fluxo ou taxa de difuso de uma substncia, em condies ideais, pode ser determinada pela chamada lei de Fick, que se traduz pela frmula: Js = - D Cs/x ou dM/dt= - Da.(dC/dx)

em que dM representa a quantidade de substncia que difunde atravs da rea a no tempo dt, D o coeficiente de difuso e dC/dx representa o gradiente de concentrao, ou seja, a diferena de concentrao dC entre dois pontos do sistema distanciados de dx. No caso de termos dois compartimentos separados por uma membrana permevel (cuja espessura desprezavel), sendo as concentraes de um e do outro lado da membrana C1 e C2 respectivamente a lei de Fick toma a seguinte forma: dM/dt = Ka (C1-C2) sendo C1>C2 e K a constante de permeabilidade. O coeficiente de difuso D, que representa a maior ou menor facilidade com que uma dada substncia difunde num dado sistema, varia de substncia para substncia e depende de vrios factores de acordo com a equao: D = KT/m em que K uma constante, T a temperatura absoluta, m o peso molecular e a viscosidade do meio atravs do qual se d a difuso. Deste modo, o coeficiente de difuso aumenta com a temperatura e diminui com o aumento da massa molecular da substncia e com a viscosidade do meio. Se na equao da lei de Fick fizermos dC/dx igual a 1 e considerarmos a rea a unitaria teremos D = dM/dt. Isto significa que D representa a quantidade de substncia que difunde, na unidade de tempo, atravs da rea unitria quando o gradiente dC/dx =1. Osmose O citoplasma, o vacolo e os organitos das clulas vegetais encontram-se envolvidos por membranas biolgicas que no so igualmente permeveis a todas as substncias. As membranas que assim se comportam so chamadas diferencialmente permeveis e tm grande importncia no controlo do trfico de ies e molculas para dentro e para fora dos compartimentos delimitados por elas. Outros tipos de membranas podem ser totalmente permeveis ou completamente impermeveis. Muitas substncias, incluindo a gua, passam atravs das membranas biolgicas to facilmente como passam atravs duma soluo aquosa. Este movimento sem restries de uma substncia atravs duma membrana chama-se transporte passivo e a energia necessria para esse movimento resulta da prpria energia cintica das molculas. A difuso das molculas dum solvente (ex. a gua) atravs duma membrana diferencialmente permevel chama-se osmose (Fig. 3).

Fig. 3 Osmose Consequncias da osmose nas clulas e tecidos vegetais As relaes hdricas de clulas e tecidos vegetais podem ser descritas pelo diagrama de Hofler que traduz a interdependncia entre o volume celular relativo (ou conteudo

hdrico) e os valores de , e dos seus componentes, s e p , medida que a clula vai perdendo gua (Fig. 4). Se o interior da clula possuir uma concentrao de solutos maior ( s mais negativo) que o exterior ento a gua entra para a clula, por osmose. Sendo a parede da clula relativamente rgida (s permite variaes de volume dentro de certos limites), ela tende a resistir ao aumento de volume do protoplasto e presso que esse aumento de volume exerce sobre ela. Quer isto dizer que o potencial de presso ou de turgescncia aumenta para contrabalanar o efeito do potencial osmtico. Contudo, a entrada de gua para a clula provocar um certo aumento de volume dependendo este do grau de elasticidade da parede. No caso limite de o meio exterior ser a gua pura, o equilibrio ocorrer quando o potencial hdrico dentro da clula for igual ao potencial hdrico no exterior, isto , for igual a zero. Nestas circunstncias, s = - p e a clula ter atingido o volume mximo permitido (volume relativo 100). Nessa altura, a clula atingiu a sua trgidez mxima.

Fig. 4 - Diagrama de Hoefler Se esta clula for colocada num meio hipertnico, ou deixada a secar ao ar, ela perder gua. Em consequncia dessa perda, o potencial de presso (turgidez) diminui rapidamente, sendo acompanhado por uma ligeira diminuio do s e por uma reduo do volume da clula. A certa altura, o protoplasto deixar de fazer presso sobre a parede e nesse momento p = 0 e o = s. Diz-se que foi atingido o ponto de plasmlise incipiente. Se a clula continuar a perder gua o plasmalema tende a afastar-se da parede (Fig. 5), verificando-se uma reduo do volume do protoplasma e uma diminuio significativa do s. A clula fica plasmolisada e, se a perda de gua ultrapassar determinados limites que leve rotura dos plasmodesmos, o processo torna-se irreversivel, acabando a clula por morrer.

Um aspecto importante que determina a forma das curvas na figura 4 a elasticidade das paredes celulares. Se a parede muito rgida, o potencial hdrico e os seus componentes variam rapidamente para uma determinada perda de gua; por outro lado, se as paredes so mais elsticas a variao daqueles parmetros faz-se mais lentamente. Trgida Plasmlise incipiente Plasmolisada Desplasmlise

Fig. 5 Plasmlise e desplamlise de clulas de Rhoeo discolor Embebio As superfcies hidroflicas (proteinas amido, argila, etc.) adsorvem gua e a tenacidade com que as molculas de gua so adsorvidas no s funo da natureza da superfcie, mas tambm da distncia entre a superfcie e as molculas de gua adsorvidas. A adsoro de gua por superfcies hidroflicas chamada embebio ou hidratao. O potencial matricial (m) , presso atmosfrica, a medida da tendncia que a matriz tem para adsorver mais molculas de gua. Esta tendncia ser igual tenacidade mdia com que as molculas da camada de gua retidas mais frouxamente (as mais afastadas) so adsorvidas. O potencial matricial expresso em unidades de presso e contribui para o valor do potencial hdrico. Apresenta valores negativos ou zero. Em geral, quando um coloide, presso atmosfrica, se encontra em equilbrio com a sua vizinhana, as molculas de gua mais frouxamente retidas possuem a mesma energia livre que as molculas de gua da vizinhana e, por conseguinte, o potencial matricial do coloide igual ao potencial hdrico da vizinhana. Num sistema de embebio o potencial matricial a componente mais importante do potencial hdrico do sistema. No entanto, como os materiais hidroflicos aumentam de volume quando embebem gua, se se encontrarem confinados podem desenvolver presses considerveis. Nestes casos o valor do potencial hdrico ser determinado por estes dois componentes: = m + p Para haver embebio de gua por um embebente necessrio que se verifiquem duas condies: 1. Que exista um gradiente de potencial hdrico entre o embebente e a soluo banhante (embebido) 2. Que exista afinidade entre os constituintes do embebente e as molculas do embebido. A rapidez e a extenso da embebio dependem de factores nomeadamente: Temperatura: - a embebio mais rpida para temperaturas mais elevadas, embora a quantidade final de gua embebida se mantenha igual

Potencial hdrico da soluo banhante: - quanto maior for o gradiente de potencial hdrico entre o embebente e a soluo banhante mais intenso ser o movimento da gua para dentro do embebente e maior ser a quantidade de gua embebida. Num sistema de embebio as molculas de gua adsorvidas superfcie das matrizes hidroflicas perdem energia no s calorfica mas tambm cintica. Este facto faz com que no sistema de embebio se observem variaes de volume e de temperatura como consequncia da embebio da gua. Assim a energia perdida sob a forma de calor faz com que a temperatura do sistema se eleve, enquanto que o volume final do sistema embebente-embebido seja menor que a soma dos volumes iniciais do embebente e do embebido tomados separadamente.

Fig. 6 A embebio muito importante no processo de germinao das plantas Medio do potencial hdrico e dos seus componentes nos tecidos vegetais Potencial hdrico Tendo em conta a importncia do potencial hdrico no movimento da gua e tambm o facto de vrios fnmenos fisiolgicos serem fortemente afectados pelo estado hdrico da planta, apresenta grande interesse a sua determinao experimental bem como os seus componentes. Deste modo, foram desenvolvidos vrios mtodos para medir o potencial hdrico de tecidos vegetais e os seus componentes. Mtodos de equilibrio: 1- Mtodo baseado na variao de peso ou de volume Coloca-se uma amostra do tecido em questo em cada uma de uma srie de solues de concentraes variaveis mas conhecidas de substncias como a sacarose , manitol ou polietilenoglicol (PEG). Pretende-se por este meio encontrar a soluo em que o volume ou o peso da amostra de tecido vegetal no se alterou, aps atingido o equilibrio. Isto significa que o tecido, mergulhado na soluo, no ganhou nem perdeu gua e, portanto, o tecido e a soluo possuiam o mesmo potencial hdrico. Como, presso atmosfrica

normal, o potencial de presso da soluo livre zero ento o potencial hdrico da soluo ser igual ao potencial osmtico e este pode ser calculado pela equao de van`t Hoff. Para determinar qual a soluo que apresenta o mesmo valor de potencial hdrico que a amostra de tecido vegetal projectam-se num grfico os valores da variao do volume, ou do peso, contra a concentrao da soluo. Nesse grfico o ponto em que a curva do volume corta a linha zero indica a soluo que apresenta o mesmo potencial hdrico que o tecido, no incio da experincia.

Fig. 7 Esquema do mtodo gravimtrico de determinar o potencial hdrico em cilindros de batata 2- Mtodo de Chardakov Em vez de se medirem as alteraes produzidas no tecido, podemos medir a variao da concentrao na soluo teste. Se a soluo se tornar menos concentrada, o tecido ter perdido gua. Para verificar qual a soluo teste em que no se observa qualquer variao de concentrao, prepara-se uma srie em duplicado de tubos de ensaio com concentraes gradualmente crescentes e cora-se ligeiramente com um pequeno cristal dum corante (ex. azul de metileno) uma delas.

Fig. 8 Esquema do mtodo de Chardakov ou da gota corada

As amostras de tecido so colocadas nos tubos de ensaio da srie no corada, onde se deixam ficar o tempo suficiente para se estabelecer o equilibrio (15 - 20 min.). Ao fim deste tempo, retiram-se as amostras das solues e coloca-se uma pequena gota da soluo corada equivalente em cada tubo. Se a gota corada subir, a soluo perdeu gua para o tecido, se a gota descer o tecido perdeu gua para a soluo, ficando esta menos densa. A soluo em que a gota difundir igualmente sem subir ou descer no ganhou nem perdeu gua porque tinha o mesmo potencial hdrico do tecido. 3 - Mtodo da bomba de presso de Scholander No caso dos ramos, folhas e caules isolados de plantas a transpirar, pode determinar-se directamente o potencial hdrico da seiva xilmica utilizando a cmara de presso de Scholander. O orgo isolado colocado na cmara ficando apenas exposta a seco de corte. A seiva xilmica, que se encontra sob tenso, retrocede quando o orgo seccionado. Faz-se elevar a presso dentro da cmara at a seiva xilmica aflorar de novo seco de corte do orgo. Nessa altura, considera-se que a presso aplicada na cmara equilibra as foras que retm a seiva e que correspondem ao valor do potencial hdrico da seiva. Como esta se encontra em equilibrio com as clulas dos outros tecidos vizinhos, considera-se ser este o valor do potencial hdrico dos tecidos destes orgos.

