MINISTERUL EDUCAIEI REPUBLICA MOLDOVA UNIVERSITATEA TEHNIC A MOLDOVEI FACULTATEA DE TEHNOLOGIE I MANAGEMENT N INDUSTRIA ALIMENTAR CATEDRA TEHNOLOGIA CONSERVRII

PROIECT DE AN
PROCESE MODERNE N TEHNOLOGII ALIMENTARE

TEMA: METODE DE DETERMINARE A INDICILOR DE CALITATE A SUCULUI DE STRUGURI

ELABORAT

GOLUBI ROMAN masterand CSPA 101

VERIFICAT

BORIS CARABULEA dr., conf. univ.

CHIINU 2011 1. Metoda de determinare a substanelor uscate solubile conform GOST 28562-90
1.1. Prelevarea probelor Prelevarea probelor se efectueaz conform cerinelor GOST 26313, pregtirea probelor conform cerinelor GOST 26671. 1.2. Aparate, materiale, reactive Refractometru, cu scar gradat n uniti parte de mas de zaharoz, cu diviziunea 0,5% i limita erorii absolute de 0,25%. Refractometru, cu scar gradat n uniti ai indicelui de refracie, cu diviziunea nu mai mare de 0,001 i limita erorii absolute 0,0002. Termometru de sticl cu mercur tip TL-4 4B2 sau TL-4 4-A2 conform GOST 28498. Cntar de laborator de uz general confom GOST 24104, cu limita maxim de cntrire 200g i limita erorii admise 0,7500 mg. Cntar de laborator de uz general conform GOST 24104, cu limita maxim de cntrire 1 kg i limita erorii admise 10,00 mg. Centrifug de laborator Phar GOST 25336 cu volumul 100, 150 sau 250 cm3. Plnie de laborator GOST 25336. Beior din sticl chimic de laborator GOST 21400. Alcool etilic rectificat tehnic GOST 18300. Tifon medicinal higroscopic GOST 5556. Hrtie de filtru GOST 12026. Ap distilat GOST 6709. 1.3 Pregtirea pentru ncercri 1.3.1. Pregtirea probei produsului Produsele lichide, care nu conin cantiti mari de particule n suspensie, snt folosite direct pentru ncercri. Produsele lichide care conin cantiti mari de particule n suspensie, i cele n form de pireu snt centrifugate sau snt filtrate prin cteva straturi de vat sau hrtie de filtru; primele porii de filtrat snt aruncate, iar restul snt folosite pentru ncercri. Produsele dense a cror faz lichid e greu de separat i produsele de culoare nchis snt diluate cu ap distilat, nu mai mult de dou ori. Astfel proba de produs marunit cu masa nu mai puin de 40g diluat cu ap, se menine nu mai puin de 15 min pe baia de ap clocotind, apoi amestecul este rcit, cntrit i filtrat. Produsele lichide de culoare nchis numai se amestec cu ap, determinnd masa probei i masa amestecului. 1.3.2. Pregtirea refractometrului pentru lucru nainte de lucru prisma refractometrului este tears cu vat sau tifon, umezit cu ap sau alcool, apoi este uscat. Se verific funcionarea aparatului dup indicele de refracie al apei distilate (1,334) la temperatura de 20,00,1C conform instruciei de exploatare. 1.4. Modul de lucru

1.4.1. ncercrile trebuie s fie efectuate la temperatura 10-40C cnd se utilizeaz scara gradat n uniti pari de mas zaharoz, i 15-25C cnd se utilizeaz scara gradat n uniti ai indicelui de refracie. n timpul determinrilor temperatura trebuie s fie meninut n limitele 0,5C. Dac este necesar, este conectat sistemul de termostatare a prismei refractometrului i se regleaz debitul de ap astfel ca s fie ndeplinite condiiile de mai sus. Temperatura soluiei de ncercare se aduce pn la valoarea, care se deosebete de temperatura prismei refractometrului nu mai mult de 2C. 1.4.2 nainte efecturii fiecrei determinri suprafeele prismelor se spal cu ap distilat sau cu alcool, se terge cu tifon sau vat i se usuc. Cantiti mici (2-3 picturi) de soluie de cercetare sunt picurate pe suprafaa prismei fixe de lucru i imediat se acoper cu prima mobil. Se lumineaz bine cmpul vizual, cu ajutorul manetei de reglare se ajusteaz linia care separ zona ntunecat de cea luminoas n ocular, fix la intersecia diagonalelor, se citete valoarea indicelui de refracie ce corespunde liniei de separare. Se efectueaz 2 determinri paralele. 1.5. Prelucrarea rezultatelor 1.5.1. Rezultatele determinrilor se ajusteaz la temperatura 20C. La determinri dup scara prii de mas de zaharoz este utilizat tabelul coreciilor de temperatur, indicat n anexa 1. La determinri dup scara indicelui de refracie, indicele de refracie a soluiei la 20C se calculeaz dup formula: n20D = ntD + K(t-20) unde ntD indice de refracie a soluiei la temperatura t; K schimbare a indicelui de refracie a soluiei la schimbarea temperaturii cu 1 C; K = 0,00013 C-1 t temperatura la care a fost efectuat determinarea, C, 15 t 25C. Transformarea valorilor calculate ai indicelui de refracie n20D n valori pari de mas substane uscate solubile (zaharoz) se efectueaz utiliznd tabelul 2 din anexa 2. Remarc. Se admite la determinri care nu cer precizie nalt, de a fixa punctul zero al refractometrului i de a efectua determinri la una i aceeai temperatur, constant n limitele 0,5C; n acest caz corecia de temperatur n rezultatele determinrii nu se introduce. Astfel valoarea erorii adiionale absolute la determinarea prii de mas a substanelor uscate solubile poate s ating 0,3%, la msurri n diapazonul de temperaturi 15C - 40C i diapazon pri de mas substane uscate solubile 2% - 80%. 1.5.2. Dac produsul a fost diluat cu ap, atunci partea de mas a substanelor uscate solubile n produs, X, n procente se calculeaz dup formula: X = a{1+100m1/[(100-)m2]} unde a valoarea parii de mas a substanelor uscate solubile, obinut pentru produsul diluat cu ap, %; m1 masa apei adugate, g; partea de mas a substanelor uscate insolubile n ap, din produs, %; = 5,5% - pentru pasta de tomate cu partea de mas a substanelor uscate solubile 25-30%; = 5,0% - pentru boabe uscate de struguri, = 1,8% - pentru gemuri i dulcea; = 0 - pentru produse lichide transparente de culoare nchis; m2 masa probei de produs, g. Rezultatul este rotunjit pn la prima cifr zecimal.

