BIOMETRIA HEMATICA

La Biometria Hemtica tambin denominada Hemograma, es uno de los estudios de rutina de mayor importancia, ya que la informacin que de aqu se deriva nos proporciona una idea muy confiable del estado general de la salud del paciente, consta de 2 bloques: Formula Roja: Determina los parmetros relacionados con el eritrocito. Formula Blanca: Determina los parmetros relacionados con los leucocitos. Formula Roja:La determinacin de la frmula roja se compone de los siguientes parmetros: A. Hematocrito (Ht): Es el porcentaje de la sangre que est compuesta por eritrocitos. B. Hemoglobina(Hb): Es determinada la cantidad de esta protena expresada en g./dl. C. Conteo eritroctico(Eri): Es la cantidad total de eritrocitos circulantes por microlitro de sangre. Algunos factores que afectan hematocrito, hemoglobina y conteo eritroctico son: 1. Cambios que inciden directamente en la circulacin de eritrocitos: Valor disminuido: Se denomina anemia, los tres parmetros disminuyen aunque este decremento puede ser desproporcionado cuando existen cambios en el tamao eritroctico y/o la cantidad de hemoglobina contenida en ellos, por lo que el clculo e interpretacin de los ndices de la formula roja son de ayuda en estos casos. Valor aumentado: Denominado policitemia, donde aumente el nmero de eritrocitos circulantes denominadopolicitemia absoluta, tambin puede darse un aumento transitorio en los eritrocitos circulantes denominadopolicitemia relativa (descritos posteriormente). 2. Cambios en el volumen plasmtico: Valor aumentado: Se presenta en estados de deshidratacin. Valor disminuido: Se presentan en sobrehidratacin con fluidos administrados parenteralmente dando una lectura que simula anemia.

D. Indices eritrocticos: Determinados mediante clculos matemticos.

1. Volumen Globular Medio (VGM): (Ht. x 10 / Eri), Es el tamao eritroctico expresado en femtolitros y se comporta de la siguiente forma: Valor aumentado: Se presenta en anemia macroctica en la que la interferencia en la sntesis del ADN causa inhibicin de la divisin celular y la resultante es la aparicin de eritrocitos de

gran tamao (como ocurre en los casos de deficiencia de vitamina B12 y cido flico). Tambin aumenta transitoriamente en los casos de reticulocitosis (anemia regenerativa). Valor disminuido: Se presenta en casos de deficiencia de hierro 2. Hemoglobina Globular Media (HGM): (Hb. x 10 / Eri.), Se refiere a la cantidad de hemoglobina depositada en el eritrocitos expresada en picogramos. Valor aumentado: En los casos de hemolisis tanto in vivo como in vitro; la hemoglobina extracelular tambin est implcita, aunque el ndice asume que toda la hemoglobina es intracelular por lo que se debe interpretar con reservas. Durante la reticulocitosis permanece normal o ligeramente elevado. Valor disminuido: En los casos de deficiencia de hierro. 3. Concentracin de Hemoglobina Globular Media (CHGM): (Hb x 100 / Ht) Es la cantidad de hemoglobina que est relacionada directamente con el eritrocito. Es el ndice ms preciso, ya que no requiere del conteo total de eritrocitos circulantes. Valor aumentado: En los casos de hemolisis tanto in vivo como in vitro, as mismo puede incrementarse en los casos de esferocitosis marcada. Valor disminuido: En los casos de reticulocitosis y deficiencias de hierro. E. Morfologa eritroctica: Es determinada en el frotis sanguneo. 1. Rouleaux: Es el agrupamiento de eritrocitos a manera de monedas amontonadas, es debido a una tendencia de sedimentacin en forma paralela, trastorno que se relaciona con el incremento en la concentracin de fibringeno y/o el cambio en las concentraciones de globulinas. En caninos y felinos puede presentarse en condiciones normales en un grado moderado y es muy marcada en casos de enfermedad inflamatoria y neoplasias. En equinos sanos es comn desapareciendo en casos de anemia. 2. Aglutinacin eritroctica: Cuando se forma un acumulo de eritrocitos, ocurre generalmente en los casos deanemias inmunomediadas, puede ser observada en las paredes del tubo colector como pequeos grumos. 3. Anisocitosis: Es la variacin en el tamao de los eritrocitos donde aparecen macrocitos y/o microcitos a lado de clulas de tamao normale, se presenta como respuesta en anemias de tipo regenerativo. Macrocitos: Son eritrocitos de gran tamao que provocan incremento en el VGM, (reticulocitos) aparecen generalmente en anemias regenerativas. Microcitos: Son pequeos eritrocitos con un VGM disminuido que son observados en casos de anemias dadas por deficiencia de hierro y piridoxina generalmente.