Fig. 9 Esquema do mtodo da bomba de presso de Scholander 4 - Mtodo psicromtrico O psicrmetro de termopares baseia-se no principio de que uma soluo ou amostra vegetal em equilibrio com a atmosfera envolvente possui o mesmo potencial hdrico e que este est relacionada com a presso de vapor relativa (e/eo) pela equao: = RT/V ln (e/eo) O mtodo psicromtrico consiste no clculo de atravs da medio da variao da temperatura observada na terminao dum sensor de temperatura (termopar) localizada no interior duma pequena cmara, onde tambm se encontra a amostra de tecido, provocada pela evaporao da gua duma gota colocada na extremidade do termopar Uma tcnica psicromtrica muito utilizada, chamada psicrometria isopistica, funciona assim: A amostra vegetal colocada numa cmara hermeticamente fechada a qual possui um sensor de temperatura (termopar) na extremidade do qual se coloca uma gota duma soluo de Conhecido. Inicialamente alguma gua da gota e do tecido evaporar-se- at que a atmosfera da cmara fique saturada de vapor de gua, ou perto disso. A partir desse momento, se o potencial hdrico do tecido vegetal e da soluo forem iguais, o movimento net de molculas de gua para e a temperatura da gota de soluo, medida pelo termopar, no varia relativamente temperatura exterior. Contudo, se o tecido tiver um mais baixo que a gota da soluo ento a gua evapora-se da gota e difunde atravs

da atmosfera da cmara sendo absorvida pelo tecido. A evaporao da gua da gota provoca o seu arrefecimento e a variao da temperatura ser medida pelo termopar. Se, pelo contrrio, o potencial hdrico da soluo for mais baixo que o do tecido, nesse caso, a gua difunde do tecido para a gota, fazendo elevar a temperatura desta, sendo a variao medida pelo termopar.

Fig. 10 Determinao do potencial hdrico pelo mtodo psicromtrico Deste modo, medindo a variao da temperatura do sensor para vrias solues de potenciais hdricos conhecidos, possivel, atravs dum grfico, determinar a soluo cujo ser exactamente igual ao do tecido, ou seja aquela em que a variao de temperatura no sensor seja zero. Por este mtodo tambm se pode determinar o potencial osmtico ( s) duma soluo. Deste modo, a determinao dos valores de s e p dum tecido vegetal pode fazer-se com os psicrmetros de termopares eliminando um dos componentes da equao = s + p e medindo o outro. Para isso, depis de medir o no tecido vivo, congela-se e descongela-se o tecido, rompendo, assim, as membranas. A rotura impede que se desenvolva turgidez e, embora o conteudo celular inumde as paredes os efeitos mtricos so pequenos podendo ignorar-se. Neste caso, = s. O valor de p calcula-se a partir da diferena entre o valor de do tecido vivo e o valor de tecido congelado / descongelado. Os potenciais osmticos da seiva extraida podem tambem ser determinados com um psicrmetro ou com um osmmetro crioscpico que mede a depresso do ponto de congelao. No entanto torna-se dificil obter uma amostra representativa da seiva celular Medio do potencial osmtico ( s) Mtodo plasmoltico Um dos procedimentos para medir o potencial osmtico dum tecido vegetal baseia-se no facto de que no ponto de plasmlise incipiente = s pelo que o potencial osmtico do

pois durante a extraco muito provavel que ocorra uma diluio com gua extracelular. tecido ser igual ao potencial hdrico da soluo que provoca plasmlise incipiente. O valor obtido por este mtodo deve ser corrigido para a variao do volume da clula. Para a determinao do potencial osmtico por este mtodo colocam-se as amostras do tecido vegetal numa srie crescente de solues de potencial hdrico conhecido e procurase aquela que provoca indcios ligeiros de plasmlise em 50% das clulas da amostra. Essa soluo ter um potencial hdrico igual ao potencial osmtico das clulas. Este procedimento particularmente indicado para certos tecidos epidrmicos com vacolo corado, em que fcil de visualizar, com a ajuda do microscpio, a separao incipiente da membrana citoplasmtica da parede celular. Noutros casos, essa visualizao dificil de verificar. Mtodo crioscpico Em muitos casos, o potencial osmtico do tecido determinado crioscpicamente, medindo o ponto de congelao do conteudo celular obtido por espresso? do tecido. Sabendo-se que uma soluo 1 molal apresenta uma depresso do ponto de congelao de 1,86 C e que o seu potencial osmtico de 2,27MPa (a 0C), pode relacionarse o potencial osmtico duma soluo desconhecida com o abaixamento do seu ponto de congelao (t) pela expresso: s = (2,27/1,86) t (MPa) ou s = 1,22 t (MPa) Medio do potencial de presso ( p) A medio directa do potencial de presso da maior parte das clulas vegetais dificil de fazer em virtude das suas pequenas dimenses. Assim, o valor do potencial de presso das clulas dum tecido vegetal , geralmente, determinada a partir da diferena entre o valor do potencial hdrico e o valor do potencial osmtico do tecido. No entanto, actualmente j possivel medir directamente o valor do potencial de presso de alguns tipos de clulas de maiores dimenses utilizando microsondas de presso (micromanmetros) cuja extremidade aberta inserida, atravs da parede, nas clulas. As primeiras microsondas eram tubos microcapilares de vidro com um extremidade fechada e a outra aberta e afilada. A presso dentro da clula era calculada com base na compresso que o conteudo da clula exercia sobre o gs que preenchia o microcapilar.)

Fig. 11- Esquema da utilizao duma micro-sonda de presso Actualmente existem verses mais sofisticadas que podem ser usadas em clulas de menores dimenses. Nessas verses o tubo microcapilar de vidro encontra-se preenchido

com um leo e ligado a um micrmetro e um detector (transductor) de variaes de presso muito sensivel (Fig. 11) Quando a extremidade do microcapilar penetra na clula, os fluidos da clula penetram no tubo fazendo recuar o leo. Rodando o parafuso do micrmetro faz-se voltar o fluido celular extremidade do manmetro, isto , restaura-se o volume original da clula. Neste momento, a presso dentro da clula equilibrada exactamente pela presso exercida no manmetro, a qual detectada pelo transductor de presso. Este aparelho permita tambm provocar pequenas variaes no volume celular e medir as alteraes de presso da resultantes.

Relaes Hdricas das Plantas Completas

Para o estabelecimento do equilbrio hdrico das plantas contribuem trs processos interligados que so: 1) A absoro da gua a nivel da raiz; 2) a transpirao que ocorre principalmente nas folhas; e 3) a conduo da gua (e sais minerais em soluo) nos elementos condutores do xilema, entre a raiz e as folhas. A gua que as plantas perdem por transpirao deve ser substituida em quantidades equivalentes por gua absorvida do solo pelas raizes. De facto, com excepo de algumas plantas que podem absorver alguma gua da atmosfera atravs das folhas ou de estruturas especializadas e das plantas aquticas que geralmente podem absorver a gua atravs de toda a superfcie em contacto com a gua, a maior parte das plantas terrestres obtm a gua que necessitam a partir do solo. Estabelece-se, um movimento contnuo de gua entre o solo e a atmosfera, passando pelo interior da planta, conhecido como contnuum solo-planta-atmosfera (SPAC). A gua do solo, contudo, est sujeita a foras diversas que condicionam a sua utilizao pelas plantas. Por isso, para uma melhor compreenso do processo da absoro radicular, convem conhecer alguns dos aspectos e propriedades do solo que afectam a disponibilidade da gua s plantas.

Fig. 12 Esquema mostrando o trajecto da gua desde o solo at atmosfera, passando pelo interior duma planta

O solo e a absoro da gua pelas plantas

O solo O solo um meio muito complexo que consiste em: uma fase slida formada por partculas inorgnicas resultantes da meteorizao das rochas, e por partculas de matria orgnica em diferentes fases de decomposio(hmus); uma fase lquida correspondente soluo do solo contendo solutos dissolvidos e uma fase gasosa que se encontra geralmente em equilibrio com a atmosfera exterior. Fazem ainda parte do solo seres vivos como algas, bactrias, fungos, nemtodes e vrios outros organismos. A fase slida do solo constituida por partculas de diferentes dimenses e natureza diversa. De acordo com o seu tamanho as partculas do solo podem classificar-se em areia grossa, areia fina, vasa (silte) e argila de acordo com a tabela seguinte. Tab. Classificao das partculas do solo e suas propriedades Tipo de partculas Tamanho em mm Reteno da gua Areia grossa 2.00 0.2 Fraca Areia fina 0.2 0.02 Fraca Vasa ou Silte 0.02 0.002 Boa Argila Menos que 0.002 Excelente Arejamento Excelente Excelente Bom Fraco

A proporo em que estes diferentes tipos de partculas entram na constituio dum solo determina a sua textura. Um solo que contenha menos de 15% de argila e vasa um solo arenoso, enquanto que um solo com mais de 40% de partculas de argila considerado um solo argiloso. Um solo com cerca de 40% de areia, 40% de vasa e 20% de argila chamado solo franco. As partculas individuais de areia e vasa dum solo encontram-se, geralmente reunidas por partculas de argila e hmus formando agregados complexos que determinam a estrutura desse solo. Por sua vez, a estrutura do solo influencia a porosidade do solo e, por consequncia, a capacidade de reteno de gua e arejamento do solo. A porosidade, ou espao poroso, refere-se aos espaos (canais) interligados situados entre as partculas do solo. Este espao poroso ocupa cerca de 40 60% do volume do solo. Reconhecem-se duas categorias principais de poros: os macroporos e os microporos ou poros capilares. Os solos em que predomina o primeiro tipo de poros (solos arenosos) possuem fraca capacidade de reteno da gua, mas so bem arejados. Por sua vez os solos argilosos em que predominam os microporos so solos compactos com grande capacidade de reteno de gua e fraco arejamento. A quantidade de matria orgnica (hmus) do solo influencia no s a sua estrutura como tambm a capacidade de reteno de gua e as suas qualidades nutritivas. A gua do solo Aps uma rega abundante ou chuvas prolongadas todos os espaos entre as partculas do solo ficam preenchidos com gua. O solo fica saturado, no podendo conter mais gua. Grande parte da gua que preenche os macroporos escoa-se para niveis inferiores do solo por aco da gravidade. Esta gua constitui a fraco gravitacional e no est disponivel para as plantas. A quantidade de gua expressa em percentagem por unidade de peso do solo seco que fica neste aps toda a gua gravitacional se ter escoado constitui o chamado ponto de capacidade de campo. Este valor varia com o tipo de solo, sendo relativamente baixo nos solos arenosos e bastante elevado nos solos argilosos. Com excepo de alguns

solos salinos a concentrao de solutos no ponto de capacidade de campo muito baixa e o valor do pontencial hdrico prximo de zero ( -0,01MPa).

