LABORATORIO DE GENTICA DROSOPHILA MELANOGASTER HERENCIA LIGADA AL SEXO

KAREN FERIAS YIVIANIS MARTNEZ JESICA MORN LINDSAY ORTIZ

LIC. JANER SALCEDO

LICENCIATURA EN CIENCIAS NATURALES Y EDUCACIN AMBIENTAL UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR 2010

OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

 Determinar las caractersticas morfolgicas externas (fenotipo) que constituyen a la Drosophila Melanogaster.

OBJETIVOS ESPECFICOS

 Identificar presencia de mutaciones que hallan sufrido las especies estudiadas.  Conocer la utilizacin que se le da a la mosca del vinagre o de la fruta conocida cientficamente como Drosophila Melanogaster.  Determinar las condiciones que se necesitan para la cra de moscas para su posterior estudio.  Saber que mtodos de captura existen para las Drosophila y cuales son los factores que influyen en la muerte de estas al momento de capturarlas.

INTRODUCCIN

En el presente trabajo de laboratorio encontrara un anlisis detallado acerca de la prctica realizada con las moscas del vinagre o de la fruta conocida cientficamente como Drosophila Melanogaster, su importante utilizacin y su identificacin dependiendo a las caractersticas fenotpicas observables. Vemos pues que hay muchas razones que hacen de D. Melanogaster un organismo idneo para la experimentacin: -Es muy abundante y de fcil de capturar. -Se cultiva fcilmente en el laboratorio. -Produce gran cantidad de descendientes (adecuado para comprobar las Proporciones mendelianas). -A 25C se completa el ciclo biolgico en 10-11 das. -Solamente posee 4 pares de cromosomas. -Tiene cromosomas gigantes en las glndulas salivares y otros tejidos de la larva, lo que facilita su observacin microscpica. -Se trabaja con ella desde 1905 y por lo tanto se dispone de una abundante bibliografa. -Hay una gran cantidad de mutantes, tanto naturales como inducidos, y muchas cepas especiales que permiten cuidadosos anlisis genticos.

DROSOPHILA MELANOGASTER Tambin llamada mosca del vinagre o mosca de la fruta, es una especie de dptero braqucero de la familia Drosophilidae. Recibe este nombre debido a que se lo encuentra alimentndose de frutas en proceso de fermentacin tales como manzana, cambur, uva, etc. Es una especie utilizada frecuentemente en experimentacin gentica, dado que posee un reducido nmero de cromosomas (4 pares), breve ciclo de vida (15-21 das) y aproximadamente el 61% de los genes de enfermedades humanas que se conocen tienen una contrapartida identificable en el genoma de las moscas de la fruta, y el 50% de las secuencias protenicas de la mosca tiene anlogos en los mamferos. Para propsitos de investigacin, fcilmente pueden reemplazar a los humanos. Se reproducen rpidamente, de modo que se pueden estudiar muchas generaciones en un corto espacio de tiempo, y ya se conoce el mapa completo de su genoma. Fue adoptada como animal de experimentacin gentica por Thomas Morgan a principios del siglo XX.

DESCRIPCIN DE LAS DROSOPHILA MELANOGASTER Drosophila melanogaster, conocida tambin como la mosca del vinagre es una mosca pequea y cosmopolita, es decir, est ampliamente distribuidas en diferentes lugares. El desarrollo de esta tiene un perodo de embriognesis y una sucesin de estados de narvales que da lugar a la mosca adulta. El ciclo completo desde el huevo al adulto demora entre nueve y diez das, a 25 C y un 60% de humedad. Estas moscas poseen caractersticas externas claramente observables. Una de ellas es el color de ojos. El color natural o Silvestre es rojo, pero hay una serie de variantes en esta caracterstica hereditaria. En 1910 Morgan estudi esta caracterstica y observ que algunas moscas tenan ojos de color blanco. A travs de sus investigaciones logr determinar qu ese rasgo estaba ligado al cromosoma X.