2. Metode de determinare a aciditii titrabile conform GOST 25555.0-82

Prezentul standard se aplic produselor de procesare a fructelor i legumelor i stabilete metode de determinare a aciditii titrabile: poteniometric pentru toate produsele, vizual pentru produse necolorate i de coloare deschis. Pentru efectuarea ncercrilor snt utilizate reactive calificate pure pentru analiz i ap distilat, ce nu conine acid carbonic. Cu acest scop apa distilat trebuie s fie proaspt fiart i rcit sau neutralizat cu soluie de hidroxid de sodiu C(NaOH)=0,1 moli/dm 3 pn la nuan slab-roz dup fenolftalein. 2.1. Prelevarea i pregtirea probelor

Se efectueaz prelevarea probelor conform GOST 26313, GOST 27853 i pregtirea probelor conform GOST 26671.

2.2. Metoda poteniometric 2.2.1. Principiul metodei Metoda se bazeaz pe titrarea poteniometric a soluiei de cercetare pn la ph=8,1 cu soluie hidroxid de sodiu C(NaOH) = 0,1 moli/dm 3. Limitele erorii relative probabile a determinrii N=V=3%; P=0,95. 2.2.2. Aparate, materiale i reactive pH-metru sau ionometru universal cu eroarea msurrilor nu mai mult 0,05 n diapazonul pH de la 4 pn la 9. Electrod de msurare (de sticl) i electrod de referin (clorur de argint sau calomel) sau electrod combinat. Cntar de laborator de uz general cu caracteristici metrologice conform GOST 24104, cu cea mai mare limit de cntrire pn la 500g, clasa de precizie 4. Pomp cu jet de ap conform GOST 25336 sau pomp Komovski. Colbe GOST 1770, 1-250-2 sau 2-250-2. Pipete dup documentaia tehnic normativ 2-2-25 sau 2-1-25, 2-2-50 sau 2-1-50, 2-2-100 sau 2-1-100. Biurete dup documentaia tehnic normativ 1-2-25-0,1 sau 2-2-25-0,1 sau 3-2-25-0,1. Colbe conice GOST 25336, -2-250-34 . Phare GOST 25336, -1-50 , -1-100 , -1-250 Plnii de laborator GOST 25336, -56-80 sau -75-140 sau -100-150 . Beior din sticl chimic de laborator GOST 21400. Hrtie de filtru GOST 12026 sau vat medicinal higroscopic GOST 5556. Soluii tampon cu pH 4,01 i 9,18 Hidroxid de sodiu GOST 4328, soluie pentru titrare C(NaOH)=0,1 moli/dm3. 2.2.3. Pregtirea pentru ncercri n colba conic de 250 cm3 este transferat cantitativ cu ap fierbinte, prin plnie, proba de produs cu masa de la 5,0 pn la 50,0 g n dependen de aciditatea presupus. Apoi n colb se toarn pn la jumtate din volumul ei ap cu temperatura 805C, se agit intens i se las 30 min, periodic agitnd. Dup rcire, coninutul colbei se transfer cantitativ n colba cotat de 250 cm3 i se toarn ap pn la cot. Se astup cu dop, se amestec bine coninutul i se filtreaz prin hrtie de filtru sau vat. Dac produsul este lichid, proba de 50,0 g luat cu eroarea nu mai mare de 0,1g, este transferat cantitativ cu ap, avnd temperatura camerei, n colb cotat de 250 cm3, se umple cu ap pn la cot, se amestec, apoi se filtreaz. Remarc. Probele de produs care conin bioxid de carbon, nainte de analiz snt eliberate de CO 2 prin creare de vacuum timp de 3-4 min cu ajutorul pompei cu jet de ap. Corectitudinea indicaiilor pH-metrului se verific cu ajutorul soluiilor tampon corespunztoare. 2.2.4. Modul de lucru a) n phar chimic se preleveaz cu pipeta de la 25 pn la 100 cm3 filtrat, obinut conform p. 2.2.3. Se ia aa cantitate de filtrat nct la filtrare s se consume nu mai puin 6 cm3 soluie NaOH. b) Filtratul luat conform p. a) este titrat prin agitare continu cu soluie hidroxid de sodiu la nceput repede pn la pH=6,0, apoi mai lent pn la pH=7,0, dup care titrarea se realizeaz n felul urmtor: concomitent se picur 4 picturi de titrant, nregistrnd cantitatea consumat i valoarea pH.

Titrarea este finisat prin adugarea nu mai puin 4 picturi soluie hidroxid de sodiu dup atingerea valorii pH=8,1. Cantitatea de soluie de hidroxid de sodiu, corespunztoare fix valorii pH=8,1 este determinat prin interpolarea datelor titrrii. Valorile pH, luate la interpolare, trebuie s fie ntre limitele 8,10,2. 2.2.5. Prelucrarea rezultatelor Aciditatea titrabil (X) recalculat la acidul predominant, n procente, este calculat dup formula: X=(VCM/m)(V0/V1)0,1 unde V volumul de titrant soluie hidroxid de sodiu, consumat la titrare, cm3; C concentraia molar a soluiei de titrant hidroxid de sodiu, mol/dm3; m masa probei, g; M masa molar, g/mol, egal pentru: acid malic M(1/2 C4H6O3) = 67,0; acid tartric M(1/2 C4H6O6) = 75,0; acid citric M(1/3 C6H8O7 H2O) = 70; acid acetic M(C2H4O2) = 60,0; acid succinic M(1/2 C2H2O4) = 45,0; acid lactic M(C3H6O3) = 90,1; V0 volum, pn la care a fost turnat n colba cotat cu prob, cm3; V1 volum de filtrat, luat la titrare, cm3. Ca rezultat final al ncercrii se ia media aritmetic a rezultatelor a dou determinri paralele, diferena relativ ntre ele nu trebuie s depeasc 5% (P=0,95). Rezultatele se rotunjesc pn la prima cifr zecimal. 2.3. Metoda vizual 2.3.1. Principiul metodei Metoda este bazat pe titrarea soluiei de cercetare cu soluie de hidroxid de sodiu C(NaOH) = 0,1 moli/dm3 n prezena indicatorului fenolftalein. Limitele erorii relative probabile ale determinrilor N=V=3%; P=0,95. 2.3.2. Aparate, materiale i reactive Cntar de laborator de uz general cu caracteristici metrologice conform GOST 24104, cu cea mai mare limit de cntrire pn la 500g, clasa de precizie 4. Pomp cu jet de ap conform GOST 25336 sau pomp Komovski. Colbe GOST 1770, 1-250-2 sau 2-250-2. Pipete dup documentaia tehnic normativ 2-2-25 sau 2-1-25, 2-2-50 sau 2-1-50, 2-2-100 sau 2-1-100. Biurete dup documentaia tehnic normativ 1-2-25-0,1 sau 2-2-25-0,1 sau 3-2-25-0,1. Colbe conice GOST 25336, -2-250-34 . Phare GOST 25336, -1-50 , -1-100 , -1-250 Plnii de laborator GOST 25336, -56-80 sau -75-140 sau -100-150 . Beior din sticl chimic de laborator GOST 21400. Hrtie de filtru GOST 12026 sau vat medicinal higroscopic GOST 5556. Hidroxid de sodiu GOST 4328, soluie pentru titrare C(NaOH)=0,1 moli/dm3. Picurtoare GOST 25336; Fenolftalein, soluie alcoolic cu partea de mas 10g/dm3.