Fig. 13 Aspecto de um solo saturado de gua (metade esquerda) e dum solo arejado (metade direita) A maior parte da gua que permanece no solo apesar da aco da gravidade preenche os canais capilares e os espaos intersticiais do solo podendo ser utilizada pelas plantas. Esta gua retida por foras de capilaridade chamada fraco capilar ou gua de capilaridade e encontra-se geralmente sob tenso. medida que o conteudo de gua do solo diminui, quer devido evaporao directa para a atmosfera, quer por ser absorvida pelas plantas, as foras que retm as molculas de gua aumentam, tornando-se cada vez mais dificil s plantas extrairem esta gua do solo. Quando as plantas que vivem num determinado local no conseguem retirar mais gua do solo murcham e no recuperam desse estado enquanto no for adicionada mais gua ao solo. Nesse momento atinge-se o chamado ponto de emurchecimento (murchido) permanente, o qual representa o limite inferior da gua do solo disponivel s plantas. A gua que ainda permanece no solo constitui a chamada fraco higroscpica e constituida principalmente pela gua de hidratao dos coloides do solo. A quantidade de gua presente no solo no ponto de murchido permanente tambm varia com o tipo de solo. No entanto, o valor do potencial hdrico neste ponto , com algumas excepes, independente do tipo de solo e situa-se por volta de 1.5 MPa. O conteudo de gua dum solo compreendido entre o ponto de capacidade de campo e o ponto de murchido permanente representa a gua disponivel para ser absorvida pelas plantas. Esse valor relativamente elevado nos solos siltosos e argilosos e baixo nos solos arenosos. A tabela seguinte apresenta valores tpicos para alguns tipos de solo. Tab. Percentagens tpicas para a capacidade de campo e ponto de murchido permanente de alguns solos. Tipo de solo Capacidade. de Ponto de murchido gua disponivel campo (%) permanente (%) (%) Areia 4.5 2.2 2.3 Vasa ou limo 18.4 12.6 5.8 Argila 45.1 26.2 18.9

Determinao da gua do solo A quantidade de gua presente numa determinada amostra de solo pode ser determinada por pesagens sucessivas da amostra antes e aps secagem a 105C durante 48 horas. Outros processos incluem a variao da condutibilidade elctrica de materiais porosos (gesso) mergulhados no solo (blocos de Buouyoucos), retardamento da transmisso de neutres lentos e tensimetro. Componentes do potencial hdrico do solo O potencial hdrico do solo pode ser separado em dois componentes: o potencial osmtico (s) e o potencial matricial (mais prpriamente uma presso hidrosttica negativa p). O potencial osmtico da soluo do solo geralmente negligvel ( -0.02MPa) com excepo de alguns tipos de solos (solos salinos) em que o potencial osmtico pode apresentar valores francamente negativos. O segundo componente (potencial matricial ou presso hidrosttica negativa) praticamente igual a zero nos solos fortemente humedecidos, mas baixa consideravelmente medida que o solo vai secando. Esta presso negativa resulta da adeso das molculas de gua s partculas do solo e tenso superficial desenvolvida na interfase gua-ar da gua contida nos interstcios capilares do solo. O seu valor ser tanto mais negativo quanto menos gua existir no solo. Movimento da gua no solo A gua desloca-se nos solos predominantemente por fluxo em massa, accionada por um gradiente de presso. Algum movimento pode tambm ocorrer devido difuso. medida que a gua na proximidade das raizes gasta o seu potencial de presso (ou matricial) baixa, estabelecendo-se um gradiente de presso com as regies vizinhas de maior conteudo hdrico. Dado que os espaos intersticiais preenchidos com gua comunicam uns com os outros, a gua desloca-se por fluxo em massa nesses canais em direco s raizes. A taxa de fluxo da gua no solo depende da magnitude do gradiente de presso (fora motriz) atravs do solo e da condutividade hidrulica (ou da resistncia) do solo. A condutividade hidrulica do solo, a qual mede a maior ou menor facilidade com que a gua se desloca atravs do solo, varia com o tipo de solo. Os solos arenosos tm condutividades hidrulicas elevadas, enquanto que os solos argilosos, com pequenos espaos entre as partculas, tm condutividades mais baixas. A condutividade hidrulica do solo depende ainda da quantidade de gua que nele existe. Assim, ser baixa nos solos secos (os espaos intersticiais ficam preenchidos com ar que impede o movimento da gua) e aumenta rpidamente quando o solo fica hidratado. Absoro da gua pela raiz O sistema radicular alm de fixar a planta ao solo, servir de local de acumulao e sntese de substncias diversas, tambm lhe permite-lhe obter a gua e os nutrientes minerais de que precisa. Para que a absoro da gua possa ocorrer necessrio que exista um gradiente de potencial hdrico entre a soluo do solo e o conteudo das clulas absorventes da raiz e que se estabelea um contacto ntimo entre a superfcie do sistema radicular e a gua do solo. A absoro da gua pelas raizes faz-se mais eficientemente nas zonas jovens prximo da extremidade da raiz e especialmente na zona de diferenciao ou maturao celular (ou zona pilosa), onde a presena de milhares de pelos radiculares aumenta enormemente a rea de contacto com a soluo do solo e o volume de solo explorado pela raiz. Pouca gua absorvida na zona meristemtica propriamente dita, provavelmente porque o

citoplasma destas clulas muito denso e porque no existem ainda diferenciados os tecidos vasculares que possam conduzir a gua para outras regies da planta.

Fig. 14 Aspecto duma raiz jovem duma planta mostrando as diferentes zonas morfolficas e da relao dos pelos radiculares com o solo Na zona de diferenciao celular, para alm da presena dos pelos radiculares, com as suas paredes altamente permeveis e grande volume vacuolar, os tecidos vasculares j comearam a diferenciar-se, enquanto que a deposio de suberina e lenhina na parede das clulas endodrmicas ainda muito incipiente, no oferecendo por isso grande resistncia ao movimento da gua em direco aos vasos lenhosos. As regies mais maduras da raiz possuem frequentemente uma camada exterior de tecido protector, chamada exoderme ou hipoderme, em que as paredes celulares em contacto com o solo possuem substncias hidrofbicas que as tornam relativamente impermeveis gua. Contudo, a presena de lentculas e os pontos de emergncia das raizes laterais, que quebram a continuidade do revestimento protector, permitem a entrada de quantidades significativas de gua no interior da raiz.

Fig. 15 Aspectos das micorrizas ectotrficas

Em muitas rvores, as raizes jovens no apresentam pelos radiculares. Em vez disso encontram-se envolvidas por densos revestimentos de hifas de fungos as quais, para alm de se estenderem a distncias consideraveis no solo, tambm penetram nos espaos intercelulares da zona cortical da raiz. Estas associaes entre hifas de fungos e o sistema radicular de plantas superiores so chamadas micorrizas (Fig. 15). Neste tipo particular de micorrizas chamado ectotrficas (ou ectomicorrizas) as hifas do fungo desempenham um papel particularmente importante na absoro da gua e de certas substncias minerais. Foras responsveis pela absoro da gua A entrada da gua na raiz faz-se sempre em resposta a um gradiente de potencial hdrico entre a soluo do solo e o conteudo das clulas da raiz ou, em ltima anlise, a gua dos vasos lenhosos. As foras responsveis pelo estabelecimento desse gradiente podem ser a suco ou aspirao (tenso) que a perda de gua ao nivel das folhas transmite superfcie da raiz, e/ou a diferena de concentrao de solutos entre a soluo do solo e o interior da raiz. Em qualquer dos casos a entrada da gua para a raiz sempre um movimento passivo sem necessidade de consumo directo de energia metablica para se realizar. Apesar disso tratamentos e condies que afectem o metabolismo da raiz, como baixas temperaturas, baixas presses de oxignio e inibidores respiratrios, tambm influenciam a absoro de gua pelas raizes. Este efeito , contudo, indirecto e deve-se, provavelmente, inibio do crescimento da raiz, a alteraes da permeabilidade das membranas biolgicas e inibio da absoro dos nutrientes minerais, com reflexos no movimento osmtico da gua. Factores que influenciam a absoro da gua A absoro da gua pela raiz das plantas afectada por vrios factores, incluindo a idade e o estado fisiolgico das plantas. Dentre esses factores podemos considerar factores ambientais e factores inerentes planta. Dentre os primeiros incluem-se factores do solo como a temperatura, a concentrao da soluo do solo, o arejamento e a disponibilidade de gua, e factores atmosfricos como a temperatura do ar, o vento e a luz. Os factores do solo afectam directamente o processo de absoro, enquanto que os segundos afectam principalmente a transpirao e s indirectamente a absoro. No que se refere aos factores inerentes planta podemos destacar a espessura da cutcula que reveste as folhas, a espessura do revestimento de pelos nas partes areas, a densidade de estomas nas folhas e o seu grau de abertura, a compacidade do mesfilo folear e o desenvolvimento do sistema radicular relativamente parte area. A maior parte destes factores afecta o fenmeno da transpirao e, apenas indirectamente, a absoro radicular. Movimento radial da gua na zona cortical da raiz A gua depois de ter sido absorvida pelos pelos radiculares ou pelas restantes clulas epidrmicas tem de atravessar a zona cortical da raiz e a endoderme antes de atingir os elementos do xilema no cilindro central. Nesse trajecto a gua pode seguir duas vias: 1) pelo apoplasto, isto pelo contnuo formado pelas paredes das clulas corticais e espaos intercelulares e 2) passando pelo interior das clulas (via celular). Nesta ltima podemos ainda distinguir duas alternativas: a) via simplasto, em que a gua depois de penetrar nas clulas perifricas da raiz atravessa o citoplasma das diversas camadas de clulas corticais e da endoderme passando dumas clulas para as outras atravs dos plasmodesmos; b) via transmembranar em que a gua entra e sai sucessivamente em cada uma das clulas das diversas camadas da zona cortical e da endoderme atravessando a membrana citoplasmtica e eventualmente o tonoplasto.