HERENCIA LIGADA AL SEXO EN DROSOPHILA MELANOGASTER El descubrimiento de los genes ligados al sexo en Drosophila melanogaster fue hecho por T. H. Morgan, en 1910. Durante sus investigaciones seleccion y cri moscas de ojos rojos. Dentro de sta cepa encontr una variedad con ojos blancos, las que aisl y cro hasta obtener una cepa pura para el color de ojos blancos, es decir, una cepa donde slo existen genes para este color de ojos. La forma clsica de ante investigar cmo se hereda una caracterstica, para este caso el color de ojos de las moscas, era de hacer cruzamientos dirigidos y analizando el nmero y tipos de descendientes. En sus trabajos, Morgan realiz cruzamientos entre machos ojos blancos con hembras de ojos rojos. En la primera generacin filial o F1, todos los individuos de ambos sexos tenan ojos rojos Cuando las moscas de F1 de ojos rojos se cruzan entre s, el 25% de los descendientes de la generacin filial o F2 presenta ojos blancos y el 75% restante ojos rojos. Estos resultados permite inferir que la caracterstica color de ojos esta controlada por dos genes alelos, en donde el gen determina que el color rojo es dominante sobre el gen para el color blanco. Si se analiza el sexo y color de ojos de los individuos de la F2, se puede comprobar que todas las hembras son de ojos con coloracin roja, en tanto que los machos, slo la mitad es de ojos color rojo y la otra mitad, de color blanco. Cuando se hace el crecimiento recproco, es decir, cuando se cruzan machos de ojos rojos con hembras de ojos blancos, las proporciones en F1 cambian: todas las hembras son de ojos rojos y todos los machos de ojos blancos. Al cruzar alguno de los machos de F1 de ojos blancos con alguna de las hembras F1 de ojos rojos, se obtiene la F2. En esta generacin, la mitad de las hembras es de ojos rojos y la mitad de ojos blancos. En los machos de esta generacin la distribucin del color de ojos es igual a la obtenida en las hembras. Las moscas de ojos blancos tienen genes puros para ese carcter, ya que generan solamente descendencia con ojos blancos. En cambio, las moscas hembras de ojos rojos pueden tener genes para ojos rojos o blancos, ya que la descendencia obtenida de ellas presenta las dos caractersticas. La gerencia ligada al sexo en la Drosophila melanogaster sigue una herencia cruzada, ya que las proporciones varan segn el sexo del individuo que porta el gen. As, los caracteres parecen alternarse o cruzarse de un sexo al otro al pasar de una generacin a la siguiente. Este es el modo de transicin seguido por el cromosoma X, ya que slo las hijas reciben un cromosoma X del padre; la madre transmite un cromosoma X a los hijos e hijas en igual proporcin. Esta distribucin explica los resultados obtenidos por Morgan durante sus experimentos. PORQUE SON LAS MS UTILIZADAS PARA TRABAJOS EXPERIMENTALES Son utilizadas para los trabajos experimentales ya que es considerado un material adecuado debido a su fcil manejo, su corto ciclo de vida y la gran cantidad de mutaciones que esta puede presentar. Las Drosophilas tambin son usadas

principalmente para alimentar dendrobates, pero tambin se pueden usar para alimentar peces tropicales, o cualquier reptil o anfibio insectvoro de pequeo tamao, siendo ideales para los juveniles. Incluso se pueden utilizar para alimentar plantas carnvoras. POSIBLES CAUSAS DE LA MUERTE DE LAS MOSCAS DROSOPHILAS CUANDO SE VAN A CAPTURAR  La temperatura ptima de cultivo es de 25C. A esta temperatura el ciclo biolgico se completa en 10-11 das. A temperaturas superiores se producen fenmenos de esterilidad y muerte, a temperaturas inferiores el desarrollo es muy lento.  anestesiar las moscas con ter y CO2 prolongado o excesivo ocasiona su muerte (se reconoce porque las alas se disponen perpendicularmente al cuerpo).  que el frasco donde se encuentren este mojado provoca la muerte de las Drosophilas.  Evitar que el frasco donde se vallan a establecer se unte de comida para que de esta manera las moscas no se peguen y mueran. MUTACIONES De cada pareja se origina un gran nmero de descendientes. Debido al corto periodo de gestacin de la especie, aspecto que hace que las variedades y mutaciones entre ellas sean infinitas. Las mutaciones son cambios qumicos estructurales que afectan a los genes o cromosomas que se producen ocasionalmente en forma irreversible y que al heredarse se transmiten de generacin en generacin, haciendo que aparezca una nueva caracterstica hereditaria. Pocas mutaciones son letales, pero si existen algunas que puedan causar la muerte del individuo (mutacin letal). Tal es el caso de la mutacin de las alas vestigiales en la Drosophila Melanogaster. De acuerdo a las mutaciones que presente una mosca, recibir un nombre especfico, entre los que se destacan: DUMPY: con alas truncadas oblicuamente y reducidas a las 2/3 partes de su longitud normal, su vena marginal est intacta. Vrtices de cerdas y pelos torxicos presentes en casi todos los casos. FORKED: las cerdas y los pelos acortados, nudosos, doblados, con las puntas partidas, rajadas o severamente dobladas. YELLOW: cuerpo color amarillo brillante, pelos y cerdas marrones con puntos amarillos, los pelos y las venas de las moscas silvestres. La superficie de las alas son grises debido a la alta concentracin de los pelos en esta.

