Analysis of Wintergreen Oil Extracted from 

Leaves of Wintergreen in Distillation Units 
of Dolakha
Khilendra Gurung

2007

[Type the abstract of the document here. The abstract is

typically a short summary of the contents of the
document. Type the abstract of the document here. The
abstract is typically a short summary of the contents of
the document.]

Home
[Type the company address]
[Type the phone number]
[Type the fax number]
Analysis of Wintergreen Oil

A Report Submitted To

Ecology Agriculture and Rural Development Society 

(ECARDS)­Dolakha

Charikot, Dolakha

Submitted By

Khilendra Gurung

June 2007

2
Analysis of Wintergreen Oil

Table of contents

1. Introduction 1

2. Objectives  2

3. Materials and methods  2

3.1 Collection and extraction of essential oils 2

3.2 Determination of organoleptic properties 2

3.3 Determination of physico­chemical properties 2

3.3.1 Specific gravity 2

3.3.2 Optical rotation 2

3.3.3 Refractive index 3

3.3.4 Solubility 3

3.3.5 Determination of acids 3

3.3.6 Determination of esters 3

3.3.7 Determination of ester number after acetylation 3

4. Results 4

4.1 Characteristics 4

4.2 Active constituents of Wintergreen oil 4

3
Analysis of Wintergreen Oil

5. Conclusion 5

5.1 Actions  5

5.2 Uses 5

5.2.1 Aromatherapeutic uses 5

5.2.2 Other uses 5

References 6

Lists of tables

Table 1: Specification of Wintergreen oil 4

Table 2: Monoterpene composition of Wintergreen Oil 5

Table 3: Sesquiterpene composition of Wintergreen oil 5

4
Analysis of Wintergreen Oil

Abbreviations and acronyms

C: Centigrade

CFUGs: Community Forest User Groups 

DMC: Deudhunga Multipurpose Cooperative 

GC­MS: Gas Chromatography­Mass Spectra 

GEF: Global Environment Facility

HPPCL: Herbs Production and Processing Company Limited 

M/S: Mild steel

m: Meter

ml: Millilitre

NTFP: Non Timber Forest Products 

S/S: Stainless steel 

SGP: Small Grant Program

UNDP: United Nations Development Program

VDC: Village Development Committee

5
Analysis of Wintergreen Oil

1. INTRODUCTION

Dolakha district is rich in plant diversity due to the presence of wide range of 
geographical and climatic conditions. Wintergreen plant (Gaultheria fragrantissima Wall.; 
family: Ericaceae) locally known as Dhasingre/machhino/patpate is widely distributed in 
open places, shrubberies, rocky slopes between 1100­2800m of Dolakha district 
(Press et al. 2000).

6
Analysis of Wintergreen Oil

Leaves of wintergreen are aromatic, stimulant and carminative. Juice of the leaves, 
mixed with water, is taken for coughs. This juice, about 2 teaspoons, is given as an 
anthelmintic. It acts as a vermicide on hookworms. Young leaves are also taken as an 
anthelmintic. Oil extracted from the leaf is applied to treat rheumatism and scabies. 
Immature fruits are chewed or their paste is given for stomach troubles. Juice of unripe 
fruit is taken to treat stomachaches. Ripe fruits are eaten fresh. The fruits are also 
distilled locally for alcohol (Manandhar, 2002). The leaves with twigs bear essential oil, 
popularly known as Wintergreen oil.

In spite of such privileges, the locals were not able to reap rich rewards from wintergreen 
plants. Several problems associated with wintergreen plant were lack of data on the 
quantity of herbs available and scientific research on the weather, growing conditions 
and life cycle of these herbs. There were no systematic and sustainable practices 
regarding the management, conservation and marketing of these herbs. Against the 
backdrop of these problems, Deudhunga Multipurpose Cooperative (DMC) came into 
existence in 1995 (2051 BS) and by coordinating the Community Forest User Groups 
(CFUGs) who depend on Non Timber Forest Products (NTFP) for their livelihoods. 

The cooperative started its activities by obtaining raw materials from the CFUGs and by 
distilling Wintergreen oil. The cooperative now runs 4 locally made Mild steel (M/S) 
distillation units and 3 newly installed Stainless steel (S/S) distillation units along with 
S/S testing units and distills various essential oils like Abies, Anthopogon, Artemisia, 
Juniper and Wintergreen oils. M/S distillation units were established with individual cash 
contribution and raw material provided by CFUGs. While S/S distillation units were 
installed with the assistance from UNDP, GEF/SGP with the increments of share holders 
as Community Forest User Groups (CFUGs) and identified pro­poor.

