TRATAMIENTO DEL TUMOR VENÉREO TRANSMISIBLE CANINO (TVTc)

MEDIANTE LA COMBINACIÓN DE IVERMECTINA Y SULFATO DE VINCRISTINA

PATRICIA ZEA CRUZ

Trabajo de grado como requisito parcial para optar por el título de Magíster en
Clínica Médica y Quirúrgica en Pequeños Animales

Director
IRMA XIMENA BARBOSA SANCHEZ
Dra. en Patología

UNIVERSIDAD DEL TOLIMA

FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA y ZOOTECNIA
MAESTRÍA EN CLÍNICA MÉDICA Y QUIRÚRGICA EN PEQUEÑOS ANIMALES
IBAGUE-TOLIMA
2020
 DEDICATORIA

Dedicado con todo mi amor a mi esposo e hijos que siempre me sostuvieron en este
proceso, estuvieron conmigo en las buenas y en las no tan buenas, apoyándome,
dándome ánimo para no flaquear. Los amos profundamente.

3
 AGRADECIMIENTOS

Manifiesto mis sinceros agradecimientos a:

A la Dra. Irma Ximena quien me orientó, corrigió y apoyó en los momentos que lo
requerí.
A la Universidad de la Amazonia quien hizo un aporte económico en mi maestría.
A la Dra. Alba Mirian por ser mi coequipera en este proyecto.

4
 GLOSARIO

ALOINJERTO: trasplante de órgano, tejido o células de un individuo a otro individuo

que es de la misma especie, pero con una carga genética diferente al receptor.

CARIOTIPO: conjunto de los cromosomas metafásicos de una célula, ordenados

según su forma y tamaño.

CÉLULAS TUMORALES DE TVTc LINFOCITICO: tumor que se caracteriza por

presentar predominio igual o superior al 60% de células tumorales redondas, con
citoplasma escaso finamente granular, con presencia de vacuolas intra-
citoplasmáticas periféricas, núcleo redondo y presencia de uno o más nucléolos.

CÉLULAS TUMORALES DE TVTc PLASMOCITICO: tumor con predominio igual

o superior al 60% de células con morfología ovoide, citoplasma abundante y núcleo
excéntrico.

CITOCINA: proteínas producidas y secretadas por muchos tipos celulares

diferentes que median las reacciones inflamatorias e inmunitarias. Las citocinas
son los principales mediadores de la comunicación entre las células del sistema
inmunitario.

CLON: un grupo de células, todas derivadas de un solo precursor común, que

mantienen muchas de las características genotípicas y fenotípicas compartidas por
la célula de origen.

COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD: son el producto de un

conjunto de genes responsables de que los linfocitos rechacen tejidos
trasplantados y detecten elementos extraños. Estas moléculas participan, además,

5
en la inducción de la respuesta inmune específica, a través de la presentación del
antígeno a los linfocitos T.

CROMOSOMA: estructura compuesta por ADN y proteínas que contiene parte de

la información genética de la célula.

EPIGENETICA: estudio de todos aquellos factores no genéticos que intervienen en

la determinación de la ontogenia. Ha sido definida como los cambios heredables en
la expresión génica, los cuales ocurren sin una alteración en la secuencia de
nucleótidos del ácido desoxirribonucleico.

FILOGENETICA: es el estudio de la filogenia utilizando diagramas tipo árbol para

representar los ancestros de esos organismos.

GLICOPROTEINA P: proteína que bombea sustancias fuera de las células. Las

células cancerosas que tienen demasiada glicoproteína p podrían no ser destruidas
con medicamentos contra el cáncer.

HISTIOCITOMA: es una neoformación cutánea benigna que puede alterar a las

células progenitoras de la célula dendrítica Langerhans de la epidermis.

INMUNIDAD ADAPTATIVA: respuestas inmunitarias estimuladas por la exposición

a microorganismos infecciosos que aumentan en magnitud y capacidades
defensivas con cada exposición sucesiva a un microbio en particular. Debido a que
esta forma de inmunidad surge como respuesta a la infección y se adapta a ella,
Los únicos componentes de la inmunidad adaptativa son unas células llamadas
linfocitos y sus productos de secreción, como los anticuerpos.

INMUNIDAD INNATA: constituye la primera línea de defensa contra los microbios.

Consta de mecanismos de defensa celulares y bioquímicos que existen antes
incluso de la infección y que pueden responder con rapidez a ella.

6
INTERFERON: su nombre se deriva del hecho de que interfieren con el ARN vírico
y con la síntesis de proteínas de los virus, de forma que bloquean su replicación.
Hay dos tipos principales de interferon. Los interferones de tipo I más importantes
son el interferon- α (IFN- α) y el interferon- β (IFN- β). Solo hay un interferón de tipo
II, denominado interferon- γ (IFN- γ).

LINFOMA: es un grupo diverso de tumores malignos que surgen del tejido linfoide
fuera de la médula espinal.

MASTOCITOMA: crecimiento o masa de mastocitos (un tipo de glóbulo blanco).

Tiene su origen en las células cebadas o mastocitos. Estas células se originan en
la médula ósea a partir de células pluripotenciales (CD 34+), se distribuyen a los
tejidos por vía sanguínea, donde adquieren gránulos citoplasmáticos y culminan su
diferenciación. También se llama tumor de mastocitos.

MUTACIÓN: cualquier cambio en la secuencia de un nucleótido o en la

organización del ADN (genotipo) de un ser vivo, que produce una variación en las
características de este y que no necesariamente se transmite a la descendencia.
Se presenta de manera espontánea y súbita o por la acción de mutágenos.

PLASMOCITOMA: son tumores sólidos que se originan a partir de células

plasmáticas que involucran la piel o las membranas mucosas.

PROTOONCOGEN: cualquier secuencia génica involucrada en la

aparición/promoción, desarrollo/progresión de un proceso neoplásico.

XENOBIOTICO: es todo compuesto químico que no forme parte de la composición

de los organismos vivos.

7
 CONTENIDO

pág.
INTRODUCCIÓN 92

1. OBJETIVOS 13
1.1 OBJETIVO GENERAL 13
1.2 OBJETIVO ESPECIFICO 13

2. MARCO REFERENCIAL 14
2.1 ETIOLOGÍA 15
2.2 EPIDEMIOLOGIA 16
2.3 PATOGENIA 17
2.4 PRESENTACIÓN CLÍNICA 18
2.5 DIAGNÓSTICO 21
2.6 TRATAMIENTO 22
2.7 RESISTENCIA A QUIMIOTERAPICOS Y REPOSICIONAMIENTO DE DROGAS 22

3. DISCUSION 26

4. CONCLUSIONES 29

5. ARTICULO 30
5.1 INTRODUCCIÓN 30
5.2 MATERIALES Y MÉTODOS 30
5.3 RESULTADOS Y DISCUSION 30

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 38

8
 RESUMEN

El tumor venéreo transmisible canino (TVTc) es una neoplasia ampliamente estudiada,

y debido a su comportamiento biológico, presenta un grado significativo de contagio en
la especie doméstica Canis lupus familiaris L., principalmente en los individuos sin
hogar. Esta enfermedad tumoral, ampliamente distribuida a nivel mundial, presenta
múltiples mecanismos de dispersión (lamer, rascar o morder las partes afectadas),
contribuyendo con los impactos a nivel clínico y epidemiológico. Dentro de los
tratamientos clínicos convencionales se destaca la quimioterapia usando sulfato de
vincristina, sin embargo, recientes estudios han reportado resistencia a este
tratamiento, principalmente hacia el subtipo TVTc plasmocítico. La presente revisión
aborda el uso de la ivermectina en el tratamiento del TVTc. Se analizaron tres casos
clínicos para TVTc con morfología plasmocítica diagnosticados mediante citología y
confirmados por histopatología. Estos casos fueron tratados farmacológicamente
combinando sulfato de vincristina (0,5 a 0,7 mg / m2 de área de superficie corporal vía
intravenosa semanalmente) e ivermectina (0,5 mg / Kg vía subcutánea semanalmente),
logrando la remisión completa con menos de 5 aplicaciones sin complicaciones
clínicas.