2.3.3. Pregtirea pentru ncercri n colba conic de 250 cm3 este transferat cantitativ cu ap fierbinte, prin plnie, proba de produs cu masa de la 5,0 pn la 50,0 g n dependen de aciditatea presupus. Apoi n colb se toarn pn la jumtate din volumul ei ap cu temperatura 805C, se agit intens i se las 30 min, periodic agitnd. Dup rcire, coninutul colbei se transfer cantitativ n colba cotat de 250 cm3 i se toarn ap pn la cot. Se astup cu dop, se amestec bine coninutul i se filtreaz prin hrtie de filtru sau vat. Dac produsul este lichid, proba de 50,0 g luat cu eroarea nu mai mare de 0,1g, este transferat cantitativ cu ap, avnd temperatura camerei, n colb cotat de 250 cm3, se umple cu ap pn la cot, se amestec, apoi se filtreaz. Remarc. Probele de produs care conin bioxid de carbon, nainte de analiz snt eliberate de CO 2 prin creare de vacuum timp de 3-4 min cu ajutorul pompei cu jet de ap. 2.3.4. Modul de lucru n colba conic se preleveaz cu pipeta de la 25 pn la 100 cm 3 filtrat, pregtit conform 2.3.3. Se ia aa cantitate de filtrat nct la titrare s se consume nu mai puin 6 cm3 soluie hidroxid de sodiu. n colba cu filtrat se adaug 3 picturi soluie fenolftalein i se titreaz cu soluie de hidroxid de sodiu prin agitare continu pn la obinerea nuanei roze, care nu dispare timp de 30 sec. 2.3.5. Prelucrarea rezultatelor Aciditatea titrabil (X) recalculat la acidul predominant, n procente, este calculat dup formula: X=(VCM/m)(V0/V1)0,1 unde V volumul de titrant soluie hidroxid de sodiu, consumat la titrare, cm3; C concentraia molar a soluiei de titrant hidroxid de sodiu, mol/dm3; m masa probei, g; M masa molar, g/mol, egal pentru: acid malic M(1/2 C4H6O3) = 67,0; acid tartric M(1/2 C4H6O6) = 75,0; acid citric M(1/3 C6H8O7 H2O) = 70; acid acetic M(C2H4O2) = 60,0; acid succinic M(1/2 C2H2O4) = 45,0; acid lactic M(C3H6O3) = 90,1; V0 volum, pn la care a fost turnat n colba cotat cu prob, cm3; V1 volum de filtrat, luat la titrare, cm3. Ca rezultat final al ncercrii se ia media aritmetic a rezultatelor a dou determinri paralele, diferena relativ ntre ele nu trebuie s depeasc 5% (P=0,95). Rezultatele se rotunjesc pn la prima cifr zecimal.

3. Metod de dozare a glucidelor din suc de struguri prin cromatografie lichid de nalt performan (HPLC) conform Resolution Oeno 23/2003
3.1. Domeniu de aplicare Aceast recomandare specific o metod de dozare a fructozei, glucozei i zaharozei n must i vin 3.2. Principiul metodei Glucidele i glicerolul snt direct dozate prin HPLC i detectai prin refractometrie. 3.3. Reactive i prepararea soluiilor de reactive 3.3.1. Ap demineralizat; 3.3.2. Acetonitril - minimum de transmisie la 200 nm - puritate > 99%; 7

3.3.3. Metanol - puritate > 99%; 3.3.4. Etanol - puritate > 99%; 3.3.5. Fructoz - puritate > 99%; 3.3.6. Glucoz - puritate > 99%; 3.3.7. Zaharoz - puritate > 99%; 3.3.8. Glicerol - puritate > 99%; 3.3.9. Azot - puritate > 99%; 3.3.10.Heliu - puritate > 99%. Prepararea soluiilor de reactive 3.3.11 Apa demineralizat (3.3.1): este obinut prin filtrare pe membran de celuloz 0,45 m (3.4.13) cu ajutorul unui sistem de filtrare; 3.3.12 Eluentul: cu ajutorul unui cilindru gradat cu suport, cu volumul de 1 litru (3.4.7), se preleveaz 800 ml acetonitril (3.3.2) ntr-un flacon de 1 litru (3.4.8.), apoi 200 ml ap (3.3.11). Amestecul este degazat n permanen cu heliu (3.3.10). n cazul cnd sistemul funcioneaz n circuit nchis (rentoarcere eluant n flacon) amestecul este rennoit n fiecare sptmn. 3.4. Aparate i recipiente 3.4.1. Fiole conice de 100 ml; 3.4.2. Eprubete cilindrice de 100 ml; 3.4.3. Eprubete cilindrice de 50 ml; 3.4.4. Pipete automatice de 10 ml; 3.4.5. Conuri pentru pipete de 10 ml; 3.4.6. Fiol gradat de 100 ml; 3.4.7. Cilindru de 1 litru; 3.4.8. Flacon de 1 litru; 3.4.9. Seringi de 20 ml i ace; 3.4.10. Seringi de 10 ml i ace; 3.4.11. Sistem de filtrare; 3.4.12. Port-filtre; 3.4.13. Membran din celuloz, 0,45 m; 3.4.14. Membran din celuloz, 0,8 m; 3.4.15. Membran din celuloz, 1,2 m; 3.4.16. Membran din celuloz, 5,0 m; 3.4.17. Prefiltre din celuloz; 3.4.18. Cartu de filtrare din siliciu grefat de grupe octadecilate (de ex. Sep pack C18;) 3.4.19. Pelicul Parafilm; 3.4.20 Fiole conice de 10 ml; 3.4.21. Aparataj de cromatografie lichid de nalt performan (n cazul nostru Agilent 1200) 3.4.22. Coloana cu alchilamin de 5 m i dimensiuni 2504,5 mm (Zorbax NH2) pstrarea coloanelor: coloanele sunt umplute i testate cu hexan. Ele trebuie splate cu 50 ml metanol (3.3.3.), nainte de trece prin ele amestec acetonitril/ap n raport 80:20 (3.3.12). Este demarat fluxul lichidului la debit mic 0,1 ml/min, apoi este mrit progresiv pn la 1ml/min pentru a evita precipitarea fazei; 3.4.23. Detector refractometric se cltete celula de referin 1 dat sau 2 ori pe zi (ntre 2 analize) cu eluent acetonitril/ap (3.3.12). Se ateapt 15-20 min pentru ca pe ecranul monitorului, n fereastra ce arat starea on-line a instalaiei HPLC, linia de baz s fie stabil (dreapt). Se regleaz linia zero al refractometrului. 3.4.24. Baie cu ultrasunet 3.5. Eantionare Eantioanele snt n prealabil degazate cu azot (3.3.9) sau ntr-o baie cu ultrasunet (3.4.24)

