UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE NICARAGUA UNAN-MANAGUA I.P.

HISTOLOGIA BIOANALISIS CLINICO USO Y MANEJO DEL MICROSCOPIO Y METODOS HISTOLOGICOS PROFESOR: DR. ROBERTO ARAUZ SALGUERA

INTEGRANTE YURI VLADIMIR VILLALOBOS CALERO FECHA: 11/08/11

INTRODUCCION El conocimiento actual referente a la estructura y funcin de los organismos biolgicos est fundamentado en los mtodos necesarios para la investigacin de las clulas y los tejidos siendo ejemplos claros de esto la microscopia electrnica, la Inmunihistoquimica , el fraccionamiento celular y las tcnicas para el estudio del ADN. Los mtodos para la obtencin de preparaciones histolgicas ocupadas en los estudios de microscopia ptica, se engloban en la Tcnica Histolgica. La Tcnica Histolgica abarca varios procedimientos a los que se somete un tejido para proporcionar los cortes como se conocen, montados bajo un cubre objeto con imgenes de estructuras contrastadas, para su estudio bajo microscopia ptica o electrnica. Denominamos proceso histolgico a una serie de mtodos y tcnicas utilizados para poder estudiar las caractersticas morfolgicas y moleculares de los tejidos. Hay diversos caminos para estudiar los tejidos, es decir, series de tcnicas que se utilizarn dependiendo de qu caracterstica deseemos observar.

AUTOEVALUACION:
1. Qu lente se encuentra cerca del ojo observador y cual cerca del objeto? Cerca del ojo se encuentra el lente ocular y cerca del objeto esta el lente objetivo. 2. Qu funcin realiza la lente condensador? Su funcin es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparacin, formando un cono de luz con el mismo ngulo que el del campo del objetivo. 3. Con que lente se debe enfocar primero? Porque? Para empezar a mirar cualquier cosa con el microscopio se debe mirar primero con el objetivo de 10x (sin correr la platina para que no se desubique el objeto), despus con el 40x y por ultimo con aceite de inmersin el objetivo 100x 4. De qu color se observa el ncleo y el citoplasma de una clula con hematoxilina y eosina? Por qu? Con eosina que es un colorante acido tie de rosado o rojo elementos bsicos ejemplos el citoplasma. Con la hematoxilina que es un colorante bsico tie de azul o purpura elementos cidos ejemplo el ncleo. 5. Por qu hay que observar primero la lamina a menor aumento? Se observa a menor aumento (10x) ya que enfocamos el campo visual de la muestra para despus continuar con el orden de los lentes objetivos(40x y 100x) 6. Para observar clulas vivas que tcnicas e instrumentos usted empleara Dentro de estas tcnicas existen 3 que son las ms importantes y que tienen mayor importancia en este estudio de las clulas, hacindose indispensables para cualquier tipo de estudio hoy en da. Estas 3 tcnicas de estudio son las siguientes: 1. Microscopia: - Microscopia ptica. - Microscopia electrnica. 2. Fraccionamiento Celular o Divisin Celular. 3. Citoqumica.

 Pasos de la tcnica de inclusin en parafina, en orden sucesivo y el propsito de cada uno.

 La parafina es una sustancia de aspecto ceroso que est formada por mezclas de hidrocarburos saturados. A temperatura ambiente es slida y su punto de fusin puede variar entre 40 y 70 C segn su composicin de la mezcla de hidrocarburos. Resultan distintos tipos de parafinas a temperatura ambiente que se emplean segn las necesidades. As, parafinas ms duras a temperatura ambiente tienen un punto de fusin mayor, mientras que las ms blandas uno menor. Es recomendable una dureza mayor para incluir muestras ms duras. Las parafinas ms usadas tienen un punto de fusin en torno a los 60 C. Podemos tambin modificar las caractersticas de las parafinas aadiendo sustancias para variar su dureza, viscosidad, fragilidad, etctera. La parafina no es miscible con agua, mientras que todos los tejidos estn formados principalmente por agua. Adems, la mayora de los fijadores son soluciones acuosas. Esto implica que para que la parafina lquida pueda penetrar completamente en el tejido ha de sustituirse el agua por un solvente orgnico. Esto se consigue mediante la deshidratacin del tejido en alcoholes, normalmente metanol, de gradacin creciente hasta alcohol de 100. Posteriormente se transfiere el tejido a un lquido que sea miscible tanto con el alcohol de 100 como con la parafina, denominado sustancia intermediaria, como es el benceno, xileno, tolueno o el xido de propileno, entre otros. Estas sustancias son normalmente aclarantes por lo que comprobando la translucidez de la pieza podemos cerciorarnos de la penetracin de la sustancia intermediaria en el tejido. El tiempo de incubacin de la pieza alguna de estos lquidos intermediarios como el tolueno o xileno no debe ser excesivo puesto que estas sustancias endurecen la pieza y provocar problemas hacer las secciones. Por ltimo se pasa el tejido a parafina previamente licuada en una estufa regulada a la temperatura apropiada para dicho tipo de parafina. Se dan tres pasos por parafina para favorecer una buena impregnacin. El tiempo que duran dichos pasos depende de lo voltil que sea el lquido intermediario y lo grande que sea nuestra pieza. Ser mayor cuanto menos voltil es el lquido intermediario o mayor sea la muestra de tejido. Hay que tener en cuenta que un tiempo excesivo en parafina puede endurecer el tejido. Tras el embebimiento completo de la muestra se vierte parafina lquida en un molde, se introduce la muestra y se coloca segn la orientacin deseada de corte y se deja solidificar a temperatura ambiente.

 Artefactos ms frecuentes que se pueden presentar en cada uno de los pasos de la tcnica de inclusin en parafina.

De fijacin: precipitacin de las protenas. Deshidratacin y aclaramiento: espacio pticamente vacio. De cortes: cortes de diferente grosor. Del montaje: pliegues.

CONCLUSION Los mtodos histolgicos son muy importantes, con ellos podemos aprender a diferenciar muchos elementos dentro de una clula viva adems pudimos ver la manera de cmo realizarlos todo con ayuda del microscopio ptico.

BIBLIOGRAFIA http://es.scribd.com/doc/3502035/INTRODUCCION20AL20ESTUDIO20DE20LA20HIS TOLOGIA12 www.rincondelvago.com www.buenastareas.com www.yahoo.es www.elpregunton.com