Probiticos e prebiticos: o seu papel na sade e na eficincia da utilizao dos alimentos.

Jos Lus Mouro , Victor Pinheiro , Maria J. Gomes , Cristina M. Guedes , Maria J. Saavedra , (2) (1) (1) Anabela A. Alves , Miguel A. Rodrigues , Arnaldo Dias-da-Silva . (1) (2) CECAV/Departamento de Zootecnia (UTAD), CECAV/Departamento de Cincias Veterinrias (UTAD). (a) email: jlmourao@utad.pt Introduo O tudo digestivo colonizado por microrganismos, que so particularmente abundantes no rmen, cego e clon. A populao microbiana do rmen desempenha um papel importante atravs da sua actividade sobre os componentes da dieta dos animais ruminantes transformando-os em cidos orgnicos, aminocidos, amonaco e vitaminas que podero ser utilizados pela populao microbiana e/ou pelo animal. A estabilidade do ambiente ruminal essencial para o equilbrio da flora microbiana e para a optimizao da sua actividade fermentativa. Em animais saudveis, os microrganismos benficos impedem por excluso competitiva, a proliferao dos microrganismos patognicos. A manuteno deste equilbrio da microflora gastrointestinal essencial para garantir o bom estado sanitrio do hospedeiro. Todavia, condies de stress podem alterar este equilbrio, permitindo o crescimento da populao de microrganismos prejudiciais e/ou patognicos, provocando distrbios digestivos e afectando negativamente o desempenho produtivo dos animais. Os animais jovens so particularmente susceptveis, principalmente aps o nascimento e o desmame, bem como animais adultos alimentados com dietas de elevada densidade energtica (teores elevados de amido) de modo a atingirem nveis de produo elevados. At 2005 utilizaram-se antibiticos em nveis subteraputicos como promotores de produo (APP). Contudo, o receio que o uso de APP possa ser responsvel pelo aparecimento no homem de bactrias resistentes aos antibiticos levou sua proibio na Unio Europeia. Neste contexto, os prebiticos e os probiticos, como produtos naturais capazes de manter o equilbrio da microflora gastrointestinal, tm sido objecto de numerosos estudos com o objectivo de conhecer os seus modos de aco e os efeitos na sade dos animais e na eficincia da utilizao das suas dietas. Os prebiticos so compostos (geralmente oligossacridos) que no so degradados pelas enzimas digestivas produzidas pelos animais. A sua principal aco estimular os microrganismos benficos e/ou inibir os patognicos. Alguns prebiticos, como os fructoligossacridos (FOS) escapam digesto por aco de enzimas endgenas mas servem de substrato aos microrganismos de espcies benficas dos gneros Lactobacillus e Bifidobacterium que colonizam predominantemente o clon e cego. Outros prebiticos, como os mananoligossacridos (MOS), geralmente obtidos da parede celular de leveduras, tm propriedades receptoras das fimbriae de bactrias patognicas o que leva sua eliminao com o fluxo da digesta, em vez de se ligarem a receptores da mucosa intestinal. Os probiticos so aditivos alimentares constitudos por bactrias e/ou leveduras. Quando incorporados na dieta competem com a flora intestinal prejudicial e/ou patognica e mantm o equilbrio entre as populaes microbianas do rmen ou do intestino, beneficiando assim a produtividade dos animais. Existem vrios probiticos disponveis para monogstricos que contm bactrias, que podem pertencer ao gnero Bacillus (Bacilllus toyoi e subtilis). Os probiticos base de leveduras como Saccharomyces cerevisiae ou o Aspergillus oryzae tem sido muito utilizados como suplementos alimentares para vacas leiteiras ou animais em engorda intensiva como moduladores da actividade ruminal, promovendo um maior equilbrio da flora e diminuindo os riscos de acidose ruminal. Apesar do grande volume de informao disponvel sobre os efeitos dos prebiticos e dos probiticos na produo animal, os indcios cientficos de que estes aditivos contribuem significativamente para a melhoria da eficincia da produo animal so ainda um desafio para os investigadores que trabalham em cincia animal. Este estado da arte motivou o nosso grupo de trabalho a desenvolver estudos no mbito da utiliza(1) (a) (1) (1) (1) (2)