Palabras clave: Plasmocítico, Ivermectina, Tumor Venereo Transmisible Canino

(TVTc)

9
 ABSTRACT

Canine transmissible venereal tumor (TVT) is a neoplasm widely studied and, because
of its biological behavior, a significant contagion degree has been identified in Canis
lupus familiaris L., mainly in homeless dogs. This worldwide tumoral disease shows
multiple dispersal mechanisms (leaking, scratching, and biting the infected areas),
contributing to the clinical and epidemiological impacts. Among conventional clinical
treatments chemotherapy by using vincristine sulfate is the most prominent. However,
recent studies have demonstrated tumoral resistance to this treatment, basically
towards the TVT plasmacytic subtype. The present review addresses the use of
ivermectin for TVT treatment. Three clinical cases, taken from a particular clinic and
previously diagnosed through cytology and confirmed by histopathology, were analyzed.
All the clinical cases were under pharmacological treatment by combining vincristine
sulfate (0.5 to 0.7 mg / m2 of body surface area intravenously weekly) and ivermectin
(0.5 mg / Kg subcutaneously weekly), achieving complete remission with less than 5
applications without clinical complications.

Keywords: Plasmacytic, Ivermectin, Transmissible Venereal Tumor

10
 INTRODUCCIÓN

El tumor venéreo transmisible canino (TVTc) es una neoplasia que se conoce desde
años remotos y debido a su comportamiento biológico afecta principalmente a perros
vagabundos sin distinción de género. De acuerdo a Strakova y Murchison (2014) es un
tumor que está ampliamente difundido por todo el mundo, lo que hace pensar que ha
sido capaz de crear mecanismos que contribuyen a su supervivencia, generando un
impacto clínico y epidemiológico importante. La presentación más común es la genital,
y en menor proporción se ha reportado en áreas extra genitales (Fernandez, Henao y
Mesa, 2018; Komnenou, Thomas, Kyriazis, Poutahidis y Papazoglou, 2015; Milo y
Snead, 2014; Ojeda et al., 2016).

Actualmente gracias a las políticas sanitarias gubernamentales, se ha logrado disminuir

la incidencia de esta neoplasia, controlando la propagación mediante planes
estratégicos de fácil ejecución como son las jornadas de esterilización masivas. Un
estudio transversal sobre prevalencia y aspectos epidemiológicos del TVTc en la
población canina colombiana en el año 2017, arrojó que el mayor número de casos se
presenta en las regiones más pobres y en general la prevalencia de la enfermedad en
Colombia es moderada (Arcila, Dusan y Pedraza, 2017). Al realizar búsquedas del
término TVTc en diferentes bases de datos científicas como Pubmed, Science Direct y
Google Scholar, se encuentran reportes de casos de TVTc presentes en diversos
países en los últimos 5 años, algunos reportan presentaciones neoplásicas primarias
en órganos reproductivos y otros reportan presentaciones atípicas en otros sistemas,
incluso algunos de ellos consideran estas ubicaciones como primarias y en otras como
metastásicas (Fernandez, Henao y Mesa, 2018; Komnenou et al., 2015; Milo y Snead,
2014; Ojeda et al., 2016).

El tratamiento convencional del tumor venéreo transmisible con sulfato de vincristina

sigue teniendo vigencia en la clínica oncológica, sin embargo ya existen reportes de
resistencia donde se argumenta que el TVTc de subtipo plasmocítico expresa mayor

11
resistencia a la quimioterapia (Bassani, Sforcin, Amaral, Gaspar y Rocha, 2007 y
Gaspar, Ferreira, Colodel, Brandão y Rocha, 2010), por lo que requiere mayor número
de aplicaciones quimioterapéuticas y en algunos casos es necesario modificar la
terapia con vincristina (Duzanski, Fêo, Montoya, Seullner y Rocha, 2017). Teniendo en
cuenta lo anterior, se resalta la necesidad de hacer investigaciones con nuevas
terapéuticas o realizar modificación de las ya existentes, para tratar este tumor. La
ivermectina que resulta ser originalmente un fármaco con acción antihelmíntica, posee
varias propiedades antitumorales que han sido muy bien estudiadas en el campo de la
medicina humana (Juárez y Dueñas, 2018; Liu, Fang, Sun y Liu, 2016; Markowska,
Kaysiewicz, Markowska y Huczyński, 2019; Zhu, Li y Zhu, 2017), pero con poco estudio
en la medicina veterinaria, haciéndola un candidato de interés para el estudio de su uso
en el tratamiento oncológico en animales.

El propósito de esta monografía es exponer el uso de la ivermectina en el tratamiento

del TVTc. Se presentan tres casos clínicos con diagnóstico de TVTc de morfología
plasmocítico, diagnosticados mediante citología y confirmados por histopatología,
tratados farmacológicamente con la combinación de sulfato de vincristina más
ivermectina, que lograron la remisión completa con menos de cinco aplicaciones sin
complicaciones clínicas.
.

12
 1. OBJETIVOS

1.1 OBJETIVO GENERAL

Describir la respuesta al tratamiento del tumor venéreo transmisible canino (TVTc)

mediante la combinación de ivermectina y sulfato de vincristina

1.2 OBJETIVO ESPECIFICO

Relacionar los resultados obtenidos en tres casos clínicos de TVTc manejados con un
tratamiento complementario al sulfato de vincristina y comparar los resultados con los
que reporta la literatura.

13
 2. MARCO REFERENCIAL

El tumor venéreo transmisible (TVTc) es un cáncer transmisible que ocurre

naturalmente y es de origen clonal (Marcos, Santos y Rocha, 2006; Frampton et al.,
2018) y se incluye en el grupo de tumores de células redondas junto con plasmocitoma,
mastocitoma, linfomas y neoplasias histiocíticas (Vasconcelos, Rodrigues, Celis, Nunes
y Peixoto, 2007; Wellman, 1990). Do Amaral et al., (2007) propusieron estandarizar la
nomenclatura del TVTc en tres grupos citomorfológicos: grupo L correspondiente al
TVTc Linfocítico, tumor que se caracteriza por presentar predominio igual o superior al
60% de células tumorales redondas, con citoplasma escaso finamente granular, con
presencia de vacuolas intra-citoplasmáticas periféricas, núcleo redondo y presencia de
uno o más nucléolos (Figura 1A); grupo P o TVTc Plasmocítico al tumor con predominio
igual o superior al 60% de células con morfología ovoide, citoplasma abundante y
núcleo excéntrico (Figura 1B). La presencia de los dos tipos citomorfológicos sin que
haya un predominio de un tipo sobre otro lo establece como grupo M o TVTc de tipo
mixto. (Figura 1C).

