SNTESE E CARACTERIZAO DE DERIVADOS ANFIFLICOS DE QUITOSANAS COM BAIXA MASSA MOLECULAR.

SYNTHESIS AND CHARACTERIZATION OF AMPHIPHILIC CHITOSAN DERIVATES WITH LOW MOLECULAR WEIGHT.
Fbio Domingues Nasrio, Marcio Jos Tiera Campus de So Jos do Rio Preto Instituto de Biocincias,
Letras e Cincias Exatas Qumica Ambiental fanasario@yahoo.com.br Palavras chaves: quitosana; degradao; reao de alquilao. Keywords: chitosan; degradation; alkylation reaction.

1- INTRODUO A quitosana um polmero natural, biodegradvel, atxico, derivado da quitina que, aps a celulose, o polissacardeo mais abundante na natureza. constitudo por unidades de 2-amino-2desoxi-D-glicose e 2-acetamido-2-desoxi-D-glicose unidas por ligaes (14) [1]. Entre as possveis aplicaes, a quitosana pode ser utilizada na medicina, na construo de sistemas para a liberao controlada de frmacos, na biomedicina, como separadores de protenas, e no meio ambiente, como removedores de poluentes. Na rea de cosmticos, utilizada na formulao de cremes para o corpo, rosto e mos, loes de banho e fabricao de xampus [2]. A introduo de pores anfiflicas cadeia de quitosana pode aumentar a interao com a membrana celular de fungos e bactrias favorecendo a atividade ltica e a formao de poros na membrana celular. Isso pode contribuir para um aumento da atividade antifngica e antimicrobiana [3]. 2- OBJETIVO Sntese e caracterizao de derivados anfiflicos de quitosana de baixa massa molecular e estudo das propriedades anfiflicas das quitosanas sintetizadas utilizando espectroscopia de fluorescncia com o pireno como sonda fluorescente. 3-MATERIAIS E METODOLOGIA 3.1-Desacetilao da Quitosana Nesse trabalho foi realizada a desacetilao heterognea, substituio nucleoflica no grupo funcional amida do substituinte acetoamido, realizada por hidrolise bsica em que o nuclefilo (hidroxila) ataca a carbonila. A quitosana (Polymar) foi suspensa em uma soluo aquosa concentrada de hidrxido de sdio a 100 C por 1,5 horas. A reao foi realizada em duas etapas em atmosfera de nitrognio para obter maio grau de desacetilao (GD) e evitar o efeito oxidante do oxignio molecular na despolimerizao da cadeia [4]. 3.2-Determinao do GD 3.2.1-Titulaes Potenciomtrica e condutimtrica: Titulou-se a quitosana em excesso de HCl com uma soluo NaOH =0,099 mol/L de NaOH utilizando o pHmetro (Analion PM 608) e o condutivmetro (Digimed DM 31). O VNaOH necessrio para desprotonar os grupos amino do polmero corresponde ao volume entre os picos da derivada na titulao potenciomtrica, e ao volume em que a variao da condutividade foi mnima na titulao condutimtrica. Para calcular o GD utilizou-se a equao 1. equao 1 VNaOH . NaOH
GD = VNaOH . NaOH + mq (VNaOH . NaOH .161, 22) 203,24
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3.2.2-Ressonncia Magntica Nuclear A partir dos espectros de ressonncia magntica nuclear de hidrognio (RMN-H), calculouse o GD da amostra desacetilada atravs das reas dos picos relativos aos hidrognios H3 e H1, segundo a equao2.
GD = 1 AH 3 3 ( AH 1 + AH 3 ) 3 ,

equao

sendo H3 referente aos hidrognios da metila do grupo acetamido e o H1 ao hidrognio do carbono anomrico dos monmeros desacetilados da quitosana. 3.3- Degradao da quitosana A reao de despolimerizao da quitosana foi realizada com nitrito de sdio em meio cido. Dissolveu-se a quitosana em 180 mL de soluo de cido actico 2%. Deixou a soluo agitando em meio de nitrognio por 1 hora, resfriou-a a 4 C e adicionou 12 mL de uma soluo contendo nitrito de sdio. A reao prosseguiu a 4 C sem agitao por 24 horas. A quitosana degradada, CH, foi purificada atravs de dilise utilizando membrana <6-8 kDa, posteriormente foi centrifugada e seca em liofilizador Thermo Electron Corporation. 3.4-Determinao da Massa Molar Ponderal Mdia (Mw) A Mw foi obtida a partir de Cromatografia de Permeao em Gel (GPC). 3.5-Reao de alquilao da quitosana A alquilao consistiu na reao do dodecanal, um aldedo, com os grupos amino do polmero, formando base de Schiff, que foi reduzida utilizando cianoboro hidreto de sdio como descrito por Debrires, J. [5]. O grau de substituio (GS) foi calculado a partir do espectro de RMN-H da quitosana CHDD, utilizando a equao 3.

