ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MDICA LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA

CURSO BACTERIOLOGIA

CATEDRATICO

PRACTICA DE LABORATORIO No. 01 PREPARACION DE MATERIALES Y ESTERILIZACION

DATOS PERSONALES ELIANA CHUQUIMIA MANDAMIENTO CODIGO: 2010231534 CICLO V

FECHA 29 09- 2011

INFORME DE LABORATORIO
1. 2. TITULO
Preparacin de materiales Esterilizacin

OBJETIVOS
Preparar adecuadamente el material de vidrio a utilizar en un laboratorio de microbiologa, previo al proceso de esterilizacin. Esterilizacin va seca y hmeda.

3.

CONSIDERACIONES TEORICAS
Limpieza, desinfeccin y esterilizacin A lo largo de este bloque hemos ido comprobando cmo los microorganismos estn presentes prcticamente en casi todos los lugares de nuestro organismo, as como de nuestro entorno cercano. El cambio de las condiciones ambientales o de las defensas del individuo puede provocar un crecimiento excesivo de determinadas especies microbianas, algunas oportunistas, que finalmente puede provocar una enfermedad infecciosa. Evitar el crecimiento incontrolado de estos microorganismos y eliminarlos total o parcialmente de aquellos productos o lugares que nos interesen, es una labor muy importante, tanto en nuestra vida cotidiana como en nuestra actividad laboral o docente. Diariamente nos lavamos para evitar el excesivo crecimiento de microorganismos sobre nuestra piel, con las consecuencias que ello provoca. Estamos acostumbrados a tomar nuestros alimentos libres de microorganismos. Cualquier producto que vayamos a introducir en nuestro organismo debera estar libre de grmenes. Las superficies de trabajo, los suelos, la ropa, los enseres deben estar limpios para garantizar nuestra salud. Es muy importante conocer las diferencias entre los tres conceptos que dan ttulo a este tema, sobre todo en aquello relacionado con el control y eliminacin de microorganismos. Limpiar es cualquier proceso mecnico, fsico o qumico que tiene por objeto disminuir las sustancias externas depositadas o adheridas sobre una superficie, sean microorganismos o no. Generalmente entendemos por limpieza cualquier proceso que arrastre y elimine la suciedad (escoba, gamuza, plumero). En ocasiones utilizamos agua en el proceso para aumentar las posibilidades de arrastrar partculas de menor tamao (fregona, bayeta) Sin embargo, algunas partculas que quedan adheridas a las superficies, como las grasas, son difcilmente eliminadas por friccin o por el agua. Para ello se utilizan los jabones o los detergentes. No obstante, la utilizacin de jabones no evita la necesidad de seguir realizando un proceso de arrastre o frotado de las superficies que queramos limpiar. Es necesario comprender que un proceso de limpieza nunca elimina totalmente los microorganismos presentes, sino que tan solo disminuye su cantidad absoluta. Para

eliminar la viabilidad de dichos microorganismos, hemos de someter a los productos y materiales a un proceso final de desinfeccin o esterilizacin. Entendemos por desinfeccin el proceso que tiene por objeto destruir todos los microorganismos, patgenos o no, que existan sobre personas, animales, ambiente, superficies o cosas, aunque al destruir estos se eliminen tambin gran cantidad de microorganismos saprofitos o residentes, pero no asegurando la eliminacin de las formas de resistencia (esporas) Si pretendemos destruir toda forma de vida, saprofita o simbionte, vegetativa o de resistencia (esporas) utilizaremos la esterilizacin, basada en mtodos fsicos o qumicos. La esterilizacin es necesaria en todos los procedimientos de laboratorio donde sea imprescindible asegurar la ausencia de cualquier microorganismo, as como en objetos que vayan a penetrar en el organismo atravesando la superficie corporal, o que penetren en cavidades estriles. En el laboratorio debemos tener las manos limpias, las superficies de trabajo desinfectadas y los medios de cultivo y reactivos utilizados, estriles. Asimismo deben esterilizarse todos los residuos biolgicos generados en el proceso analtico microbiolgico. Se denomina desinfectante, segn la FDA a "aquella sustancia qumica capaz de destruir en 10-15 min. los microorganismos depositados sobre cualquier material, vivo o inerte, alterando lo menos posible el sustrato donde residen, y abarcando todas las formas vegetativas de las bacterias, hongos y virus". El trmino antisptico se usa para aquellas sustancias que evitan la existencia o desarrollo de grmenes sobre la piel o mucosas, heridas, abrasiones, etc.

