MICROBIOLOGIA GERAL - Aula I Microbiologia - Estudo dos organismos microscpicos.

Deriva de trs palavras gregas: Mikros- pequeno, bios vida, logos cincia - O estudo da vida microscpica; Origem: H quatro bilhes de anos, a partir de um material orgnico complexo de guas ocenicas, considerados ancestrais de todas as outras formas de vida; Microrganismos e o bem estar humano: Reciclagem de nutrientes; bioremediao, na industria alimentcia e de medicamentos, controle de pragas e doenas na agricultura, biotecnologia e engenharia gentica, .... Microrganismos e as doenas. A microbiologia uma cincia jovem. Os microrganismos foram observados pelos cientistas H apenas 300 anos e estes foram muito pouco compreendidos por muitos anos; Existe um perodo de quase 200 anos desde as primeiras observaes e o reconhecimento da sua importncia. Avanos que contriburam para o reconhecimento da microbiologia como cincia: Cientistas provaram que os microrganismos eram originados de clulas iguais (pais iguais) e no de causas sobrenaturais ou de plantas ou animais em putrefao (segunda metade do sculo XIX); Cientistas provaram que os microrganismos eram a causa e no o resultado da fermentao do suco de uva para a fabricao de vinho; Um tipo especfico de microrganismo causa uma doena especfica; Durante o sculo XX Os cientistas foram descobrindo que os microrganismos eram capazes de realizar uma enorme diversidade de reaes qumicas, envolvendo a quebra de compostos ou a sntese de novos compostos; As reaes qumicas produzidas pelos microrganismos so muito semelhantes s reaes que ocorrem nos seres superiores; A informao gentica de todos os seres vivos, dos microrganismos a seres humanos codificada pelo DNA: A simplicidade de realizar experimentos com microrganismos, a rpida velocidade de crescimento e a variedade de reaes qumicas fizeram com que os microrganismos se tornassem modelos para os estudos da gentica e, mais tarde da biologia molecular; Os microrganismos tm surgido como novas fontes de produtos e processos para o benefcio da sociedade. Ex: lcool produzido pela fermentao de gros, produo de insulina por bactrias geneticamente modificadas, decomposio de poluentes, biocontrole de doenas, ...

Histria da Microbiologia Leeuwenhoek e os microscpios: Era amador, zelador da prefeitura e provador oficial de vinhos na Holanda. Antony van Leeuwenhoek (1632-1723) conhecia sobre o uso de lentes para inspeo de tecidos e fibras. Polia lentes de vidro e montava entre finas placas de prata ou bronze para construir microscpios. No estudava microrganismos, mas fez descries detalhadas sobre o mundo dos seres vivos, tornando-se um dos fundadores da microbiologia. Observou a gua dos rios, infuses de saliva, fezes, etc. Observou objetos diminutivos mveis e invisveis ao olho nu. Chamou-os de animculos, acreditando que eram pequenos animais vivos. No ano de 1675, escreveu: descobri seres vivos na gua que tinha ficado alguns dias num pote de barro, vitrificado por dentro. Isto me levou a olhar esta gua com grande ateno, especialmente aqueles animaizinhos que me pareciam dez mil vezes menores do que os que podem ser percebidos na gua a olho nu. Os detalhes dos desenhos deixam claro de que ele viu protozorios, fungos e bactrias. Forneceu a primeira descrio de microrganismos conhecidos como bactrias. Escreveu mais de 200 cartas para a Sociedade Real Inglesa e alertou o mundo para a existncia de formas microscpicas de vida. Duas escolas de pensamento sobre a origem dos animlculos surgiram: Admitia a existncia destes organismos, mas considerava que elas eram o resultado da decomposio de plantas e animais. Acreditavam que a vida surgia de objetos inanimados processo denominado de abiognese CONCEITO DA GERAO ESPONTNEA. Outra escola defendia que os animlculos eram originados de pais iguais, como as formas de vida superior biognese. A microbiologia como cincia no poderia evoluir at que a teoria da gerao espontnea fosse refutada. Foram necessrios vrios experimentos e mais de 100 anos para resolver essa controvrsia. Teoria da gerao espontnea Em 1745, John Needham: cozinhou pedaos de carne para destruir microrganismos prexistentes e colocou-os em frascos abertos. Cresceram colnias de microrganismos na superfcie e ele concluiu que eles surgiram espontaneamente da carne. Em 1769, Lazzaro Spallanzani ferveu caldo de carne em um frasco durante uma hora e vedou-o. Nenhum microrganismo apareceu no caldo. Contudo, Needham contestou que o ar era essencial para a vida e para a gerao espontneo dos microrganismos e o experimento de Lazzaro tinha excludo o ar. Quase 100 anos depois, Franz Schulze (1815-1873) passou o ar por uma soluo forte de cido e aerou uma infuso de carne previamente fervida em frasco fechado. No ano seguinte, Theodor Schwann (1810-1885) forou a passagem do ar por tubos aquecidos e aerou o caldo. No cresceram microrganismos porque o cido e o ar quente matavam os microrganismos do ar. Mas no convenceu aqueles que defendiam a teoria da gerao espontnea. Diziam que o ar e o cido alteravam a composio do ar.

