INMUNOLOGA APLICADA Notas de Clase Mara Dolores Lastra A.

INMUNOHEMATOLOGIA En 1901 Karl Landsteiner demostr la existencia de los antgenos de los grupos sanguneos en los eritrocitos humanos, as como de anticuerpos dirigidos contra estos antgenos en el suero humano. Landsteiner verdaderamente abri las puertas del banco de sangre con eL descubrimiento del primer sistema de grupo sanguneo, el ABO. Esto marc el principio del concepto de lo nico individual definido por los antgenos eritrocitarios presentes en su membrana. El sistema ABO permanece como el ms importante en la prctica de la transfusin. La transfusin de un tipo incorrecto de ABO puede provocar la muerte del paciente. Los antgenos de grupo sanguneo son marcadores de superficie en el exterior de la membrana del eritrocito. Son protenas y carbohidratos, unidos a lpidos y a protenas. La terminologa utilizada actualmente para denominar los grupos sanguneos es inconsistente. Algunos antgenos se denominaron por el individuo o familia cuyos eritrocitos tenian el antgeno o por el que hizo el primer anticuerpo que reconoci al an tgeno., a otros se les asign una dnominacin numrica o alfabtica. Aun dentro del mismo grupo, se han utilizadp diferentes formas de nombrar a los antgenos. La Asociacin Internacional para laTransfusin Sangunea (siglas en ingls,ISBT) ha establecido un sistema de letras maysculas y nmeros para representar los sistemas y los antgenos de grupo sanguneo en un formato, que permitir una ampliacin y un registro en sistemas de cmputo. Por ejemplo:

Sistema ABO Nombre del sistema: ABO Smbolo ISBT: ABO Nmero ISBT 001 Nmero de antgenos: 4 Nombre de los genes: ABO Localizacin cromosmica: 9q34.1-q34.2 Expresin En forma soluble en todos los fluidos corporales (excepto lquidocfalo raqudeo)en secretores. Adems de la membrana del eritrocito, en linfocitos y palquetas slo adheridoa del plasma. En la mayor parte delas clulas epiteliales y/o endoteliales. Distribucin amplia en tejidos. En trminos generales, la va bioqumica de los grupos sanguneos produce el antgeno H (antgeno presente en las personas de grupo O) y se modifica el antgeno H a antgeno A (presente en individuos A) y el antgeno B (presente en las personas B). La enzima A se codifica por el alelo del gen ABO y la enzima B por el alelo correspondiente del gen ABO. El alelo O u H, no codifica una enzima as que el individuo que es homocigoto ii no puede modificar el antgeno H, ya sea el A o el B, as permanece como tipo sanguneo 0 cero. Los individuos que son heterocigotos para los alelos A y B (AB), codifican para ambas, la enzima A y la enzima B y producen ambos antgenos A y B. El gen ABO se localiza en el cromosoma 9 (9q34.1-q34.2). Otros rasgos asociados con genes del cromosoma 9 son la galactosemia, el sndrome de "nail-patella" y el de "xeroderma pigmentosum". Secretores Las secreciones son, saliva, sudor, lgrimas, leche, jugo gstrico, etc. Genes Secretores gen: Se/Se,Se/se Se:carcter dominante, se: carcter recesivo No secretores gen: se Frecuencia Secretores 78% poblacin No secretores 22% En secreciones, O A B AB tiene H tiene A y H tiene B y H tiene A, B y H

Los individuos homocigotos para se/se, no secretan antgenos A, B y H, aunque tengan los genes A, B y H. La secrecin de estas personas contiene cadenas tipo

1 y tipo 2 pero no actividad A, B y H. La enzima codificada por el gen h acta principalmente en cadenas tipo 2 y en las membranas de eritrocitos. La enzima producida por Se prefiere tipo 1 y acta principalmente en las glndulas secretoras. El rol sugerido para la transferasa Se, (L-fucosiltransferasa) es transferir L-fucosa a la galactosa terminal de cadenas tipo 1 que forma la substancia h en las secreciones. Es la presencia de fucosiltransferasa que subsecuentemente determina si las substancias A, B y H solubles, se secretan por que la substancia H debe sintetizarse, antes de la formacin de las substancias A o B. Otros antgenos en secreciones: Lewis, Chido, Rodgers, I, etc. Las pruebas para secreciones pueden ayudar a establecer el verdadero tipo ABO en individuos con antgeno eritrocitarios poco desarrollados. Y su demostracin en saliva es evidencia para la herencia del gen A, B y H. Y Se.

