PRODUCCION DE ALGINATOS COMERCIALES A PARTIR DE ALGAS PARDAS PATAGONICAS

Introduccin Los alginatos son obtenidos a partir del procesamiento de una gran cantidad de especies de algas pardas entre ellas la Macrocistis Pyrifera muy abundante en todo el litoral Patagnico, pese a ello no existe en nuestro pas explotacin industrial del recurso. Presentan una amplia y creciente gama de aplicaciones industriales por sus propiedades como estabilizantes espesantes y formadores de geles siendo utilizados en forma mayoritaria por las industrias alimentaria, textil y farmacutica, fabricacin de pinturas, ablandadores de aguas y un gran conjunto de usos menores. Los principales mtodos de obtencin estn basados en la extraccin de los alginatos presentes en el alga en forma de sales, la posterior separacin de estas de la matriz slida y una purificacin final. En este trabajo se estudi la obtencin del cido algnico y sus sales de calcio y sodio se evalu el mtodo y se caracteriz el producto. En los ensayos realizados se evaluaron rendimientos y viscosidades. Los primeros estudios sobre la extraccin de alginatos a partir de las algas pardas datan del siglo diecinueve mediante los estudios del qumico britnico E.C.Stanford, quien encontr que la sustancia que denomino alginato posea varias propiedades interesantes como espesante, formador de geles y de pelculas, a partir de estos estudios l propuso varias aplicaciones industriales aunque la produccin a gran escala fue desarrollada mucho despus, Krefting (1896) obtuvo cido algnico puro, e investigadores posteriores determinaron muchas de las propiedades de las sales de este cido. Sin embargo, la produccin comercial de alginatos no comenz hasta el ao 1929 [8] y tuvo un notable incremento despus de la segunda guerra mundial con la instalacin de empresas extractoras en todo el mundo, la continuacin de la investigacin y su ampliacin dio lugar a una gran cantidad de datos sobre la estructura del cido algnico, las propiedades de sus soluciones y las reacciones qumicas de los alginatos. Usos y Aplicaciones

Actualmente los alginatos son uno de los biopolmeros ms verstiles para uso industrial, son usados para espesar soluciones, estabilizar suspensiones y emulsiones, para gelificar un amplio rango de mezclas y para formar pelculas sobre diferentes superficies Aprovechando estas propiedades, son usados en diferentes ramas de la industria; en la industria alimenticia, como aditivos por sus propiedades espesantes, emulsionantes (aceite-agua), estabilizantes, coloides protectores y texturizantes en distintos productos como helados, conservas, aderezos de ensaladas, embutidos, etc.; en la industria farmacutica, como agente fijador y emulsificante en la formulacin de comprimidos y otras formas farmacuticas y tambin como principio activo fundamentalmente en especialidades del tipo anticido; en la industria textil como aprestos, impermeabilizantes de tejidos y espesantes en el estampado; como estabilizante en pinturas al agua; en prtesis e impresiones dentales; como fundente de electrodos y otras de menor volumen.
Posibilidades de produccin en el Pas

Dentro del extenso litoral martimo de nuestro pas existen en las costas patagnicas (fundamentalmente Chubut y Santa Cruz) enormes praderas de Macrocystis pyrifera alga gigante del orden Laminariales que ha demostrado ser una importante productora de alginatos, se han realizado relevamientos de la ubicacin y magnitud de las mismas los que junto a mltiples

