Quim. Nova, Vol. 25, No.

6, 943-948, 2002 OBTENO E CARACTERIZAO DE BLENDAS COLGENO-QUITOSANA Edivan Tonhi* Instituto de Qumica, Universidade Estadual de Campinas, CP 6154, 13083-970 Campinas - SP AnaMariadeGuzzi Plepis Departamento de Qumica e Fsica Molecular, Instituto de Qumica de So Carlos, Universidade de So Paulo, CP 780, 13560-970 So Carlos - SP Recebido em 15/8/01; aceito em 19/2/02

PREPARATION AND CHARACTERIZATION OF COLLAGEN-CHITOSAN BLENDS. Biodegradable polymer blends were obtained using collagen and chitosan. Membranes of collagen and chitosan in different proportions (3:1, 1:1 and 1:3) were prepared by mixing their acetate solutions (pH 3.5) at room temperature. The blends were characterized by differential scanning calorimetry (DSC), thermogravimetric analysis (TGA), Fourier Transform infrared (FTIR) spectroscopy, specific viscosity, water absorption and stress-strain assays. The results showed that chitosan did not interfere in the structural arrangement of the collagen triple helix and the properties of the blends can be controlled by varing the proportion of the collagen and the chitosan. Keywords: blends; collagen; chitosan.

INTRODUO O colgeno uma protena fibrosa presente na pele, tendes, ossos, dentes, vasos sangneos, intestinos e cartilagens, correspondendo a 30% da protena total e a 6% em peso do corpo humano. A quitosana um copolmero constitudo de b-(1-4)-2-amino-2deoxi-D-glicopiranose e b-(1-4)-2-acetamida-2-deoxi-D-glicopiranose, proveniente da reao de desacetilao da quitina, o segundo polissacardeo mais abundante na natureza. O colgeno e a quitosana tm sido bastante utilizados na medicina, odontologia e farmacologia como biomateriais, pois so polmeros biocompatveis, atxicos e biodegradveis, alm de possurem inmeras propriedades biolgicas1-6. As blendas polimricas constituem-se na mistura de pelo menos dois polmeros ou copolmeros sem que haja qualquer reao qumica entre eles7. O interesse nesta rea deve-se s crescentes aplicaes prticas destes novos materiais e os principais estudos so voltados para a melhoria de suas propriedades fsicas, fsico-qumicas e de processamento destes materiais, comparadas s propriedades dos polmeros puros8. Muitas blendas formadas pela combinao de biopolmeros, tm grande importncia na rea de biomateriais, sendo que possvel juntar as propriedades individuais de cada material em um s, alm da possibilidade de melhorar ou controlar as suas propriedades mecnicas e biolgicas atravs da interao entre as suas estruturas qumicas diferentes. Recentemente, membranas e hidrogis provenientes da mistura de colgeno e quitosana foram investigados pelas suas aplicaes potenciais no campo dos biomateriais9,10. J foi demostrado que as interaes entre o colgeno e a quitosana dependem da organizao estrutural do colgeno e da quantidade e distribuio de cargas ao longo das cadeias dos dois polmeros11. Estas propriedades esto diretamente relacionadas com o pH do meio, que uma propriedade de fundamental importncia para o estudo da interao entre eles em soluo.

Este trabalho teve por objetivos obter blendas colgeno-quitosana em diferentes propores (3:1, 1:1 e 1:3) em pH 3,5, estudar a interao entre estes dois biopolmeros tanto na forma de membranas como em soluo e avaliar suas propriedades fsico-qumicas. PARTE EXPERIMENTAL Colgeno O colgeno foi extrado de serosa suna tratada com soluo aquosa contendo dimetilsulfxido (DMSO) 6% (v/v) e cido actico pH 2,0 por 24 h12. Este tratamento foi repetido at que o pH da soluo se estabilizasse em 2,0. O DMSO foi removido por lavagens com soluo de cido actico 0,55 mol L-1 (pH 3,5) at pH constante. Aps estabilizao, a soluo foi homogeneizada em um liquidificador. A concentrao do gel foi 1,30% (m/m), determinado por liofilizao. As massas molares dos constituintes do colgeno foram determinadas por eletroforese em gel de poliacrilamida-SDS13, usando-se um gel de empacotamento de 5% e de resoluo de 7%, comparando-se com padres conhecidos de albumina de soro bovino (BSA), ovoalbumina e gliceraldedo-3-fosfato-dehidrogenase. A razo das cadeias polipeptdicas a1 e a2, que constituem o colgeno, foi determinada por medida de densitometria aps colorao do gel com Coomassie Blue. As membranas de colgeno foram preparadas por secagem do gel em moldes retangulares de Teflon, temperatura ambiente. O espectro de absoro na regio do infravermelho das membranas de colgeno foi obtido utilizando um espectrofotmetro BOMEN (FTIR). A razo das absorbncias 1235 cm-1/1450 cm-1 foi determinada como medida da integridade da tripla hlice do colgeno14. Quitosana A quitosana (produto comercial da Fluka/Bio Chemica) foi purificada pela dissoluo em soluo aquosa de cido actico 3% (v/v) por 24 h e filtrao sob presso positiva usando seqencialmente filtros com porosidade de 5,0, 1,2 e 0,45 m. A soluo foi ento