3.6. Modul de lucru 3.6.1. Pregtirea eantioanelor Filtrare 3.6.1.1. Se preleveaz 25 ml de eantion cu ajutorul unei seringi de 20 ml (3.4.9.) dotat cu ac i se filtreaz prin membrane grupate n bloc 0,45(3.4.13) - 0,8(3.4.14) - 1,2(3.4.15) - 5(3.4.16) m + prefiltru (3.4.17) pentru must sau vin nelimpezit. 3.6.1.2. Sucul sau mustul se dilueaz de 5 ori. Se preleveaz 20 ml cu ajutorul unei pipete automatice de 10 ml (3.4.4.) dotat cu con (3.4.5.), se transfer n fiol gradat de 100 ml (3.4.6.). Se ajusteaz pn la 100 ml cu ap demineralizat (3.3.11), se astup fiola cu pelicul Parafilm i se omogenizeaz. Eliminare compuilor fenolici 3.6.1.3. Sucul sau mustul este trecut prin cartu de filtrare C18 (3.4.18.). Pregtirea cartuului de filtrare C18: este trecut n contrasens 10 ml de metanol (3.3.3), apoi 10 ml de ap demineralizat (3.3.11.). 3.6.1.4. Trecere prin cartu de filtrare C18. Seringa de 10 ml se cltete cu 2 ml eantion. Se preleveaz aproximativ 9 ml eantion. Se braneaz cartuul C18 (3.4.18) prin orificiul mic cu seringa de 10 ml (3.4.10), se trece sucul prin cartu eliminnd primii 3 ml. Se iau cei 6 ml rmai ntr-o fiol conic de 10 ml (3.4.20). Se cltete cartuul de filtrare C18 n contrasens cu 10 ml metanol (3.3.3.), apoi cu 10 ml ap demineralizat (3.3.11) dup fiecare eantion. n acest caz cartuurile pot fi reutilizate. 3.6.1.5. Curare curent Seringile (3.4.9.), (3.4.10) i acele (3.4.11.) snt cltite cu ap demineralizat (3.3.11.) dup fiecare eantion. Port-filtrul este cltit cu ap cald, apoi cu metanol (3.3.3.), se las s se usuce la aer. 3.6.2. Analiza 3.6.2.1. Condiii analitice Faz mobil: eluent isocratic acetonitril/ap n raport de volum 80:20; Debit 1 ml/min Volum injectat 20 l Detector refractometric (3.4.23) cu parametri conform instalaiei Durata unei analize este aproximativ 50 min 3.6.2.2. Etalonare extern Amestec etalon sintetic compus din: fructoz (3.3.5.) 10 g/l 0,01 g/l; glucoz (3.3.6.) 10 g/l 0,01 g/l; zaharoz (3.3.7.) 10 g/l 0,01 g/l. Calculul factorilor de rspuns: RFi = suprafaa i/Ci unde suprafaa i suprafaa picului produsului prezent n soluia de calibrare Ci cantitatea de produs prezent n soluia de calibrare 3.7. Prelucrarea rezultatelor

Calculul concentraiilor Ce = suprafaa e/Rfi unde suprafaa e suprafaa picului produsului prezent n eantion; Rezultatele sunt exprimate n g/l, dar trebuie inut cont de diluiile fcute. Controlul rezultatelor se face prin metoda comparativ; racordare indirect la mas, volum i temperatur. Martori sintetici i/sau de referin snt intercalai printre eantioane. 3.8. Limitele de detecie i de cuantificare LD fructoz = 0,12 g/l LD gluoz = 0,18 g/l LQ fructoz = 0,4 g/l LQ glucoz = 0,6 g/l

4. Metod de dozare a acizilor organici din suc de struguri prin cromatografie lichid de nalt performan (HPLC) conform Mthode gnrale OIV
4.1 Principiul metodei Acizii organici din suc de struguri, must i vin pot fi separai pe 2 tipuri de faz staionar: siliciu grefat cu octil i rin shimbtoare de ioni. Acizii sunt detectai prin spectrofotometrie de absorbie n ultraviolet. Pentru dozarea acizilor tartric i malic este preferabil de utilizat separarea pe siliciu grefat cu octil, iar pentru acizii citric i lactic separarea pe rein scimbtoare de ioni. Dozarea acizilor este efectuat n raport la un etalon extern analizat n aceleai condiii. Aceast metod permite, printre altele, o evaluare a coninutului n acizi ichimic, acetic, succinic i fumaric. Alte tipuri de coloane de asemenea permit o separare bun. 4.2. Aparate i materiale 4.2.1. Dispozitiv de filtrare din membran de celuloz (diametrul porilor 0,45 m). 4.2.2. Cartue dotate cu siliciu grefat cu octadecil (filtru Sep pack) 4.2.3. Cromatograf n faz lichid de nalt performan (de ex. Agilent 1200) echipat cu: - injector cu bucl de 10 l; - dispozitiv de termostatare; - detector spectrofotometru care permite msuri ale absorbanei la 210 nm (n cazul nostru instalaia Agilent 1200 este dotat cu Detector Matrice Diodic (DAD)) - nregistrator i eventual integrator. Condiii de lucru Separare acizi tartric, malic, lactic, ichimic, succinic i fumaric - 2 coloane (de ex Zorbax Sax 250 mm lungime i 4,6 mm diametru interior) plasate n serie, umplute cu siliciu grefat cu octadecil, particule sferice cu diamtru de 5 m; - faz mobil eluent soluie acid sulfuric cu concentraia C(H2SO4) = 0,005 N; - debitul fazei mobile: 0,5 cm3/min; - temperatura: 20C 4.3. Reactive 4.3.1. Ap distilat 4.3.2. Metanol distilat 4.3.3. Acid tartric 4.3.4. Acid malic 4.3.5. Lactat de sodiu 10

4.3.6. Acid ichimic 4.3.7. Acetat de sodiu 4.3.8. Acid succinic 4.3.9. Acid citric 4.3.10. Acid fumaric 4.3.11. Acid sulfuric 0,1 N 4.3.12. Soluie de referin compus din: acid tartric 5 g/l lactat de sodiu 6,22 g/l acetat de sodiu 6,83 g/l acid fumaric 0,01 g/l 4.4. Modul de lucru