GS =

AH 1 . 3 ( AH 5 + AH 6 + AH 7 )

equao

3.6- Estudo das propriedades anfiflicas: O pireno uma sonda hidrofbica e a razo dos picos I/III do espectro de emisso fluorescncia (figura 2) decai com a diminuio da polaridade do solvente [6]. As solues de quitosanas CH e CHDD foram adicionadas sob agitao soluo tampo (0,3mol/L/0,2 mol/L, HAc/NaAc) contendo pireno, e foi medido o espectro de emisso para o clculo da razo I/III em espectrofluormetro F-4500 Hitachi, a cada adio. Os espectros de emisso do pireno, de cada concentrao de amostra, foi realizado em ex= 310 nm e em de 350 a 550 nm.
1200 1000 800

I
Pireno

Intensidade

600 400 200 0 350

III

400

450

500

550

Figura 2: Espectro do pireno em metanol

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em

4- RESULTADOS E DISCUSSO 4.1-Determinao do GD As curvas de titulaes potenciomtrica e condutimtrica foram feitos com software Origin 7.5 e encontram-se na figura 3. O espectro de RMN-H da CH utilizado para o clculo do GD encontra-se na figura 5. Os GD encontrados em cada mtodo utilizado esto apresentados na tabela 1.
18 16 14 12 Derivada pH 12

35 30 mS/cm

Condutividade (mS/cm)

10 8 6 4 2

25 20 15 10 5

Derivada

10 8 6 4 2 0 -2 0 2 4 6 8 10 12 14

pH

Volume de NaOH

-2

10

12

14

16

18

20

Volume de NaOH (mL)

Figura 3: Grficos das titulaes potenciomtrica e condutimtrica

Figura 4: Espectros RMN-H das quitosanas CH e CHDD.

Tabela 1: Graus de desacetilao da Quitosana desacetilada determinados nos diferentes mtodos de caracterizao. Mtodo Potenciometria Condutimetria RMN-H
mq (mg) VNaOH (mL)

41,1 61,6 10

2,175 3,233 --

GD (%) 87 86,7 98,7

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Tabela 2: Propriedades das quitosanas desacetilada (CH) e modificada (CHDD). Amostra CH CHDD Mw (kDa) 12 -PDI 1,34 -GD (%) 98,7 -GS (%) -1,45

As curvas da figura 5 mostram a diferena das propriedades anfiflicas das quitosanas CH e CHDD. possvel observar um decaimento maior da razo I/III para a CHDD, confirmando a hidrofobicidade proveniente do grupo dodecil.
2,0 1,8 1,6 1,4 2,0 1,8 1,6 1,4

I/III

1,2 1,0 0,8 0,6

CH CHDD

1,2 1,0 0,8 0,6

0,01

0,1

Logaritimo da concentrao (g/L)

Figura 5: Grfico I/III em funo das concentraes de CH e CHDD. 5- CONCLUSES A reao de desacetilao mostrou-se eficaz, visto que o GD obtido do espectro de RMN-H foi de 99%, aproximadamente. Em relao degradao da quitosana desacetilada pode-se concluir que foi bem sucedida, pois a Mw da quitosana antes da reao era 50 kDa, aproximadamente, havendo reduo de 76% da Mw do polmero. A razo I/III apresentou maior decaimento para a quitosana CHDD devido poro hidrofbica proveniente dos grupos dodecil presentes na cadeia polimrica. Conclui-se que a quitosana modificada (CHDD) apresenta maior carter hidrofbico que a quitosana desacetilada (CH). Referncias Bibliogrficas [1] KUMAR, M. N.V. R. A review of chitin and chitosan applications. Reactive & Functional Polymers, v. 46 p. 127, 2000. [2] SIGNINI, R.; CAMPANA FILHO, S. P.; Caractersticas e Propriedades de Quitosanas Purificadas nas Formas Neutra, Acetato e Cloridrato. Polmeros: Cincia e Tecnologia, v.11, p. 58-64, 2001. [3] PENG, Y.; HAN, B.; LIU, W.; XU, X. Preparation and antimicrobial activity of hydroxypropyl chitosan. Carbohydrate Research, v. 340 p. 18461851, 2005. [4]CAMPANA FILHO, S. P.; SIGNINI, Efeito de Aditivos na Desacetilao de Quitina. Polmeros: Cincia e Tecnologia, v. 11, p. 169-173, 2001. [5] DESBRIRES, J; MARTINEZ, C.; RINAUDO, M. Hydrophobic derivatives of chitosan: Characterization and rheological behavior. International Journal of Biological Macromolecules, v.19 p.21-28, 1996. [6] VIEIRA, N. A. B.; MOSCARDINI, M. S.; TIERA, V. A. O.; TIERA, M. J., Aggregation behavior of hydrophobically modified dextran in aqueous solution: a fluorescence probe study. Carbohydrate Polymers, v. 53, p. 137143, 2003.

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