El TVTc se encuentra principalmente en las mucosas de los genitales externos de la

hembra y el macho, sin embargo este tumor puede invadir otros tejidos tanto por
metástasis como por trasplante (Marcos, Santos, Rocha, 2006; Montoya, Pedraza,
Monteiro, Brandão y Rocha, 2013; Valençola et al., 2015). El TVTc junto con el Tumor
Facial del Demonio de Tasmania (TFDT) son tumores transmitidos naturalmente en
forma de aloinjerto contagioso. Pese que los dos tumores comparten muchas
similitudes en sus características, tienen un impacto muy diferente en sus huéspedes,
TFDT tiene un crecimiento más agresivo y puede causar la muerte del animal a
diferencia del TVTc que no es letal (Murchison, 2009; Siddle y Kaufman, 2014).

14
Figura 1. Lesiones microscópicas de Tumor Venero Transmisible Canino (TVTc)

Fuente: Loyola (2014)

A. Muestra citológica de TVT de patrón linfocítico. Se observa predominio de células

redondas de citoplasma escaso y alta relación núcleo: citoplasma. B. Muestra citológica
de TVT de patrón plasmocítico. Se observa predominio de células ovoides de
citoplasma amplio y núcleo excéntrico. C. Muestra citológica de TVT de patrón mixto.
Se observa presencia de dos tipos morfológicos, sin predominio de ninguno (flecha
roja: célula tipo plasmocítico; flecha azul: célula tipo linfocítico).

2.1 ETIOLOGÍA

El origen celular del TVTc es desconocido, se presume que es de células neoplásicas

redondas no diferenciadas de origen reticuloendotelial histiocítico (De la Cruz et al.,

15
2015; Sá, Moraes, Cruz, Marquez y Calderón, 2016). Inicialmente se pensó que este
tumor podría ser de origen viral, pero partículas virales oncogénicas no han sido
detectadas en las células tumorales (Cockrill y Beasley, 1975; Murray, James y Martin,
1969) ni tumores han sido trasmitidos por filtrados libres de estas células (Salamanca,
Santander, Triana, Romero y Rondon, 2008). Murgia, Pritchard, Kim, Fassati y Weiss,
2006 y Ostrander, Davis y Ostrander, 2016 propusieron que una característica única
del TVTc es su origen clonal el cual evolucionó de un lobo o una raza de perro del este
asiático por mutación de células somáticas. Normalmente, el cariotipo de los caninos
tiene 78 cromosomas, pero estudios citogenéticos han demostrado que las células del
TVTc se caracterizan por presentar un menor número exhibiendo entre 57 y 59
cromosomas incluyendo varios con morfología submetacentrica (De la Cruz et al.,
2015; Fonseca et al., 2012), sugiriendo la ocurrencia de reordenamientos, que pueden
ser el resultado de un equilibrio de fusiones y no de la ganancia o pérdida de material
genético.(Cohen, 1985; Murgia et al., 2006; Vázquez-Mota et al., 2008; Vonholdt y
Ostrander, 2006).

Las alteraciones moleculares en el TVTc se dan por el reordenamiento del protoncogen

c-myc resultado de la inserción de un segmento de ADN perteneciente a la familia de
elementos de transposición genética conocidos como LINE (Long Interspersed Nuclear
Element), que no ocurren en células caninas normales (Fonseca et al., 2012).
Posicionando este segmento como un marcador molecular para el diagnóstico de este
tumor.

2.2 EPIDEMIOLOGIA

La principal vía de contagio del TVTc es a través del coito, y debido al comportamiento
social de los perros de oler, lamer y morder, ha sido descrita como una importante vía
para la transmisión de la enfermedad (Mendoza, Chavera, Falcón y Perales (2010).
Estos hábitos, también están implicados en la transmisión del TVTc extra genital,
debido al contacto entre los perros (Jantzen, 2005) por que permite el trasplante de
células tumorales exfoliadas intactas de un animal a otro (Cohen, 1985), especialmente

16
si existen abrasiones o pérdida de integridad de la superficie mucosal (Valençola et al.,
2015). Otra vía de transmisión reportada, es la descrita por Marcos et al., 2006 quienes
realizaron transmisión experimental de células de TVTc por inyección subcutánea. Así
mismo, Sá et al., 2016; Siddlea y Kaufman, 2013, observaron que la aparición tumoral
se presentaba dentro de los dos meses posteriores a la implantación. La prevalencia
del TVTc es más alta en áreas urbanas de regiones tropicales y subtropicales (Sá et
al., 2016). Un estudio transversal sobre prevalencia y aspectos epidemiológicos del
TVTc en la población canina colombiana en el año 2017, arrojó que el mayor número
de casos se presenta en las regiones más pobres y en general la prevalencia de la
enfermedad en el país es moderada (Arcila et al., 2017).

2.3 PATOGENIA

Un aspecto importante del comportamiento biológico del TVTc, es la capacidad de

desarrollar y evadir el sistema inmune pese a un reconocimiento especializado por
parte del huésped (Ballestero et al., 2018). Es así, como la respuesta inmunológica
adecuada en el individuo y el microambiente tumoral resulta preponderante en la
inhibición del TVTc y la evolución a metástasis (De la Sota, D´ Amigo, Adagio, Noia y
Gobello, 2004; Siddle y Kaufman, 2014). La regresión ocurre gracias a la señalización
molecular entre las células de la inmunidad innata y específica por parte del huésped
(Frampton et al., 2018; Siddle y Kaufman, 2014). Un rápido reconocimiento y respuesta
del sistema inmunológico a los aloinjertos se manifiesta cuando las células T CD4 y
CD8 del huésped se exponen a moléculas extrañas del Complejo de
Histocompatibilidad Mayor (MHC) en la superficie de las células del TVTc, más
comúnmente las células presentadoras de antígenos (APC) donantes que están
presentes en un injerto (Siddlea y Kaufman, 2013).

La primera etapa donde el TVTc empieza a crecer después de la implantación se

denomina fase progresiva (P), durante la cual el sistema inmune no puede controlar el
crecimiento del tumor. Durante la fase P, la mayoría de las células del TVTc carecen de
expresión de moléculas de MHC clase I y clase II, y no hay infiltración de linfocitos en el

17
tumor (Siddlea y Kaufman, 2013). Durante esta fase se produce una citoquina llamada
factor de crecimiento transformante beta 1(TGF-β1), la cual inhibe la actividad de las
células natural killer (NK), así como la infiltración de linfocitos T citotóxicos en el tumor
(Hsiao, Liao, Hung y Chu, 2004), favoreciendo que el crecimiento del tumor, ocurra de
forma acelerada hasta convertirse en una masa exudativa, pedunculada similar a un
coliflor. Microscópicamente hay gran cantidad de células neoplásicas en mitosis y
pocos linfocitos infiltrantes en el tumor (Frampton et al., 2018). Durante la fase estable
(E) el ritmo del crecimiento del tumor disminuye y con ello la celularidad, esta fase
puede durar semanas o meses (Murchison, 2009). La fase de regresión (R) se
caracteriza por un incremento en la producción de interleucina-6 (IL-6), citoquina pro
inflamatoria secretada por los linfocitos T infiltrantes (TILs), la cual antagoniza los
efectos de TGF-β1 y restaura la actividad de las células NK (Hsiao et al., 2004). En
esta fase, en la superficie de las células del TVTc hay una elevada expresión del MHC
clase I y clase II, infiltración de linfocitos en la masa tumoral, aumento en la producción
del interferón gamma (IFN-γ) (Siddlea y Kaufman, 2013) y desaparición de células
neoplásicas, también se presenta el colapso del estroma tumoral y depósito de
colágeno, por lo tanto se puede decir que la regresión completa es inherente a un
sistema inmunológico competente, una noción respaldada por el hecho de que los
caninos inmunosuprimidos desarrollan TVTc más agresivo ya que carecen de TILs y
rara vez se elimina (Frampton et al., 2018).