acid malic 5 g/l acid ichimic 0,05 g/l acid succinic 5 g/l acid citric 5 g/l

4.4.1. Pregtirea soluiei de lucru Se spal n prealabil un cartu cu 10 ml metanol apoi cu 10 ml ap. Proba de suc sau must este degazat, apoi filtrat prin membran de celuloz 0,45 m. Se preleveaz 8 ml eantion filtrat cu o sering n prealabil cltit cu soluia eantion, se cupleaz la cartu i se trece prin el. Sunt eliminate primii 3 ml i sunt recepionai cei 5 rmai (de evitat situaia de a ajunge pn la cartu sec). 4.4.2. Pregtirea eluentului Se ia 50 cm3 soluie acid sulfuric 0,1 N cu pipeta i se transfer n colba gradat de 1000 cm 3 i se adaug ap bidistilat pn la cot. Soluia se amestec atent, apoi se filtreaz prin cartu cu fluorplast 0,45 m i se degazeaz 15 min., cuplnd flaconul cu eluent la pompa cu jet de ap. 4.4.3. Cromatografie Se injecteaz n cromatograf 10 l de soluie de referin, apoi 10 l de eantion pregtit conform 4.4.1. Se repert de 3 ori aceste injecii n aceeai ordine. Coloana Zorbax Sax separ acizii respectivi, spectrofotometrul msoar absorbia la 210 nm i nregistratorul transmite informaia primit sub form de cromatogram. 4.5. Calcule 4.5.1. Analiza calitativ Acizii organici sunt separai n ordinea de eluie urmtoare: Acid citric acid tartric acid malic acid succinic+acid ichimic acid lactic acid fumaric acid acetic. Mai jos sunt date timpurile de retenie orientative pentru majoritatea acizilor organici cerceti. Denumire acid Acid citric Acid tartric Acid malic Acid succinic+acid lactic (suma) Acid acetic Timp de retenie, min 11,20,4 11,80,2 13,10,5 16,40,5 19,50,5

4.5.2. Analiza cantitativ Integratorul din setul de programe ce deservesc instalaia HPLC msoar suprafaa fiecrui pic i determin media a trei rspunsuri pentru soluia de referin i proba-eantion pentru analiz. El calculeaz concentraiile acizilor organici din eantion utiliznd factorii de rspuns determinai pentru aceiai acizi n soluia de referin: 11

RFi = suprafaa i/Ci unde suprafaa i suprafaa picului produsului prezent n soluia de referin Ce = suprafaa e/Rfi unde suprafaa e suprafaa picului produsului prezent n eantion; Concentraiile sunt exprimate n g/l pentru acizii tartric, malic, lactic, succinic i n mg/l pentru acizii citric, acetic, fumaric La calculul concentraiilor trebuie inut cont de diluiile fcute.

5. Metoda de mineralizare uscat a probelor de suc de struguri naintea dozrii prin spectrofotometrie de absorbie atomic conform Resolution Oeno 18/2003
Metoda este aplicabil pentru dozarea elementelor urmtoare: calciu, magneziu, sodiu, fier, cupru 5.1. Obinerea cenuii Se cntrete cu precizie 5 g produs ntr-o capsul de porelan, bine curat i uscat. Se arde ncet proba la flacra unui bec Bunsen, sub nia aspirant. Apoi capsula cu proba ars este pus n cuptor cu mufel la 52525C timp de 12 ore. Reziduul este dizolvat cu civa mililitri de ap demineralizat. Apa este evaporat pe o baie de ap la 100C. Capsul este pus din nou n cuptor. Mineralizarea este terminat cnd cenua este alb. 5.2. Obinerea soluiei din cenu Cenua este solubilizat cu 2 ml de acid clorhidric concentrat, apoi se transfer n colb cotat de 100 ml, se cltete capsula cu ap demineralizat de 2-3 ori i se transfer tot n colb, apoi se aduce pn la cot cu ap demineralizat. Diluii complementare: Soluia de cenu este rediluat n acid clorhidric n aa fel nct s fie compatibil cu sensibilitatea aparatului, se studiaz separat metoda pentru fiecare cation. Pentru dozarea calciului i a magneziului se adaug clorur de lantan n timpul acestei diluii.

6. Metod de dozare a calciului prin spectrofotometrie de absorbie atomic conform Resolution Oeno 18/2003
6.1. Principiul metodei Calciul este dozat direct n suc sau must (sau n soluia de mineralizare) diluat convenabil, prin spectrofotometrie de absorbie atomic n flacr aer-acetilen, dup adaosul unei soluii tampon speciale. 6.2. Aparate i materiale Parametri instrumentali: Spectrofotometru cu absorbie atomic Flacr aer-acetilen Lamp cu catod concav (calcium) Lungime de und: 422,7 nm Limea fantei: 0,2 nm Intensitatea lmpii: 5 mA Fr corecii de absorbie nespecific. 6.3. Reactive 12

6.3.1. Ap demineralizat 6.3.2. Soluie iniial de calciu de 1g/l, pregtit n felul urmtor: 5,8919 g Ca(NO 3)24H2O se dizolv n soluie de HNO3 0,5 M, se ajusteaz la 1 litru cu HNO3 0,5 M. 6.3.3. Soluie de calciu de 100 mg/l: se plaseaz 10 ml soluie iniial 6.3.2. ntr-o colb cotat de 100 ml i 1 ml acid azotic pur. Se aduce pn la cot cu ap demineralizat. 6.3.4. Acid clorhidric concentrat (R) 35 % minimum 6.3.5. Soluie de lantan de 25 g/l : se cntrete 65,9 g clorur de lantan (LaCl 36H2O) ntr-o colb cilindric de 250 ml, se transfer cantitativ mpreun cu ap demineralizat ntr-o colb cotat de 1000 ml, se adaug cu eprubeta 50 ml acid clorhidric concentrat (R); dup dizolvare se las s se rceasc, apoi se aduce pn la cot cu ap demineralizat. 6.3.6. Seria de soluii de etalonare: 0; 2; 4; 6; 8 mg/l de calciu n 5 colbe cotate de 50 ml snt dozate cu eprubeta succesiv 0; 1,0; 2,0; 3,0; 4,0 ml soluie de 100 mg/l de calciu, apoi n fiecare colb se adaug 10 ml soluie de lantan de 25 g/l i se aduce pn la cot cu ap demineralizat. 6.4. Pregtirea probelor ntr-o colb cotat de 50 ml sunt transferate 10 ml soluie de lantan de 25 g/l i un volum de eantion n aa fel ca dup completarea pn la cot cu ap demineralizat, concentraia calciului s fie mai mic de 8 mg/l. 6.5. Modul de lucru Fiecare soluie din seria etalon este trecut la spectrofotometru cu absorbie la 422,7 nm n ordinea creterii concentraiei de calciu. Pentru fiecare soluie sunt fcute 2 lecturi de absorban, dup ce valorile indicate sunt perfect stabilizate (timp de integrare a semnalului 10 secunde). Se stabilete curba de etalonare (absorbana n funcie de concentraia n mg/l de calciu) Fiecare prob de produs este trecut de 2 ori, apoi se calculeaz coninutul de calciu n mg/kg.