EBONY: cuerpo de color bano, negro brillante adulto; las venas de las alas y de las patas son mucho ms oscuras que en las moscas silvestres. EYELESS: el ojo queda reducido a la mitad o a la cuarta parte de su superficie normal, el grado de reduccin a veces difiere en cada ojo de un mismo individuo. WHITE: el color de sus ojos es casi blanco. Ocelos, tbulos de Malpigi y cubierta testicular (en los machos) incoloros. MINIATURA: sus alas son apenas ms largas que el abdomen y proporcionalmente ms angostas que en las moscas silvestres. La superficie de las alas son grises debido a la alta concentracin de pelos en esta. SEPIA: el color de los ojos del imago al salir es marrn rojizo transparente, oscureciendo a sepia con la edad hasta de alcanzar la tonalidad negra en la fase adulta. Ocelos de color silvestres. Algunas mutaciones en las Drosophilas son: MUTANTE Yellow White eyes Carmine eyes Vermillion wing Miniature wing Forked bristies Bar eyes Helout Dumpy wing Cinnabar eyes Vestigial wing Brown eyes Sepia eyes Hairless Ebony body Eyeless Jaunti NOMENCLATURA Y W Cm V M F B Ho Dp Cu Vg Bw Se H E Ey J PARTE DEL AFECTADA Cuerpo amarillo Ojos blancos Ojos Carmn Ojos Bermellon Alas Miniatura Quetas tenedor en forma de CUERPO

Ojos en forma de barra Alas extendidas en 45 Alas regordetas Ojos color cinabrio Alas vestigiales (gen letal) Ojos pardos Ojos color sepia Sin quetas o pelos Cuerpo color bano Ojos reducidos a la mitad Alas con extremos dobaldos hacia arriba

MATERIALES

o o o o o o o o o o o

Moscas drosophila mocho y hembra Portaobjetos ter dietlico Frascos de boca grande Gasa Lupa Estereoscopio Agujas de diseccin Algodn Microscopio Pur de banano

PROCEDIMIENTO 1 Lo primero que realizamos fue capturar a las moscas que se encontraban en un frasco de boca ancha con un algodn untado de ter dietlico para dormirlas, posteriormente observamos sus caractersticas y las pusimos a aparearse para poder comprobar y realizar el experimento que nos demostrara de lo que trata la herencia ligada al sexo. PROCEDIMIENTO 2

I.

En un frasco de boca grande que tenia una fruta en estado de descomposicin se introdujeron dos moscas Drosophila (un macho y una hembra) con las siguientes caractersticas: MACHO Antenas cortas Ojos rojos Alas largas Patas largas Abdomen redondeado

HEMBRA Antenas cortas Ojos rojos Alas escarpeladas(mutacin-juanti: alas con extremos doblados hacia arriba ) Patas largas Abdomen puntiagudo

II. III.

Las llevamos a casa en un lugar que acondicionamos para que tuvieran un ptimo desarrollo. Pero las moscas se nos murieron por posibles causas que afectaron su supervivencia. Se recolectaron nuevamente las moscas a estudiar y estas si tuvieron un buen desarrollo y reproduccin dando en la F1 72 individuos. 43 hembras y 29 machos, que tenan las siguientes caractersticas: Todas las hembras y todos los machos de la F1 tenan alas escarpeladas. 29 MACHOS tenan las siguientes caractersticas: Antenas cortas Ojos rojos Alas escarpeladas(mutacin-juanti: alas con extremos doblados hacia arriba ) Patas largas Abdomen redondeado