2.4 PRESENTACIÓN CLÍNICA

La presentación genital del TVTc es la más frecuente (Mendoza et al., 2010), siendo
que en las hembras es común hallar lesiones neoplásicas en la parte posterior de la
vagina (Milo y Snead, 2014), o entre el infúndibulo y la vagina y en los machos suele
presentarse en el bulbo y glande del pene (Das y Das, 2000). (Figura 2C).

Macroscópicamente la neoplasia de TVTc puede presentarse de forma solitaria con

bordes definidos, que van de 1 a 3mm de diámetro, mientras que las neoplasias
múltiples se asemejan a la forma de un coliflor presentándose de forma pedunculada,

18
papilar o multilobulada (De la Sota et al., 2004). Poseen consistencia firme y
usualmente apariencia hemorrágica, atribuibles a la naturaleza friable de la neoplasia
(Paranzini, Sant’anna, Di Santis y Martins, 2015; Sá et al., 2016). (Figura 2).

El inicio de las lesiones neoplásicas puede cursar con pequeñas áreas elevadas
hiperémicas que aumentan de tamaño y que pueden alcanzar hasta 15cm de diámetro,
son altamente vascularizadas, lo que hace indispensable diferenciar el origen del
sangrado con infecciones del tracto urinario. La descarga hemorrágica vulvar en las
hembras, puede a veces atraer machos y ser confundida por los dueños con el celo.
(De la Sota et al., 2004). El TVTc generalmente no hace metástasis ni mata fácilmente
a los perros infectados (Siddle y Kaufman, 2014), pero se han notificado casos de
metástasis de TVTc en zona inguinal, ojo, boca, linfonodos, cavidad abdominal
(Crossley y Ramírez, 2017), piel (Figura 2A), párpados (Ojeda et al., 2016), amígdalas,
hígado, faringe, bazo, peritoneo, colon, cerebro, huesos (De la Sota et al., 2004) y
pulmón (Salamanca et al., 2008) cuando el huésped es un cachorro o está
inmunocomprometido (Sá et al., 2016; Siddle y Kaufman, 2014). Es importante
considerar como diagnóstico diferencial en casos de epistaxis, TVTc en cavidad nasal,
ya que es común encontrarlos como implantaciones primarias sin signos en los
genitales (Grandez, De Priego, Yi, y Torres, 2011).

19
 Figura 2. Lesiones macroscópicas de Tumor Venero Transmisible Canino (TVTc)

Fuente: (A) y (B) Acevedo (2020); (C) y (D) Zea (2020)

Tumor Venero Transmisible canino (TVTc). A y B. Se observa neoplasia de forma

multinodular, sobre plano dorsal nasal (ulcerado y sangrante) y gingival. C y D. Se
observa neoplasia en bulbo y glande peneano, forma pedunculada y apariencia de
coliflor. En labios vulvares se observan dos neoplasias redondeadas circunscritas y
enrojecidas.

20
2.5 DIAGNÓSTICO

El diagnóstico presuntivo de TVTc inicia a través de una historia clínica detallada como
la edad del paciente, lugar de origen, estado sexual y examen semiológico que permita
localizar el tumor y evidenciar las lesiones macroscópicas características para el caso
de la presentación genital. El diagnóstico confirmativo se hace mediante citología e
histopatología de las lesiones (Das y Das, 2000; Sá et al., 2016) así como por PCR,
éste último resulta ser el método más confiable por su alta sensibilidad (De la cruz et
al., 2015). El TVTc de presentación extragenital puede confundir al clínico para su
diagnóstico inicial por el origen de los signos clínicos como epixtasis, epífora, halitosis,
pérdida de dientes, exoftalmia, deformaciones orales o faciales entre otros (De la Sota
et al., 2004).

En las citologías de TVTc generalmente se observa multicelularidad, con contenido de

células redondas u ovaladas que varían entre 14 y 30μ de diámetro, con citoplasma
bien delimitado, núcleo redondo u ovalado, frecuentemente encontrarlo excéntrico y de
tamaño variable, con cromatina rugosa y granular y generalmente se evidencia un solo
nucléolo prominente. El citoplasma puede verse basófilo y frecuentemente con gran
contenido de vacuolas (Wellman, 1990; Dar et al., 2017). Se pueden observar figuras
mitóticas y presencia de células inflamatorias como linfocitos, macrófagos y neutrófilos
(Stockmann et al., 2011).

Do Amaral (2005) hace una clasificación de acuerdo a las características morfológicas

de las células de TVTc de la siguiente manera: Patrón linfocítico (predominio celular
mayor o igual al 60% de células redondeadas, con citoplasma escaso y rugoso, núcleo
redondo con cromatina gruesa, presencia de uno o dos nucléolos predominantes y
vacuolas en el citoplasma) b) patrón plasmocítico (predominio mayor o igual al 60% de
células de tipo ovoides, citoplasma abundante, menor relación núcleo-citoplasma y
núcleo excéntrico) y c) patrón mixto (ninguna de las células supera el 59% del total. En
la actualidad, se reconoce la importancia de identificar el patrón morfológico
predominante. Se ha encontrado relación entre el tamaño de tumor y el patrón

21
morfológico, de modo que en los tumores pequeños las células que predominan son las
plasmocíticas y en los tumores grandes las células linfocíticas y de patrón mixto (Lima
et al., 2013). (Figura 1).

2.6 TRATAMIENTO

El protocolo más eficaz y practico establecido para TVTc es la utilización del alcaloide
sulfato de vincristina en monoterapia con una administración semanal de 0,5 a 0,7 mg /
m2 de área de superficie corporal, requiriendo un total de 4 a 8 aplicaciones vía IV.
Este alcaloide ejerce actividad citotóxica al interrumpir la formación de microtúbulos
celulares lo que consecuentemente inhibe la replicación de las células tumorales
(Hantrakul, 2014; Salar y Kumar, 2016). Existen algunos casos en donde la terapia con
sulfato de vincristina no resultó eficaz para lograr la remisión completa del tumor,
siendo necesario continuar la terapia con doxorrubicina (Lima et al., 2013).
Antimitóticos como ciclofosfamida, metotrexato y vinblastina, también han sido
empleados (Das y Das, 2000; Montoya, Ballestero y Rocha, 2014), sin embargo los
datos que reporta la literatura sobre su efectividad son incipientes. Existe un reporte de
caso de TVTc donde el paciente resultó refractario a la terapia con doxorrubicina y
decidieron manejar un nuevo protocolo quimioterapéutico con Lomustina un agente
considerado alquilante obteniendo resultados favorables (Fernandez et al., 2018). Los
efectos adversos mayormente encontrados después de la aplicación de vincristina son
trastornos gastrointestinales como vómito, diarrea, leucopenia a expensas de
neutropenia debido a la mielo supresión, anemia y necrosis en el tejido por
extravasación (Nack et al., 2005).

Se recomienda un conteo de glóbulos blancos previo a cada tratamiento, para hacer

control a la neutropenia, ya que cuando los neutrofilos descienden a un rango inferior
de 4000/mm3 el tratamiento debe ser retrasado de 3-5 días (De la Sota et al., 2004).