Na prtica as duas vias no so separadas pois a gua apoplstica encontra-se em equilbrio com a gua do interior das clulas. Isto significa que o movimento da gua atravs do cortex se faz pelas duas vias. O apoplasto ter provavelmente uma maior contribuio no processo por esta via oferecer menos resistncia ao fluxo da gua que a via celular. No entanto, ao nivel da endoderme, a gua apoplstica tem que passar pelo interior das clulas endodrmicas por as suas paredes radiais e transversais apresentarem faixas suberificadas (faixas ou bandas de Caspary) que representam uma barreira passagem da gua e das substncias nela dissolvidas para o interior do cilindro central.

Fig. 16 Vias do movimento radial da gua na raiz A resistncia que a zona cortical e a endoderme, oferecem ao movimento da gua desde o solo at aos vasos lenhosos bastante maior que a resistncia que o xilema oferece circulao da seiva, sendo, por isso, a principal causa do atraso que se observa na curva de absoro quando esta comparada com a curva de transpirao. A remoo das raizes faz desaparecer em grande medida esse desfasamento. Fora motriz do movimento radial O movimento radial da gua na zona cortical da raiz faz-se em resposta a um gradiente de potencial hdrico entre a soluo do solo e a soluo dos vasos lenhosos. Na criao desse gradiente participam dois componentes: a suco resultante da perda de gua por transpirao que coloca a gua do xilema sob tenso; e a componente osmtica resultante da secreo de ies no xilema. Duma maneira geral, a primeira componente (diferena de presso) mais importante que a segunda (diferena na concentrao de solutos) no estabelecimento da fora motriz responsavel pelo movimento da gua. Certas condies ambientais (baixas temperaturas e falta de oxignio) e tratamentos com inibidores respiratrios, aumentam a resistncia ao fluxo da gua atravs da zona cortical da raiz, provavelmente por inactivarem as aquaporinas ou atravs de outros processos ainda desconhecidos.

Ascenso da gua nas plantas

Anatomia da via de conduo A gua com sais minerais dissolvidos, depois de atingir os vasos condutores do xilema da raiz transportada em sentido ascendente em direco s folhas e outros orgos areos da planta, constituindo a chamada corrente de transpirao.

Que a gua e substncias minerais nela dissolvidas se deslocam no xilema pode ser comprovado fornecendo s raizes uma soluo dum corante ou dum radioistopo, ou ainda removendo os tecidos exteriores ao xilema em todo o permetro do caule duma planta. No primeiro caso o corante ou o radioistopo localizam-se essencialmente nos elementos condutores do xilema (embora possam ocorrem trocas laterais com os tecidos vizinhos e especialmente com o floema), enquanto que no segundo caso se verifica que a gua continua a chegar s folhas, apesar de se terem removido os tecidos exteriores ao xilema incluindo toda a zona cortical e tambm o floema. Tambm foi demonstrado (Strasburger e Boucherie) que as clulas vivas do xilema no desempenham qualquer papel importante neste movimento ascensional da gua, uma vez que a sua morte, provocada pela imerso da base seccionada do caule numa soluo de cido pcrico, no impede a soluo cida de ascender na planta e de atingir as folhas. Dos diversos tipos de clulas que constituem o xilema (fibras, parnquima e elementos traqueais) so estes ltimos que se encontram mais directamente envolvidos na conduo da seiva xilmica. Os elementos traqueais so de dois tipos: os traqueidos e os elementos de vaso.

Fig. 17 Xilema duma planta e elementos condutores da gua Tanto os traqueidos como os elementos de vaso so clulas tubulares alongadas, mortas na maturidade, com paredes secundrias lenhificadas e diversamente esculpidas. Os traqueidos so clulas individuais com dimetros compreendidos entre 10 e 50 m e, geralmente, menos de 1 cm de comprimento. O movimento da gua entre os traqueidos facilitada em zonas da parede secundria, conhecidas por pontuaes, em que a deposio dos materiais da parede secundria foi interrompida, ficando a parede dessas zonas restringida parede primria, que permeavel. As pontuaes das paredes de traqueidos adjacentes encontram-se justapostas formando pares de pontuaes, de tal forma que os lumina desses traqueidos se encontram separados, nessas zonas, apenas pelas chamadas membranas das pontuaes constituidas pelas paredes primrias e pela lamela mdia. Nos traqueidos com pontuaes areoladas a parte mediana da membrana da pontuao

encontra-se dilatada (trus) e pode funcionar como uma vlvula que fecha a pontuao quando a presso nas clulas condutoras adjacentes diferente. As extremidades afiladas de traqueidos sucessivos sobrepoem-se em certa extenso permitindo a passagem da gua de um traqueido para o seguinte ou para o traqueido que lhe fica ao lado, atravs dos pares de pontuaes existentes. Os vasos xilmicos so longos tubos constituidos pela associao topo a topo de vrias unidades de elementos de vaso, em que, na maturidade, as paredes terminais dos elementos de vaso se dissolveram ficando uma ou mais aberturas (perfuraes) que constituem as chamadas placas de perfurao. Nas paredes laterais dos elementos de vaso existem pontuaes semelhantes s dos traqueidos. Os vasos xilmicos apresentam calibres bastante maiores que os traqueidos e so tambm mais longos. Dado o seu maior calibre e extenso os vasos so considerados mais eficientes na conduo da gua e substncias minerais que os traqueidos. Mecanismos de ascenso da gua nas plantas A gua entra para a planta pelas raizes e perdida principalmente pelas folhas. A questo que aqui se coloca saber como feito o transporte da gua desde a raiz at ao topo das plantas, incluindo rvores com mais de 100 metros de altura. Neste caso, as foras necessrias para deslocar a gua a essas alturas so substanciais, (2,0 - 3,0 MPa) pois tm que contrariar a influncia da fora da gravidade sobre a coluna de gua, mas tambm a resistncia que a via de transporte (xilema) oferece ao movimento da gua. No que se refere ao mecanismo que gera essas foras existem duas possibilidades: 1) A gua pode ser bombeada (empurrada) de baixo para cima, ou 2) A gua pode ser aspirada de cima. Presso Radicular No primeiro caso inclui-se o fenmeno da presso radicular. A presso radicular uma fora (presso) positiva gerada na raiz de algumas plantas, que empurra a gua presente nos vasos do xilema para cima. Essa fora pode ser demonstrada se o caule duma planta envasada e bem regada for seccionado junto ao solo. Se as condies forem favorveis, a gua com substncias minerais dissolvidas sair sob presso atravs da seco de corte. O valor dessa presso pode ser medido se ajustarmos um manmetro seco de corte, podendo atingir valores da ordem de grandeza de 0.1 a 0.5 MPa. O desenvolvimento da presso radicular nas plantas est intimamente relacionada com a estrutura da raiz e com a absoro activa de ies do solo e a sua secreo e acumulao no cilindro central, nos vasos do xilema. A acumulao de solutos no xilema faz com que a gua se desloque do solo para o cilindro central empurrando a seiva presente nos vasos lenhosos que, deste modo, obrigada a subir na planta. A ocorrncia da presso radicular favorecida por condies que estimulem a actividade metablica da raiz, como temperaturas amenas (20-25C) e bom arejamento do solo (oxignio), humidade adequada do solo e ausncia de transpirao. Talvez por causa disso, a presso radicular mais evidente em certas horas do dia (normalmente durante o perodo nocturno) e em certas pocas do ano (princpio da primavera). Normalmente, no se observa na maior parte das rvores, nem nas plantas a transpirarem intensamente. Estes factos, associados com os fracos valores que a presso radicular normalmente apresenta, demonstram que esta hiptese no pode ser aceite como o principal mecanismo de ascenso da gua nas plantas, embora o fenmeno da presso radicular possa, em circunstncias especiais, contribuir para a circulao da gua. Intimamente associada com a presso radicular est o fenmeno da gutao. Este fenmeno consiste na emisso de gua na forma lquida em certos locais da margem das

folhas de certas plantas impedidas de transpirar. A gua sai atravs de aberturas especiais chamadas hidtodos ou estomas aquferos localizados no prolongamento das terminaes dos feixes condutores mais pequenos das folhas. Estas poros distinguem-se dos verdadeiros estomas por se manterem sempre abertos, e no possuirem qualquer mecanismo de regulao da sua abertura.

Fig. 18 Gutao numa planta de morangueiro e esquema mostrando a organizao dos tecidos na proximidade dum hidtodo Capilaridade Uma outra possibilidade a ter em conta seria a subida de gua por capilaridade no caule das plantas. A subida de gua em tubos capilares, como so os traqueidos ou os vasos lenhosos mais pequenos, est bem documentada. Este fenmeno chamado subida capilar ou simplesmente capilaridade, devido interaco de vrias foras. Estas incluem a adeso entre as molculas de gua e os grupos polares da parede do tubo capilar, a tenso superficial resultante da coeso entre as molculas da gua, e a fora da gravidade que actua sobre a coluna de gua. A altura a que a gua capaz de subir num tubo capilar inversamente proporcional ao raio do tubo. Deste modo, num vaso ou num traqueido com diametro de 50 m a altura a que a gua pode subir de apenas 0,6 metros, diminuindo essa altura drasticamente quando o dimetro do vaso aumenta. Por esse motivo a capilaridade apenas poderia explicar a ascenso da gua em plantas de pequenas dimenses. Teoria da tenso-coeso Excluidas as hipteses anteriores, resta, por conseguinte, a hiptese que considera que a gua aspirada (puxada) pela parte area da planta. Esta suposio apoiada por uma srie de observaes, as quais serviram de base chamada teoria da tenso-coeso proposta por Dixon e Joly e tambm por Askenasi por volta de 1914. Segundo esta teoria, a gua que se evapora das paredes das clulas do mesfilo para os espaos intercelulares circundantes tem que ser substituida (reposta) por gua retirada do citoplasma. Isto faz baixar o potencial hdrico dessas clulas o que lhes permite que retirem gua das clulas vizinhas. Estas, por sua vez, retiram gua doutras clulas

prximas e, por ltimo, as clulas localizadas junto aos elementos condutores do xilema acabam por obter gua directamente destes. Desta forma, a gua do xilema da folha colocada sob tenso (presso negativa) e esta, em virtude da coeso das molculas de gua, transmite-se a toda a coluna de lquido, ao longo da planta, incluindo a raiz. Ao ser retirada gua da raiz, o potencial hdrico das clulas absorventes diminui, aumentando a sua capacidade para extrairem gua da soluo do solo.