Demonstrao da biognese: Louis Pasteur (qumico francs, 1822-1895): Interesse na indstria de vinhos franceses e a funo dos microrganismos na produo do lcool. Pasteur realizou diversos experimentos: Frasco com colo longo e curvo, semelhante ao pescoo de um cisne. Frasco com caldo de carne. O ar passava pelo tubo e as partculas de poeira ficavam retidas no tubo e no atingiam o caldo; Levou frascos com caldo de carne para as montanhas no alto dos Pirineus e dos Alpes e demonstrou que nas montanhas o ar era mais puro e quanto mais puro o ar, menos partculas de poeira com microrganismos e menor a probabilidade de ocorrer contaminao.

Outros cientistas passaram o ar por tubos com algodo, os microrganismos ficavam retidos no algodo e no cresciam no caldo, fornecendo evidncias para a biognese. Tyndall (1820-1883) demonstrou que o ar poderia ficar isento de microrganismos por permitir que as partculas de poeira sedimentassem na regio em u dos tubos e o lquido (caldo de carne) estril no fundo da caixa permaneceu estril. Estes experimentos levaram aceitao da teoria da biognese.

 Pasteur dedicou seu tempo aos estudos dos microrganismos utilizados na produo de vinhos e dos microrganismos causadores de doenas. Teoria Microbiana da Fermentao: Suco de fruta estagnado - ocorre a fermentao e diversas reaes bioqumicas que levam a produo do lcool e outras substncias a partir do acar da uva; Sabia que os produtos da fermentao eram o resultado de microrganismos e no que a fermentao que produzia os microrganismos; Pasteur atendendo a uma indstria de vinho examinou lotes de vinho bom e vinho ruim e encontrou tipos diferentes de microrganismos. Certos tipos de microrganismos predominavam nos vinhos bons e outros tipos predominavam nos vinhos ruins. Pasteur concluiu que a seleo de microrganismos poderia assegurar a boa qualidade do vinho. Destruiu os microrganismos j existentes no suco de uva, aquecendo e resfriando o suco, em seguida inoculou o suco com o vinho de alta qualidade. Observou tambm que se o vinho fosse aquecido a 50-60oC, por vrios minutos, poderia ser preservado sem alteraes no sabor e qualidade. Processo conhecido como PASTEURIZAO Revolucionaram a indstria do vinho. Teoria microbiana da doena Descobriram o agente etiolgico de diversas doenas que afetavam os homens e animais.

Girolamo Fracastoro (1483-1553) sugeriu que as doenas eram o resultado de microrganismos que podiam ser transmitidos de uma pessoa para outra. Observava que marinheiros quando retornavam de expedies do exterior transmitiam doenas. Anton von Plenciz (1705-1786) de Viena, estabeleceu que seres vivos eram a causa de doenas e que diferentes agentes eram a causa de diferentes doenas. Ao mesmo tempo o conceito de um organismo vivendo sobre o outro, a partir do qual retirava os seus nutrientes foi tornando-se aceitvel - conceito de parasitismo. Pasteur foi indicado para estudar a doena do bicho da seda que ameaava a indstria da seda francesa. Ele levou 6 anos para demonstrar que a doena era causada por um protozorio e ensinou os produtores a selecionarem os bichos saudveis. Na Alemanha, Robert Koch (1843-1910) - mdico, ganhou um microscpio de presente da esposa e comeou a estudar o mundo microbiano, j conhecido por Pasteur.