22
2.7 RESISTENCIA A QUIMIOTERAPICOS Y REPOSICIONAMIENTO DE DROGAS

La resistencia a múltiples fármacos (MDR) en el tratamiento del cáncer ha sido una

limitante importante para el éxito de la quimioterapia. Hecho demostrado en estudios in
vitro en donde las células tumorales han sido expuestas a agentes citotóxicos y han
expuesto resistencia a destruirse (Thomas y Coley, 2003). Entre otros, estos resultados
han generado la búsqueda de alternativas de tratamiento donde la reducción y
eliminación tumoral sea efectiva y que a su vez generen el menor daño posible,
intentando conservar la morfostasia y homeostasia de las células no tumorales. Una de
las opciones que ha surgido, es la reutilización o reorientación de fármacos, en la que
se identifican nuevos usos para drogas pre-existentes y de las cuales se conoce muy
bien su nivel de seguridad, así como su farmacocinética y farmacodinamia. Importantes
esfuerzos se están realizando para reposicionar fármacos no antineoplásicos con
actividad antitumoral probando los mismos en experimentos in vivo e in vitro
(Domínguez, et al., 2018; Juárez y Dueñas, 2018; Markowska, et al., 2019; Zhu, et al.,
2017).

Los estudios del comportamiento del cáncer indican que el aspecto farmacológico,
bioquímico y genético más involucrado en el desarrollo de multiresistencia en su gran
mayoría obedece a la sobreexpresión de P-Glicoproteína (Pgp) (Ruiz, Souviron y
Martínez, 2002), lo que implica la disminución del quimioterapéutico en el espacio
intracelular por un bombeo activo al exterior de la célula (Gaspar et al., 2010; Montoya
et al., 2014; Roninson, 1992) cuando se une a una proteína de membrana plasmática,
presente solo en las células resistentes (Astudillo, Ruiz, Martínez y Ochoa, 2010)
induciendo a generar resistencia a agentes quimioterapéuticos. Esta proteína usa la
energía que es liberada cuando hidroliza el ATP para dirigir el transporte de varias
moléculas a través de la membrana celular (Thomas y Coley, 2003).

La P-Glicoproteina es producida por el gen MDR1, se trata de una proteína de

membrana de 171 kDa dependiente de ATP que está implicada en la transferencia de
móleculas biológicas a traves de la membrana contra un gradiente de concentración

23
(Juranka, Zastawny y Ling, 1989; Montoya et al., 2014), actúa como una bomba que
expulsa xenobióticos desde el interior de la célula hacia el exterior a través de un poro
en la membrana, participando de esta forma en procesos de detoxificación e
inactivación de fármacos (Astudillo et al., 2010). Avances recientes en biología
molecular han permitido detectar que la Pgp se expresa de modo específico en
condiciones normales en las células de tejidos de varios órganos como: hígado,
páncreas, riñón, colon, yeyuno, corteza adrenal, sangre periférica y en la médula ósea
(Ruiz et al., 2002), incluso la proteína podría tener funciones adicionales en el sistema
endocrino y partes del pulmón y bronquios (Weinstein, Kuszak, Kluskens, y Coon,
1989). Para el caso de TVTc, de acuerdo a estudios realizados en Brasil por Bassani,
et al. (2007) y Gaspar et al. (2010) el subtipo plasmocítico, indica mayor potencial
mitótico y resistencia a la quimioterapia, asociado a una mayor expresión de Pgp. Por
otro lado, un estudio reciente sobre genética y comportamiento del TVTc realizado en
Colombia sugiere que existen diferencias filogenéticas del tumor entre los dos países
(Alzate, Montoya-Florez, Perez, Rocha y Pedraza-Ordoñez, 2019).

2.7.1 Ivermectina. La ivermectina pertenece al grupo de las avermectinas (AVM), que

es un grupo de compuestos de lactonas macro-cíclicas de 16 miembros descubierta en
1967 en el Instituto Japonés Kitasato; es reconocida como acaricida, nematicida e
insecticida y estas acciones se dan aumentando los receptores de ácido γ-
aminobutírico (GABA) o de los canales de iones de cloruro glutamato (Glu-Cl),
bloqueando la señal en la placa motora (Juarez et al., 2018).

La ivermectina al actuar como un sustrato de la P-Glicoproteina, y al tener gran afinidad

por ella, bloquea los receptores o puntos de unión de la vincristina, ocupandolos,
mediante un mecanismo de inhibición competitiva evitando la expulsión del
quimioterapeutico al espacio extracelular (Astudillo et al., 2010).

Estudios recientes comprueban que la ivermectina aparte de tener una actividad

antihelmíntica, presenta cualidades anticancerígenas en diferentes tumores, actuando
de diferentes modos: 1. Inhibiendo proteínas de resistencia a múltiples fármacos

24
(MDR), 2. Actuando como ionóforo y por regulación ascendente de los canales de
cloruro para generar apoptosis y muerte celular osmótica, 3. Provocando disfunción
mitocondrial y daño oxidativo, 4. Induciendo la muerte celular inmunogénica, 5.
Induciendo la autofagia, 6. Inhibiendo la vía WNT-TCF (Factor de trascripción de
células T), 7. Realizando modulación epigenética, 8. Inhibiendo la helicasa, un inhibidor
del cáncer de células madres (Juárez et al., 2018). Como ejemplo de su acción
antitumoral se menciona en el tratamiento de neoplasias malignas en humanos como
cáncer de próstata, leucemia, glioblastoma, cáncer de ovario entre otros, donde se han
obtenido resultados exitosos (Liu et al., 2016; Juarez et al., 2018; Markowska et al.,
2019; Zhu et al., 2017).

25
 3. DISCUSION

En concordancia con lo descrito por Fernández et al., (2018) el TVTc es una neoplasia
con un impacto clínico y epidemiológico importante en Colombia, esto obedece a la alta
población de caninos callejeros en las grandes y medianas ciudades así como a la
población canina presente en ciudades pequeñas menos desarrolladas, sin embargo, a
pesar de su presentación, existen escasos reportes de este tumor, debido a la poca
importancia que se le da, ya que probablemente se supone que es de fácil resolución lo
cual ha generado un atraso importante en su investigación. Si bien es cierto, el
tratamiento quimioterapéutico más frecuentemente usado para el TVTc es el sulfato de
vincristina (De la Cruz et al., 2015) y aunque ha demostrado su efectividad, existe
evidencia, la mayoría reportada en Brasil, que argumenta que el TVTc de subtipo
plasmocítico expresa mayor resistencia a la quimioterapia (Bassani et al., 2007 y
Gaspar et al., 2010), tiene una regresión más lenta y requiere más de cinco semanas
de terapia, en comparación con el tumor de subtipo linfocitico (Lima et al., 2013 y
Álzate et al., 2019), e incluso en algunos casos se ha reportado la necesidad de
implementar terapias modificadas (Duzanski et al., 2017), resultando como
consecuencia, un aumento en los costos de tratamiento para el propietario y mayores
efectos colaterales para el paciente. En contraste, Álzate et al. (2019) reportaron que
no se encontró una relación directa entre la morfología celular y la resistencia al sulfato
de vincristina, hecho que lo atribuyen a una posible diferencia en los grupos
filogenéticos de TVTc en los dos países. En nuestro estudio de casos todos los
tumores fueron clasificados morfológicamente como plasmocítico y fueron tratados con
una terapia farmacológica de sulfato de vincristina más ivermectina, mostrando una
respuesta satisfactoria respecto al tiempo en que se produjo la remisión del tumor
(entre cuatro y cinco semanas), lo que hace pensar que el TVTc subtipo morfológico
plasmocítico podría tener mejor respuesta cuando se realiza un tratamiento
complementario. Estos hallazgos se relacionan con la hipótesis propuesta por Said et
al. (2009) donde se determina que se debe hacer cambio de quimioterapéutico si no se
logra la regresión tumoral después de la sexta semana.