Fig. 19 Esquemas de montagens experimentais destinadas a demonstrar a teoria da tenso-coeso (esquerda) e alguns valores representativos do potencial hdrico ao longo do trajecto da seiva bruta (direita). A perda de gua por transpirao faz baixar o conteudo hdrico das folhas e estabelece-se um gradiente de potencial hdrico entre as folhas e a soluo do solo em contacto com a superfcie radicular. Este gradiente constitui a fora motriz que faz circular a gua no continuum solo-planta-atmosfera. A teoria da tenso - coeso assenta em trs pressupostos: 1) O valor do gradiente de potencial hdrico (fora motriz) entre as folhas e a soluo do solo tem que ser suficientemente grande para fazer chegar a gua s copas das rvores mais altas nas quantidades requeridas. 2) As foras de coeso entre as molculas de gua das colunas de seiva nos vasos lenhosos tm que ser suficientemente fortes para suportarem as tenses a que so submetida sem haver ruptura da continuidade dessas colunas de lquido. Num tubo de vidro de 500 m de dimetro so necessrias tenses superiores a 2 MPa para provocar essa rotura. Em capilares mais finos o valor aumenta consideravelmente. 3) A gua nos vasos lenhosos das plantas a transpirar activamente encontram-se necessriamente sob tenso. A estes critrios podemos ainda acrescentar um quarto que : As paredes dos vasos lenhosos tm que ser suficientemente fortes para suportarem o peso das colunas de lquido e as tenses a que estas esto sujeitas sem colapsarem.

Para validar a teoria deve ser possivel testar positivamente os pressupostos enunciados. Se a grandeza dos gradientes de potencial hdrico entre as zonas de evaporao (transpirao) e a raiz (ou a soluo do solo) parece ser mais que adequada (frequentemente superiores a 2-3 MPa) para justificar o movimento da gua nas plantas, as maiores dvidas que possam subsistir dizem respeito fora tensil da gua ou seja capacidade das coluna de lquido suportarem as elevadas tenses a que so sujeitas sem se romperem. De facto, quando as condies so favorveis transpirao e a gua disponivel no solo muito escassa, desenvolvem-se tenses muito grandes que as colunas de lquido que preenchem os vasos lenhosos, principalmente os de maior calibre, no so capazes de suportar intactas e cavitam. Este fenmeno da cavitao consiste na vaporizao repentina e localizada da seiva num determinado sector dum vaso lenhoso, provocando o embolismo, ou seja o preenchimento por uma bolha de gs desse sector. As tenses susceptiveis de causar cavitao variam com as espcies. A arquitectura dos vasos lenhosos, com as suas pontuaes areoladas que funcionam como vlvulas, e a tenso superficial na interface gs-lquido, impedem que a bolha de gs se espalhe por todo o vaso ou mesmo pelos elementos condutores vizinhos, e faz com que o embolismo fique restringido a um pequeno sector. No entanto a gua pode facilmente contornar a zona obstruida, atravs das clulas e vasos adjacentes e retomar depois o seu trajecto normal. Certas condies parecem favorecer a cavitao. So elas: Stress hdrico elevado, congelamento da seiva no inverno e aco de certos agentes patognicos. Apesar de ocorrer alguma cavitao, esta no generalizada e as foras de coeso entre as molculas de gua parecem ser, na maior parte dos casos, suficientemente fortes para suportar as tenses requeridas para fazer ascender a gua no caule das plantas. Apesar disso as plantas devem possuir mecanismos que permitam minimizar os efeitos da cavitao ou de repararem o embolismo, para a longo prazo poderem sobreviver. A estrutura dos elementos condutores o principal mecanismo de minimizar o efeito da cavitao, na medida em que, conjuntamente com a tenso superficial da seiva na interface gs-lquido, permite restringir o embolismo a sectores muito limitados do sistema condutor. Por outro lado, a presso radicular que se desenvolve durante a noite nas plantas herbceas, ou em certas pocas do ano no caso de algumas plantas lenhosas, pode facilitar a dissoluo das bolhas de gs e o enchimento com seiva dos vasos anteriormente obstruidos. Por sua vez, nas plantas lenhosas frequente elas fecharem os estomas nos perodos de maior transpirao a fim de reduzirem a taxa de cavitao. Tambm o facto das plantas lenhosas produzirem todos os anos (incio da primavera) novos elementos condutores pode servir para substituir os vasos xilmicos obstruidos por outros funcionais evitando assim os efeitos nefastos da cavitao. Que o conteudo dos vasos lenhosos das plantas a transpirar activamente se encontra sob tenso, no parece oferecer dvidas. Esta situao pode ser inferida a partir de vrias observaes, designadamente:

Fig. 20 Variao do dimetro do tronco duma rvore com as horas do dia (transpirao)

1) Quando se corta o caule de uma planta que est a transpirar a seiva nos vasos lenhosos retrocede bruscamente para ambos os lados, tal como sucede com um elstico que se rompe. 2) O dimetro do tronco das rvores varia durante as horas do dia, sendo menor nas horas de maior transpirao. 3) O movimento da seiva inicia-se de madrugada nas partes mais elevadas das plantas quando as folhas comeam a perder gua por transpirao. Esse movimento estende-se depois gradualmente em direco base do tronco e raiz. Velocidade A velocidade de circulao da seiva nas plantas depende fundamentalmente de dois factores: 1) Da grandeza do gradiente de potencial hdrico entre as folhas e a raiz; 2) Da resistncia ao fluxo da gua. O gradiente de potencial hdrico constitui a fora motriz e por isso quanto maior for o gradiente , maior ser a velocidade. Por outro lado, a velocidade de circulao aumenta quando diminui a resistncia ao fluxo. Assim, nos vasos de maior calibre a gua circula mais rapidamente que nos vasos mais estreitos ou nos traqueidos. Dum modo geral, a seiva apresenta picos de velocidade de circulao por volta do meio dia quando as condies atmosfricas so mais favorveis transpirao. Nas plantas com vasos de maior calibre (lianas) tm-se registado velocidades de transporte compreendidas entre 16 e 45 metros por hora, enquanto que nas plantas com vasos de menor calibre a velocidade de circulao est geralmente contida entre 1 e 6 metros por hora. A velocidade de circulao no xilema pode ser determinada recorrendo a corantes e radioistopos ou a sondas termoelctricas que aquecem ligeiramente a seiva num dado local dum caule, ou dum ramo, e detectam a sua passagem noutro ponto do percurso da seiva.

Fig. 21 Medio da velocidade de circulao da seiva xilmica

Transpirao
Cerca de 99% da gua absorvida pelas plantas libertada para a atmosfera na forma de vapor. Esta perda de gua na forma de vapor designada transpirao. Uma pequena poro da gua transpirada pode ser perdida atravs de pequenas aberturas, chamadas lentculas, existentes na casca de caules, rebentos e ramos jovens (transpirao lenticular), mas a maior parte da gua perdida atravs das folhas.

A grande capacidade das folhas para perderem gua est relacionada com a sua arquitectura interna, a qual est mais adaptada para suprir as necessidade da fotossntese do que para economizar gua. Deste modo, as folhas apresentam grandes superfcies atravs das quais se podem realizar trocas gasosas e, ao mesmo tempo, a evaporao de grandes quantidades de gua (Tab. ). Tabela. Quantidade de gua transpirada por uma nica planta durante uma estao de crescimento Planta gua perdida (em litros) Ervilhaca (Vigna sinensis) 49 Batateira (Solanum tuberosum) 95 Trigo (Triticum aestivum) 95 Tomateiro (Lycopersicon esculentum) 125 Milho (Zea mays) 206 O arranjo interno, muito disperso, das clulas faz com que cerca de 70% do volume seja ocupado por espaos intercelulares que comunicam com a atmosfera atravs dos estomas. As folhas possuem, ainda, um eficiente e muito ramificado sistema de nervuras que fornecem gua superfcie de evaporao interna. A gua perdida por transpirao ter que ser substituida por gua absorvida do solo pelas raizes e posteriormente deslocada para as folhas. A transpirao essencialmente um processo de difuso. O vapor de gua passa deste modo das superfcies de evaporao para a atmosfera livre onde arrastado pelos movimentos de turbulncia do ar. Como qualquer processo de difuso, a do vapor de gua obedece s leis de Fick e depende do gradiente de concentrao de vapor de gua (C) entre a folha e a atmosfera (fora motriz do processo) e das resistncias difuso que o vapor de gua encontra no seu trajecto T = C/r em que T a taxa de transpirao (g cm-2 s-1), C o gradiente de concentrao de vapor de gua (g cm-3) e r a resistncia difusiva total (s cm-1). Transpirao estomtica e transpirao cuticular Do vapor de gua transpirado pelas folhas, a maior parte perdida atravs dos estomas (transpirao estomtica, 90 a 95%), embora uma parte significativa se possa evaporar directamente da superfcie das clulas epidrmicas para a atmosfera (transpirao cuticular, 5 a 10%).