*e-mail: edivan@iqm.unicamp.br

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neutralizada com NH 4OH concentrado para a precipitao da quitosana. Posteriormente, filtrou-se o precipitado e seguiu-se lavagem com gua destilada at a neutralidade. A quitosana foi ento seca em estufa 40 oC por 1 semana. Para a preparao das membranas, primeiro dissolveu-se a quitosana em soluo de cido actico 0,55 mol L-1 (pH 3,5) e em seguida esta soluo foi seca em moldes retangulares de Teflon, temperatura ambiente. Determinou-se o grau de acetilao (GA) da quitosana atravs do espectro de ressonncia magntica nuclear de prton15, que foi obtido em um espectrmetro BRUKER AC de 200 MHz, utilizando uma amostra de quitosana com concentrao de 10 mg mL-1 em soluo de gua deuterada-cido clordrico 100:1 (v/v). A anlise foi feita 80 oC, utilizando o pulso de 90o (8,2 segundos) e 16 varreduras de espectro acumulados. O grau de acetilao foi determinado utilizando a seguinte expresso:
GA% = A +0! x 100 3A H

Termogravimetria e calorimetria exploratria diferencial Para os estudos de estabilidade trmica foram utilizadas amostras de 10 mg das membranas. As medidas foram feitas em equipamentos da TA Instruments DSC 2010 e TGA 2050 numa razo de aquecimento de 10 o C min -1 em atmosfera de N 2 . O estudo termogravimtrico foi feito na faixa de 25 a 600 oC e a calorimetria exploratria diferencial na faixa de 25 a 200 oC. Ensaios de viscosidade especfica Para estes ensaios utilizou-se solues de colgeno, quitosana e blendas com concentraes de 5 mg mL-1. As amostras foram ensaiadas em um viscosmetro capilar tipo Ostwald, nmero 300, com controlador de temperatura. Os valores de tempo de escoamento empregados para a determinao da viscosidade especfica corresponderam mdia de 3 determinaes independentes. Absoro de gua A quantidade de gua absorvida pelas membranas foi determinada pela imerso em gua destilada por um determinado perodo de tempo. Os tempos escolhidos foram 0,5, 10 e 20 h. Primeiramente, retirou-se toda a gua das membranas em liofilizador at obter peso constante (aproximadamente 8 h). Em seguida, as mesmas foram colocadas separadamente em frascos com gua destilada e retiradas para pesagem aps o perodo determinado. A pesagem das membranas foi feita retirando-se o excesso de gua com papel de filtro. A quantidade de gua absorvida foi calculada pela equao:

(1)

onde, ACH3 = rea dos prtons metlicos do grupo acetamida A H2 = rea dos prtons ligados ao carbono C(2) do anel glicopiranosdico. A massa molar da quitosana foi obtida pelo mtodo viscosimtrico. Seis solues de quitosana com concentraes que variaram de 6,0 x10-4 a 3,0x10-4 g mL-1 foram preparadas usando tampo cido actico 0,3 mol L-1/acetato de sdio 0,2 mol L-1, pH 4,5, como solvente. As viscosidades relativas foram medidas com viscosmetro capilar AVS-350. Os valores de tempo de escoamento empregados para a determinao da viscosidade reduzida correspondem mdia de 4 determinaes independentes. A massa molar (M) foi calculada pela relao de Mark-Houwink16,17: [h] = K Ma (2)