o de probiticos e prebiticos em vrias espcies. At agora, foram efectuados ensaios envolvendo aves, coelhos e vacas. Trabalhos desenvolvidos Prebiticos Aves: Nos frangos para produo de carne as primeiras semanas de vida so cruciais para a sua sobrevivncia, sendo nesta fase da vida das aves que o papel dos prebiticos poder ser mais importante. Os trabalhos desenvolvidos em aves envolveram o uso de MOS no desempenho produtivo, na actividade fermentativa no intestino e na morfometria ileal: Aves 1 - Neste ensaio foi estudada a influncia do MOS nas performances de 624 frangos em 39 parques com cama submetidos aos seguintes tratamentos: controlo (sem aditivos), ACP (0,01% de avilamicina dos 1 aos 35 dias e sem aditivos dos 35 aos 42 dias) e 2 nveis de MOS de acordo com a fase de crescimento das aves (0,1% de MOS de 1 aos 21 dias e 0,05% de MOS dos 22 aos 41 dias). Todos os alimentos continham coccidiosttico Aves 2 - Foi estudado o efeito do MOS em 288 frangos alojados em 36 jaulas com cama submetidos aos seguintes tratamentos: dieta com ACP (0,01% de avilamicina) e dieta com 2 nveis de MOS de acordo com a fase de crescimento das aves (0,1% de MOS de 1 aos 21 dias e 0,05% de MOS dos 22 aos 41 dias). Estudou-se o efeito na nas digestibilidades ileal e total dos 18 aos 21 dias e dos 38 aos 41 dias, no desenvolvimento do tubo digestivo, na morfometrial ileal e na actividade microbiana no cego das aves nos dias 21 e 42. Coelhos: No coelho o perodo aps o desmame particularmente crtico. Neste perodo, o coelho necessita de dietas com teor adequado em fibra de modo a manter um trnsito digestivo apropriado e evitar actividade microbiana indesejvel. Todavia, para o animal exprimir o seu potencial de crescimento utilizam-se dietas com elevados teores em energia (amido) e baixos teores em fibra, o que acarreta um risco sanitrio elevado. Os estudos com coelhos envolveram a utilizao de MOS e de FOS em animais em crescimento medindo-se o desempenho, a actividade fermentativa no cego e a morfometria ileal. Coelhos 1 - Estudaram-se os efeitos dos FOS na morbilidade, na mortalidade, no desempenho de crescimento, na fermentao cecal e na morfometria intestinal em 144 coelhos dos 35 (desmame) aos 70 dias. Foram utilizados 2 tratamentos, o controlo e o FOS (0,036%). Coelhos 2 - Foi estudado o efeito do MOS no desempenho, na morfologia intestinal e na fermentao cecal de coelhos em crescimento em 2 ensaios, comparando 3 nveis de MOS (0,1, 0,15 e 0,2%) com um controlo negativo (sem aditivos) e um APP (0,01% de Bacitracina de zinco). Um ensaio foi realizado numa explorao comercial, utilizando 400 coelhos, e o outro ensaio foi realizado nas instalaes experimentais da UTAD com 220 coelhos. Ambos os ensaios decorreram no perodo entre os 32 dias (desmame) e os 67 dias. Probiticos Coelhos: As coelhas reprodutoras, durante o perodo de aleitamento so alimentadas com dietas de elevada densidade energtica. Estas dietas constituem um risco sanitrio para os lparos a partir do momento em que comeam a ingerir alimentos slidos. Neste mbito foi delineado um trabalho em coelhas reprodutoras com o objectivo de estudar o efeito de um probitico com Bacillus cereus toyoi na fertilidade das coelhas e no desempenho dos lparos. Coelhos 3 - Utilizaram-se 102 coelhas alimentadas com 3 dietas: controlo sem aditivos e 2 nveis de TOYO (0,2 10 e 1 10 CFU/kg alimento). Fora avaliados os seguintes parmetros produtivos: a fertilidade das coelhas, o crescimento e a viabilidade dos lparos e das coelhas reprodutoras. Ruminantes: Foi estudado do efeito do nvel de leveduras Saccharomyces cerevisiae - nos indicadores de fermentao ruminal e na degradao da parede celular de silagens de milho em 3 vacas fistuladas no lactantes alimentadas com uma dieta de silagem de milho, feno de prado natural e concentrado (48:10:42).