The cooperative has established itself as an ideal NTFP based industry, adopting social 
inclusive model. 

7
Analysis of Wintergreen Oil

In this respect, it is essential to analyze the chemical constituents of wintergreen oil for 
its quality control and quality assurance for its marketing to national and international 
markets. 

2. OBJECTIVES 

The objectives of the research are as follows:

1. To analyze the organo­leptic and physico­chemical test of wintergreen oil in 
the authorized lab of Nepal

2. To incorporate the results of active constituents analysis of wintergreen oil 
performed by other researchers

3. To recommend the quality control mechanism of wintergreen oil  

3. MATERIALS AND METHODS

3.1. Collection and extraction of essential oils

The leaves of wintergreen were collected from different CFUGs of Dolakha district. The 
collected leaves were steam distilled to produce wintergreen oils in three distillation units 
located at Lakuri Danda VDC, Suspa VDC and Hawa VDC of Dolakha district. About 10 
ml sample from three distillation units were collected and mixed in 30 ml bottle. The 
sample was taken to the quality control laboratory of Herbs Production and Processing 
Company Limited (HPPCL) for the analysis work.

8
Analysis of Wintergreen Oil

3.2. Determination of organoleptic properties

Organoleptic properties of wintergreen oil were detected by expert nose and eyes. 
Appearance of oil was determined by eyes and aroma by nose.

3.3. Determination of physico­chemical properties

The physico­chemical properties of wintergreen oil were determined as according to 
Guenther (1972).

3.3.1. Specific gravity

Specific gravity bottle (5ml, 10ml or 25ml) was used to determine specific gravity of 
wintergreen oil. Dry and clean bottle was filled with oil to be determined and the weight 
was taken upto three digits in an electronic balance. The same bottle was cleaned and 
the weight of bottle with freshly boiled and cooled distilled water was taken. The weight 
of oil contained in the specific gravity bottle divided by the water equivalent gives the 
specific gravity of oil at specific temperature.

3.3.2. Optical rotation

Polarimeter was used to determine the optical rotation of wintergreen oil. The extent of 
optical activity of oil was measured in degrees of rotation. The angle of rotation was 
dependent upon the nature of the liquid. In recording rotations the direction by the use of 
(+) sign to indicate dextrorotary (rotation to the right i.e. clockwise) or a (­) sign to 
indicate levorotatory (rotation to the left i.e. anti clock wise)

9
Analysis of Wintergreen Oil

3.3.3. Refractive index

Refractometer was used for this determination. Few drops of  sample was put into funnel 
shaped aperture between the prisms of refractometer, closed the prism firmly by 
tightening the screw and reading was noted by rotating alidade backward or to forward 
until yield of vision was divided into a light and dark portion. Reading was taken as the 
refractive index of the sample directly on the scale of the sectors.

3.3.4. Solubility

The number of volumes of dilute alcohol required for the complete solubility of one 
volume of oil was calculated as the solubility of the given oil.

3.3.5. Determination of acids

In determining the acid number dilute alkali was used. The acid number of oil was 
calculated as the number of milligrams of Potassium hydroxide required neutralizing the 
free acids in 1 gm of oil using Phenolphthalein as an indicator.

Acid number:  28.05 x a/S

Where, a= No. of CC of 0.5N NaOH used to neutralize

S= Weight of oil taken in grams

3.3.6. Determination of esters

10
Analysis of Wintergreen Oil

Ester number of oil was calculated as the number of milligrams of Potassium hydroxide 
required to saponify the esters present in 1 gram of oil.

Ester number: 28.05 x a/S

Where, a= Number of CC of 0.5 NHCL used in saponification.

S= Weight of oil taken in grams.

3.3.7. Determination of ester number after acetylation

The ester number after acetylation was determined as the number of milligrams of 
Potassium hydroxide required to saponify the ester present in 1 gram of acetylated 
sample.

Ester number after acetylation: 28.05 x a/20 S

Where, a= Number of CC of 0.5N HCL used in saponification

S=Weight of acetylated oil taken in grams.

