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Grado: 5 Semestre
Objetivo.El alumno efectuara el recuento de leucocitos, utilizando la cmara cuenta glbulos de Neubauer sin error.
Material.Pipetas para glbulos blancos de la cmara de Neubauer. Torundas con alcohol Microscopio Boquilla con ligadura Lanceta
Fundamento.La sangre se diluye 1=20, la pipeta usada es semejante a la de glbulos rojos, pero su bulbo es mas pequeo y sus graduaciones son distintos. El tallo esta dividido en 10 partes iguales con seales 0.5 y 1 sobre el extremo corto arriba del bulbo, se encuentra la seal 11; el diluyente usado es una solucin hipotnica que destruye a los glbulos rojos.
Procedimiento.Se aspira la sangre hasta la seal, 0.5, se limpia la punta de la pipeta y se absorbe diluyente hasta la marca 11. Los diluyentes para leucocitos son:
Solucin de HCL al 1% o solucin n/10, sol. De acido actico al 2 o 3%, a estas soluciones se les adiciona unas gotas de violeta de gencina, azul de metileno. La agitacin de la pipeta y el llenado de la cmara de recuentos es igual que para el recuento de eritrocitos. Los leucocitos se encuentran en los cuadros grandes de las esquinas de las cuadriculas, cada uno de estos cuadros esta dividido en 16 cuadritos, se suman los resultados de cada cuadro grande, se saca mitad y se aade dos ceros. Esto ser el numero de leucocitos por mm3 de sangre, la diferencia d enumero de leucocitos obtenido en cada cuadro no ha de ser mayor de 12. Valores normales de leucocitos. Recin nacidos 10 000-25 000/mm3 Nios de 1 ao 5 000-18 000/mm3 Nios de 4 a 7 aos 6 000-1 500/mm3 Adultos 5 000-10 000/mm3
Utilizando la pipeta de glbulos blancos llenar la cmara con la con la sangre bien diluida y mezclada. No debe haber burbujas de aire y el liquido no debe derramarse, si se derrama, se deber lavar la cmara, secarla, montarla y volverla a llenar. Dejar que las clulas se asienten en el fondo de la cmara durante dos minutos. Para evitar que el lquido se seque, se puede colocar la cmara en una caja de petri que contenga un papel filtro mojado. Se deber ajustar el enfoque de manera que las clulas aparezcan como pequeos puntos negros. Incluir en la cuenta las clulas observadas sobre las lneas de dos de los lados de cada cuadro que se cuenta.
Hematocitometro de Neubauer. Los cuadros marcados W se utilizan para contar leucocitos, los cuadros R para contar eritrocitos y plaquetas.
Se diluyen en la cuenta clulas situadas sobre las lneas de dos lados del cuadro.
Papel filtro.
Autoevaluacin.1.- Encontrar con ayuda del microscopio la cuadricula para contar glbulos blancos.