 Koch e Pasteur eram rivais e queriam descobrir a origem do Carbnculo, uma doena que dizimava as pessoas que trabalhavam com gado e ovelhas na Europa. As bactrias isoladas do camundongo eram idnticas quelas observadas no carneiro doente. Seis anos depois anunciou a descoberta da bactria do Carbnculo. Sugeriu que animais doentes deveriam ser mortos e queimados ou enterrados bem fundo devido aos esporos bacterianos que poderiam sobreviver por meses em produtos contaminados. Koch foi o primeiro cientista a provar que um microrganismo causava uma doena especifica. Mais tarde descobriram as bactrias causadoras da clera e da tuberculose Tcnicas Laboratoriais para o estudo de microrganismos: Havia a necessidade de isolar e estudar individualmente os microrganismos: Tcnica da cultura pura. Cientistas alemes viram colnias de fungos crescendo na superfcie de rodelas de batata cozida modo de cultivo de colnias e separao das colnias. Demonstraram como uma substncia extrada das algas poderia solidificar o meio de cultura - agar. Desenvolveram a tcnica da cultura pura. Richar Petri inventou a Placa de Petri. Koch defendia o uso de animais como modelos de doenas humanas e desenvolveu os Postulados de Koch: Postulados de Koch: Um microrganismo especfico pode sempre estar associado a uma doena; O microrganismo pode ser isolado, cultivado em cultura pura, em condies laboratoriais; A cultura pura do microrganismo poder reproduzir a doena quando inoculada em animal suscetvel; possvel recuperar o microrganismo inoculado do animal infectado experimentalmente. Desenvolvimento dos Processos de Preveno de Doenas: A peste, tifo, difteria, varola, clera e influenza devastaram grandes regies do mundo. Milhes de pessoas morreram de doenas (epidemias), ex; peste causada por bacilos transmitidos por roedores (ratos) por meio das pulgas. Vrus da influenza tambm causou muitas mortes, foi endmica e pandemia, matou cerca de 21 milhes de pessoas no mundo inteiro (1917-1919). Com a descoberta de que os microrganismos causavam as doenas, os cientistas passaram a dar importncia aos mtodos de preveno e tratamento. Desenvolvidas tcnicas de asspsia, imunizao e quimioterapia. Spsis - refere-se ao efeito txico da presena do microrganismo no corpo durante a infeco. Anti-sepsia ou assepsia refere-se s medidas que eliminam os efeitos txicos por prevenir a infeco. Oliver Wendell holmes (1809-1894) - insistiu que a febre de parturiente era contagiosa e transmitida de uma mulher para outra pelas mos dos mdicos e parteiras. Hoje conhecida como febre puerpural.

 O mdico hngaro Ignz Semmelweis tentou convencer os colegas de que solues cloradas faziam a anti-sepsia das mos dos obstetras. Em 1860, um cirurgio ingls Joseph Lister (1827-1912) pesquisava uma maneira de manter as incises cirrgicas livres de contaminao por microrganismos. As mortes por infeces cirrgicas eram muito freqentes. Lister sabia que o fenol destrua as bactrias e passou a embeber as compressas cirrgicas com uma soluo diluda de fenol e borrifava a sala de cirurgia. O sucesso foi to notvel que outros cirurgies passaram a dotar tal prtica deu origem s tcnicas de assepsia atuais que previnem as infeces. Immunizao Em 1880 Pasteur utilizou as tcnicas de Koch para isolar e cultivar a bactria que causa a clera aviria. Organizou uma demonstrao pblica para confirmar a sua descoberta e repetiu em pblico o experimento com galinhas. Inocularam galinhas sadias com a cultura da bactria e aguardou que elas manifestassem os sintomas e morressem logo aps. As galinhas no adoeceram e no morreram. Razo: inoculou as galinhas com uma cultura velha. Semanas depois repetiram o experimento inoculando as mesmas galinhas e outras galinhas com uma cultura nova virulenta. As galinhas no adoeceram, mas as galinhas que no tinham sido inoculadas antes morreram. Demonstrou que as culturas velhas no causavam doena e produziam substncias protetoras no sangue, os anticorpos imunizavam as galinhas. Quimioterapia Gerhard Domagk (1895-1964) - um mdico alemo descobriu que o grupo de substncias qumicas, denominado sulfonamidas ou sulfas era muito eficiente contra infeces bacterianas. Ganhou o Prmio Nobel. Alexander Fleming (1881-1955) - Descoberta da penicilina notou que um fungo tinha contaminado as placas de cultura bacteriana e descartou-as. Depois observou que as bactrias no cresciam nas placas com o fungo Penicillium notatum. S 10 anos depois comearam a reconhecer a importncia da substncia de origem microbiana.