Fig. 22 Trajecto da gua durante a transpirao

As duas vias transpiratrias encontram-se a funcionar em paralelo, sendo a fora motriz da difuso (C) a mesma para ambos os tipos. Deste modo, a importncia relativa de cada uma delas depende das resistncias respectivas, sendo a transpirao total da folha a soma de ambas as modalidades. A resistncia cuticular, que determinada essencialmente pela espessura e composio da cutcula, muito maior que a resistncia estomtica quando os estomas esto abertos, mas em condies de seca, que provocam o encerramento dos estomas, a transpirao cuticular torna-se no principal processo de perda de gua pelas plantas. A transpirao estomtica pode ser considerado como um processo em duas etapas: 1) a evaporao da gua das paredes encharcadas das clulas do mesfilo ou das paredes internas das clulas epidrmicas, para os espaos intercelulares seguido da migrao do vapor de gua para o espao subestomtico; 2) difuso do vapor de gua do espao subestomtico para a atmosfera exterior atravs da abertura dos estomas. Por isso, a resistncia estomtica compreende vrios componentes: re = rw + ri + rp em que rw , ri , e rp representam respectivamente a resistncia das paredes das clulas do mesfilo, a resistncia dos espaos intercelulares e a resistncia do poro do estoma. Destas resistncias, de longe a mais importante a resistncia do poro a qual depende, de forma dramtica, do grau de abertura do estoma. A resistncia aumenta medida que os estomas se vo cerrando, sendo atranspirao estomtica abolida quando os estomas se encontram totalmente fechados. Deste modo, a regulao da abertura dos estomas o mecanismo mais importante de controlo da perda de gua pelas plantas. Antes de atingir a atmosfera livre, o vapor de gua tem ainda que atravessar a camada estacionria de ar, rica em vapor, que se deposita junto superfcie da folha. A resistncia que esta camada estacionria oferece difuso do vapor de gua depende da sua espessura. Por sua vez, a espessura depende da geometria e tamanho das folhas e da velocidade do vento (agitao do ar). O valor desta resistncia , portanto, variavel, sendo particularmente importante nos dias calmos, sem vento. Medio da gua transpirada A determinao da gua perdida por transpirao por uma planta ou por um orgo isolado duma planta pode fazer-se essencialmente por dois mtodos: 1) Mtodos baseados na variao de peso 2) Mtodos baseados nas trocas gasosas O primeiro caso aplica-se principalmente a pequenas plantas envasadas ou orgos isolados (folhas, pequenos ramos), mas tambm j tem sido usado em estudos agrcolas, no campo, com a construo de lismetros que so grandes recipientes cheios de terra, montados num sistema de pesagem e mergulhados no solo,. Se se tiver o cuidado de evitar trocas directas de vapor de gua entre o solo e a atmosfera, a variao de peso observado reflecte as perdas de gua ocorridas atravs das plantas. Os mtodos baseados nas trocas gasosas envolvem normalmente o encerramento duma folha ou ramo numa cmara transparente por onde passa uma corrente de ar, cujo teor em humidade conhecido. A transpirao pode ser calculada como a diferena entre a quantidade de vapor de gua presente no ar que entra na cmara e a quantidade de vapor de gua no ar que sai da cmara. Fisiologia dos estomas Dada a importncia de que se revestem os estomas na gesto dos recursos hdricos das plantas, conveniente conhecer um pouco melhor os aspectos relacionados com a sua estrutura e a sua fisiologia.

Estrutura e distribuio dos estomas. O nmero de estomas por cm2 de rea folear varia muito de espcie para espcie, estando normalmente compreendido entre 1000 e 100000. De acordo com a distribuio dos estomas as folhas podem ser anfiestomticas (estomas em ambas as pginas) e folhas hipoestomticas (estomas restringidos pgina inferior). Mesmo nas folhas anfiestomticas a distribuio dos estomas no , na maior parte dos casos, uniforme sendo geralmente mais abundantes na pgina inferior (Tabela 2). O aparelho ou complexo estomtico (ou simplesmente estoma) constituido por duas clulas guarda (ou estomticas, ou oclusivas), que delimitam um poro, o ostolo, e, em muitos casos, pelas clulas epidrmicas adjacentes chamadas subsidirias, acessrias ou anexas que diferem na sua morfologia das restantes clulas epidrmicas

Fig. 23 Estrutura das clulas guarda As clulas guarda apresentam algumas caractersticas distintivas, tais como: 1) Capacidade para alterar rpida e reversivelmente a sua turgidez e, consequentemente, o seu volume; 2) Orientao radial das microfibrilhas de celulose na parede das clulas guarda o que determina uma menor elasticidade na direco longitudinal da parede interior (voltada para o ostolo), relativamente parede dorsal. Em alguns casos, a parede interna tambm mais espessa que a dorsal;

Fig. 24 Esquemas da distribuio das microfibrilhas na parede das clulas guarda e suas consequncias para o mecanismo de abertura dos estomas 3) Capacidade para atingirem uma concentrao de solutos mais elevada e, por conseguinte, uma maior turgidez, que as clulas vizinhas da epiderme;

4) Ao contrrio das outras clulas epidrmicas, as clulas guarda possuem cloroplastos; 5) Encontram-se simplasticamente isoladas das clulas vizinhas, no possuindo plasmodesmos, por isso, recebem a gua e solutos do apoplasto; 6) Apresentam formas caractersticas: nas dicotiledneas tm forma de rim enquanto que nas monocotiledneas apresentam forma de alter. O ostolo, quando completamente aberto, apresenta dimenses que variam de espcie para espcie. Contudo, elas encontram-se compreendidas entre: 3 - 12 m de largura e 10 - 40 m de comprimento. Mecanismo de abertura dos estomas um facto bem conhecido que os movimentos de abertura e encerramento dos estomas so consequncia de variaes na turgidez das clulas guarda. Nestas, um aumento de turgidez traduz-se numa abertura dos estomas, enquanto que uma diminuio da turgidez provoca o seu fecho. Tambm se sabe que estas variaes de turgidez so comandadas por alteraes do conteudo osmtico e pela entrada ou saida de gua da clulas guarda. Mais dificil de explicar o mecanismo responsvel pela induo das rpidas alteraes de conteudo osmtico nas clulas guarda. Ao longo do tempo tm sido apresentadas diversas explicaes para o facto, as quais, por uma razo ou por outra, se revelaram inadequadas. A teoria actualmente aceite foi elaborada com base em observaes que revelaram que a abertura dos estoma era precedida por uma acumulao macia de K+ nas clulas guarda e que o seu fecho se correlaciona com a diminuio da concentrao do mesmo io. Segundo esta teoria, a acumulao do io K+ obedeceria a um mecanismo quimiosmtico clssico que consistiria no seguinte:

Fig. 25 Niveis de K+, Cl- e Fsforo nas clulas guarda de estomas fechados e abertos No plasmalema das clulas guarda existem H+-ATPases activadas por baixos niveis de CO2 interno e outros sinais como a luz azul, as quais bombeiam activamente protes (H+) para o exterior, originando um gradiente electroqumico entre o exterior e o interior das clulas guarda. Os ies K+ entrariam para as clulas atravs de canais prprios, que respondem a diferenas de potencial elctrico transmembranar, aproveitando o gradiente de carga elctrica criado pelo excesso das cargas + dos protes no exterior das clulas. Para manter a neutralidade elctrica no interior das clulas necessrio que entrem para as clulas anies de compensao como os ies cloro (Cl-) ou, mais frequentemente, que sejam produzidos ies malato em resultado da ionizao do cido mlico (Fig. ).

O fecho dos estomas resultaria da desactivao da bomba de protes por aco do ABA e da saida passiva da clulas guarda de ies potssio, Cl- e ies malato ao longo dos seus gradientes de concentrao.

Fig. 26 Mecanismo quimiosmtico explicativo da abertura e encerramento dos estomas Controlo do movimento dos estomas Sendo os estomas simultaneamente a porta de entrada do CO2 para a fotossntese e de saida do vapor de gua da transpirao natural que os factores que controlam o movimento dos estomas reflitam a dupla funo destas estruturas. De facto o movimento dos estomas controlado principalmente por dois tipos de factores: 1) Factores relacionados com a necessidade de fornecer CO2 para a fotossintese; 2) Factores relacionados com a necessidade de conservar gua No primeiro caso incluem-se a concentrao intracelular de CO2 [CO2]i das clulas guarda e espaos intercelulares, cujo mecanismo de actuao ainda desconhecido, e a luz. Baixas concentraes internas de CO2 promovem a abertura dos estomas, enquanto que concentraes elevadas determinam o fecho dos estomas mesmo em presena da luz. A magnitude da resposta ao CO2 varia de espcie para espcie e tambm com o grau de stress hdrico a que a planta esteve ou est sujeita. A resposta variao da concentrao de CO2 rpida (apenas alguns segundos) e a sua percepo faz-se nas prprias clulas guarda. A luz promove a abertura dos estomas na maior parte das plantas de duas maneiras diferentes: Indirectamente atravs da activao da fotossntese nas clulas do mesfilo, para mdias e altas fluncias (intensidades). Espectros de aco deste processo mostram que so as radiaes PAR (fotossintticamente activas) as mais eficazes. O efeito da luz neste caso atribuido a uma reduo dos niveis de CO2 nos espaos intercelulares devido fotossntese nas clulas do mesfilo. Directamente, nas clulas guarda, a baixas fluncias, atravs dum fotorreceptor chamado criptocromo (provavelmente uma flavina ou flavoproteina) localizado no tonoplasto e, possivelmente no plasmalema, que absorve luz azul. Este sistema sensivel luz azul e luz vermelha, mas, a baixas fluncias, apenas a luz azul eficaz a promover a abertura

dos estomas nessas condies. Julga-se que a luz azul active a extruso de protes e a entrada de ies K+, nas clulas guarda e estimule a biosntese de malato; ambos os processos so pre-requisitos para a abertura dos estomas. Este sistema poder funcionar como um sinal promovendo a abertura dos estomas de manh cedo, preparando a planta para a realizao da fotossntese, e ao fim da tarde e, tambm, em condies de luz intermitente. No caso do segundo grupo de factores podemos apontar a temperatura, a humidade relativa atmosfrica e o estado hdrico da planta. Dado que as clulas guarda se encontram expostas directamente atmosfera elas podem perder gua por evaporao. Em determinadas condies, a gua perdida pelas clulas guarda pode exceder a gua que nelas entra. Neste caso, as clulas guarda perdem turgidez, ficam flcidas e os estomas fecham. Este tipo de encerramento chamado encerramento hidropassivo. Neste processo tem influncia, como evidente a humidade relativa atmosfrica que se encontra estreitamente relacionada com a temperatura do ar. Um outro tipo de resposta o que est relacionado com com alteraes do estado hdrico da planta que conduzam a situaes de stress hdrico. Este caso, chamado encerramento hidroactivo, ocorre quando a planta detecta um deficit hdrico e desencadeia um mecanismo que conduz ao encerramento dos estomas. O mecanismo hidroactivo envolve o fluxo dos mesmos ies que o encerramento normal, mas desencadeado por um deficit hdrico e mediado pela fitohormona cido abscsico (ABA). O ABA sintetizado em pequenas quantidades nos cloroplasros das clulas do mesfilo, onde se acumula. Quando as folhas so sujeitas repetidamente a deficits hidricos moderados o ABA acumulado libertado no apoplasto e da transportado para as clulas guarda na corrente de transpirao, onde d incio ao fecho dos estomas. Entretanto a folha acelera a produo de ABA para que os estomas se mantenham fechados e, desta forma reduzir a perda de gua por transpirao, enquanto durar a situao de stress hdrico. O ABA induz o fecho dos estomas afectando o funcionamento das bombas de protes da membrana plasmtica das clulas guarda e, deste modo, reduzindo a entrada de K+, e/ou estimulando a saida deste io dessas clulas.

