Activacin de un microorganismo y cultivo de cepas J.Arana, E. Arrese y C.

Cajavilca
Resumen El laboratorio a tratar consisti en la activacin de la levadura Sacchraomyces cerevisiae, que es comnmente llamado levadura de panadero. Durante el laboratorio se explic que la levadura se encuentra dormida debido a un proceso de lioxifilacin el cual el material biolgico es desecado en fro, que sirve para conservar sin dao los mas diversos materiales biolgicos. El producto al ser enfriado, conserva sus propiedades al rehidratarse. Se conserv en forma de pellet, que son aglomerados de material orgnico, a 4C en una refrigeradora. Se detall que para que la levadura Sacchraomyces cerevisiae se active, se requiere que sta este en un medio el cual contenga azcar casero, miel o jugo de caa, para que la levadura se despierte y se alimente del azcar, adems de que debe estar en un medio lquido y en relacin de 3% con respecto al sustrato. Para que esta reaccin se lleve a cabo, la levadura necesita de oxgeno por ser aerbico, por lo que se deja un espacio en la botella y no se llen completamente. Se hizo la activacin del microorganismo en una botella Gatorade de 350ml, disolvindose glucosa 2gr/100ml y almidn de papa 2gr/100ml en 100ml de agua, pesando correctamente y evitando que se ensucie la balanza. Luego de esto se coloc en la autoclave a 15 psi. y 120C por 15 min. para evitar que se formen otros microorganismos en la botella. Para agregar la levadura se us el asa de siembra, el cual previamente se calent al rojo vivo con el mechero de alcohol y luego enfri para esterilizar la punta a usar. Luego se agreg la levadura del pan a la solucin, que era de una tonalidad marrn de consistencia pastosa, se cerr y finalmente se guard en la caja. Previamente a este laboratorio, se procedi con observar las muestras de agar agar en la caja petri, del laboratorio de la semana pasada, para ver si el medio de cultivo estuvo correctamente estril. Lamentablemente se comprob que el medio de cultivo sufri una ligera contaminacin, en el cual se formo un hongo conocido como penicillium chrysogenum, el cual es muy frecuente en el medio ambiente y es conocido por atacar las frutas una vez que se fermentan. Se observ que el hongo tenia un color plomizo con bordes blancos en los extremos (ver Fig. 1 y Fig. 2).

Materiales Para la activacin de un microorganismo se necesit: A.- Material de Vidrio. Botella Gatorade 350ml. Probeta de 50ml.

B.- Reactivos 2gr. Glucosa 2gr. Almidn de papa. 100ml. de agua.

C.- Material de siembra Asa de siembra con punta de tungsteno. Mechero de alcohol.

D.- Preparacin de la muestra Balanza de precisin de 2 dgitos para laboratorio. Autoclave de laboratorio.

Mtodo Procedimiento realizado para la activacin de un microorganismo: 1. Preparar en una botella de vidrio de 350ml., 100 ml. de agua des ionizada. 2. Pesar 2gr de glucosa. 3. Pesar 2 gr. de almidn de papa. 4. Agregar a la botella de vidrio de 350ml. y colocar en la autoclave a 15psi y 120C. 5. Limpiar el asa de siembra con el mechero de alcohol hasta que este al rojo vivo y luego dejar enfriar. 6. Aadir la levadura de pan Sacchraomyces cerevisiae con el asa de siembra y luego cerrar. 7. Esperar algn resultado. Resultado Se puede apreciar un color marrn en la botella, el cual se debe dejar unas 2 horas para poder ver el resultado de la cepa. No se observ un cambio significativo al agregar la levadura, lo cual parece extrao. Existe la posibilidad que la levadura se halla secado, debido a que se inform que esa levadura fue dejada por alumnos de tesis el ciclo pasado, y la levadura de ese tipo solo se puede conservar fresca si esta en estado de pastillas (pellet), y al tener esa consistencia arenosa y el frasco al estar cerrado desde hace tiempo quiere decir que esa levadura ya se degrad hace tiempo. Respecto a la preparacin del cultivo de agar agar, puede haberse formado el hongo debido a un error en la esterilizacin de la caja petri al no aadirle alcohol, adems es posible que en el momento de abrir la placa, el aire haya dejado pasar algn microorganismo comn del ambiente. Bibliografa y Enlaces externos Consultado el 30/9/2009 a las 9:00 am http://www.invap.net/indus/liofilizacion/index.html http://es.wikipedia.org/wiki/Pellet http://www.uoguelph.ca/~gbarron/MISCELLANEOUS/penicill.htm

Anexo

Fig 1.- Primera muestra del cultivo de agar agar con penicillium chrysogenum.

Fig 2 .- Segunda muestra del cultivo de agar agar con penicillium chrysogenum.