4. RESULTS

11
Analysis of Wintergreen Oil

The organo­leptic and physico­chemical analysis of wintergreen oil from 3 distillation 
units of Dolakha revealed the following results as follows:

4.1. Characteristics

Table 1: Specification of Wintergreen oil

Tests Results

Organo­leptic properties
Appearance A fluid liquid
Color Pale yellow or pinkish
Strongly aromatic with a sweet woody odor, displaying a peculiar 
Aroma
creamy­fruity top note and a sweet­woody dryout
Physico­chemical properties

Specific gravity 1.1735 to 1. 1 855 at 25o C.
Optical rotation [­] 0.3 o to [­] 10.5 o at 25o C
Refractive index 1.537 to 1.5405 at 25o C
Acid number 10 to 25
Ester number 335 to 365
Ester number after 
88.8 to 98% (calculated as Methyl salicylate)
acetylation
Solubility Soluble in 2.0 to 3.5 volumes of 80% alcohol

4.2. Active constituents of Wintergreen oil

Juliani et al. (2004) conducted Gas Chromatography­Mass Spectroscopy (GC­MS) of 
wintergreen oil distilled in Lakuri danda VDC of Dolakha. The results of the analysis 
revealed that the wintergreen oil was dominated by methyl salicylate (97%) with minor 
and traces amounts of monoterpenes (alpha­pinene, myrcene, delta­3­carene, and 
limonene) and sesquiterpenes (delta­cadinene, 3, 7 Guaiadiene). 

12
Analysis of Wintergreen Oil

Similarly, Baruah and Bhagat (1976) conducted active constituent analysis of Indian 
wintergreen oil and found the major constituent as methyl salicylate (99.6%). 

Whereas, Clark (1999) reported that wintergreen oil from other related species 
(Gaultheria procumbens) were also dominated by methyl salicylate and is the 
commercial source of this component. 

The table below shows the details of the composition of wintergreen oil distilled in Lakuri 
danda VDC, Dolakha.

Table 2: Monoterpene composition of Wintergreen Oil

SN Components %

1 alpha­pinene 0.4

2 Myrcene 0.2

3 delta­3­Carene 0.9

4 Limonene 0.5

5 Methyl salicylate 97.4

Total monoterpene 99.4

Table 3: Sesquiterpene composition of Wintergreen oil

13
Analysis of Wintergreen Oil

SN Composition %

1 3, 7 Guaiadiene 0.1

2 delta­Cadinene 0.3

Total sesquiterpene 0.4

Source: Juliani et al. (2004)

5. CONCLUSION

The composition of oil of Gaultheria fragrantissima was similar to the oil of G. 
procumbens, but the Nepalese sample can be an alternative source of the flavoring 
agent methyl salicylate.

The study showed that Nepali wintergreen oil showed a great chemical diversity thus 
providing new aroma profiles. The chemical diversity found in Nepali wintergreen oil can 
be used to open new market opportunities, due to their novel and unique properties. 
However, the development of grades and standards as well as quality assurance and 
quality control system are key strategies for further development of the oil quality.

5.1. Actions 

Analgesic, anti­inflammatory, anti­rheumatic, antitussive, astringent, carminative, 
diuretic, emmenagogue, galactogogue, stimulant.

5.2. Uses

5.2.1. Aromatherapeutic uses

Beneficial for muscle and joint discomfort, arthritis, cellulite, obesity, edema, poor 
circulation, headache , stimulates liver, heart disease, coronarities crisis and 
preventative, hypertension, rheumatism, tendentious, cramps, anti­inflammatory, high in 

14
Analysis of Wintergreen Oil

cortisone­like functions, eczema, hair care, psoriasis, gout, ulcers, broken or bruised 
bones. 

5.2.2.Other uses

1. Used in some perfumery applications especially in forest type fragrances. 

2. Used as a flavoring agent for toothpaste, chewing gum and soft drinks.

References

 Baruah, A.K.S. and Bhagat, S.D. 1976. Oil of Indian Wintergreen. Indian Journal of  
Pharmacy. 38(2): 56­57.

 Clark, G. 1999. An Aroma­chemical Profile. Methyl salicylate, or Oil of Wintergreen. 
Perfumer and Flavorist. 24(1): 5­11.

 Guenther E. 1972. The Essential Oils: History­Origin in Plants Production­Analysis. 
Volume 1. Robert E. Krieger Publishing Company, Huntington, New York.

 Juliani R, Moharram H, Wang M and Simon J. 2004. Chemical diversity of Nepalese 
Essential oils. In: New Use Agriculture and Natural Plant Products Program, Cook 
College, Rutgers University, USA.

 Lawless J. 1995.Complete Essential Oils: A Guide to the Use of Oils in  
Aromatherapy and Herbalism. Element Books Limited.

 Manandhar N P. 2002. Plants and People of Nepal. Timber Press, Portland, Oregon 
USA.

 Press, J R, K K Shrestha and D A Sutton. 2000. Annotated Checklist of the  
Flowering Plants of Nepal. The Natural History Museum, London.

15