26
Sales et al. (2012) realizaron un estudio comparativo utilizando dos protocolos en 50
pacientes caninos distribuidos entre hembras y machos, previamente diagnosticados
con TVTc, a un grupo le aplicaron solo vincristina a una posología de 0,5mg/m2 y al
otro grupo le aplicaron una combinación de vincristina más ivermectina a una posología
de 0,5mg/m2 y 0,4mg/Kg respectivamente. Los resultados arrojaron, que los pacientes
del grupo que utilizaron un protocolo en combinación redujeron significativamente el
número de aplicaciones. Santos, Gomes, Lima, Cordeiro, y Oriá (2014) y Lopes, dos
Santos, y Silva (2015) en sus reportes de caso mencionan el uso combinado de
ivermectina más sulfato de vincristina con posologías de 0,6mg/Kg y 0,4mg/Kg
respectivamente más vincristina a una posología de 0,5mg/m2 para el tratamiento de
TVTc, logrando la cura clínica con un máximo de cuatro aplicaciones de la
combinación. Las evidencias anteriores concuerdan con los resultados obtenidos en
este estudio de casos donde no se aplicó más de cinco dosis de vincristina más
ivermectina en los pacientes, pero contrastan en que en esos estudios no se discrimina
el subtipo tumoral como lo realizado en nuestro caso. Otras investigaciones han
informado la acción de la ivermectina como un fármaco contra el cáncer en animales y
humanos obteniendo resultados favorables (Juárez et al., 2018; Korystov et al., 2004;
Markowska et al., 2019). Didier y Loor (1996) demostraron que la ivermectina actúa
como sustrato y como inhibidor de la Pgp. Siendo que la acción de la Pgp ha sido
identificada como uno de los mecanismos que aprovechan las células tumorales para
expresar resistencia (Thomas y Coley, 2003). Teniendo en cuenta las afirmaciones
anteriores se realizó este trabajo, donde se manejó en los pacientes un tratamiento con
el fármaco de elección (sulfato de vincristina) en combinación con ivermectina
permitiendo reducir de manera significativa el número de dosis del quimioterapéutico y
consecuentemente permitiendo la reducción de los efectos adversos de este fármaco,
ya que al disminuir el número de aplicaciones se disminuye el riesgo de mielo
supresión y la aparición de infecciones concomitantes. En los casos reportados las
dosis de ivermectina usadas fueron seguras para los pacientes teniendo en cuenta que
trabajos previos in vivo e in vitro demostraron que la acción antitumoral de este
medicamento se logra a las mismas dosis empleadas clínicamente como agente
antihelmíntico ( Zhu et al., 2017; Juarez et al., 2018).

27
Pese a que la vincristina se considera una droga bien tolerada en perros, por su acción
citostática no selectiva, genera mielosupresión (Nak et al., 2005). A los pacientes de
este estudio se les realizaron exámenes físicos y hematológicos, para controlar mielo
supresión, nefrotoxicidad y anorexia, mostrando resultados clínicos y hematológicos
satisfactorios sin presencia de complicaciones debido a la aplicación del tratamiento.
Cabe resaltar que en el examen clínico no se evidenció la presencia de enfermedades
concomitantes que comprometieran el sistema inmunológico, incrementando la tasa de
éxito del tratamiento así como lo indicó De la Sota et al. (2004). También existen
reportes de casos donde se utilizó para el tratamiento de TVTc terapias
complementarias al sulfato de vincristina, como es el caso de un estudio donde se
manejó además del quimioterapéutico la aplicación de interleucina-2 (IL2) por vía
intramamaria, encontrando que los resultados de disminución del tamaño tumoral del
TVTc eran impresionantes (Den et al., 2015), así mismo, Marín, Barrios, Zambrano y
Zea (2017) describieron un caso clínico de TVTc tratado mediante la combinación de
vincristina con agentes homeopáticos obteniendo resultados favorables, ya que
concomitante con el TVTc el paciente padecía múltiples patologías. La presentación de
este trabajo permite generar una hipótesis de investigación sobre el uso de ivermectina
combinado con vincristina en tratamiento de TVTc de fenotipo plasmocítico que abre la
puerta para realizar estudios de investigación que posibiliten extender las opciones
terapéuticas para tratar esta neoplasia y elucidar el beneficio del protocolo instaurado
en los pacientes del presente reporte.

28
 4. CONCLUSIONES

El TVTc continua siendo una patología de elevada presentación en la clínica diaria

siendo su mayor incidencia en zonas rurales donde habita una alta cantidad de caninos
callejeros, por lo tanto se hace necesario que se conozcan aspectos inherentes a su
morfología celular para predecir la respuesta al tratamiento quimioterapéutico y así
realizar la mejor elección según sea el caso.

Las bases genéticas del tumor de TVTc pueden diferir en Colombia con respecto a las
presentadas en el tumor de Brasil, por lo que su comportamiento biológico también
puede cambiar, demostrando la necesidad de realizar más estudios genéticos en
nuestro país, que permitan dilucidar esta hipótesis y así proponer otras opciones
terapéuticas que beneficien al paciente.

La ivermectina es un fármaco que toma fuerza en el campo oncológico, bien estudiado

en medicina humana, pero con escasos reportes en medicina veterinaria, por eso se
hace necesario ahondar más sobre el uso de la ivermectina en TVTc de subtipo
plasmocítico descrito en la literatura como el subtipo más resistente.

La presentación genital del TVTc es la más frecuente, sin embargo cada vez son más
los reportes de presentaciones extragenitales, que soportan la idea que el TVTc tiene
un comportamiento maligno y por lo tanto amerita más interés investigativo.

29
 5. ARTICULO

TRATAMIENTO DEL TUMOR VENÉREO TRANSMISIBLE CANINO (TVTc)

MEDIANTE LA COMBINACIÓN DE IVERMECTINA Y SULFATO DE VINCRISTINA
(TVTc). REPORTE DE CASOS
USE OF IVERMECTIN IN COMBINATION WITH VINCRISTINE SULFATE AS A
TREATMENT OF CANINE TRANSMISSIBLE VENEREAL TUMOR (TVTC). CASE
REPORT

Patricia Zea Cruz1, Alba Mirian Poche2, Irma Ximena Barbosa3.

1Est. MSc. Clínica Médica y Quirúrgica en Pequeños Animales. Departamento de
Sanidad Animal, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad del Tolima,
Santa Helena Parte Alta, A.A. 546, Ibagué, Tolima (Colombia), e-mail: pzeac@ut.com;
2 MVZ, Esp. Docente Universidad de la Amazonia (Colombia), e-mail:
a.poche@udla.edu.co; 3 MVZ, MSc, PhD. Grupo de Investigación en Medicina y
Cirugía de Pequeños Animales, Departamento de Sanidad animal, Facultad de
Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad del Tolima, Santa Helena Parte Alta, A
.A. 546, Ibagué, Tolima (Colombia), e-mail: isanchez@ut.edu.co.