Fig. 27 Factores que controlam o movimento dos estomas Em muitos casos os estomas das folhas podem fechar em resposta a sinais de deficit hdrico do solo detectado pelas raizes antes de as clulas do mesfilo foliar apresentarem qualquer reduo de turgidez. Neste caso haveria um aumento da sintese de ABA nas

clulas da raiz o qual seria transportado para a parrte area na corrente de transpirao, onde iria actuar, induzindo o fecho dos estomas. A temperatura pode influenciar a abertura dos estomas de vrias maneiras, na maior parte dos casos de forma indirecta. Assim, a temperatura afecta a actividade metablica das clulas estomticas e da folha em geral, a qual tem influncia na abertura dos estomas. A temperatura tambm afecta o equilibrio entre a respirao e a fotossntese e, deste modo, faz variar a concentrao intercelular de CO2. Por exemplo, temperaturas elevadas estimulam a respirao, mas podem reduzir a taxa da fotossntese, fazendo com que os niveis de CO2 aumentem e que, por conseguinte, os estomas fechem. A elevadas temperaturas correspondem normalmente baixas humidades relativas da atmosfera. Algumas plantas reagem s temperaturas elevadas e transpirao excessiva das horas do meio dia fechando transitriamente os estomas, os quais voltam a abrir mais tarde no dia quando as condies de temperatura e secura excessivas da atmosfera se alterarem. Ritmos circadianos e a abertura dos estomas Muitos fenmenos biolgicos apresentam flutuaes peridicas (com perodos de cerca de 24 horas) mesmo sob condies ambientais constantes. Por exemplo os estomas das folhas de Tradescantia continuavam a abrir e a fechar com o ritmo normal (cerca de 24 horas) durante pelo menos trs dias aps as plantas terem sido transferidas para condies de iluminao contnua. Estes resultados indicam o envolvimento dum ritmo circadiano endgeno no controlo da abertura dos estomas. Capacidade difusiva dos estomas O fluxo difusivo do vapor de gua entre dois compartimentos que comunicam entre si depende do gradiente de presso de vapor de gua entre os dois compartimentos (PH2O) e da condutividade (C) da superfcie de comunicao: Fluxo difusivo = PH2O x Condutividade Por sua vez a condutividade proporcional rea do orifcio atravs da qual se d a difuso e inversamente proporcional resistncia difuso oferecida durante o trajecto para o ambiente exterior (resistncia do poro + camada limitante). No caso dos estomas, a difuso de gases (CO2 e vapor de gua) mais eficiente do que seria de esperar se considerssemos apenas a sua rea. Assim a rea total dos poros dos estomas de uma folha no excede 0.5 a 2% da rea total da folha. No entanto a taxa de difuso dos gases referidos atravs dos estomas pode atingir 70% da taxa que difundiria atravs duma superficie livre equivalente rea total da folha. A explicao para este fenmeno reside no facto de a difuso de gases atravs de pequenos poros ser proporcional ao permetro do orifcio e no sua rea. Por sua vez, este facto resulta de as molculas difundirem mais facilmente junto s margens (permetro) do que pelo centro do orifcio, por a resistncia difuso causada pela acumulao de molculas do gs na parte central da zona (calota) exterior ao orifcio ser maior que nas margens. Ora, quanto menor for o orifcio, maior ser a sua razo permetro/rea. Deste modo, se tivermos muitos orifcios pequenos com a mesma rea que um nico orifcio grande o permetro total dos vrios orifcios pequenos ser muito maior que o permetro do orifcio grande, e portanto aqueles so mais eficazes na difuso. Medio do grau de abertura dos estomas A determinao do grau de abertura dos estomas pode fazer-se por medio directa sobre a epiderme ou moldes da epiderme das folhas, ou indirectamente com base na velocidade

de penetrao nas folhas de fluidos com diferentes viscosidades, ou pela utilizao de aparelhos chamados pormetros, dos quais existem vrios tipos (presso, difuso, steady-state, etc. Regulao da transpirao. O valor da taxa de transpirao afectado por vrios factores ambientais e por adaptaes das prprias plantas. Estes factores no actuam independentemente um dos outros podendo interagir entre si. Alem disso, o mesmo factor pode actuar a vrios niveis, o que torna a transpirao um fenmeno complexo e dinnico que se altera a todo o momento. Factores ambientais: 1) Humidade atmosfrica: - Para haver transpirao necessrio que o potencial hdrico da atmosfera seja menor (mais negativo) que o potencial hdrico da folha. Deste modo o ar seco aumenta o gradiente de potencial hdrico, favorecendo a transpirao.

Fig. 28 Variao da transpirao 2) Concentrao interna de CO2: -Embora a concentrao de CO2 na atmosfera se mantenha praticamente constante, a concentrao de CO2 no interior das folhas varia bastante principalmente por aco das actividades fotossinttica e respiratria. Baixas concentraes de CO2 nos espaos intercelulares faz com que os estomas abram e que a transpirao aumente. O oposto acontece quando a concentrao de CO2 aumenta. 3) Vento: - Junto superfcie das folhas a transpirar acumula-se uma camada de ar rico em vapor de gua, chamada camada estacionria ou circundante (boundary layer) a qual reduz o gradiente de presso de vapor entre o interior da folha e a atmosfera e, por conseguinte, diminui a transpirao. O vento remove esse ar rico em vapor de gua, substituindo-o por ar seco. Por esse motivo, aumenta a transpirao.

Fig. 29 Variao da transpirao com a velocidade do vento

4) Temperatura do ar: - As folhas expostas directamente luz solar podem apresentar temperaturas bastante superiores s do ar circundante. Isso faz com que a presso de vapor (e o potencial hdrico) no interior da folha seja mais elevado e, deste modo, a transpirao aumenta. 5) Solo: Qualquer factor que afecte a disponibilidade da gua do solo afecta tambm a absoro. Por conseguinte, o conteudo de gua do solo tem influncia na transpirao. 6) Intensidade luminosa: A luz provoca geralmente a abertura dos estomas e, portanto, favorece a transpirao. A abertura e o fecho dos estomas so processos graduais que levam quase uma hora a completar-se. A luz promove a abertura dos estomas por mais que um processo: Indirectamente, favorece a abertura dos estomas atravs do seu efeito na fotossntese que reduz a concentrao de CO2 no interior da folha; por um processo directo que actua atravs de comprimentos de onda na gama do azul e em condies de baixa intensidade luminosa, promovendo a abertura dos estomas. Adaptaes da planta que afectam a transpirao Adaptaes fisiolgicas 1) Eficincia no uso da gua: A gesto do equilbrio entre a fotossntese e a transpirao cabe, em grande medida, aos movimentos de abertura e fecho das clulas guarda. A eficincia dessa gesto, isto , o consumo de gua relativamente fixao do CO2 varia de planta para planta e pode definir-se como a quantidade de gua perdida (em gramas) a dividir pela quantidade de CO2 fixado. Eficincia do Uso da gua = g de H2O perdida/ g de CO2 fixado Nas plantas C3 (ex. o tomateiro), a eficincia do uso da gua de cerca de 600. Por sua vez as plantas C4 (ex. o milho), que esto adaptadas a viver em ambientes mais quentes e mais secos, a eficincia de cerca de 300. Portanto estas plantas utilizam a gua mais eficazmente que as plantas C3. No entanto, as plantas CAM, como os cactos e outras suculentas, que geralmente vivem em ambientes ridos e muito secos, tm grande convenincia em economizarem a maior quantidade de gua possivel. Para conseguirem esse objectivo, essas plantas mantm os estomas fechados durante o dia e abrem-nos durante a noite quando as condies so menos favorveis transpirao. Nestas plantas, a eficincia do uso da gua de cerca de 50. Este melhor aproveitamento dos escassos recursos hdricos permite-lhes viver em ambientes em que outras planta no conseguem.

2) Absciso das folhas e dormncia: Estes so tambm meios eficazes para reduzir a transpirao, pois reduzem a superfcie atravs da qual pode ocorrer evaporaoda gua. A perda das folhas pode acontecer quando a gua ou a temperatura se tornam limitantes. Isto tanto pode acontecer no inverno, como durante perodos de seca prolongada. 3) Posio das folhas: Algumas plantas, como o eucalipto, podem reorientar as suas folhas relativamente ao sol de modo a receberem menos luz, evitando, assim, uma subida exagerada da temperatura e diminuindo a transpirao. 4) Produo de cido abscsico: Est provado que a acumulao de cido abscsico endgeno, ou aplicado exogenamente, nas clulas guarda conduz ao fecho dos estomas. Em perodos de seca prolongada a dessecao estimula a produo (sntese) de cido abscsico nos cloroplastos das clulas do mesfilo. Este cido abscsico transportado pela corrente de transpirao para as clulas guarda onde, aps atingir um determinado valor, induz o fecho dos estomas. Adaptaes estruturais So vrias as adaptaes estruturais que as plantas podem apresentar para reduzir a perda de gua. 1) Cutcula: O revestimento das superfcies areas por uma cutcula impermevel gua e aos gases reduz grandemente a perda directa de gua para a atmosfera pelas clulas da epiderme das folhas. Quanto mais espessa for a cutcula maior ser a proteco contra a perda de gua.

Fig. 30 Efeito da espessura da cutcula na transpirao (cutcula a negro) 2) Tricomas: Os tricomas tendem a aumentar a espessura da camada estacionria ou circundante que reveste as folhas. Alm disso, os pelos tambm reduzem a transpirao pelo facto de reflectirem a luz e impedirem que a temperatura da folha suba.