observaciones anteriores muestran la enorme disponibilidad de este recurso, pese a lo cual aun no existe explotacin industrial del mismo, la obtencin del material puede realizarse mediante la cosecha de los ejemplares dejados en la costa por la marea en importante cantidad o por cortes controlados en las praderas utilizando embarcaciones acondicionadas para ese fin.
Argentina es el nico pas del mundo con disponibilidad del recurso natural pero sin explotacin [8], por esta razn en el presente trabajo se desarrollan las caractersticas ms importantes de la fase productiva y las posibilidades de su subsiguiente desarrollo tecnolgico [13]. Estructura qumica y propiedades fsicas Qumicamente los alginatos son polmeros cuyas unidades monomricas son los cidos urnicos (azucares donde el grupo CH2OH del C6 ha sido reemplazado por un grupo COOH, una de las unidades deriva de la D- manosa y se llama cido D- manurnico (M) la otra es su epmero en C5, el cido L- gulurnico (G), si bien estos monmeros solo difieren en la configuracin del C5, hay una enorme diferencia entre ellos, ya que las conformaciones espaciales son diferentes lo que provoca una gran diferencia estructural entre los bloques polidricos [16], si bien los cidos algnicos son copolmeros lineales de ambos cidos por formacin de enlaces glucosdicos (1-4), no todos son iguales. Se encuentran bloques de homopolmeros tanto (G) como (M) y tambin heteropolmeros secuenciales alternados (GM). La distribucin de estos bloques determina las propiedades individuales del compuesto obtenido. Los cidos algnicos tienen un grado de polimerizacin variable entre 100 a 3.000 unidades, la relacin porcentual entre estos cidos es uno de los valores que caracteriza a un alginato, oscilando entre 0,4 a 2,4. La conformacin estructural es una de las caractersticas ms importantes de los alginatos y del cido algnico ya que reacciona con cationes polivalentes, por ejemplo el calcio, este se ubica en los espacios formados entre los bloques de cido glucornico, estructura conocida como caja de huevo figura 1. Esto permite la unin de dos cadenas de polmero con lo que se consigue aumentar mucho el peso molecular y el volumen de las molculas, aumentando por consiguiente la viscosidad, dentro del polmero existen las tres clases de bloques (M.M, G.G y M.G) teniendo estos ltimos alternancia uniforme [9], todas las uniones son 1-4 siendo las del cido manurnico de configuracin b y las del gulurnico de configuracin a, la reactividad con el calcio para la formacin de geles es una funcin directa de la longitud promedio de los bloques (G) [10], los alginatos que poseen grandes fracciones (G-G) presentan una fuerte capacidad gelificante. Las principales propiedades de los alginatos son la viscosidad y la capacidad gelificante:

FIGURA 1: En la figura se puede ver la formacin de la caja de huevo y la ubicacin de los iones polivalentes que sirven de enlace de dos molculas de polmero. Por lo tanto, la viscosidad de las soluciones de alginatos depende de la longitud de las molculas cuanto mayor sea la longitud de las cadenas ms alta ser la viscosidad para una

misma concentracin, al disolverse en agua las molculas se hidratan y aumenta su viscosidad. Las molculas disueltas no son

completamente flexibles, la rotacin a lo largo de los enlaces glucocdicos en los bloques G, se ve impedida dando lugar a un endurecimiento de la cadena. Estas soluciones son altamente viscosas. Los alginatos poseen distintas proporciones de monmeros gulurnicos y manurnicos distribuidos de diferentes formas, la principal propiedad que depende de esta distribucin es la capacidad de formar geles con cationes polivalentes con los cuales reacciona en forma cruzada como con el calcio, para que esto se realice, los alginatos deben poseer una cantidad suficiente del monmero gulurnico y una cierta proporcin de los mismos deben estar en bloque. Se pueden producir uniones intermoleculares mediante el calcio (u otros cationes multivalentes). Estos enlaces dan lugar a la gelificacin de la solucin, un gel de alginato no puede definirse como un slido o una solucin de forma categrica presentando un estado intermedio donde los puntos de unin intermolecular representan el estado slido [9]. Despus de la gelificacin las molculas de agua estn atrapadas en la matriz del alginato, pero todava tienen la posibilidad de migrar, esto es de gran importancia en muchas aplicaciones (por ejemplo: geles de alginatos para encapsular o inmovilizar clulas). La capacidad del gel para retener agua se debe a fuerzas capilares, los alginatos forman geles trmicamente estables su resistencia es generalmente independiente de la longitud de la cadena, en la medida que la cadena supere una cierta longitud critica (el grado de polimerizacin debera exceder 200 para lograr una resistencia ptima del gel) desde un punto de vista qumico la formacin de un gel clcico es un intercambio inico. El sodio (u otro catin de alginato soluble en agua) es intercambiado por el calcio. Es posible formar un gel de alginato sin involucrar el calcio u el entrecruzamiento por otro catin. Haciendo una solucin cida de alginato se formar un gel de alginato, esto ocurre cuando el polianin del alginato pierde su carga a bajos pH a medida que los grupos carboxlicos de los cidos urnicos aceptan protones, dando lugar a que las cadenas de alginatos se aproximen mas lo que favorece la formacin de enlaces de estructuras G, nuevamente aqu son las estructuras G, las que contribuyen a la resistencia del gel desarrollando enlaces que endurecen las estructuras G alinendolas y fijndolas unas a otras mediante enlaces hidrogeno. Ensayos experimentales En el presente trabajo se desarroll la tcnica de obtencin de alginatos basada en el mtodo desarrollado por Green (1936) el cual fue modificado sucesivamente de acuerdo a la naturaleza de la materia prima y el uso pensado para el producto final; entre los trabajos que usaron material de la Patagonia podemos destacar a Mutscheller y Gomez Artero (1961), y Duville y colaboradores (1974). En nuestro caso se realizaron las adaptaciones y desarrollos necesarios para el material en estudio, se trabajo a escala laboratorio y banco obtenindose alginatos en las formas de sales de sodio, calcio y cido algnico. El proceso ensayado representado en la Figura 2 se puede dividir en tres etapas: Etapa 1: Tratamiento primario: Secado, molienda y tamizado Etapa 2: Extraccin de alginato de sodio Lixiviacin, Maceracin, Separacin por centrifugacin. Etapa 3: Purificacin: Obtencin de alginato de calcio, cido algnico y alginato de sodio.