7. Metod de dozare potasiu prin spectrofotometrie de absorbie atomic conform Resolution Oeno 18/2003
7.1. Principiul metodei Potasiul este dozat dup mineralizare uscat prin spectrofotometrie de absorbie atomic n flacr aer-acetilen. Este necesar adaosul unei soluii tampon spectral (clorur de ceziu) pentru a evita ionizarea potasiului. 7.2. Aparate i materiale 7.2.1. Materiale Fiole cotate de 100 i 200 ml (clasa A) Pipete gradate de 1, 2, 4 i 10 ml (clasa A) Cilindru de 100 ml 7.2.2. Parametri instrumentali: Spectrofotometru cu absorbie atomic Flacr aer-acetilen oxidant: debit aer 3 litri/min; debit acetilen 1,8 litri/min Lamp cu catod concav (potasiu) Lungime de und: 769,9 nm Limea fantei: 0,5 nm Intensitatea lmpii: 7 mA 13

Fr corecii de absorbie nespecific. 7.3. Reactive 7.3.1. Ap demineralizat 7.3.2. Clorur de ceziu (CsCl) 7.3.3. Soluie clorur de ceziu cu 5 % ceziu, pregtit n felul urmtor: 6,330 g CsCl se dizolv n 100 ml de ap demineralizat. 7.3.4. Soluie iniial de potasiu de 1 g/l, pregtit n felul urmtor: 2,5856 g KNO3 se dizolv n 1000 ml de ap demineralizat. 7.3.5. Soluie diluat de potasiu 100 mg/l: se plaseaz 10 ml soluie iniial 7.3.4. ntr-o colb cotat de 100 ml i 1 ml acid azotic pur. Se aduce pn la cot cu ap demineralizat pur. 7.3.6. Seria de soluii de etalonare: 0; 2; 4; 6; 8 mg/l de potasiu n 5 colbe cotate de 100 ml snt dozate cu eprubeta succesiv 0; 2,0; 4,0; 6,0; 8,0 ml soluie de 100 mg/l de potasiu, apoi n fiecare colb se adaug 2 ml soluie clorur de ceziu i se aduce pn la cot cu ap demineralizat pur. Soluiile etalon conin 1 g/l ceziu. 7.4. Pregtirea probelor ntr-o colb cotat de 50 ml sunt transferate 1 ml soluie de clorur de ceziu cu 5 % ceziu i un volum de eantion n aa fel ca dup completarea pn la cot cu ap demineralizat, concentraia potasiului s fie mai mic de 8 mg/l. 7.5. Modul de lucru Fiecare soluie din seria etalon este trecut la spectrofotometru cu absorbie la 769,9 nm n ordinea creterii concentraiei de potasiu. Pentru fiecare soluie sunt fcute 2 lecturi de absorban, dup ce valorile indicate sunt perfect stabilizate, timp de integrare a semnalului 10 secunde. Se stabilete curba de etalonare (absorbana n funcie de concentraia n mg/l de potasiu) Fiecare prob de produs este trecut de 2 ori, apoi se calculeaz coninutul de potasiu n mg/kg.

8. Metod de dozare sodiu prin spectrofotometrie de absorbie atomic conform Resolution Oeno 18/2003
8.1. Principiul metodei Sodiul este dozat dup mineralizare uscat prin spectrofotometrie de absorbie atomic n flacr aer-acetilen. Este necesar adaosul unei soluii tampon spectral (clorur de ceziu) pentru a evita ionizarea sodiului. 8.2. Aparate i materiale 8.2.1. Materiale Fiole cotate de 50 i 100 ml (clasa A) Pipete gradate de 2,0; 5,0 i 10,0 ml (clasa A) Pipet automatic de 1000 l Cilindru de 100 ml. 8.2.2. Parametri instrumentali: Spectrofotometru cu absorbie atomic Flacr aer-acetilen oxidant: debit aer 3,1 litri/min; debit acetilen 1,8 litri/min Lamp cu catod concav (potasiu) 14

Lungime de und: 589,0 nm Limea fantei: 0,2 nm Intensitatea lmpii: 5 mA Fr corecii de absorbie nespecific. 8.3. Reactive 8.3.1. Ap demineralizat pur pentru analiz 8.3.2. Acid azotic pur pentru analiz, de 65% 8.3.3. Soluie clorur de ceziu cu 5 % ceziu, pregtit n felul urmtor: 6,330 g CsCl se dizolv n 100 ml de ap demineralizat. 8.3.4. Soluie iniial de sodiu de 1 g/l, pregtit n felul urmtor: 3,6968 g NaNO3 se dizolv n 1000 ml de ap demineralizat. 8.3.5. Soluie diluat de sodiu 10 mg/l: se plaseaz 1 ml soluie iniial 8.3.4. ntr-o colb cotat de 100 ml i 1 ml acid azotic pur de 65%. Se aduce pn la cot cu ap demineralizat pur. 7.3.6. Seria de soluii de etalonare: 0; 0,25; 0,50; 0,75; 1,00 mg/l de potasiu n 5 colbe cotate de 100 ml snt dozate cu eprubeta succesiv 0; 2,5; 5,0; 7,5; 10,0 ml soluie de 10 mg/l de potasiu, apoi n fiecare colb se adaug 2 ml soluie clorur de ceziu i se aduce pn la cot cu ap demineralizat pur. Soluiile etalon conin 1 g/l ceziu. 8.4. Pregtirea probelor ntr-o colb cotat de 50 ml sunt transferate 1 ml soluie de clorur de ceziu cu 5 % ceziu i un volum de eantion n aa fel ca dup completarea pn la cot cu ap demineralizat, concentraia sodiului s fie mai mic de 1 mg/l. 8.5. Modul de lucru Fiecare soluie din seria etalon este trecut la spectrofotometru cu absorbie la 589,0 nm n ordinea creterii concentraiei de sodiu. Pentru fiecare soluie sunt fcute 2 lecturi de absorban, dup ce valorile indicate sunt perfect stabilizate, timp de integrare a semnalului 10 secunde. Se stabilete curba de etalonare (absorbana n funcie de concentraia n mg/l de sodiu) Fiecare prob de produs este trecut de 2 ori, apoi se calculeaz coninutul de sodiu n mg/kg.

9. Metode de determinare a vitaminei C n suc de struguri conform GOST 24556

Acest standard se aplic produselor de procesare a fructelor i legumelor, stabilete metode de determinare a vitaminei C: titrimetric cu titrare vizual pentru produse ce dau extracte de culoare deshis; titrimetric cu titrare poteniometric pentru produse ce dau extracte de culoare nchis 9.1. Prelevarea i pregtirea probelor Prelevarea i pregtirea probelor se efectueaz conform GOST 26313. 9.2. Principiul metodei Metoda este bazat pe extragerea vitaminei C cu soluie de acid (clorhidric, metafosforic) cu titrare ulterioar vizual sau poteniometric cu soluie de 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu pn la stabilirea culorii roz deschis. 9.3 Aparate, materiale i reactive 15

