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MICROBIOLOGIA DE ALIMENTOS
Contedo programtico das aulas prticas ainda em preparao 2 provas prticas no horrio da aula (15% cada) Relatrios (5% extra, 5% a menos para quem no entregar) cada relatrio dever ser entregue no prazo mximo de uma semana aps a aula.
Uelinton M. Pinto
Normas de segurana
As lminas e lamnulas usadas devem ser colocadas em recipiente com desinfetante; Lavar as mos com freqncia, usando soluo desinfetante, com gua corrente e sabo, especialmente antes e aps o trabalho laboratorial; Limpar a mesa de trabalho, antes e depois de cada sesso de trabalho, usando desinfetante;
O cotidiano no laboratrio
Organizao! Tempo mximo entre diluio e inoculao 20 min Limpar e desinfetar a superfcie de trabalho antes e depois do trabalho dirio; Identificar as amostras, bem como o material a ser utilizado, antes de iniciar a anlise.
O cotidiano no laboratrio
O material utilizado deve receber a seguinte seqncia de tratamento: esterilizao, lavagem, secagem, embalagem; esterilizao e armazenamento; Os cultivos aps a leitura devem ser esterilizados;
O cotidiano no laboratrio
Normas de higiene e ordem pessoais Manter no laboratrio exclusivamente os materiais necessrios aos trabalhos de anlise; Se for portador de algum ferimento nas mos, no participar dos trabalhos de anlise. No caso de necessidade extrema, utilizar luvas, procedendo tambm a sanificao das mesmas; Lavar e usar sanificantes nas mos ao entrar, sempre que for necessrio e ao sair do laboratrio;
O cotidiano no laboratrio
Normas de higiene e ordem pessoais Evitar tocar o corpo e especialmente os olhos, boca, nariz com as mos durante os trabalhos no laboratrio; No umedecer etiquetas ou outro material do laboratrio com a lngua; Em casos de acidente com ferimentos e cortes, proceder imediatamente a lavagem e a desinfeco;
O cotidiano no laboratrio
Resumo das condies de esterilizao:
a) Via seca: 170 C por 2 a 3 horas (estufa de esterilizao): placas de Petri, pipetas, vidraria em geral. b) Via mida: 121 C por 15 min. (autoclave): soluo de diluio, meios de cultura, etc. c) Antibiticos, vitaminas: filtrao
Diretos
Indiretos
Contagem em placas
Diretos Viveis
Mtodos rpidos
Indiretos
Radiometria
Determinao de impedncia
Atividade metablica
Contagem em placas
Contagem em placas
Cont. em membrana filtrante Determinao do NMP
Luminescncia dos genes lux
Radiometria
Determinao de impedncia
Atividade metablica
Stomacher
Contagem em placas
Diluio seriada Dilui
25g
225mL
Homogenato
Diluente
Plaqueamento
Plaqueamento
Mtodos de plaqueamento
Entre 30 e 300
10
-4
Spiral plater
Spiral plater
UFC/mL
Tcnica de microcotas
20 l
UFC/mL
Contagens Microscpicas
Petrifilm(3M)
1 ml de diluente contendo a amostra
Contagens eletrnicas
Contagem em placas Cont. em membrana filtrante Determinao do NMP Luminescncia dos genes lux
Reidratao
Radiometria
Determinao de impedncia
Incubao
Atividade metablica
10 ml por tubo
1 ml por tubo
Confirmativo
Membrana filtrante que retm clulas Sada para vcuo Incubao Colnias
Contagem em placas Cont. em membrana filtrante Determinao do NMP Luminescncia dos genes lux Radiometria Determinao de impedncia Atividade metablica
Secagem
Laranja de acridina
Membrana
Contagem em placas Cont. em membrana filtrante Determinao do NMP Luminescncia dos genes lux Radiometria Determinao de impedncia Atividade metablica
Contagem em placas Cont. em membrana filtrante Determinao do NMP Luminescncia dos genes lux Radiometria Determinao de impedncia Atividade metablica
A deteco acontece quando h 107 clulas/g Impedncia diminui deteco automtica Vrios sistemas comerciais disponveis deteco de diversos tipos de microrganismos
RAPID
Contagem em placas Cont. em membrana filtrante Determinao do NMP Luminescncia dos genes lux Mtodo indireto deteco de CO2 radioativo por exemplo. Radiometria Determinao de impedncia Atividade metablica
lux genes
Engenharia gentica do fago especfico
Contagem em placas
Fago multiplica
LUZ
Atividade metablica
Determinar o efeito de diversos fatores, encontrados pelos micro-organismos nos alimentos, no crescimento microbiano. Contagem de microrganismos em alimentos. Contagem total de aerbios em placa (spread plate e microgotas); Contagem de psicrotrficos; Determinao de coliformes totais e termotolerantes; Isolamento de patgenos de alimentos
Avaliao
Responder s seguintes perguntas para a prxima aula: 1 Por que enumerar micro-organismos em alimentos? 2 Que tipo de micro-organismos seriam enumerados de um alimento refrigerado? 3 Qual a principal desvantagem de se enumerar microorganismos pelos mtodos tradicionais? 4 Qual o objetivo de se utilizar membranas para as contagens de micro-organismos em microscpio?
1. Jay, J.M. Microbiologia de Alimentos/ James M. Jay; trad. Eduardo Cesar Tondo [et al.] 6.ed. Porto Alegre: Artmed, 2005. 2. FRANCO, B.D.G.M.; LANDGRAF, M. Microbiologia de Alimentos. So Paulo, Atheneu, 2008. 3. APHA. Compendium of Methods for the Microbiologica Examination of Foods. 2001.