Desarrollo y distribucin de los grupos ABO Los antgenos A y B no estn completamente desarrollados en los recin nacidos, pero se puede detectar algn desarrollo antignico en los eritrocitos embrionarios a las 5 semanas de edad gestional. Aunque la fuerza de los antgenos A y B no aumenta durante la vida fetal, estos antgenos ganan fuerza enseguida del nacimiento. Se observan reacciones de aglutinacin dbiles con los eritrocitos y de neonatos comparadas con las de eritrocitos adultos. Se ha propuesto que las diferencias en la actividad celular de A, B y H entre infantes y adultos puede relacionarse con el nmero de estructuras ramificadas en las membranas celulares de cada grupo. El nmero y fuerza de los sitios antignicos son menores en los infantes que en los adultos. Los bebes del grupo A pueden ser tipo A2 al nacer pero subsecuentemente, tener reacciones de tipo A1 a los 6 a 18 meses de edad. Bioqumica y desarrollo de los antgenos A, B y H El gen H codifica para la produccin de alfa-L-fucosiltransferasa que cataliza la adicin de L-fucosa, el aminoazcar dominante del antgeno H, a dos estructuras ligeramente diferentes conocidas como cadenas precursoras 1 y 2 ( estas se denominan as por las uniones entre la N-acetilglucosamina y la galactosa terminal,en la 1 la unin es beta 1-3 y en la 2, es beta 1-4). Una vez que acta el gen H, las enzimas codificadas por los genes A y B, pueden aadir los monosacridos correspondientes (que dan especificidad) a las cadenas H preformadas. Las enzimas transferasas son los productos de los genes A y B. La substancia precursora est constituda por glucosa-galactosa-Nacetilglucosamina-galactosa. En la substancia H existe una L-fucosa insertada en

la D-galactosa terminal, la L-fucosa es el azcar inmunodominante. En la substancia A el azcar inmunodominante en la N-acetil D-galactosamina insertada en la D-galactosa terminal; en la B es D-galactosa-insertada en la D-galactosa terminal. La L-fucosa es el azcar responsable de la especificidad H. El gen A codifica para la produccin de N-acetilgalactosaminil transferasa que transfiere Nacetilgalactosamina de nucletido uridn-difosfato-N-acetil-D-galactosa-a las estructura H. El gen A produce mayor concentracin de glicosiltransferasa que el gen B. Esto hace que prcticamente todo el antgeno H en la membrana del eritrocito se convierta a antgeno. Hay de 810,000 a 1,170,000 sitios antignicos de A, en la clula adulta. El gen B codifica para la D-galactosiltransferasa que transfiere D-galactosa del uridn-difosfato galactosa a la substancia H. Este azcar en posicin terminal es inmunoespecfico para la substancia B. Existen de 600,000 a 830,000 sitios antignicos B en el eritrocito. Cuando se heredan A y B, la enzima B parece competir ms eficientemente por la estructura H que la A. As el nmero de ags. A en el eritrocito A es de 600,000 comparada con un promedio de 720,000 sitios ags. B. Variaciones de las transferasas Aunque son especficas para un mismo monosacrido y utilizan la misma molcula aceptora, las transferasas producidas por los genes A1 y A2 son diferentes cuantitativa y cualitativamente. Se ha demostrado que los niveles de transferasa son de 5 a 10 veces mayores en personas A1, que en las A2, los individuos y las transferasas difieren en requerimientos qumicos tales como el pH ptimo.