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Indicadores de fermentao medidos foram: pH, amnia, cidos gordos volteis (AGV) e lactato. A degradao da parede celular (NDF) das silagens de milho (n=40) foi determinada pela tcnica dos sacos de nylon. Resultados e aplicaes prticas Prebiticos Nos coelhos os FOS mostraram a capacidade para melhorar a eficincia da utilizao dos alimentos sem afectar a morbilidade a mortalidade. Os resultados obtidos foram pouco evidentes, possivelmente por terem sido utilizadas doses baixas de FOS. O MOS parece ser uma boa alternativa utilizao de APP em coelhos, permitindo desempenho semelhante aos obtidos com bacitracina de zinco, melhorando a integridade da mucosa intestinal, em resultado de um efeito protector contra os microrganismos patognicos. O efeito mostrou-se dependente da dose, sendo os resultados mais evidentes com 0,1% de MOS, no havendo assim vantagem na utilizao de teores mais elevados. Nas aves o MOS mostrou alguns efeitos positivos no desempenho das aves. No entanto o efeito na modulao da flora intestinal foi menos evidente do que nos coelhos. Probiticos A utilizao do Bacillus cereus toyoi em coelhas reprodutoras afectou positivamente a fertilidade das coelhas e o crescimento e a viabilidade dos lparos no perodo em que ingeriram simultaneamente leite e o alimento slido da coelha reprodutora (18 dias ao desmame). Os efeitos obtidos com 0,210 e 110 CFU Bacillus cereus toyoi por kg de alimento foram semelhantes aos obtidos efeitos com 10 CFU. Em vacas, a adio de leveduras no rmen, provocou uma reduo nas flutuaes dirias dos indicadores de fermentao ruminal e alteraes dos seus valores, um aumento do pH e da produo de AGV e uma reduo da produo de lactato e da relao acetato:propionato. Isto reflectiu-se no aumento da degradao in sacco da fraco NDF das silagens de milho aps 36 h de incubao. No entanto, o aumento de degradao desta fraco variou de 5 a 25% dependendo da sua degradao inicial; o efeito na degradao da parede celular foi tanto maior quanto menor a degradao inicial e mais elevado o nvel de incorporao de leveduras. De um modo geral, verificamos que a levedura Saccharomyces cerevisiae modifica a actividade fermentativa no rumen, conduzindo a uma maior estabilidade do processo digestivo no rmen. Isto indica que, em termos prticos, a levedura modifica o ambiente de rmen de modo a reduzir o efeito negativo de nveis elevados do concentrado na dieta (acidose) na degradao da fibra. Por outro lado, o aumento da degradao da fibra conduz a um aumento da disponibilidade de nutrientes para a absoro e, por conseguinte, uma melhor eficincia da utilizao dos alimentos fibrosos e a um previsvel aumento de ingesto de alimento. Orientaes futuras Prebiticos: Estudar FOS e MOS produzidos a partir de subprodutos de indstria da alimentao humana e misturas de FOS que diferem no tamanho molecular dos oligossacridos. Sero investigados os efeitos deste prebiticos no desempenho de crescimento, digestibilidade dos alimentos, microflora intestinal, morfologia e resposta imune em porcos, coelhos e aves. Tambm sero investigados efeitos de sinergismo entre FOS e MOS. Procurar-se- utilizar metodologia mais exacta no estudo das populaes microbianas no ileum e no cego, estudar com maior profundidade alteraes do tubo digestivo induzidas pelas diferentes populaes de microrganismos e pelos aditivos, os efeitos da populao microbiana ileal na utilizao dos nutrientes e adeso de microrganismos (salmonelas, E. coli) superfcie intestinal. A relao entre os resultados obtidos, a natureza da dieta e a idade de desmame (coelhos e porcos) ser investigada.