Figura 2: En el experimental.

diagrama de flujo se esquematizan los procesos empleados en la tarea

ETAPA 1: Tratamiento primario. Fueron utilizados ejemplares de Macrocystis pyrifera colectados en las costas de Comodoro Rivadavia durante el verano de 2001, las algas fueron secadas en origen, a continuacin se trasladaron a la Planta Piloto de Ingeniera Qumica (Baha Blanca) donde se realizo la mayor parte del trabajo, las algas fueron molidas en un molino de cuchillas hasta un tamao inferior a 1 cm de dimetro aparente. Luego se tamizaron en un tamiz vibratorio y se separ un 40% de arena, este es un dato interesante para evaluar la factibilidad y localizacin de una planta productora de alginatos por dos razones: una es el rendimiento estimado por kilogramo de materia prima y la otra el mayor costo que implica el transporte de arena. En este punto se tiene al slido seco y disgregado en pequeas partculas para la separacin de los alginatos. ETAPA 2: Extraccin de alginato de sodio. Primeramente se realizo una lixiviacin con cido clorhdrico, esto permite el intercambio de los cationes presentes, generalmente Ca++, Mg++, K+ y Na+ por H+, transformando los alginatos de la matriz slida en cido algnico (insoluble) lo que permite una recuperacin ms eficiente de los mismos. La reaccin de liberacin del cido algnico puede esquematizarse como sigue: . Este tratamiento se llev a cabo con una solucin de HCl 0.1 N durante 2 horas [1], a continuacin se lavaron y filtraron las algas con el fin de eliminar los restos cidos provenientes del HCl agregado en exceso y que dificultaran la operacin siguiente. Los lquidos de lavado pueden ser utilizados para recuperar potasio dado que las algas tienen gran cantidad de potasio en su estructura el que se libera en este acto, estos pueden ser un producto secundario de la planta y debe ser incluido en la evaluacin econmica. A continuacin el residuo slido se separ y someti a una maceracin, en ella el cido algnico obtenido en el paso anterior se somete a un tratamiento alcalino para solubilizar el extracto como alginato de sodio, La obtencin del alginato de sodio crudo, permite la separacin del alginato de la matriz slida mediante mtodos fsicos (filtracin, centrifugacin, decantacin,

etc.) dado que el alginato de sodio es soluble. Se emplearon distintos agentes proveedores de sodio (CO3Na2, NaOH y NaCl) a distintas concentraciones, trabajando en un rango de temperaturas entre 20 y 80 C mediante el uso de un bao termosttico durante un tiempo operativo entre 0,5 y 3 H]. La reaccin que representa a esta operacin es la siguiente: . Hidratacin: Una vez transformado el compuesto de inters en alginato de sodio es necesario hidratar las algas para facilitar su migracin a la fase acuosa como el proceso es difusivo es necesario favorecerlo actuando en tres direcciones: grandes cantidades de agua, aumento de la temperatura y agitacin de la masa. Se utilizaron 25 L de agua por Kg de alga seca [15]. Separacin de la matriz slida: Se utiliz en centrfuga de canasto que giraba a 2800 RPM siendo el dimetro del canasto de 20 cm, lo que representa una aceleracin de 44 g como elemento filtrante se us una malla de 160 micras (Mesh 100). En este punto se tiene al alginato de sodio impurificado con diversos elementos que resistieron el ataque cido y bsico y se separaron en la misma fase que este alginato. Esto es lo que se denomina alginato de sodio crudo. Como control de esta etapa se determin la viscosidad del filtrado para la maceracin llevada a cabo a 50 C y cada tiempo de la misma.

