Facultad de Ciencias Biolgicas BIO050 Enfermera

Biologa Molecular y Gentica Bacteriana

Replicacin, Transcripcin y Traduccin Variabilidad Gentica
Prof.: Liliana Berrocal

Conceptos generales. Definiciones

Genotipo: Patrimonio gentico caracterstico de un organismo, especie o individuo Propiedad inherente a los genes presentes en un organismo Fenotipo: Conjunto de caractersticas observables o medibles de un organismo, especie o individuo Manifestacin externa del genotipo de un organismo

Conceptos generales. Cadena polinucleotdica

Consiste en una serie de enlaces azcar-fosfato 5 3

Azcar: ribosa desoxirribosa

Conceptos generales. Estructura del DNA

Doble hebra antiparalela

Molcula helicoidal

Dogma central de la biologa molecular

Replicacin del DNA

Replicacin del RNA

Transcripcin

Traduccin

Transcripcin Reversa

Replicacin del RNA: Virus RNA Transcripcin reversa: Retrovirus

Gentica. Replicacin semiconservativa

Cada una de las molculas hijas est formada por una hebra nueva ms una hebra proveniente del DNA templado (parental).

Gentica. Replicacin

La elongacin de la replicacin es siempre 5 3.

Gentica. Replicacin

Topoisomerasa DNA Girasa Primasa

DNA ligasa

DNA polimerasa

Gentica. Secuencia de DNA

atcatcctgccccatgcccatcgccacgcgttttggcgtgccaaaaaggttgcacagc accggcatggcgtaacctttaggattttcaaacagcaacgccggtccaccggcacgca gcgtgcggtcagcgatttccgtgatttccagatgaggatccacaggtagcgtgatgcg ttttagttccccctgctgctcaagtagcgtcaggaagtcgcgtaaatcgtgatatttc atggcgtccattgtagcctcttggtaagcgcatcattatacggcgttcatcatcggga tgctgtatttttgttaaattagcgtgaactctggcaaccaacgctaatccagatacgg cttaaaggatgaagtgtataattaacttcgcgcatggcttttgctatgcttgcgcccc gaacaagcggataagagtcattatgcaatcctggtatttactgtactgcaaacgcggg caacttcagcgtgctcaggaacacctcgaaagacaagcggtaagttgcctgacaccga tgatcaccctggaaaaaatggtacgcggaaaacgtaccttcgtcagcgaaccgctctt tcctaattatctgttcgttgaatttgatccggaagtgatacataccactacaatcaac gccacgcgcggcgtcagccattttgtgcgctttggcgcgcatcctgcgatcgtgcctt ccagcgttattcatcagctttctatctacaagcccgaaggcgttgtcgatcctgaaac cccctatcccggcgatagcgtcatcatcacggaaggcgcatttgaagggctgaaagcg atttttaccgaaccggatggcgaaacgcgttcgatgttactgcttaatttactcaata aagaagtgaagcagagcgtaaaaaacaccggttttcgcaagatttagcgatcgttcag aatacgacctcaaataaggttctggcattggcatctgtcatcgccgctaaccattgcg gatcttcaccacgccatagcgctatgcgctccag

Gentica. Secuencia de DNA

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Gentica. Estructura de un gen

Inicio
(transcripcin) +1

Promotor
(Regin -35 y -10)

Fin traduccin Inicio traduccin

ATG TAA TGA TAG

X
Regin regulatoria
(transcripcin)

Regin codificante Secuencia de unin al ribosoma

(Shine-Delgarno) (Marco de lectura abierto) (Open reading frame ORF)

Terminador
(transcripcin)

Gentica. Transcripcin

La elongacin de la transcripcin es siempre 5 3

Gentica. Transcripcin

La enzima RNA polimerasa copia utilizando la hebra templado como molde. El resultado, o sea, la secuencia del RNA naciente es igual a la hebra codificante. Excepto por U en vez de T. (Ribosa / Desoxirribosa)

Gentica. Cdigo gentico

El cdigo gentico es un cdigo degenerado

Existe ms de un codn para un determinado aminocido

Gentica. Codn / Anticodn

El apareamiento de la tercera base del codn con el anticodn es menos estricta (ms flexible).