% gua =

(m K - mI ) x100 mK

(3)

onde mu e ms so as massas das membranas mida e seca, respectivamente. Os resultados representaram a mdia de trs determinaes independentes. Comportamento mecnico Para os ensaios mecnicos pelo mdulo trao foram preparadas membranas em moldes retangulares de Teflon, de dimenses 10 x 5 cm. Destas membranas cortou-se tiras 10 x 1 cm, que foram mantidas em dessecador sob vcuo at o momento das medidas. As medidas foram feitas temperatura ambiente em uma mquina de testes SINTECH 6, utilizando uma cela de carga modelo 3397-136 com capacidade de 90 Kg. A distncia inicial entre as garras foi de 30 mm e elas foram tracionadas a uma velocidade constante de 5 mm min-1. RESULTADOS E DISCUSSO Neste trabalho optou-se por preparar as blendas em pH 3,5, sendo que praticamente todos os grupos NH 3+ da quitosana esto protonados e o colgeno est abaixo do seu ponto isoeltrico (pI~7), onde mais acentuado o processo de fibrilognese19, em que suas molculas se organizam em forma de fibras, o que dificultaria a interao com as molculas da quitosana. Caracterizao do colgeno O perfil densitomtrico obtido a partir do gel de colgeno (Figura 1) mostrou as bandas correspondentes s cadeias a1 e a2 numa

onde, [h] = viscosidade intrnseca, que foi obtida pela extrapolao diluio infinita da curva de viscosidade reduzida versus concentrao, e K e a so constantes com valores18 de 0,0074 e 0,76, respectivamente. Preparao das blendas Primeiramente diluiu-se a soluo de colgeno para 0,7% (m/m) com soluo de cido actico 0,55 mol L-1 (pH 3,5). Logo aps dissolveu-se a quitosana em soluo de cido actico 0,55 mol L-1 (pH 3,5) at obter tambm uma soluo 0,7% (m/m). A protonao da quitosana provoca um aumento do pH, que foi corrigido com a adio de cido actico at obter novamente pH 3,5. As duas solues foram misturadas estequiometricamente para obter blendas colgeno-quitosana nas propores de 3:1, 1:1 e 1:3 (m/m) em pH 3,5. As blendas foram ento agitadas por 5 min para homogeneizao e colocadas para secar em moldes retangulares de Teflon, temperatura ambiente. Caracterizao das blendas Espectroscopia de infravermelho Para obteno dos espectros de absoro foram utilizadas as membranas das blendas. A razo das absorbncias 1235 cm-1/1450 cm-1 tambm foi determinada para o colgeno nas blendas.

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Figura 1. Perfil densitomtrico do gel de colgeno

razo de 2:1, tpica do colgeno do tipo I20. As massas molares calculadas a partir da curva de calibrao dos padres foram 112.000 Da para a cadeia a1 e 106.000 Da para a cadeia a2, valores estes que esto de acordo com os descritos na literatura para o colgeno do tipo I20. Caracterizao da quitosana Pelo espectro de 1H-RMN da quitosana (Figura 2) obteve-se um grau de acetilao de aproximadamente 24%. Este resultado pode ter uma variao de 5%, que est relacionado com a escolha da linha de base e dos intervalos de integrao para a obteno do espectro.

Figura 3. Espectros de infravermelho de: (a) colgeno, (b) colgenoquitosana 3:1, (c) colgeno-quitosana 1:1, (d) colgeno-quitosana 1:3 e (e) quitosana

Figura 2. H1-RMN da quitosana em HCl/D2O

A massa molar determinada por ensaios de viscosidade foi de 140.000 Da. Este resultado no est de acordo com a massa molar dada pelo fabricante (400.000 Da), o que sugere que a amostra comercial no homognea e pode ter ocorrido fracionamento aps o procedimento de purificao, ou o dado do fabricante incorreto. Caracterizao das blendas Espectroscopia de infravermelho A Figura 3 mostra os espectros de infravermelho do colgeno, da quitosana e das blendas. O espectro do colgeno (Figura 3a) apresenta as seguintes ban-