Cntar de laborator de uz general GOST 24104, clasa I de precizie cu limita cea mai mare de cntrire 200 g. Cntar de laborator de uz general GOST 24104 cu limita cea mai mare de cntrire 500 g i limita admis 0,01 g. Omogenizator. pH-metru-milivoltmetru de laborator pentru msurarea pH i potenialelor de oxido-reducere cu diapazon de la -1 pn la +14 mV i eroarea nu mai mult 0,05 la msurarea pH i diapazon de la -100 pn la 1500 mV cu eroarea nu mai mult +5 mv la msurarea potenialelor de oxido-reducere. La msurarea potenialelor se folosesc electrozi: de msurare din platin, auxiliar din clorur de argint. Agitator magnetic cu reglare uoar a frecvenei de rotaie. Cronometru cu eroarea 0,2 secunde. Plnii de laborator, din sticl, GOST 25336, cu diametru de la 5 pn la 10 cm. Colbe gradate de laborator, din sticl, GOST 1770 cu volunul de 100, 500, 1000 i 2000 cm3. Colbe de laborator, din sticl, GOST 25336, cu volumul de 50, 100, 250 cm3. Microbiuret conform documentaiei tehnice normative, cu diviziunea 0,01 cm3. Beioare de sticl. Pipete gradate, de laborator, din sticl conform documentaiei tehnice normative, clasa de precizie I, volumul de 1, 2, 5, 10, 20, 25 cm3. Phare de laborator, din sticl, GOST 25336, cu volumul de 50, 100, 1000 cm3. Mojar cu zdrobitor, ambele din porelan, GOST 9147. Cilindre gradate de laborator, din sticl, GOST 1770 cu volumul de 100, 250 cm3. Hrtie de filtru GOST 12026. Nisip de cuar purificat i clit GOST 28561. Ap distilat GOST 6709. Aceton GOST 2603. 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu, soluie cu concentraia masic de 0,250 g/dm3. Acid ascorbic, soluii de 1,0 i 0,1 g/dm3, ele trebuie s corespund cerinelor farmaceutice. Acid azotic GOST 4461 cu densitatea 1,41 g/dm3, soluie cu partea de volum de 25%. Acid metafosforic GOST 841, soluii de 3 i 6%. Acid clorhidric GOST 3118 cu densitatea 1,19 g/dm3, soluie cu partea de mas 2%. Acid acetic glacial GOST 61 i soluie cu partea de mas 3%. Acid percloric, soluie cu concentraia molar 0,1 mol/dm3. Se pregtete naintea prelucrrii electrozilor. Acid etilendiamintetraacetic sau sarea de sodiu a acestuia, soluie cu partea de mas 5 %. Iodur de potasiu GOST 4232, soluie cu partea de mas 1% n soluia de acid acetic cu partea de mas de 3%. Se pregtete naintea prelucrrii electrozilor. Acetat de sodiu topit, soluie saturat, se pregtete : 200 g sare se dizolv n 300 cm3 de ap. Aldehid formic, soluie cu partea de mas 36-40 %. La analize se admite folosirea aparaturii din import, veselei de laborator i reactive clasa de precizie i calitate nalte. Se folosesc reactive cu calificarea pure pentru analize. 9.4. Pregtirea pentru ncercri. 9.4.1. Pregtirea soluiei de extragere n calitate de soluie de extragere se folosesc soluiile acizilor clorhidric cu partea de mas de 2% i metafosforic cu partea de mas 3 % sau amestec din acid acetic i acid metafosforic, pregtit n modul urmtor: 15 g acid metafosforic se dizolv n 250 cm3 ap distilat, se adaug 40 cm3 acid acetic glacial, se aduce pn la cota 500 cm3 cu ap distilat. Se amestec i se filtreaz n flacon, care apoi se astup cu dop. Se pstreaz n frigider nu mai mult de 10 zile. 9.4.2. Pregtirea soluiilor standart de acid ascorbic

16

Pentru pregtirea soluiei de acid ascorbic cu concentraia de 1,0 g/dm3 se cntrete 0,1000 g acid ascorbic cu eroarea 0,0001 g, se dizolv n soluia de extragere n colba cotat de 100 cm3, se aduce la cot cu aceeai soluie de extragere i se amestec. Pentru pregtirea soluiei de 0,1 g/dm3 se preleveaz 10 cm3 soluie acid ascorbic cu concentraia 1,0 cm3 i se introduce n colba cotat de 100 cm3, se aduce la cot cu soluia de extragere i se amestec. Soluiile de acid ascorbic sunt instabile, de aceea se pregtesc naintea efecturii ncercrii. 9.4.3. Pregtirea soluiei 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu i determinarea titrului ei. 0,05 g 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu se dizolv n 150 cm3 ap fierbinte, n prealabil fiart timp de 30 min sau coninnd 0,042 g bicarbonat de sodiu, se rcete pn la temperatura camerei, se aduce la cota 200 cm3 cu aceeai ap rcit, se amestec i se filtreaz n flacon. Soluia se pstreaz nu mai mult de 10 zile. Titrul soluiei 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu se stabilete dup soluiile de acid ascorbic de concentraii de 1,0 i 0,1 g/dm3 n ziua efecturii ncercrilor. 9.4.4. Pregtirea soluiei tampon de acetat Soluia de tampon cu pH=4 se pregtete dup cum urmeaz: 300 g acetat de sodiu anhidru se dizolv n 700 cm3 ap distilat, se adaug 1000 cm3 acid acetic glacial, se amestec i cu ajutorul pH-metrului se stabilete pH=4, adugnd, la necesitate, din nou acid. 9.4.5. Pregtirea electrozilor pentru titrare poteniometric Electrodul de msurare, din platin, este introdus n phar de 50 cm3 cu soluie de acid azotic, se fierbe de la 5 pn la 10 min., se cltete cu ap distilat i se las n ap 2-3 zile. Apoi electrozii de msurare i auxiliar sunt plasai n phar cu volumul de 100 cm3 cu soluie de acid clorhidric i se scurtcircuiteaz (se unesc clamele intre ele). Peste 2 ore electrozii se scot, neseparai, se cltesc cu ap distilat i se pun n phare de 50 cm3 : cel de msurare n soluie de iodur de potasiu, cel auxiliar n ap distilat. Peste 15 min electrozii se separ, cel de msurare se cltete cu ap distilat. Electrozii se pstreaz n phare cu ap distilat. 9.5. Modul de lucru 9.5.1. Extracia Pentru extracia vitaminei C din produse lichide, proba cu masa de la 5 pn la 50 g se transfer n colbe cotate sau cilindru de 100 cm3, splnd pereii pharului cu porii nu mari de soluie de extragere pn cnd volumul nu va atinge cota. Coninutul se menine 10 min, se amestec i se filtreaz. Extractele obinute snt folosite imediat la titrare. 9.5.2. Titrarea vizual n colba cu volumul 50 sau 100 cm3 cu pipeta se introduc de la 1 pn la 10 cm3 extract obinut la 9.5.1., se aduce la cot cu ap distilat i se titreaz cu soluie 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu pn la apariia culorii roz pal, stabil 15-20 sec. Totodat se efectueaz ncercare de control a coninutului de substane reductoare. Pentru aceasta n colb se introduce acelai volum de extract, luat ca la titrarea de mai sus, se adaug un volum egal de soluie tampon de acetat, soluie de aldehid formic n volum din cel al soluiei tampon de acetat, se amestec i se las 10 min. acoperind colba cu un dop. Apoi coninutul se titreaz cu soluie 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu. 9.5.3. Titrare poteniometric n phar cu volumul 50 cm3 se introduce cu pipeta un volum de extract, obinut conform 9.5.1. dar nu mai mult de 25 cm3, se adaug soluie de extragere aproximativ pn la 30 cm3 i se plaseaz electrozii pH-metrului-voltmetrului n aa mod, ca la agitare ei s nu se ating de agitatorul magnetic. Apoi se titreaz poteniometric din microbiuret cu soluie de 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu. Soluia de 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu se adaug cu porii de 0,1-0,2 cm 3 prin agitare continu. La titrare, acul aparatului, iniial se nclin spre stnga, apoi micarea lui ncetinete i dup punctul de 17