Gentica. Traduccin

Gentica. Traduccin

Gentica. Resumen
La secuencia de DNA determina una secuencia polipeptdica (protena)

La secuencia polipeptdica o secuencia aminoacdica de una protena determina una estructura tridimensional

La estructura tridimensional define una FUNCIN Cualquier alteracin en la secuencia de DNA se puede traducir en una alteracin de la funcin de una protena. Favorable o desfavorable Variabilidad Gentica

Mecanismos de variabilidad gentica

Mutaciones Missense / Nonsense Insercin / Delecin
Cambio en los genes propios

Transferencia horizontal (lateral) de material gentico Transformacin Transduccin Conjugacin

Adquisicin de nuevos genes

Mutaciones
Las mutaciones corresponden a cambios heredables en el patrimonio gentico (genoma) de un organismo
Se generan de manera espontnea (errores durante la replicacin del material gentico), o pueden ser inducidas por agentes qumicos (BrEt) o fsicos (luz UV). Pueden causar cambios en las propiedades fenotpicas de una bacteria. Constituyen la fuente primordial de variabilidad gentica en todos los seres vivos. Para que una mutacin se establezca en una poblacin, sta debe conferir una ventaja adaptativa al organismo (seleccin positiva del nuevo organismo.)

Tipos de mutacin
Mutacin de sentido equivocado (Missense): Sustitucin de un nucletido que genera el cambio de un codn codificante por otro distinto al original. Como consecuencia, cambia la secuencia primaria de una protena en un aminocido particular Tambin se puede generar la modificacin de regiones regulatorias o promotoras de un gen (Mutaciones regulatorias) Este tipo de mutacin puede afectar la funcin de la protena o no afectarla en absoluto (Mutacin silente)

Mutacin por prdida del sentido (Nonsense): Sustitucin de nucletido que genera la aparicin de un codn de detencin de la traduccin (TAA, TGA o TAG). Como consecuencia, se genera una protena incompleta que suele ser no-funcional (Degradacin.)

Ejemplos de mutacin

Tipos de mutacin
Mutacin por insercin: Entrada de nucletidos que genera un cambio o corrimiento en el marco de lectura de un gen (aparicin de mutaciones missense y/o nonsense) Tambin puede generar modificacin de regiones regulatorias o promotoras de un gen (Mutaciones regulatorias) En un caso extremo, puede haber inserciones en las cuales se gana un gen completo o regiones genmicas completas (Ganancia de uno a cientos de genes) Mutacin por delecin: Prdida de nucletidos que genera un cambio o corrimiento en el marco de lectura de un gen (aparicin de mutaciones missense y/o nonsense) Tambin puede generar modificacin de regiones regulatorias o promotoras de un gen (Mutaciones regulatorias) En un caso extremo, puede haber deleciones que comprometen genes completos o regiones genmicas completas (Prdida de uno a cientos de genes...)

Ejemplos de mutacin

Tipos de mutacin
Supresin: Mutacin secundaria, generada por cualquiera de los mecanismos mencionados, que corrige el defecto (fenotipo) generado por una mutacin previa Cuando est presente en el mismo gen mutado que provoc el defecto observado se le llama Supresin intragnica Cuando est presente en otro gen, distinto al gen mutado que provoc el defecto observado se le llama Supresin intergnica o extragnica

Mutacin silente: Mutacin generada por cualquiera de los mecanismos mencionados, que no presenta un defecto observable (fenotipo). Generalmente, su presencia pasa inadvertida.