das principais: em 1650 cm-1, tpica de amida I, devido ao estiramento da carbonila, em 1560 cm-1, relacionado amida II, devido as vibraes no plano da ligao N-H e ao estiramento C-N21, em 1235 cm-1, correspondente s vibraes no plano da amida III, devido ao estiramento C-N e deformao N-H, em 1450 cm-1, correspondente estereoqumica dos anis pirrolidnicos14 e prximo a 3450 cm-1, devido ao estiramento O-H. O espectro do colgeno tambm mostra a integridade da sua tripla hlice, atravs da relao das absorbncias em 1235 e 1450 cm-1, devido amida III e ligaes C-H do anel pirrolidnico14. Para materiais preparados em solues cidas (pH 3,5), a integridade da estrutura secundria do colgeno pode ser verificada quando o valor da relao 1235cm-1/1450cm-1 for maior ou igual unidade. Para o material utilizado neste trabalho, o valor encontrado para esta relao (Tabela 1) foi 0,98, portanto, significativamente maior do que aquele que seria observado para estruturas desnaturadas, cujos valores esto por volta de 0,514. As bandas principais para o espectro da quitosana (Figura 3e) so: 1650 cm-1, correspondente a amida I, 1560 cm-1, relacionada a amida II, 1070 cm-1 e 1030 cm-1, devido ao estiramento C-O, prximo a 3450 cm-1, estiramento O-H, e 1314 cm-1 devido ao grupo CO-N-. A banda intensa entre 800 e 1200 cm-1 est relacionada com os anis piranosdicos22. Os espectros das blendas (Figuras 3b, c e d) so caracterizados pelas bandas do colgeno e da quitosana, sendo suas intensidades proporcionais quantidade de cada material na blenda. Para confirmar a ausncia de novas bandas nos espectros das blendas, fez-se para todos a subtrao pelo espectro da quitosana. Como Tabela 1. Razo de absorbncias 1235cm-1/1450cm-1 dos espectros de infravermelho do colgeno e das blendas Proporo colgeno-quitosana 1:0 3:1 1:1 1:3 A1235 /A1450 0,98 0,99 0,99 0,97

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exemplificado na Figura 4, subtraindo-se o espectro da quitosana pelo da blenda 1:1, o resultante ficou idntico ao espectro do colgeno. Com a ausncia de novas bandas e a preservao da intensidade e forma daquelas j existentes, conclui-se que, se houver interaes entre o colgeno e a quitosana, elas so puramente eletrostticas, envolvendo os grupos -NH3+ da quitosana e -COO- do colgeno. Este resultado j foi mencionado por outros autores na literatura, mas utilizando o atelocolgeno no lugar do colgeno nativo11.

Figura 5. Curvas termogravimtricas das amostras de: (a) colgeno; (b) colgeno-quitosana 3:1; (c) colgeno-quitosana 1:1; (d) colgeno-quitosana 1:3; e (e) quitosana

Tabela 2. Perda de massa dos materiais nos estgios de 25 at 200 oC e de 200 at 500 oC e a quantidade de resduo a 600 oC Perda de massa %
Figura 4. Espectros de IV: (a) blenda 1:1; (b) resultante da subtrao do espectro da blenda 1:1 pelo espectro da quitosana e (c) colgeno

Proporo Colgeno-quitosana 1:0 3:1 1:1 1:3 0:1

1 estgio 25-200oC
o

2o estgio Resduo (%) 200-500oC 600oC 61,8 53,7 49,5 45,5 46,2 21,2 24,9 29,2 31,6 31,8

A integridade da estrutura em tripla hlice do colgeno tambm foi determinada para as blendas pela razo das absorbncias 1235cm-1/1450cm-1, os resultados esto mostrados na Tabela 1. Esta razo para as blendas tambm foi prxima de 1, mostrando que a presena da quitosana no provoca desestabilizao da tripla hlice do colgeno nas blendas. Termogravimetria As curvas termogravimtricas do colgeno, da quitosana e das blendas esto mostradas na Figura 5. Elas mostram uma perda de massa em dois estgios. O primeiro estgio (da temperatura ambiente at cerca de 200 oC) atribudo perda de gua adsorvida e estrutural contida nos materiais, e o segundo estgio, iniciando-se prximo de 200 oC e indo at 500 oC, atribudo degradao dos polmeros23-25. A Tabela 2 mostra a porcentagem de perda de massa dos materiais nos dois estgios e a quantidade de resduo restante 600 oC. De acordo com a perda de massa do primeiro estgio, verifica-se que, aumentando a quantidade de quitosana nas blendas, maior a quantidade de gua perdida. No segundo estgio, nota-se que a degradao das blendas aumenta com o aumento da quantidade de colgeno. Isto tambm fica evidente na porcentagem de resduo restante dos materiais a 600 oC. Calorimetria exploratria diferencial As curvas de estabilidade trmica obtidas para o colgeno, quitosana e blendas esto mostradas na Figura 6. A curva do colgeno (Figura 6a) apresentou uma pequena transio em aproximadamente 54 oC, correspondente a sua desnaturao. Para as blendas, a temperatura de desnaturao (Td) do colgeno ocorreu tambm prxima