Fig. 31 Tipos de tricomas das plantas

3) Estomas afundados: Nas plantas com estomas afundados a camada estacionria (circundante) que envolve os estomas, mais espessa, dificultando a difuso do vapor de gua.

Fig. 32 Estomas localizados abaixo da superfcie da epiderme 4) Reduo da rea folear: Muitas plantas do deserto possuem folhas muito reduzidas e, por conseguinte, uma pequena rea atravs da qual pode ocorrer evaporao. Estas plantas so geralmente suculentas e armazenam grandes quantidades de gua nos seus tecidos. Os caules so verdes e substituem as folha na funo clorofilina. Gesto do equilbrio Fotossntese-Transpirao Depois de termos falado das principais interaces que afectam a transpirao e do modo como funcionam os estomas, estamos em condies de tentar compreender como as plantas gerem o dilema de precisarem de apresentar uma fotossntese suficientemente eficiente e ao mesmo tempo manterem a transpirao dentro de limites aceitveis. O modelo mais aceite para explicar a regulao deste equilibrio considera a participao de dois circuitos de feedback (retrocontrolo) (Fig. ):

Fig. 33 Mecanismos de retrocontrolo da abertura e fecho dos estomas Um fiscaliza as necessidades da fotossntese, medindo a concentrao interna de CO2 e que funciona do seguinte modo: 1) A fotossntese reduz a concentrao de CO2 no interior da folha; 2) A diminuio da concentrao interna de CO2 faz com que as clulas guarda recebam K+ das clulas vizinhas; 3) A acumulao de K+ nas clulas guarda e o movimento osmtico de gua para dentro delas provoca a abertura dos estomas; 4) O CO2 atmosfrico difunde atravs dos estomas abertos para as clulas do mesfilo onde utilizado na fotossntese.

O segundo circuito protege contra a dessecao (desidratao) do seguinte modo: 1) A dessecao estimula a sntese do cido abscsico nos cloroplastos das clulas do mesfilo; 2) O cido abscsico translocado para as clulas guarda na corrente de transpirao; 3) O cido abscsico estimula a saida de K+ para fora das clulas guarda; 4) A perda de K+ provoca o fecho dos estomas. Com os estomas fechados as plantas economizam (conservam) gua. Com estes dois circuitos de retrocontrolo, as plantas garantem que os estomas abram quando a luz suficiente para que se realize a fotossntese e que fechem quando os riscos de desidratao excedem os eventuais benefcios da fotossntese.

Atraso na absoro e ajustamento osmtico

Raizes e o atraso da absoro Quando a taxa da transpirao aumenta, a taxa com que a gua fornecida s folhas tem tambem que aumentar e isso s pode ser conseguido se aumentar o gradiente de potencial de gua ao longo do trajecto entre as raizes e as folhas. Este ajustamento leva algum tempo devido resistncia ao movimento da gua ao longo da via, resultando um desfasamento (atraso) entre a absoro radicular e a transpirao foliar.

Fig. 34 Curvas da variao diria da transpirao e da absoro de gua A extenso do atraso do fornecimento de gua s folhas depende da magnitude da maior resistncia ao fluxo da gua ao longo do trajecto e, no caso do solo se encontrar bem hmido, essa resistncia limitante est localizada na raiz. Essa forte resistncia deve-se principalmente necessidade da gua atravessar as membranas citoplasmticas, pelo menos, ao nivel das clulas da endoderme da raiz. Removendo as raizes reduz-se o atraso no fornecimento.

Fig. 35 Demonstrao da resistncia das raizes no fornecimento de gua para transpirao

Uma consequncia do atraso da absoro relativamente transpirao que, durante o dia, quando as taxas de transpirao so elevadas, a gua tende a sair das clulas situadas prximo da via principal (ex. clulas vivas do parnquima xilmico) e a passar para os vasos condutores o que faz com que diminua o dimetro do tronco das rvores nesses perodos. Durante a noite, as clulas re-hidratam-se e o dimetro do tronco volta aos seus valores normais. Condies que favorecem o atraso na absoro Certas condies ambientais e estruturais da planta podem aumentar consideravelmente o atraso da absoro de tal forma que por vezes podem causar a morte da planta mesmo havendo gua no solo.Por exemplo: 1) Baixas temperaturas do solo: Esta situao aumenta a resistncia hidrulica das membranas das clulas da raiz, reduzindo a taxa do movimento da gua atravs delas. Raizes sujeitas a baixas temperaturas combinado com temperaturas foliares elevadas, ventos fortes e ar seco (condies que favorecem a transpirao) podem provocar a morte das plantas por desidratao. As plantas de clima quentes so particularmente susceptiveis a estas condies. 2) Fraco arejamento do solo: Esta condio, especialmente quando combinada com situaes de rpida transpirao, pode tambem causar a morte das planta por desidratao. A falta de oxignio faz com que as raizes recorram fermentao glicoltica para produzir energia. A acumulao dos produtos da fermentao nas raizes tende a provocar danos e a aumentar a sua resistncia hidrulica. Alm disso, a escassez de ATP restringe a capacidade das raizes absorverem ies activamente o que impede a criao dum gradiente de potencial hdrico adequado para a absoro da gua do solo. 3) A estrutura da raiz, a presena duma endoderme com paredes celulares impermeveis e todos os factores que restrinjam o movimento da gua atravs da raiz ou afectem a sua capacidade para acumularem ies influenciam igualmente a magnitude do atraso da absoro. Osmoregulao e a resposta secagem do solo medida que o solo seca o potencial hdrico da soluo do solo diminui (torna-se mais negativo) e a resistncia hidrulica aumenta. Ambos os factores reduzem o fluxo de gua para dentro das raizes e a maneira que as plantas tm de compensar isto fazer baixar o potencial hdrico destas. Tal objectivo pode ser conseguido baixando o potencial osmtico (aumentando a concentrao de solutos) ou diminuindo a presso de turgescncia das clulas absorventes. Na maior parte dos casos, actua a primeira opo, isto , o abaixamento do potencial osmtico em consequncia dum aumento da acumulao de ies inorgnicos e tambem parcialmente pelo aumento dos niveis de solutos orgnicos. Um tal ajustamento osmtico ou osmoregulao pode ocorrer sem que se verifique reduo do turgor das raizes, o que muito importante pois o turgor essencial para a expanso celular e para o crescimento das raizes. Quando as taxas elevadas de transpirao so muito elevadas o gradiente do potencial hdrico atrvs da planta aumenta e o potencial hdrico da raiz pode baixar por a gua das clulas vivas passar para os vasos do xilema e nesse caso o turgor das raizes diminui. Nestas circunstncias, as raizes podem encolher causando uma reduo do crescimento das raizes e, tambem, uma diminuio do contacto destas com as partculas do solo. Na figura seguinte apresenta-se um modelo das variaes do potencial hdrico que ocorre nas folhas e na raiz medida que o solo se vai tornando progressivamente mais seco. Todos os dias se verifica um ciclo dirio de stress hdrico (falta de gua) provocado pela transpirao, elevada resistncia nas raizes e danos causados pelo embolismo e cavitao

no xilema; quer isto dizer que as folhas perdem gua mais rapidamente do que o xilema a pode transportar e, por conseguinte, as folhas desidratam-se e o seu potencial hdrico torna-se mais negativo. Durante a noite os estomas fecham e a gua transportada no xilema rehidrata os tecidos da folha, mas em cada ciclo (isto de dia para dia) as folhas secam mais que na noite anterior. Isto, contudo no muito grave enquanto o potencial hdrico diurno das folhas no se tornar mais negativo que o ponto de emurchecimento (linha tracejada). Quando as folhas murcham muitos processos metablicos so afectados negativamente. Os pontos de emurchecimento variam de espcie para espcie sendo em geral mais negativos para as plantas xerfitas que para as plantas msicas. Quando o solo se torna extremamente seco a rehidratao nocturna no consegue trazer o potencial hdrico acima do ponto de emurchecimento. A planta encontra-se ento no ponto de emurchecimento permanente e podem ocorrer danos graves. Todo o crescimento pra e as folhas, as gemas florais e frutos em desenvolvimento podem morrer e cairem.

Fig. 36 Variao do potencial hdrico do solo, da raiz e das folhas duma planta durante alguns dias O efeito na planta destes ciclos dirios de baixo potencial hdrico depende em grande medida do grau de recuperao do xilema da cavitao e, tambem, do facto de haver ou no osmoregulao nas folhas. Se no ocorrer, ento o abaixamento do potencial hdrico

Fig. 37 Alteraes do potencial hdrico e do potencial osmtico das folhas com a diminuio do potencialhdrico do solo em plantas sem e com osmoregulao

da folha provocar uma diminuio do turgor da folha, o que pode induzir o fecho dos estomas e reduzir a expanso das folhas jovens. Esta situao ilustrada pela linha mdia tracejada na figura anterior, em que o valor da presso de turgescncia dada pela distncia entre esta linha e a linha que indica o potencial hdrico. A linha inferior a cheio indica o que acontece quando ocorre osmoregulao; neste caso, a turgidez da folha mantida constante durante 4 ou 5 dias de secagem do solo e o emurchecimento das folhas s ocorre ao fim de 7 dias. A capacidade de osmoregulao envolve dois processos distintos, dos quais o mais importante para o abaixamento do potencial hdrico das clulas a acumulao no vacolo de ies inorgnicos e de solutos orgnicos carregados electricamente. Contudo, o vacolo e o citoplasma devem estar em equilbrio osmtico e o aumento da concentrao de ies no citoplasma no pode ocorrer indiscriminadamente sob pena de ir afectar a conformao e o funcionamento de macromolculas, especialmente proteinas. Ajustamento osmtico do citoplasma. O citoplasma em vez de acumular solutos inicos, sintetiza e acumula molculas orgnicas sem carga elctrica, as quais parecem no afectar o funcionamento das proteinas e so designadas por solutos compatveis. Nas angiosprmicas, dois dos compostos mais frequentes com essas funes so o amino cido prolina e o composto quaternrio de amnio betaina. Nas clulas das plantas superiores o ajustamento osmtico pois feito pela acumulao de ies e por vezes solutos orgnicos no vacolo e pela acumulao de solutos orgnicos compatveis no citoplasma. Pensa-se que o controlo destes ajustamentos feito a partir de receptores de presso existentes no plasmalema, sensveis a variaoes da turgidez das clulas, e que quando esta desce abaixo de determinados valores desencadeiam a sntese ou a acumulao activa daqueles solutos.