Mecanismos de variabilidad gentica

Mutaciones Missense / Nonsense Insercin / Delecin
Cambio en los genes propios

Transferencia horizontal (lateral) de material gentico Transformacin Transduccin Conjugacin

Adquisicin de nuevos genes

Transferencia horizontal de material gentico

Corresponde al intercambio de material gentico entre organismos de una misma especie, o de especies no relacionadas filogenticamente Generalmente, causan cambios en las propiedades fenotpicas de una bacteria....adquisicin de nuevos genes. Corresponde al segundo mecanismo principal de variabilidad gentica en todos los seres vivos Para que el material gentico transferido se establezca en una poblacin, debe conferir una ventaja adaptativa al organismo Ocurre principalmente por tres mecanismos: Conjugacin, Transduccin y Transformacin

Elementos genticos importantes en bacterias

1.- Nucleoide o cromosoma bacteriano 2.- Plasmidios: Conjugativos

No conjugativos Elementos genticos mviles

3.- Bacterifagos (virus bacterianos) 4.- Transposones. 5.- Integrones.

Elementos transferibles

Elementos genticos transferibles. Plasmidios

Replicones autnomos (se replican de manera independiente del cromosoma bacteriano) DNA circular de doble hebra (sobreenrollado) Tamao variable (menor que el cromosoma) Nmero de copias variables (1 a >100) Capacidad de transferencia horizontal (conjugacin) Contienen genes no esenciales, que aportan una ventaja adaptativa (resistencias a antibiticos y metales pesados, rutas metablicas, toxinas y factores de virulencia)

Plasmidios

Plasmidio F (Fertilidad)

Plasmidio R100 (Resistencia)

Transferencia de plasmidios. CONJUGACIN

Bacteria F- (Receptora)

Bacteria F+ (Dadora)
Pili sexual

Fimbrias

DNA de Bacterifagos / Fagos

Partculas virales que infectan bacterias. Poseen genoma DNA o RNA, encapsulado por protenas. Se unen a receptores especficos de la pared celular bacteriana (Adsorcin).

ciclo ltico (replicacin continua que destruye la bacteria hospedera) o ciclo lisognico (Profago integrado al genoma bacteriano. Se replica junto con el genoma hospedero)

Transferencia gentica por Fagos. TRANSDUCCIN

DNA o RNA lineal fcilmente degradable

DNA lineal se circulariza y debe integrarse

INTEGRASA
Recombinasa especfica

TRANSDUCCIN

Durante la transduccin, partculas virales (transductoras) inyectan DNA de origen bacteriano en una bacteria receptora. Este DNA posteriormente recombina con el material gentico de la cepa receptora.

Transferencia de plasmidios o DNA. TRANSFORMACIN

Durante la transformacin ocurre la captacin e internalizacin de DNA forneo, el que posteriormente recombina con el material gentico de la cepa receptora.

Elementos genticos. Transposones

Elementos genticos mviles. Poseen un gen que codifica una transposasa, capaz de catalizar su integracin en otra molcula de DNA Generalmente codifican genes de resistencia a antibiticos, desinfectantes, metales pesados y otros txicos Tambin pueden codificar vas metablicas completas

Transposicin...

La transposicin es una integracin inespecfica. El DNA se puede insertar en cualquier parte del cromosoma del hospedero La transposasa puede escindir al transposn e integrarlo en otro lugar del cromosoma del mismo hospedero

Elementos genticos. Integrones...

Elementos genticos capaces de capturar genes de resistencia a antibiticos, desinfectantes, metales pesados y otros txicos. Poseen un gen que codifica una integrasa y un promotor fuerte que regula la expresin de los genes capturados. SHU: sndrome hemoltico urmico. Es producido por Shigella, la cual posee Integrones que le confieren multirresistencia a antibiticos.

Transferencia horizontal. Resumen

Transferencia horizontal. Resumen

Transformacin Conjugacin

Factores de virulencia Factores de resistencia a antibiticos, detergentes, antimicrobianos, desinfectantes Factores de resistencia a metales pesados Vas metablicas

Transduccin