Mecanismo de accin de los agentes fsicos y qumicos El efecto desfavorable de los agentes fsicos y qumicos sobre los organismos unicelulares, eucariotas o procariotas, se debe a mecanismos muy variados y no del todo conocidos. Por su intensidad, cualquier agente se puede clasificar en bacteriosttico, cuando impide su multiplicacin, o bactericida, si el efecto es mortal e irreversible. No siempre ambos mecanismos son diferentes; la mayor parte de las veces, el que se alcance uno u otro efecto, depende de la intensidad con que se aplique el agente. Segn el mecanismo de accin y la estructura sobre la que acten, los agentes fsicos y qumicos actan de maneras diferentes, aunque algunos de ellos puedan hacerlo por varios a la vez: Agentes que actan sobre la pared celular: - Por hidrlisis de la pared bacteriana (lisozima) Agentes que actan sobre la membrana citoplasmtica:

- Por alteracin de los mecanismos de transporte activo (cidos, lcalis y detergentes) - Por inhibicin de la cadena transportadora de electrones (hexaclorofeno) Agentes que actan sobre las protenas y las enzimas: - Coagulacin y desnaturalizacin de protenas (calor, formol y alcohol) - Efecto txico sobre las enzimas, debido a la oxidacin de sus radicales libres (Cl, H2O2) - Formacin de compuestos con los radicales libres (mercurio, formol, glutaraldehdo) Agentes que actan por alteracin del ncleo: - Por combinacin con los grupos sulfhidrilos (oxidantes) - Por interferencia en la replicacin del ADN (radiaciones) Los antimicrobianos tambin actan sobre el crecimiento de los microorganismos, y aunque no tienen el mismo mecanismo de accin, los lugares sobre los que actan son muy parecidos. Vamos a ver algunas diferencias entre dichos mecanismos de accin Mecanismos de accin de los antimicrobianos Agentes que actan sobre la pared celular: - Por inhibicin de la sntesis de la pared bacteriana (Beta lactmicos) Agentes que actan sobre la permeabilidad de la membrana citoplasmtica: - Por aumento de la permeabilidad de la membrana (Polimixinas) Agentes que actan sobre la sntesis de protenas (y enzimas): - Inhibiendo la sntesis de protenas a nivel de la subunidad 50 S (Macrlidos) - Inhibiendo la sntesis de protenas a nivel de la subunidad 30 S (Aminoglucsidos) Agentes que inhiben la actividad enzimtica (antimetabolitos): - Inhibiendo la actividad de los enzimas por bloqueo de su centro activo (Trimetoprim) - Desplazando al sustrato natural por inhibicin competitiva (Sulfonamidas) Agentes que actan por alteracin de los cidos nuclicos: - Por inhibicin de la replicacin actuando sobre la DNA girasa (Quinolonas) - Por inhibicin de la transcripcin bloqueando la ARN polimerasa (Rifampicina) - Por rotura directa del ADN (Metronidazol) Control de esterilizacin Los procesos de esterilizacin deben ser cuidadosamente controlados, comprobando en cada ocasin, si es posible, la temperatura, la presin y el tiempo de actuacin de cada agente. Generalmente estos parmetros estn monitorizados y son almacenados en un sistema que permite su lectura en cualquier momento. No obstante, aunque se alcancen tericamente las condiciones de esterilizacin, deberemos comprobarlo en cada proceso mediante procedimientos qumicos y biolgicos. Indicadores qumicos:

Son unas tiras individuales o impresas en los envoltorios del material esterilizado que cambian de color cuando han sido alcanzadas las condiciones requeridas para la esterilizacin (temperatura, presin y tiempo). El cambio de color del indicador no demuestra que el material est estril. Controles biolgicos: Son los nicos que informan realmente sobre el proceso de esterilizacin. Para ello seutilizan esporas muy resistentes de ciertas bacterias. Pueden utilizarse esporas de Bacillus subtilis para el control de esterilizacin por xido de etileno o Bacillus stearotermophilus para el control de esterilizacin por autoclave. Estos controles biolgicos, incluidos con el material que se quiera esterilizar y sometidos al proceso de esterilizacin, son cultivados al finalizar el ciclo para comprobar que todas las esporas son inviables, y el proceso de esterilizacin ha funcionado correctamente. La concordancia de los resultados de los parmetros fsicos, indicadores qumicos y controles biolgicos, nos informan sobre la calidad de los procedimientos de esterilizacin.