43 HEMBRAS tenan las siguientes caractersticas: Antenas cortas Ojos rojos Alas escarpeladas(mutacin-juanti: alas con extremos doblados hacia arriba ) Patas largas Abdomen puntiagudo Total de moscas obtenidas 72

Pudimos observar que el doblamiento de las alas hacia arriba es una mutacin, y que es trasmitida a todos los descendientes de la F1; es decir, concluimos que el alelo que posee esta caracterstica es dominante sobre el alelo que posee el macho de alas largas. Se observa que la mutacin es heredada por las hembras y los machos de la F1, concluyendo que la herencia va ligada al sexo.

TIEMPO EN QUE TARDARON LAS MOSCAS EN APARECER: El tiempo que requerimos para obtener las moscas fue de 12 das, distribuyndose de la siguiente manera: y y y y y 2 das despus de llevarnos las moscas comenzaron a aparecer larvas de pequeo tamao A los 2 das despus de haber aparecido las larvitas estas crecieron su tamao Al sexto da aparecieron las pupas de color verde claro Al octavo da estas pupas se tornaron de color marrn claro Y finalmente en el da doce salieron las pequeas moscas.

PREGUNTAS

1) consultar sobre machos asquiasmaticos del tipo melanogaster Los machos son aquiasmticos; en la meiosis, no se producen quiasmas, Esto en la segregacin se traduce en que dos loci ligados (en el mismo cromosoma) siempre segregan juntos, es decir si el carcter (por poner un ejemplo, no es cierto) color de las quetas y color de las alas va en el mismo cromosoma, las proporciones genotpicas y fenotpicas de estos caracteres coincidirn. 2) el gen que produce los caracteres mutantes esta en los autosomas o en los cromosomas sexuales. Mutaciones condicionales Son aquellas que slo presentan el fenotipo mutante en determinadas condiciones ambientales (denominadas condiciones restrictivas), mostrando la caracterstica silvestre en las dems condiciones del medio ambiente (condiciones permisivas). Un ejemplo es la mutacin Curly en Drosophila melanogaster que se manifiesta como las puntas de las alas del insecto curvadas hacia arriba. A temperaturas permisivas de 20 a 25 C (las cuales son, por otro lado, las tpicas del cultivo de este organismo) las moscas homocigticas para el factor Curly no se diferencian de las moscas normales. No obstante, bajo condiciones restrictivas de temperaturas menores a 18 C, las moscas Curly manifiestan su fenotipo mutante. Este tipo se da por la mutacin del par autosomico nmero 2 presente en drosophila melanogaster; es decir, que el gen que produce los caracteres mutantes est presente en los autosomas. 3) Los genes estn ligados a los autosomas o al sexo? Los genes estn ligados al sexo debido a que estos determinan las caractersticas cromosmicas del nuevo individuo. 4) determinar si las mutaciones analizadas son recesivas o dominantes. Las mutaciones que nos dieron en la prctica son dominantes. 5) determinar si los individuos parentales los pares de alelos son homocigotos o heterocigotos. Un par es homocigoto dominante y orto es heterocigoto recesivo.

6) utilidades del cultivo de drosophila para otras especies. Son utilizadas para los trabajos experimentales ya que es considerado un material adecuado debido a su fcil manejo, su corto ciclo de vida y la gran cantidad de mutaciones que esta puede presentar. Las Drosophilas tambin son usadas principalmente para alimentar dendrobates, pero tambin se pueden usar para alimentar peces tropicales, o cualquier reptil o anfibio insectvoro de pequeo tamao, siendo ideales para los juveniles. Incluso se pueden utilizar para alimentar plantas carnvoras.

CONCLUSIONES

Con la realizacin de este laboratorio se pudo conocer acerca de las caractersticas fenotpicas de las Drosophila Melanogaster. Teniendo en cuenta su morfologa, y posibles mutaciones. Pudimos observar las diferencias entre macho y hembra en las moscas, como el tamao, el peine sexual, las bandas abdominales, forma del extremo abdominal, color de los ojos, forma de las alas.etc. Los resultados de nuestro experimento permiten concluir que la caracterstica (forma de las alas en este caso), est controlada por dos genes alelos, en donde el gen determina que las alas escarpeladas son dominantes sobre el gen para las alas largas