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Probiticos: Aprofundar estudos sobre utilizao de probiticos base de bactrias no coelho em crescimento, nomeadamente nos perodos antes e aps desmame, investigando os efeitos na microflora intestinal, ndices de fermentao cecal, desenvolvimento do tubo digestivo e na morfometrial ileal. Alargar o estudo do efeito das leveduras a dietas tendo como forragem base a silagem de erva e a utilizao em ovinos (borregos em crescimento) e equinos (cavalos). Bibliografia Alves A., Pinheiro, V., Mouro, J.L., Oliveira, J., Gama, A., Pereira, A., Eouzan, J., Madureira, M. 2003. Effect of diets supplemented with promoters of digestive flora and alimentary tract development on performances and morphometry of ileal mucosa of growing rabbits. Comunicao oral. COST Action 848. Scientific Meeting Nutrition and Pathology (WG4) and Meat quality (WG5), Prague, 25 Alves A., Pinheiro, V., Mouro, J.L., Pires, I., Oliveira, J., Gama. 2004. Measurement of rabbits intestinal villus: preliminary comparison of two methods. Poster. 8 World Rabbit Congress, Mxico, 422-426. Guedes C.M., Gonalves D., Rodrigues M.A.M., Dias-da-Silva, A., 2007. The effect of the yeast, Saccharomyces cerevisae, level on the ruminal fermentation activity and on fibre degradation of maize silages in cows. Animal Feed Science and Technology, (em publicao) Mouro, J.L, Pinheiro, V., Silva, A., Kocher, A, Cardoso, J. 2005. Efeitos do Bio-Mos nas performances de crescimento do frango de carne. Poster. XV Congresso de Zootecnia, Vila Real. 389-395. Mouro, J.L., Alves, A., Pinheiro, V., 2004. Effects of fructo-oligosaccharides on performances of growing rabbits. Poster. 8 World Rabbit Congress. September 7 -10. Puebla, Mxico. 915-921. Mouro, J.L., Pinheiro, V., Alves, A. 2004. Effects of zinc bacitracin diet supplementation on performance, morphometry of ileal mucosa and caecal development of rabbits around weaning. Comunicao oral. COST Action 848. Scientific Meeting Nutrition and Pathology. Madrid. 48. Mouro, J.L., Pinheiro, V., Alves, A., Guedes, C.M., Pinto, L., Saavedra, M.J., Spring, P., Kocher, A., 2006. Effect of mannan oligosaccharides on the performance, intestinal morphology and cecal fermentation of fattening rabbits. Animal Feed Science and Technology, 126 (I-II). 107-120. Mouro, J.L., Pinheiro, V., Falco e Cunha, 2005. Alternativas ao uso de antibiticos nas dietas para coelhos em crescimento. Comunicao oral. III Jornadas Internacionais de Cunicultura. Vila Real, 27-45. Pinheiro V., Mouro JL., Alves A., Rodrigues M., Saavedra, MJ. 2004. Effects of zinc bacitracin on performance, digestibility and caecal development of growing rabbits. Poster. 8 World Rabbit Congress. Mxico. 942-972 Pinheiro V., Mouro J.L., Silva C., Gimenez G. 2006. Efecto de Toyocerin sobre los rendimientos productivos de conejas primparas durante el primer ciclo. Poster. XXXI Symposium de Cunicultura de ASESCU. Lorca, Espanha. 125-132. Pinheiro, V., Alves, A., Mouro, J.L., Guedes, C.M, Pinto, L., Spring, P., Kocher, A., 2004. Effect of mannan oligosaccharides on the ileal morphometry and cecal fermentation of growing rabbits. Comunicao oral. 8 World Rabbit Congress. Puebla, 936-941 Pinheiro, V., Silva A.B., Mouro, J.L. 2005. Efeito do teor de fibra da dieta nas performances produtivas de coelhos em crescimento. Poster. Livro de comunicaes do XV Congresso de Zootecnia, Vila Real. 396-400
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