FIGURA 3: Efecto del tiempo de extraccin sobre la viscosidad del filtrado

ETAPA 3: Purificacin. La idea bsica sobre la purificacin consiste en cambiar de fase el compuesto de inters para eliminar con la otra fase los contaminantes, la posterior recuperacin del compuesto se realiza, por lo tanto, en mejores condiciones de pureza, en este caso se precipitar el alginato quedando los contaminantes, en su gran mayora, en las aguas sobrenadantes, eliminndose con ellas, la precipitacin se realiz con cloruro de calcio al 10 % hasta moderado exceso.

. Las caractersticas del precipitado fueron fuertemente dependientes de las velocidades de agitacin del medio y del agregado de reactivo [3], esto es razonable si se piensa que no todos los iones calcio tiene que ligar pares de molculas sino que pueden formar una red de alginatos, lo que depender de las condiciones de operacin, se separ por tamizado, flotacin y centrifugacin. El slido obtenido, Alginato de calcio, fue blanqueado y desodorizado mediante un lavado con NaClO. El alginato de calcio es el

primer producto de inters comercial obtenido en forma purificada, a partir de l pueden obtenerse los restantes. A continuacin el alginato de Calcio fue transformado en cido algnico por acidificacin; para ello se realizaron tres lavados con solucin de HCl al 5%

El cido algnico obtenido fue escurrido y secado en estufa de vaco a 50C hasta peso constante. Esto permiti retirar el agua absorbida (5-10 veces su peso). El ltimo producto buscado es el alginato de sodio el que se consigue desde la solucin cida de cido algnico por alcalinizacin con soda custica 5 N, como este alginato es soluble en agua fue secado en estufa de vaco a 50C hasta peso constante.

Evaluacin de Rendimientos Se verific experimentalmente la importancia de la fijacin del pH para ello, se recurri a diferentes fuentes de sodio.

Compuesto

pH aproximado 7 10 14

Siendo adecuado trabajar alrededor de 10. En valores cercanos a neutralidad con ClNa el rendimiento es muy pobre, a alcalinidad alta (NaOH) se obtiene un producto muy impurificado y difcil de manejar. Por lo tanto, el anlisis ms detallado de los resultados se llev a cabo con solucin de carbonato de sodio, cuyos resultados se muestran en la figura 4.

Figura 4. Efecto del tiempo de maceracin sobre el rendimiento a distintas temperaturas En dicha figura puede verse la forma de variacin del rendimiento como funcin de la temperatura y el tiempo. A alta temperatura 80 C, se alcanza rpidamente un rendimiento algo mayor del 20% pero con el transcurrir del tiempo la masa de alginatos se va deteriorando, presumiblemente por rotura de cadenas, disminuyendo el rendimiento hacia el final de la experiencia. A una temperatura media 50 C se nota que el deterioro encontrado a 80 C no aparece y hay un aumento constante del rendimiento, como el tratamiento es mas suave a las dos horas se alcanza un rendimiento mayor que a 80 C. A 20 C (un solo punto) se observa un rendimiento menor que en los otros casos, debido a que la baja temperatura no permite movilizar totalmente los alginatos. A partir de estos ensayos surge como la mejor opcin el tratamiento a 50 C durante 2 horas, frente a las otras alternativas.

Medicin de viscosidad En las evaluaciones de los alginatos la propiedad ms importante a determinar, como se dijo antes, es la de las viscosidades de las soluciones [7]. Para ello se determino la viscosidad mediante un viscosimetro Brookfield LVT II, a 25C de soluciones al 1% de los alginatos obtenidos a las temperaturas con que se trabajo en la etapa de maceracin alcalina. Figura 5.