4. Esferocitos: Son considerados microcitos que cuentan con una membrana celular reducida, lo que incrementa la permeabilidad hacia el sodio, son casi exclusivos de caninos y se presentan generalmente en anemias de tipo autoinmune y en anemias hemolticas isoinmunes as como despus de una transfusin. Son removidas rpidamente de la circulacin por los macrfagos esplnicos, debido a su falta de elasticidad y a que no estn habilitadas para traspasar los poros capilares esplnicos. 5. Policromasia: Es una variacin en la afinidad eritroctica hacia el colorante, donde existe un tono azuloso en las clulas que contienen residuos de ARN, eritrocitos que generalmente son grandes y se consideran reticulocitos. La presencia de policromasia est asociada con el incremento de la actividad eritropoyetica como respuesta a unaanemia, catalogada como regenerativa cuando esta presente. 6. Hipocromia: Se refiere a la presencia de palidez marcada en la regin central del eritrocito dado por la disminucin en la concentracin de hemoglobina dentro de la clula, la causa ms comn en la que se presenta es la deficiencia de hierro. 7. Poiquilocitosis: Son clulas anormales en su forma comnmente encontradas en anemias debidas a la prdida crnica de sangre o a enfermedades caracterizadas por fragmentacin eritroctica, clulas que son retiradas prematuramente de la circulacin agudizando el estado anmico. Los acantocitos, son un tipo de poiquilocitosis. 8. Leptocitos: Son clulas delgadas que cuentan con una membrana celular grande observadas en enfermedades crnicas debilitantes que producen anemia. 9. Estomatocitos: Son eritrocitos con una forma oval hacia el centro que se observa en la estomatocitosis hereditaria del Alaska malamut y en enfermedades hepticas. 10. Clulas en diana: Son clulas con forma de tiro al blanco que se presentan en anemias de tipo regenerativo junto con policromasia, aunque cuando se presentan y no existe policromasia se pueden relacionar con enfermedad renal, heptica o esplnica. 11. Cuerpos de Howell-Jolly: Son remanentes nucleares observados frecuentemente como consecuencia de un estado anmico en procesos regenerativos, no obstante si son numerosos pueden indicar hipoesplenismo.. 12. Cuerpos de Heinz: Son estructuras localizadas en la membrana eritroctica producto de la desnaturalizacin de la hemoglobina causada por la accin oxidante de ciertas drogas o qumicos, estos cuerpos desorganizan la membrana eritroctica y se asocian con hemolisis intravascular. 13. Cuerpos eritrocticos refrctiles: Se localizan en estados normales en aproximadamente el 10% de los eritrocitos del gato, se incrementan en la presencia de diversas enfermedades, en muchas ocasiones juegan un papel importante en el desarrollo de la anemia.

14. Eritrocitos nucleados (Rubrocitos y Metarrubrocitos): Se deben a la liberacin de clulas eritroides inmaduras hacia la circulacin sangunea en los casos de anemia, aunque pueden ser observadas en casos de enfermedad de la mdula sea donde existe dao en el parnquima que afecta la barrera capilar, as como en casos de leucemia. F. Determinacin de Reticulocitos (Ret): Los reticulocitos son clulas eritroides inmaduras que en su citoplasma cuentan con remanentes nucleares de ARN, en el canino, felino y suino, representan aproximadamente el 1% en la circulacin sangunea en condiciones normales, presentan un incremento en los casos de anemias de tipo regenerativo. En algunos laboratorios el conteo de reticulocitos se hace por medio del uso de tinciones como Giemsa en un frotis sanguneo ordinario, aunque la determinacin ms exacta se realiza por medio de tinciones supravitales especificas como la de azul de cresil o la de nuevo azul de metileno, su valoracin se realiza en base a los siguientes parmetros: 1. Porcentaje relativo de reticulocitos (PRR): Se obtiene al realizar varios conteos de 100 clulas eritroides, obteniendo el porcentaje correspondiente a aqullas que son compatibles con reticulocitos, en la mayora de las ocasiones expresa un valor que no es real, dando una falsa impresin diagnstica debido a lo siguiente: ste menor nmero de eritrocitos maduros circulantes que se mezclan con reticulocitos recin liberados de la mdula sea y una relativa reticulocitosis es observada. a un estado anmico los reticulocitos ms inmaduros son liberados, clulas que persisten como reticulocitos por periodos ms prolongados en la sangre antes de convertirse en eritrocitos maduros. Para lograr una correccin del porcentaje relativo de reticulocitos cuando se presentan los problemas descritos anteriormente se determina lo siguiente: 2. Conteo absoluto de reticulocitos (CAR): (PRR x Eri). Este parmetro corrige la falsa impresin de reticulocitosis expresada en el inciso anterior (1,a) debido a que se determina la cantidad total de reticulocitos circulantes. 3. Porcentaje corregido de reticulocitos (PCR): [(Ht obtenido / Ht normal) x PRR] Con la ayuda de este calculo se obtiene un porcentaje ms adecuado a la realidad en los casos donde no se conoce el conteo de eritrocitos circulantes, ya que se ajusta el porcentaje de reticulocitos observados en la muestra problema con respecto a un parmetro normal (considerado de 45%), sirve para determinar el IPR. 4. Indice de produccin de reticulocitos (IPR): (PCR / Tiempo de maduracin) Este ndice de correccin ha sido adaptado en el canino especficamente para corregir el problema descrito

en el inciso (1,b), ya que se utilizan diferentes tiempos de maduracin del reticulocito basndose en el hematocrito observado, algunos de estos tiempos son:

Hematocrito 45% 35% 25% 15%

Tiempo de maduracin 1 da 1.5 das 2 das 2.5 das

5. Interpretacin de los parmetros reticulocitarios: En el gato solamente son utilizados el PAR y el PCR debido a que la respuesta reticulocitaria de esta especie es menor a la del canino. Un incremento absoluto de reticulocitos indica una respuesta de la mdula sea, es comn en anemiashemorrgicas o hemolticas, aunque la reticulocitosis es ms marcada en la anemia de tipo hemoltico debido a que en esta no hay prdida de hierro y es fcilmente reciclable durante el proceso eritropoyetico. La reticulocitosis no se hace evidente hasta despus de 72 horas de que ocurre la anemia y puede alcanzar su mximo hasta los 7 das posteriores a su presentacin. Un ndice de produccin de reticulocitos mayor de 1 sugiere una anemia de tipo regenerativo. Indices entre 1 y 3 sugieren prdida sangunea. Indices mayores de 3 son indicativo de un proceso hemoltico.

G. Determinacin de plaquetas: Son estructuras producidas por los megacarioicitos en la mdula sea mediante el proceso de fragmentacin citoplasmtica, juegan un papel muy importante en la hemostasis, su variacin puede ser: 1. Trombocitopenia: Disminucin en el nmero de plaquetas circulantes, es el trastorno ms comn en los animales, generalmente acompaada con severos problemas de coagulacin, se puede deber a:

que excede la produccin ocurrida en trombocitopenias inmunomediadas (autoinmunes, isoinmunes o inducidas por drogas), Lupus Eritematoso, hiperestrogenismo, Afecciones por Ehrlichia, enfermedad causada por Riketsia, o secuestro esplnico, as como neoplasias como hemangiosarcoma. anemias aplsticas, enfermedad de la mdula sea y quimioterapia citotxica. Adems la trombocitopenia puede dar un cuadro de coagulacin intravascular diseminada, un sndrome que casi siempre acompaa a una enfermedad sistmica. 2. Trombocitosis: Incremento del nmero plaquetario. tos con sndromes

mieloproliferativos.

casos de neoplasia. anemias por deficiencias de hierro. Siempre que existan trastornos en la cuenta plaquetaria se debe considerar la determinacin de parmetros que intervienen en la coagulacin sangunea. Enfermedades hemorrgicas en los animales estn asociadas con la disminucin en el nmero plaquetario, as mismo las alteraciones en la morfologa del trombocito se observa en anemias regenmerativas, desordenes mieloproliferativos en el felino y en otros trastornos en la mdula sea. H. Velocidad de Sedimentacin globular media (Wintrobe): Es la precipitacin de los eritrocitos en un lapso de tiempo estandarizado (1 hora), se relaciona directamente con la tendencia eritroctica hacia la formacin de rouleau as como a la concentracin plasmtica de globulinas y fibringeno. OBJETIVOS: - Saber realizar las pruebas correspondientes a la sangre para saber el estado de salud de un paciente. - Conocer los trastornos y complicaciones que puede traer una deficiencia en la sangre MATERIAL: o o 5 ml de sangre venosa 1 Spectronic

o o o o o o o o o o o o o o o o o o o o MTODO: o o

1 microscopio 1 ligadura 1 microcentrfuga 1 boquilla 1 frasco con torundas alcoholadas 1 jeringa desechable de 5 ml 1 pipeta de Thoma para glbulos rojos 1 pipeta de Shalli 80.02 ml 1 tubo de ensaye o frasco con anticoagulante 1 cmara de Neubauer 1 tubo de Wintrobe 4 portaobjetos 2 tubos capilares 1 pipeta Pasteur con bulbo 1 gradilla para tubos de Wintrobe Solucin salina isotnica Reactivo de Drabkin Solucin buffer Colorante de Wright Aceite de inmersin

Obtuvimos sangre de un voluntario Se coloco en el tubo de ensaye con anticoagulante

Despus se tomo una parte y se coloco en el tubo de Wintrobe y se llevo a la gradilla Se obtuvo con esto la velocidad de sedimentacin eritrocitaria Despus para obtener el recuento total de eritrocitos se tomo otro poco de sangre y se aspiro con una boquilla en la pipeta de Thoma Se le agrego solucin salina isotrpica. Se agito y se depositaron 2 gotas en la cmara de Neubauer Se llevo a microscopio y se cont por cuadrantes el nmero de eritrocitos. Se toma la muestra en capilares para obtener el nivel de hematrocitos Por decantacin se coloca en los capilares y se lleva a la microcentrfuga Con la pipeta de Shalli se obtiene la determinacin de hemoglobina Se lee en el Spectronic El estudio morfolgico se realiz por medio de un frotis Se toma una o dos gotas de sangre y se colocan en un extremo del portaobjetos y con otro se extiende Se lleva al microscopio y se observa, en los objetivos ms pequeos primero y por ltimo en el de 100x, colocando previamente aceite de inmersin Se lleva la cuenta de los tipos de clulas en la sangre hasta alcanzar un total de 100

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