echivalen se nclin spre dreapta. Volumul soluiei de 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu, corespunztor punctului de echivalen i, prin urmare, consumat la titrarea volumului, se stabilete dup diferena maxim (salt) a dou indicaii vecine ale aparatului sau dup curba de titrare poteniometric valori potenial n milivoli n funcie de volumul de soluie titrant n centimetri cubi. Totodat se efectueaz ncercarea de control a coninutului de substane reductoare. n colb se introduce acelai volum de extract, luat ca la titrarea de mai sus, se adaug un volum egal de soluie tampon de acetat, soluie de aldehid formic n volum din cel al soluiei tampon de acetat, se amestec i se las 10 min. acoperind colba cu un dop. Apoi coninutul se titreaz poteniometriccu soluie 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu. Ca rezultat al titrrii se ia media aritmetic a rezultatelor a dou titrri ale aceluiai extract. La titrarea repetat n regiunea punctului de echivalen presupus a soluiei de 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu se adaug 1-2 picturi. 9.6. Prelucrarea rezultatelor Partea de mas (X) al acidului ascorbic, n procente, se calculeaz dup formula: X = (V1-V2)TV3100/V4m unde V1 volum de soluie 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu, consumat la titrarea extractului probei, cm3; V2 volum de soluie 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu, consumat la titrarea de control a extractului probei, cm3; T titrul soluiei 2,6-diclorfenolindofenolat de sodiu, g/cm3; V3 volumul de extract, obinut la extragerea vitaminei C din proba de produs, cm3; V4 volumul de extract, consumat la titrare, cm3; m masa probei de produs, g. Ca rezultat final se ia media aritmetic a rezultatelor a dou determinri paralele. Calculele se fac pn la 4 cifre dup virgul, rezultatul se rotunjete pn la 3 cifre semnificative i se exprim ca produs al numrului i 10-3. Diferena ntre dou determinri paralele nu trebuie s depeasc 3% de la media aritmetic a valorii la probabilitatea de ncredere P=0,95.

10. Metoda de determinare a precipitatului n sucuri i extracte de fructe i pomuoare conform GOST 8756.9-78
Metoda se bazeaz pe separarea precipitatului de suc sau extract pin centrifugare cu nclzire preliminar a sucului sau extractului pe baia de ap i determinarea masei precipitatului separat. 10.1. Prelevarea probelor i pregtirea lor ctre ncercri Prelevarea probelor i pregtirea lor ctre ncercri se efectueaz conform GOST 8756.0 10.2. Aparate, materiale i reactive Cntar de laborator cu limita maxim de cntrire 200 g i eroare admis nu mai mult de 0,0002 g Baie cu ap Centrifug de laborator -2 sau centrifug de alt tip, care efectueaz centrifugare la factor de separare aprox. 5500, cu eprubete de centrifugare din materiale polimere cu volum de 25 sau 10 cm3. Reou electric GOST 14919 Ceas cu nisip la 3 i 10 min. 18

Termometru cu mercur GOST 28498 cu limita de msurare de la 0 pn la 100C cu eroarea nu mai mare de 1,0C. Pipete cu volumul de 10 i 25 cm3. Colbe cotate de sticl, de laborator, GOST 25336, cu volumul 250 cm3.

10.3. Pregtirea pentru ncercri Eprubete uscate pentru centrifugare se cntresc cu eroarea nu mai mare de 0,0001 g. Din proba comun de suc sau extract, dup o amestecare intens, se toarn fr a lsa s sedimenteze precipitatul, aproximativ 150 cm3 suc natural sau 40 cm3 suc/extract concentrat. Sucul sau extractul concentrat este diluat cu ap distilat conform cerinelor GOST 18192 sau GOST 18078. 10.4. Modul de lucru Cnd se utilizeaz eprubete de centrifugare cu volumul de 25 cm3, din proba pregtit de suc sau extract, agitnd intens, se ia cu pipeta cte 25 cm3 i se pune n fiecare din cele 4 eprubete, apoi eprubetele cu produsul cercetat se cntresc. Eprubetele cu suc sunt plasate n baia cu ap, se nclzesc pn la 85-90C i se menin la aceast temperatur 3 min. Eprubetele cu suc se plaseaz n centrifug i se centrifugheaz 20 min. la viteza 8000 rot/min. Eprubetele se scot, atent se scurge lichidul, apoi snt ntoarse cu gura n jos pe hrtie de filtru pentru scurgerea cantitii rmase de lichid. Peste 10 min. urmele de lichid rmase pe pereii eprubetei, fr a deforma precipitatul, se elimin cu fii de hrtie de filtru. Cnd se utilizeaz eprubete de centrifugare cu volumul de 10 cm 3, precipitatul este obinut n 2 etape: iniial n fiecare din cele 4 eprubete se introduce cu pipeta cte 10 cm3 din proba pregtit de suc sau extract, apoi eprubetele cu produsul cercetat se cntresc. Eprubetele cu suc sunt plasate n baia cu ap, se nclzesc pn la 85-90C i se menin la aceast temperatur 3 min. Eprubetele cu suc se plaseaz n centrifug i se centrifugheaz 20 min. la viteza 8000 rot/min. Eprubetele se scot, atent se scurge lichidul i se cntresc. Tot n aceste eprubete se introduc iari cte 10 cm3 produs cercetat i se cntresc din nou. Dup nclzire, centrifugare, scurgere lichid i meninere eprubete cu gura n jos timp de 10 min pe hrtie de filtru, eliminare urme de lichid, eprubetele cu precipitatul acumulat se cntresc. Toate masurrile se efectueaz cu eroarea nu mai mare de 0,0001 g. 10.5. Prelucrarea rezultatelor Partea de mas (X) de precipitat, n procente, se calculeaz dup formula: X = (m1 m0)100/ m2 Unde m0 masa eprubetei uscate, fr produs, g; m1 masa eprubetei cu precipitat, g; m2 masa probei de produs, g. Rezultatul se exprim cu eroarea pn la 0,01 %. Ca rezultat final se ia media aritmetic a 4 determinri paralele, diferena ntre ele nu trebuie s depeasc 10 %. Dac diferena ntre orice 2 determinri paralele depete 10 %, toate ncercrile se repet i ca rezultat final se ia media aritmetic a 8 determinri.

19

20