5.1 INTRODUCCIÓN

La resistencia a múltiples fármacos (MDR) en el tratamiento del cáncer ha sido una

limitante importante para el éxito de tratamientos quimioterapéuticos (Thomas y Coley,
2003), lo que ha generado la búsqueda de nuevas alternativas que provean una
reducción y eliminación tumoral efectiva y que a su vez causen el menor daño posible,
priorizando la conservación de la morfostasia y homeostasia de las células no
tumorales. Recientemente, la reutilización o reorientación de fármacos ha permitido la
identificación de nuevos usos para drogas pre-existentes de las cuales se conocía muy
bien su nivel de seguridad, su farmacocinética y farmacodinamia. Es así, como el
desarrollo de importantes trabajos in vivo e in vitro han reposicionado fármacos no

30
antineoplásicos con actividad antitumoral (Zhu et al. 2017; Dominguez et al. 2018;
Juarez et al. 2018; Markowska et al. 2019), dando una luz de esperanza para la
implementación de tratamientos menos agresivos.

Estudio del comportamiento del cáncer indica que una causa en el desarrollo de
resistencia a los quimioterapéuticos es la sobreexpresión de P-Glicoproteina (Pgp), lo
que influye en la expulsión del quimioterapéutico desde la célula tumoral (Montoya et
al. 2012). La Pgp producida por el gen MDR1, es una proteína de membrana de 170
kDa ATP dependiente que está implicada en la transferencia de moléculas biológicas a
través de la membrana contra un gradiente de concentración (Montoya et al. 2014).
Con alta expresión en tumores que se derivan de tejidos que normalmente la expresan
como hígado, colón, adrenal, páncreas, y riñón, lo que induce a generar resistencia a
agentes quimioterapéuticos (Thomas y Coley, 2003).

La ivermectina al actuar como un sustrato de la P-Glicoproteina, y al tener gran afinidad

por ella, bloquea los receptores o puntos de unión de la vincristina, ocupándolos,
mediante un mecanismo de inhibición competitiva evitando la expulsión del
quimioterapéutico al espacio extracelular (Astudillo et al. 2010).

Lo cual hace pensar que podría ser un candidato especial para el acompañamiento de
fármacos quimioterapéuticos en el tratamiento antineoplásico.

El tumor venéreo transmisible (TVTc) es un cáncer transmisible que ocurre

naturalmente y es de origen clonal (Marcos et al. 2006; Frampton et al. 2018) y se
incluye en el grupo de tumores de células redondas junto con plasmocitoma,
mastocitoma, linfomas y neoplasias histiocíticas (Vasconcelos, et al. 2007; Wellman,
1990). Do Amaral et al. (2007) propusieron estandarizar la nomenclatura del TVTc en
tres grupos citomorfológicos: grupo L correspondiente al TVTc Linfocítico, tumor que se
caracteriza por presentar predominio igual o superior al 60% de células tumorales
redondas, con citoplasma escaso finamente granular, con presencia de vacuolas intra-
citoplasmáticas periféricas, núcleo redondo y presencia de uno o más nucléolos; grupo

31
P o TVTc Plasmocítico al tumor con predominio igual o superior al 60% de células con
morfología ovoide, citoplasma abundante y núcleo excéntrico. La presencia de los dos
tipos citomorfológicos sin que haya un predominio de un tipo sobre otro lo establece
como grupo M o TVTc de tipo mixto. Este tumor generalmente se ubica en los genitales
externos, sin embargo, puede invadir otros tejidos y provocar lesiones metastásicas
(Marcos et al. 2006).

El objetivo de este reporte es dar a conocer la respuesta de tres pacientes caninos con
diagnóstico de TVTc de presentación genital clasificados en el fenotipo plasmocítico,
los cuales fueron tratados con sulfato de vincristina en asociación con ivermectina.

5.2 MATERIALES Y MÉTODOS

En una clínica veterinaria particular, ubicada en la ciudad de Florencia (localizada en el

departamento del Caquetá, Colombia, a los 01°37'03” de latitud norte y 75°37'03” de
longitud oeste; a una altura de 242 metros sobre el nivel del mar), se recibieron para
consulta tres caninos con las siguientes características:

Canino 1. Hembra entera, raza Pug, 3 años de edad, que al examen clínico presentaba
dos masas de contorno redondeado, consistencia dura, no sangrante, ubicadas en los
labios vulvares. La masa más grande tenía un tamaño de 15mm de largo por 7mm de
ancho y la más pequeña de 5mm de largo por 4mm de ancho. La paciente no
presentaba alteraciones adicionales. (Figura 1).

Canino 2. Macho entero, raza mestiza, 7 años de edad, fue llevado a consulta médica
veterinaria por presentar sangrado a través del prepucio. Al examen clínico se
evidenció la presencia de 2 masas, irregulares, multilobuladas, friables y sangrantes, la
primera masa ubicada en la base del bulbo externo peneano, medía 1,8mm de largo
por 2cm de ancho. La segunda masa ubicada en el glande peneano medía 1,9mm de
largo por 2cm de ancho.

32
Canino 3. Macho entero, raza mestiza, de edad desconocida (al realizar análisis de la
arcada dentaria se determinó que era un canino adulto), presentó masa en el glande
del pene, de apariencia eritematosa, sangrante, exudativa, en forma de coliflor, medía
4cm de largo por 2,2cm de ancho. (Figura 1).

A cada individuo se le realizó citología e histopatología de los tumores. El frotis por

hisopado fue extendido en tres láminas portaobjetos, que inmediatamente fueron
teñidas con Diff-QuiffTM y analizadas en microscopio óptico de luz (Leica DM500) con
el fin de determinar el diagnóstico microscópico. El índice mitótico (coeficiente entre el
número de células que experimentan mitosis y el número de estas que no
experimentan mitosis en una población) fue determinado en 10 campos para cada
tumor (Natarajan et al. 2009).

Índice mitótico = No. células en mitosis X 100

No. Total de células

A cada paciente se le realizó biopsia incisional de la masa tumoral. La sedación se hizo

con Xilacina 0.5mg/kg vía IM (Xilacina 2%, Laboratorios Farmacéuticos Veterinarios
Erma, Colombia). La anestesia local se realizó por infiltración local de lidocaína
(Lidocaína 2%, Virbac, Colombia). Muestras de 0,5cm3 fueron fijadas en formalina
tamponada al 10%, procesada rutinariamente y teñidas con Hematoxilina-Eosina.
Microfotografías fueron obtenidas con cámara digital (OLyMPUS XC50), adaptada a un
microscopio triocular invertido modular (IX73P2F, Japón) visualizando los tejidos por
medio del programa CellSens Estándar 1.12 (Olympus®, Japón). Se evaluó el fenotipo
morfológico de la neoplasia y la respuesta inflamatoria celular en cada muestra.

Una vez confirmado el TVTc de subtipo plasmocítico (figura 1 C, D, E, F) se instauró un

protocolo terapéutico oncológico previa autorización mediante consentimiento
informado por parte del propietario. Sulfato de vincristina al 0,1% (0,5mg/m²) fue
inyectado vía IV cada 7 días, asociado a ivermectina al 1%, a una posología de
(0,5mg/Kg) vía SC cada 7 días. La regresión del tumor se determinó a intervalos

33
semanales de forma macroscópica tomando medidas de cada tumor utilizando un
calibrador pie de rey manual Stanley® y microscópicamente mediante citología de la
masa tumoral calculando índice mitótico. La remisión completa del tumor se contempló
de forma clínica y mediante citología con cuantificación de células tumorales e
inflamatorias.