4.

DESCRIPCION DEL EQUIPO

Son necesarios el equipo y materiales siguientes: MATERIAL: * Pipeta * Caja de Petri * Tubos de ensaye * Mechero de Bunsen * Tapones de algodn * Lata para hervir * Matraz Erlenmeyer * Asa de nicromo * Horno * Autoclave * Franela * Papel Kraf

5.

PROCEDIMIENTO
Se procede a envolvimiento de los materiales con papel Kraf

Tubos de ensayo 1. Colocar a cada tubo una tapa deee una torunda de algodn con la ayuda de una varilla de madera o vidrio 2. Colocar los tubos preparados en una cesta destinada para tal fin. 3. Cubrir la cesta con papel Craft y sujetar el mismo con pabilo. Baln o fiola

1. Colocar un tapn de algodn 2. Cubrir el algodn con una porcin de papel Craft y sujetar el mismo con pabilo. NOTA: cuando se utiliza algodn para cubrir tubos, fiolas o balones se debe tomar la precaucin de que ste pueda ser manipulado con facilidad, para ello no debe quedar ni muy apretado ni muy flojo y debe alcanzar aproximadamente 3 cm dentro del material de vidrio. Pipetas 1. Colocar una pequea torunda de algodn en el extremo superior de la pipeta con la ayuda de un alambre. 3. Rotular, por la parte externa del papel, la capacidad de la pipeta. Por ejemplo: 5 mL, 1 mL, etc. Placa de Petri. 1. Envolver con papel Craft .

DESINFECCIN.
Realizar una correcta limpieza (agua y detergente), aclarado y secado previo a la inmersin del material. Aplicar la solucin segn las recomendaciones del fabricante para tiempo y concentracin. Registrar la caducidad de la solucin preparada. No deben mezclarse varios productos. La solucin no debe servir de almacn para el material. Utilizar agua estril para el aclarado. Tras un secado minucioso empaquetar el material para continuar el proceso de esterilizacin.

EMPAQUETADO DEL MATERIAL.

Paso previo a la esterilizacin en autoclave, perxido, plasma-gas. Opciones: 1. Material de porosidad controlada: Papel crepado. Papel Kraft. Bolsa plstica. Envases mixtos. Pueden cerrarse con termoselladora. Adhesivo con control o autoadhesivo. 2. Contenedores de almacenaje.

ESTERILIZACIN.
Definicin de esterilizacin: la esterilizacin es el proceso que persigue la reduccin de la carga biolgica de un utensilio al menos a su millonsima parte. Mtodos de esterilizacin: Mtodos Fsicos: aplicacin directa de energa: Vapor de agua, calor seco o radiaciones ionizantes. Mtodos Qumicos: productos catalizados por condiciones fsicas que aumentan su reactividad: xido de etileno, vapor de formaldehido o plasma gas.

Esterilizacin por calor hmedo: autoclaves Destruye toda forma microbiana incluidas las esporas. Produce vapor saturado a presin eficaz. Poseen variedad de programas segn los materiales: o temperaturas 120-135 C; o presiones 3.2-2.2 Kg/cm2; o tiempo de exposicin 30-60 minutos No toxico, rpido, eficaz y seguro.

Aplicaciones del autoclave: Material metlico: instrumental de ciruga, contenedores,... Material textil: gasas, vendas, ropa,... Material de vidrio: jeringas, pipetas, biberones,... Materiales plsticos y gomas termo resistentes (caucho, silicona,...).

ESTERILIZACION EN SECO

6.

CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

En este trabajo se identificaron las etapas de trabajo en la central de esterilizacin y se analizaron algunas consideraciones en los procedimientos.

La capacitacin continua y la protocolizacin de todas las normas y procedimientos a ejecutar en el laboratorio de microbiologa constituyen herramientas fundamentales para lograr un resultado de alta eficiencia, calidad y productividad.

A lo anterior se une el inters y el amor que cada persona entregue a la hora de asumir la gran responsabilidad de efectuar estas tareas, recordando que estn destinadas a preservar la salud de las personas, por lo que deben ser de mxima calidad.

7.

BIBLIOGRAFIA http://www.monografias.com/trabajos13/manubio/manubio.shtml
fcm.uncu.edu.ar/joomla/downloads/OMS.pdf