14,5 17,4 16,7 18,7 18,5

deste valor (Tabela 3), mostrando que a quitosana no alterou a estrutura nativa do colgeno em tripla hlice, como j mostrado anteriormente por espectroscopia no infravermelho. A transio prxima 115 oC est associada perda de gua ligada aos dois polmeros, e pelos valores de DH (Tabela 3) pode-se notar que as blendas com maior quantidade de quitosana perdem mais gua, confirmando o resultado da anlise termogravimtrica. Alguns autores mostraram a determinao da transio vtrea da quitosana e o estudo da miscibilidade de blendas de quitosana por calorimetria exploratria diferencial26. Neste trabalho no foi possvel fazer o mesmo estudo, pois existe a necessidade de se fazer um praquecimento das blendas, o que acabaria por desnaturar o colgeno. Ensaios de viscosidade especfica A Figura 7 mostra o comportamento da viscosidade especfica das solues de colgeno, quitosana e blendas a pH 3,5, em funo da temperatura. A soluo de colgeno apresenta viscosidade aproximadamente trs vezes maior do que a soluo de quitosana com a mesma concentrao. As viscosidades das blendas so intermedirias s viscosidades do colgeno e da quitosana. Para as solues de colgeno e das blendas no intervalo de 25 oC a 35 oC as viscosidades decresceram, mantendo uma pequena diferena entre seus valores. partir de 35 oC as viscosidades destas solues passaram a decrescer rapidamente, devido desnaturao

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Figura 7: Efeito da temperatura sobre a viscosidade especfica de solues de: (a) colgeno; (b) colgeno-quitosana 3:1; (c) colgeno-quitosana 1:1; (d) colgeno-quitosana 1:3 e (e) quitosana

Figura 6. Curvas de estabilidade trmica das amostras de: (a) colgeno; (b) colgeno-quitosana 3:1; (c) colgeno-quitosana 1:1; (d) colgenoquitosana 1:3 e (e) quitosana

Tabela 4: Temperatura de desnaturao do colgeno obtida pelo ponto de inflexo das curvas de viscosidade especfica Proporo colgeno-quitosana 1:0 3:1 1:1 1:3 Temperatura de desnaturao do colgeno (ponto de inflexo da curva) 42,5 42,6 42,3 42,2

Tabela 3. Transies trmicas obtidas por DSC para as membranas de colgeno, quitosana e blendas Proporo colgeno-quitosana 1:0 3:1 1:1 1:3 0:1 1 54,2 54,2 54,5 * Transio trmica (oC) 2 114,8 114,3 114,1 113,8 116,9 DH (J g-1) 317,4 352,8 361,6 386,7 393,1

*no foi possvel obter esta transio, devido baixa concentrao do colgeno na blenda

com o colgeno. Assim, possvel controlar o entumescimento das membranas, entre aproximadamente 70% e 80%, variandose a proporo de cada um dos polmeros na blenda. Este resultado importante para a utilizao destas membranas como implantes, matrizes para liberao controlada de drogas e membranas permeveis. Estes resultados esto de acordo com as anlises trmicas, as quais mostraram que, quanto maior a quantidade de quitosana na blenda, maior a quantidade de gua retida pelas membranas. Comportamento mecnico As curvas representativas de tenso-deformao das amostras de colgeno, quitosana e blendas, atravs de ensaios de trao mecnica, esto mostradas na Figura 9. As curvas exibem comportamentos semelhantes e podem ser classificadas em trs regies: 1) a regio inicial linear e corresponde a fase elstica; 2) a regio curva, consecutiva linear, corresponde deformao plstica uniforme, sendo que o material no sofre estrangulamento e 3) regio plstica no uniforme, marcada pelo estrangulamento da amostra. Nesta regio a deformao tambm varia linearmente com a tenso. Apesar das curvas da Figura 9 apresentarem um aspecto semelhante, nota-se que o colgeno e a quitosana tem comportamentos opostos nas regies elstica e plstica. Na regio elstica o colgeno deforma mais que a quitosana, embora esta ltima suporte maior tenso no limite de elasticidade. J na regio plstica este comportamento invertido, ou seja, a quitosana passa a deformar mais que o colgeno para um mesmo valor de tenso, enquanto o colgeno capaz de suportar maiores tenses que a quitosana. Estes comportamentos obtidos para o colgeno e a quitosana so repassados para as blendas de acordo com as suas propores. Assim, as blendas com maior quantidade de colgeno devem suportar maiores tenses antes