Configuracin molecular de A, B y H Los ligosacridos A o B se insertan en la banda 3 y en la 4.5 y son partes integrales de la membrana de los eritrocitos y de las clulas endoteliales y epiteliales. Estos ligosacridos tambin estn presentes en forma soluble en el plasma. Las glicoprotenas que llevan ligosacridos idnticos son responsables de la actividad A y B en las secreciones como la saliva. Se encuentran ligosacridos A y B que carecen de protena acarreadora o lpidos, en la leche y la orina. Cadenas tipo 1 y tipo 2 Los antgenos H se sintetizan en cadenas precursoras o core que terminan en enlaces tipo 1 y tipo 2. Las cadenas difieren solo en el enlce de la beta galactosa al residuo terminal beta-N-acetilglucosamina. El carbn beta-1,3 representa la

cadenas tipo 1; en enlace beta-1,4 representa una cadena tipo 2. Los azcares inmunodominantes A, B ya se pueden aadir a cualquiera de las dos cadenas. Las cadenas tipo 1; son las principales acarreadoras de A, B y H en secreciones y fluidos corporales. Los antgenos A, y H aparecen como oligosacridos libres en la leche y la orina y en glicolpidos del plasma. En la saliva, los antgenos A, B y H, se llevan en glicoprotenas con cadenas tipo 1 y tipo 2. Las cadenas tipo 2 casi exclusivamente forman los antgenos A, B y H presentes en las membranas de los eritrocitos. Estudios recientes indican que puede haber cadenas tipo 3 y tipo 4. Los antgenos ABO estn estructuralmente relacionados a la banda 3 y a la banda 4.5 intercambiadora de glucosa. La estructura qumica bsica de los antgenos ABO, se encuentra en la presentacin en power-point, correspondiente. Subgrupos sanguneos de ABO A1, A2, A3, Ax, Am, etc. Transparencia Los antgenos del grupo A se pueden diferenciar en subgrupos principales: A1 y A2. Aproximadamente 80% de los A, son A1, la mayora de los restantes son grupo A2. Los patrones hereditarios de los fenotipos A1 y A2 sugieren que los genes A1 y 2 codifican para diferentes transferasas. Al menos cuatro tipos diferentes de substancias activas A y H, se han aislado de los eritrocitos. Las H se clasifican H1, H2, H3 y H4. El suero de individuos B contiene una mezcla de dos acs, anti A y anti A1 que se pueden separar por absorcin. Las clulas A que reaccionan slo con anti A y no con anti A1, se clasifican como de subgrupo A2. Cuando el anti A se absorbe con clulas A2, el suero que queda es el anti A1. Las clulas A que reaccionan con anti A y anti A1, se clasifican como A1. Otra fuente de anti A1 es la lectina de Dolichos biflorus. De anti H, es la lectina de Ulex europeus. Existen as, cuatros tipos diferentes de A y H activos, las cadenas H se clasifican en H1, H2, H3 y H4 y las cadenas A se refieren como Aa, Ab, Ac, Ad. Estas cadenas varan en longitud y complejidad de las ramificaciones. Las cadenas ms lineales son: H1 y H2; Aa y Ab. Las cadenas ms ramificadas son H3, H4 y Ac y Ad. Los grupos que amplan la determinacin de ABO son el A1 y el A2, y A1B y A2B. Reacciones serolgicas de estos fenotipos en transparencia y material impreso . Los otros subgrupos A3, Ax, Am, Aend y otros son menos frecuentes por lo tanto en rutina no se investigan.

Grupo Bombay Se presenta una situacin interesante cuando un individuo no es capaz de hacer antgeno H. Esta persona, no puede producir antgeno H, y aun cuando tenga enzimas A y B, no puede hacer estos antgenos, porque no existe el precursor para los antgenos sobre el que ejercer una accin. Un individuo que no puede producir antgeno H, parecer de grupo O, ya que este grupo no presenta A, ni B, adems el Bombay tampoco produce H. Esto se document por primera vez en Bombay, por Bhenda y as se le conoce como fenotipo Bombay. Estos individuospueden presentar anti A, anti B y anti H , en secreciones. Reaccin con anti H de los grupos del sistema ABO: Reaccin con anti H: O > A2> A2B> B> A1> A1B