5.3 RESULTADOS Y DISCUSION

Los hallazgos citológicos encontrados en las muestras de los pacientes, guardan

relación con lo descrito por Do Amaral et al. (2007) y Stockmann et al. (2011), quienes
observaron figuras mitóticas y presencia de células inflamatorias que indican una
elevada replicación celular. Si bien es cierto, el tratamiento quimioterapéutico más
frecuentemente usado para el TVTc es el sulfato de vincristina (De la Cruz et al. 2015)
y aunque ha demostrado su efectividad, existe evidencia, la mayoría reportada en
Brasil, que argumenta que el TVTc de subtipo plasmocítico expresa mayor resistencia a
la quimioterapia (Bassani et al. 2007 y Gaspar et al. 2010), tiene una regresión más
lenta y requiere más de cinco semanas de terapia, en comparación con el tumor de
subtipo linfocitico (Lima et al. 2013 y Alzate et al. 2019), e incluso en algunos casos se
ha reportado la necesidad de implementar terapias modificadas (Duzanski et al. 2017),
resultando como consecuencia, un aumento en los costos de tratamiento para el
propietario y mayores efectos colaterales para el paciente. En contraste, Alzate et al.
(2019) reportaron que no se encontró una relación directa entre la morfología celular y
la resistencia al sulfato de vincristina, hecho que lo atribuyen a una posible diferencia
en los grupos filogenéticos de TVTc en los dos países. En nuestro estudio de casos
todos los tumores fueron clasificados morfológicamente como plasmocítico y fueron
tratados con una terapia farmacológica de sulfato de vincristina más ivermectina,
mostrando una respuesta satisfactoria respecto al tiempo en que se produjo la remisión
del tumor (entre cuatro y cinco semanas), lo que hace pensar que el TVTc subtipo
morfológico plasmocítico podría tener mejor respuesta cuando se realiza un tratamiento
complementario. Estos hallazgos se relacionan con la hipótesis propuesta por Said et

34
al. (2009) donde se determina que se debe hacer cambio de quimioterapéutico si no se
logra la regresión tumoral después de la sexta semana.

Sales et al. (2012) realizaron un estudio comparativo utilizando dos protocolos en 50

pacientes caninos distribuidos entre hembras y machos, previamente diagnosticados
con TVTc, a un grupo le aplicaron solo vincristina a una posología de 0,5mg/m2 y al
otro grupo le aplicaron una combinación de vincristina más ivermectina a una posología
de 0,5mg/m2 y 0,4mg/Kg respectivamente. Los resultados arrojaron, que los pacientes
del grupo que utilizaron un protocolo en combinación redujeron significativamente el
número de aplicaciones. Santos et al. (2014) y Lopes, dos Santos, y Silva (2015) en
sus reportes de caso mencionan el uso combinado de ivermectina más sulfato de
vincristina con posologías de 0,6mg/Kg y 0,4mg/Kg respectivamente más vincristina a
una posología de 0,5mg/m2 para el tratamiento de TVTc, logrando la cura clínica con
un máximo de cuatro aplicaciones de la combinación. Las evidencias anteriores
concuerdan con los resultados obtenidos en este estudio de casos donde no se aplicó
más de cinco dosis de vincristina más ivermectina en los pacientes, pero contrastan en
que en esos estudios no se discrimina el subtipo tumoral como lo realizado en nuestro
caso. Otras investigaciones han informado la acción de la ivermectina como un fármaco
contra el cáncer en animales y humanos obteniendo resultados favorables (Juarez et
al. 2018; Korystov et al. 2004; Markowska et al. 2019). Didier y Loor (1996)
demostraron que la ivermectina actúa como sustrato y como inhibidor de la Pgp.
Siendo que la acción de la Pgp ha sido identificada como uno de los mecanismos que
aprovechan las células tumorales para expresar resistencia (Thomas y Coley, 2003).
Teniendo en cuenta las afirmaciones anteriores se realizó este trabajo, donde se
manejó en los pacientes un tratamiento con el fármaco de elección (sulfato de
vincristina) en combinación con ivermectina permitiendo reducir de manera significativa
el número de dosis del quimioterapéutico y consecuentemente permitiendo la reducción
de los efectos adversos de este fármaco, ya que al disminuir el número de aplicaciones
se disminuye el riesgo de mielo supresión y la aparición de infecciones concomitantes.
En los casos reportados las dosis de ivermectina usadas fueron seguras para los
pacientes teniendo en cuenta que trabajos previos in vivo e in vitro demostraron que la

35
acción antitumoral de este medicamento se logra a las mismas dosis empleadas
clínicamente como agente antihelmíntico (Zhu et al. 2017; Juarez et al. 2018).

Pese a que la vincristina se considera una droga bien tolerada en perros, por su acción
citostática no selectiva, genera mielosupresión (Nak et al. 2005). A los pacientes de
este estudio se les realizaron exámenes físicos y hematológicos, para controlar mielo
supresión, nefrotoxicidad y anorexia, mostrando resultados clínicos y hematológicos
satisfactorios sin presencia de complicaciones debido a la aplicación del tratamiento.
Cabe resaltar que en el examen clínico no se evidenció la presencia de enfermedades
concomitantes que comprometieran el sistema inmunológico, incrementando la tasa de
éxito del tratamiento, así como lo indicó De la Sota et al. (2004). También existen
reportes de casos donde se utilizó para el tratamiento de TVTc terapias
complementarias al sulfato de vincristina, como es el caso de un estudio donde se
manejó además del quimioterapéutico la aplicación de interleucina-2 (IL2) por vía
intramamaria, encontrando que los resultados de disminución del tamaño tumoral del
TVTc eran impresionantes (Den et al. 2015), así mismo, Marín et al. (2017)
describieron un caso clínico de TVTc tratado mediante la combinación de vincristina
con agentes homeopáticos obteniendo resultados favorables, ya que concomitante con
el TVTc el paciente padecía múltiples patologías. La presentación de este trabajo
permite generar una hipotesis de investigación sobre el uso de ivermectina combinado
con vincristina en tratamiento de TVTc de fenotipo plasmocítico que abre la puerta para
realizar estudios de investigación que posibiliten extender las opciones terapéuticas
para tratar esta neoplasia y elucidar el beneficio del protocolo instaurado en los
pacientes del presente reporte.

36
Figura 1. TVTc Plasmocítico. A y B. Fotografías de TVTc proveniente de caninos 1 y 3.

Se observa neoplasia en bulbo y glande peneano, forma pedunculada y apariencia de

coliflor. En labios vulvares se observan neoplasias redondeadas circunscritas y
enrojecidas. C y D, microfotografía de histopatología. H&E. TVTc subtipo plasmocítico.
Células tumorales con morfología característica: núcleo excéntrico, nucleolo
prominente, abundante citoplasma vacuolado (flechas negras) y escasa matriz
extracelular. 10X y 100X respectivamente. E y F. Microfotografías de citología
proveniente de casos 1 y 2. Diff-QuiffTM.Se observan células neoplásicas típicas con
núcleo excéntrico y citoplasma abundante (apariencia de plasmocitos) (flechas rojas).
M: Mitosis. *: Células epiteliales. N: Neutrófilos. 40 y 100X.

37
 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Alzate, J. M.; Montoya‐ Florez, L. M.; Pérez, J. E.; Rocha, N. S. Pedraza‐ Ordonez, F.
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Amaral, A. S. D. (2005). Tumor venéreo transmissível canino: critérios citológicos de
malignidade e caracterização citomorfológica correlacionada a imunocitoquímica e
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Universidad Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”, Botucatu.
Arcila-Villa, A.; Dussán-Lubert, C. & Pedraza-Ordoñez, F. (2017). Distribution and
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Astudillo-de la Vega, H.; Ruiz, G.E.; Martinez, C.J. & Ochoa, C.F. (2010). El papel de la
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