do colgeno. J a soluo de quitosana teve uma diminuio gradual da viscosidade na faixa de temperatura estudada. A temperatura de desnaturao do colgeno pode ser obtida pelo ponto de inflexo das curvas (Tabela 4). A temperatura de desnaturao do colgeno nas blendas foi prxima de 42,5 oC, o que confirma que a quitosana no altera a estrutura de tripla hlice do colgeno em soluo, como tambm indicado por DSC e espectroscopia no infravermelho para os materiais na forma de membrana, embora nesta forma, a temperatura de desnaturao tenha sido prxima de 54 oC. Isto se deve ao fato de que, em soluo, as molculas apresentam maior mobilidade e, portanto, maior facilidade das ligaes serem rompidas quando submetidas a variaes de temperatura. Absoro de gua A Figura 8 compara a capacidade de absoro de gua das membranas das blendas com as membranas de colgeno e quitosana. Notase pelas curvas que todas as membranas atingiram a mxima quantidade de gua aps meia hora de imerso e a quantidade de gua absorvida pelas membranas aumenta proporcionalmente com o aumento da quantidade de quitosana na blenda, o que est relacionado com a maior hidrofilicidade da quitosana (GA=24%), comparado

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Tabela 5. Propriedades mecnicas pelo mdulo de trao das amostras de colgeno, quitosana e blendas Proporo colgeno-quitosana 1:0 3:1 1:1 1:3 0:1 Mdulo de Young (N mm-2) 39 3 41 3 44 3 46 3 50 3 Tenso no escoamento (N mm-2) 22 2 24 2 27 2 30 2 32 2

Figura 8. Porcentagem de gua absorvida pelas membranas de: (a) colgeno; (b) colgeno-quitosana 3:1; (c) colgeno-quitosana 1:1; (d) colgeno-quitosana 1:3 e (e) quitosana

em tripla hlice responsvel em grande parte por suas propriedades mecnicas e biolgicas. As propriedades das blendas como capacidade de absoro de gua, estabilidade trmica e resistncia trao e deformao so intermedirias quelas apresentadas pelos materiais individuais e podem ser controladas variando-se a proporo do colgeno e da quitosana. As blendas obtidas neste trabalho podero ser utilizadas como biomateriais nas formas de gel e membrana em variadas aplicaes, como veculo de liberao de drogas, bandagens, gis injetveis, membranas periodontais, etc. AGRADECIMENTOS Aos tcnicos E. Biazin, G. D. Broch e V. C. A. Martins pela colaborao e Capes pela bolsa e o suporte financeiro. REFERNCIAS
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Figura 9. Curvas representativas de tenso-deformao para: (a) colgeno; (b) colgeno-quitosana 3:1; (c) colgeno-:quitosana 1:1; (d) colgenoquitosana 1:3 e (e) quitosana

da ruptura, enquanto as blendas com maior quantidade de quitosana devem deformar mais. No foi possvel determinar a tenso, nem a deformao no momento da ruptura dos materiais, devido presena de pequenas fibras de colgeno nos corpos de prova, impedindo a reprodutibilidade dos ensaios. O comportamento intermedirio das blendas em relao aos seus constituintes pode ser notado tambm pelos valores de mdulo de Young e tenso de escoamento dos cinco materiais (Tabela 5). CONCLUSES Neste trabalho foi mostrado um mtodo simples e rpido de preparao de gis e membranas de blendas colgeno-quitosana em diferentes propores. Foram estudadas por espectroscopia de infravermelho, calorimetria exploratria diferencial e ensaios de viscosidade especfica as possveis interaes entre estes dois polmeros e foi mostrado que a quitosana no interfere no arranjo estrutural do colgeno em tripla hlice, tanto em soluo como na forma de membranas. Este um resultado importante, pois a estrutura do colgeno