Figura 5. Efecto de la temperatura de maceracin sobre la viscosidad del producto (a las dos horas de maceracin) Puede concluirse de estas experiencias que las largas cadenas responsables de la alta viscosidad del producto son fraccionadas cuando se trabaja a temperaturas muy altas, como se esperaba del anlisis de los rendimientos. Por otro lado, cuando la maceracin se lleva a cabo a 20 C solo se alcanzan a movilizar la cadenas ms cortas en las dos horas de maceracin. Por el contrario a 50 C se consigue la mejor calidad del producto, con una viscosidad de 1153 cp. Tambin bajo este punto de vista, la mejor opcin sigue siendo el realizar la maceracin a 50 C durante 2 horas. Por otro lado, fueron analizadas las caractersticas reolgicas de las soluciones resultantes a varias concentraciones de las soluciones encontrando para todas ellas los mismos comportamientos. Las soluciones se muestran como fluidos pseudoplsticos, dado por la pendiente negativa de las curvas. Esta caracterstica se acenta con el aumento de la concentracin de alginatos.

Figura 6. Viscosidad aparente del alginato de sodio para varias concentraciones y ecuaciones de ajuste correspondientes.

Discusin y conclusiones

Se obtuvieron alginatos en forma de alginato de sodio, alginato de calcio y cido algnico en experiencias a escala banco. Se observ una influencia importante de las variables operativas de proceso que afectaron los rendimientos, como as tambin la calidad del producto obtenido asociada al color y viscosidad. En la etapa de maceracin, el tratamiento con CO3Na2 a una concentracin mayor a 0.636 gr. por gr de alga seca, con pH ajustado a 10, demostr ser la alternativa ms conveniente. Este resultado tambin pudo ser estimado a partir de la mayor viscosidad que present la solucin cruda de alginatos extrada en el tratamiento con carbonato con respecto a los otros agentes proveedores de sodio. El uso de una centrifuga de canasto con una malla de 100 Mesh result ser la opcin ms conveniente para la separacin del alginato crudo de la matriz slida. En la purificacin con CaCl2, una agitacin moderada y el agregado lento del reactivo dieron un precipitado de fcil separacin y manejo. Adems, dicha separacin debe ser realizada en forma rpida dado que un contacto prolongado con la solucin madre origina un producto muy coloreado. Los resultados obtenidos permiten concluir que la produccin de alginatos comerciales a partir de Macrocystis pyrifera es tcnicamente factible lo que significar, de llevarse a cabo un emprendimiento de este tipo, un importante aporte a la economa de la regin. Desde esta base de conocimientos se puede continuar con el desarrollo del proceso, en especial abordando los aspectos de calidad del producto, aconsejndose ensayar el uso de otros agentes decolorantes y clarificantes (formaldehdo, perxidos, silicagel, xido de aluminio etc.), como as tambin una profundizacin en el estudio de las etapas. La posibilidad de obtener subproductos comerciales (sales de potasio , de Iodo, algas molidas o prensadas ) constituyen una condicin positiva en el clculo de la factibilidad econmica de una explotacin industrial. Los datos y experiencias logrados son suficientes para el planteo de un avance a la escala planta piloto (paso necesario antes de la explotacin industrial a gran escala). Referencias [1] Arvizu-Higuera, Hernandez-Carmona y Rodriguez-Montesinos.1995. Sistemas de carga y de flujo continuo durante la etapa de preextraccin cida en el proceso de extraccin de alginatos. Ciencias Marinas, 21(1); 25-37 [2] Arvizu-Higuera, Hernandez-Carmona y Rodriguez-Montesinos. 1996. Efecto de la temperatura y el tiempo de extraccin en el proceso de alginato de sodio. Ciencias Marinas ,22(4); 511-521 [3] Arvizu-Higuera, Hernandez-Carmona y Rodriguez-Montesinos.1997. Efecto del tipo de precipitacin en el proceso de obtencin de alginato de sodio Ciencias Marinas ,23(2); 195207 [4] Boraso A. 1997. Macroalgas de inters econmico. Cap. 1, p. 15-55. Editorial de la U.N.L.P. Argentina. [5] Duville, Duville y Panzarasa.1974. Estudios bsicos sobre cido algnico. CIBIMA, Contribucion Tecnica N 16 [6] Green, H. C. 1936. Process for making alginic acid and product. US Patent 2,036,934 [7] Haug and Larsen. 1962. Quantitative determination of the uronic acid composition of alginates. Acta chem. Sccan. 20: 183-190. [8] Kelco 1986. Kelco algin hydrophilic derivatives of alginic acid for scientific water control. Kelco and Co., 56pp. Knutsen. 1993. A laboratory course in alginate chemistry. The Norwegian Institute of technology. [10] Larsen, Knutsen and Robech. 1993. Course in applied Alginates. Instituto de Algologia Aplicada, Las Palmas, Espaa. algology, COURSE 6

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